在動脈上方以并緊的止血鉗引導進行燒灼課件

藥理實驗中容易犯的錯誤及對策謝人明陜西省中醫(yī)藥研究院西安710003謝沁海正輝瑞制藥有限公司上海200032劉芳陜西中醫(yī)學院基礎醫(yī)學院咸陽7120462014.12

藥理實驗中容易犯的錯誤及對策謝人明陜西省中醫(yī)藥研究院1

前言

毛澤東主席1965年教導我們“人類總得不斷地總結(jié)經(jīng)驗，有所發(fā)現(xiàn)、有所發(fā)明、有所創(chuàng)造、有所前進，停止的論點，悲觀的論點,，無所作為和驕傲自滿的論點都是錯誤的。”----人的正確思想是從哪里來的？在紀念白求恩那篇文章中說要學習“白求恩同志毫不利己專門利人的精神”，“對技術(shù)精益求精的精神”。筆者從事藥理研究多年，積累了一些經(jīng)驗與教訓?，F(xiàn)歸納成藥理實驗中容易犯的錯誤并給予克服的對策及小竅門。前言毛澤東主席1965年2一、麻醉量要計算正確注射部位要準確麻醉量要計算正確，注射部位要準確。否則，導致麻醉過量死亡；不足，麻醉不全動物掙扎不易手術(shù)。常用大鼠、小鼠、豚鼠以烏拉坦麻醉較好，1.0g/㎏腹腔注射。例如大白鼠250g則用10%的烏拉坦2.5ml腹腔注射即可，位置以左、右下腹部以鋒利針刺入腹腔，先向上挑見針尖，然后放平回抽無回血，便可緩慢注入。位置一定要在腹壁與腸子之間漿膜吸收最好。若注入腸腔中糞便吸附麻醉劑，使其劑量不足動物不易麻醉，若再補過量，動物可能會因過量而致死亡。一、麻醉量要計算正確注射部位要準確麻醉量要計算正確，注射3二、手術(shù)止血要徹底保證血壓平穩(wěn)以大動物狗、貓為例，進行開胸血流動力學實驗，頸部手術(shù)分離出氣管及頸總動脈，從頸部正中線開口，出血少，見出血點要線扎或電燒灼止血。開胸時要肌肉分層切開，止血必須徹底。否則開胸后狗的血壓可低于100mmHg。肌肉切開可以用兩把止血鉗分開，分別結(jié)扎后再切開。否則動物肝素化以后肌肉廣泛出血，致狗血壓過低，動物不能維持較長時間。二、手術(shù)止血要徹底保證血壓平穩(wěn)以大動物狗、貓為例，進行開4三、大鼠利膽及幽門結(jié)扎抗?jié)儗嶒?/p>

穿線位置很重要動物麻醉后仰臥位固定，從上腹部中線切開皮膚，從腹白線切開進入腹腔，此位置血管很少，出血少。找到十二指腸用無齒眼科彎鑷子夾住十二指腸，提起腸系膜沒有血管處，再用小鑷子夾線穿過繞過十二指腸，如果是利膽實驗將十二指腸向下輕拉，從肝至十二指腸有一韌帶，從中找出總膽管，穿雙線下線結(jié)扎，上線先打一活結(jié)，以眼科小剪剪開1/3總膽管，將內(nèi)徑1mm的聚乙烯塑料管插入，再將活扣扎緊，并將線扎于外邊有膠布纏繞的塑料管扎緊以防滑脫，黃色膽汁便不斷順利流出。三、大鼠利膽及幽門結(jié)扎抗?jié)儗嶒?/p>

穿線位5同法幽門結(jié)扎時將胃的幽門部輕輕提起，在十二指腸腸系膜無血管處以鑷子將縫線穿過結(jié)扎幽門部，要輕拉否則將十二指腸旁胰腺破壞實驗便不成功。好的操作幽門結(jié)扎后4h胃液可達5-8ml，手術(shù)不好的僅可收集少于2ml胃液。同法幽門結(jié)扎時將胃的幽門部輕輕提起，在十二指腸腸系膜無血管處6四、血壓實驗減少切口出血以狗、貓、大鼠為對象，動物麻醉后仰臥位固定，從頸部正中下頜部至胸骨上部連線切口可少出血，縱向鈍性分離氣管前肌肉出血少，在氣管兩側(cè)容易找到頸總動脈。以無齒眼科鑷子將與頸總動脈同行的神經(jīng)輕輕地分開。動脈下穿雙線，遠心端結(jié)扎，近心端打一活結(jié)，將動脈夾夾住活結(jié)后的近心端。小剪子剪開1/3管徑，將充滿肝素生理鹽水的連接壓力換能器的細塑料管插入動脈，將活結(jié)扎死，并固定于塑料管外的膠布處防滑脫。壓力換能器中空氣必須排空，以肝素生理鹽水充滿，不能有氣泡，否則血壓波動不穩(wěn)，血易進入換能器中。換能器中應澄明無血，脈壓差可達30-45mmHg。四、血壓實驗減少切口出血以狗、貓、大鼠為對象，動物麻醉后仰臥7若從股動脈插入，可在腹股溝處，以手摸動脈波動最明顯處，以夾皮鉗從兩側(cè)夾住，用燒灼器燒開切口，這樣可以減少出血，在動脈上方以并緊的止血鉗引導進行燒灼，千萬不能燒破股動脈，否則狗血噴頭。以無齒眼科鑷子分離出股動脈，并將并行的股靜脈，股神經(jīng)輕輕分開。穿線結(jié)扎同上。若從股動脈插入，可在腹股溝處，以手摸動脈波動最明顯處，以夾皮8五、大鼠長期毒性實驗結(jié)束后

