食品中病原微生物檢驗技術(shù)-食品中志賀氏菌檢驗技術(shù)

食品微生物與檢驗志賀氏菌的鑒定檢驗流程：LOREM自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個以上典型或可疑菌落，分別接種TSI、半固體和營養(yǎng)瓊脂斜面各一管，置36℃±1℃培養(yǎng)20h～24h，分別觀察結(jié)果。Part1一初步鑒定試驗原理：分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（福氏志賀氏菌6型可產(chǎn)生少量氣體），不分解乳糖，蔗糖。不產(chǎn)生硫化氫。接種方法：穿刺劃線結(jié)果：底層變黃不變黑，無氣泡，斜面不變色。1.

三糖鐵試驗1.

三糖鐵試驗沙門氏菌志賀氏菌2.動力試驗原理：在半固體上穿刺接種后，細(xì)菌因不具有鞭毛只能沿著穿刺線生長。結(jié)果：陽性——沿穿刺線生長陰性對照試驗——擴(kuò)散生長取營養(yǎng)瓊脂斜面上生長的菌苔，進(jìn)行β-半乳糖苷酶、尿素、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶以及水楊苷和七葉苷的分解試驗。Part1二生化試驗由于某些不活潑的大腸埃希氏菌的部分生化特征與志賀氏菌相似，并能與某種志賀氏菌分型血清發(fā)生凝集。Part1三附加生化試驗因此前面生化實(shí)驗符合志賀氏菌屬生化特性的培養(yǎng)物還需另加葡萄糖胺、西蒙氏檸檬酸鹽、粘液酸鹽試驗(36℃培養(yǎng)24h～48h)。志賀氏菌屬和不活潑大腸埃希氏菌、A-D菌的生化特性區(qū)別：也可根據(jù)初步判斷結(jié)果，用已培養(yǎng)的營養(yǎng)瓊脂斜面上生長的菌苔，可選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)。原理：相應(yīng)的抗原(細(xì)菌)與抗體(免疫球蛋白)在體外一定條件下作用，可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀、凝集現(xiàn)象。在微生物檢驗中，常用血清學(xué)反應(yīng)來鑒定分離到的細(xì)菌，以最終確認(rèn)檢測結(jié)果。Part1四血清學(xué)鑒定抗體攻擊抗原（居中者）抗原—抗體結(jié)合物食品微生物與檢驗志賀氏菌的增菌和分離檢驗流程：以無菌操作取樣品25g（mL），加入志賀氏菌增菌肉湯225mL。用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器或拍擊式均質(zhì)器拍擊均勻，制備成1:10的樣品勻液。于41.5℃±１℃，厭氧培養(yǎng)16h～20h。Part1一増菌取增菌后的志賀氏增菌液分別劃線接種于XLD瓊脂平板和MAC瓊脂平板或志賀氏菌顯色培養(yǎng)基平板上，于36℃±1℃培養(yǎng)20h～24h，觀察各個平板上生長的菌落形態(tài)。若出現(xiàn)的菌落不典型或菌落較小不易觀察，則繼續(xù)培養(yǎng)至48h再進(jìn)行觀察。Part1二分離典型的志賀氏菌在MAC瓊脂上的菌落無色至淺粉紅色，半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊。食品微生物與檢驗志賀氏菌概述概述分類生物學(xué)特性流行病學(xué)1234目錄①志賀氏菌屬的細(xì)菌統(tǒng)稱痢疾桿菌，是細(xì)菌性痢疾的病原菌。②在不衛(wèi)生和人口密集條件下可迅速轉(zhuǎn)播，如餐廳、食堂等。③主要為糞-口途徑傳播。痢疾桿菌隨患者或帶菌者的糞便排出，通過受污染食物、水、手等經(jīng)口傳播。一、概述二、分類A群痢疾志賀氏菌(Sh.dysenteriae)通稱志賀氏痢疾桿菌。不發(fā)酵甘露醇。有12個血清型，其中8型又分為三個亞型。B群福氏志賀氏菌(Sh.flexneri)通稱福氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇。有15個血清型(含亞型及變種)，抗原構(gòu)造復(fù)雜，有群抗原和型抗原。根據(jù)型抗原的不同，分為6型，又根據(jù)群抗原的不同將型分為亞型;X、Y變種沒有特異性抗原，僅有不同的群抗原。C群鮑氏志賀氏菌(Sh.boydii)通稱鮑氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇，有18個血清型，各型間無交叉反應(yīng)。D群宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei)通稱宋內(nèi)氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇，并遲緩發(fā)酵乳糖，一般需要3~4天。只有一個血清型。有兩個變異相，即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相為S型，Ⅱ相為R型。LOREMIPSUMDOLORSITAMET大小為0.5~0.7×2~3μm，無芽胞，無莢膜，無鞭毛。多數(shù)有菌毛。革蘭氏陰性桿菌。三、生物學(xué)特性Part1一菌體形態(tài)學(xué)特征010203需氧或兼性厭氧，最適溫度37℃。

Part1二培養(yǎng)特性三、生物學(xué)特性固體培養(yǎng)基上形成邊緣整齊、濕潤光滑、圓形的菌落。

液體培養(yǎng)基上呈均勻渾濁生長，無沉淀和菌膜。

0102本菌對理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱。對酸敏感，在外界環(huán)境中的抵抗力能以宋內(nèi)氏菌最強(qiáng)，福氏菌次之，志賀氏菌最弱。Part1三抵抗力三、