頸總動脈插管取血最好原因是血液量多，而且無組織液混入，血小板不破壞，手術(shù)準確，取血徹底，300g左右大鼠可取血10mml以上，滿足很多的血液生化指標測定，如ALT、AST、TBL、TP、ALB、GLB、GLU、TC、TG、LDH、CK、K+、Na+、Cl-、Ca2+、P3+、BUN、CREA、ALP等20項以及血液學指標16項測定。五、大鼠長期毒性實驗結(jié)束后

頸總動脈插管取血最好9六、血氧測定時保證動脈血樣新鮮否則氧分壓降低一般可先分出股動脈，向后肢遠心端分出倒Y字形分支，從一細分支插入，取血插管進入股動脈管腔中，外連接三通取血。因為血總是流動的，所以血氧飽和度好。六、血氧測定時保證動脈血樣新鮮10七、兔灌胃要注意不要入肺，

否則引起兔死亡一人用雙腿夾兔雙下肢，雙手分別抓住前腿及兔頭，另一人將開口器從兔嘴角一側(cè)插入，順時針滾動，將兔舌壓在下方，以導尿管從開口器中的中孔插入，將導尿管外端插入裝滿水的燒杯中，若不冒氣泡，說明導尿管插入食管中，可將藥物緩緩注入1mL,動物不掙扎，再將藥推完。七、兔灌胃要注意不要入肺，

否則引起兔死亡一人用雙腿夾兔雙下11八、靜脈注射液進行兔耳血管刺激性實驗的小竅門兔耳緣靜脈消毒后，用小兒頭皮針3?

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從耳緣靜脈遠心端自耳尖部穿刺，以1ml/min速度推入要測的注射液。每日一次，連續(xù)5-7天，每天往近心端前進3mm,注射完畢，以干棉簽輕輕撫平靜脈，可迅速止血，通暢耳部循環(huán)。八、靜脈注射液進行兔耳血管刺激性實驗的小竅門兔耳緣靜脈消毒后12九、特殊實驗不要忘記禁食利膽實驗、胃潰瘍實驗必須前天晚上禁食，狗、大鼠十二指腸給藥也必須禁食，否則藥物被食物吸附，藥物難以顯示作用。九、特殊實驗不要忘記禁食13十、不要忘記動物飲水飲食尤其是節(jié)假日，周六周日。一定不要忘記給動物飲水飲食，否則動物饑渴難忍，做不好實驗。北京同仁堂百年老字號有一古訓“修合無人見，存心有天知”“人在做，天在看”。你愛護照顧動物，動物就給我們好的實驗數(shù)據(jù)和結(jié)果。長期給藥尤其要定時定人，要安撫動物，不要激惹動物，不要對動物粗暴，否則動物有攻擊性，就像捅馬蜂窩一樣，馬蜂就要蜇人。動物實驗必須控制好條件，條件控制越嚴格，實驗越容易成功。否則，實驗數(shù)據(jù)標準差太大。十、不要忘記動物飲水飲食尤其是節(jié)假日，周六周日。一定不要忘記14

結(jié)束語吃一塹，長一智。失敗是成功之母，實驗不可能一帆風順，要經(jīng)常及時總結(jié)，對技術(shù)精益求精。實驗操作是一門藝術(shù)。老子說“天下難事，必作于易，天下大事，必作于細”（道德經(jīng)，第63章）細節(jié)決定成敗，誰不注重細節(jié)，就要招致實驗失敗。希望年輕的藥理工作者打好基礎，練好基本功。切開、結(jié)扎、止血、縫合、插管、灌胃、靜脈注射……。天才在于勤奮，聰明在于積累。老子說“合抱之木，生于微末。九層之臺，起于壘土。千里之行，始于足下?！蓖贻p同志，認認真真，踏踏實實，一步一個腳印，慎終如始，不斷總結(jié)經(jīng)驗，接受教訓，積學儲寶，迅速成長，