腐植酸鈉對綿羊瘤胃消化代謝的影響

腐植酸鈉對綿羊瘤胃消化代謝的影響

腐植酸鈉是腐植酸鈉。這是一種用化學法提出的有機弱酸鹽，具有良好的耐候性，是一種罕見的黑色粉末或黑色顆粒，密度為1.33.1.44。它在水中很可溶，是一種性質(zhì)很弱的離子。它對重金屬離子也有很強的離子交換能力，具有吸附和脫離作用。腐植酸及其復合鹽類作為飼料添加劑在畜禽養(yǎng)殖業(yè)上的應用效果已有一些報道。唐志成等(2000)用腐植酸和尿素飼喂中國荷斯坦奶牛,結(jié)果奶牛產(chǎn)奶量得到了提高。馬玉勝(1995)用腐植酸鈉飼喂奶牛(每日13g),可提高11%的產(chǎn)奶量。王內(nèi)貴等(2001)用腐植酸鈉-尿素在小尾寒羊上試驗,處理組比對照組1個月多增重4.33kg。Islam等(2005)試驗證明用腐植酸鈉飼喂家禽,有減少糞便異味,加速動物生長的作用。高靜等(2007)將主要成分為飼料級黃腐植酸的動物營養(yǎng)素均勻拌入飼喂奶牛的精飼料中,結(jié)果表明,添加動物營養(yǎng)素后牛奶產(chǎn)量增加、質(zhì)量提高,有效產(chǎn)奶期延長。但是,關于腐植酸鈉對動物消化代謝作用的研究報道很少。陳偉華等(1983)報道,在飼喂含尿素的山羊日糧中添加腐植酸鈉,可促進瘤胃中微生物的生長,但不能延緩尿素在瘤胃中的分解。本文在前人相關試驗基礎上,研究添加不同水平的腐植酸鈉對綿羊瘤胃消化代謝的影響,為合理利用腐植酸鈉和認識其作用機理提供進一步的科學依據(jù)。1材料和方法1.1腐植酸鈉試驗用腐植酸鈉購自新疆雙龍腐植酸有限公司,腐植酸含量(干物質(zhì)基礎)63.4%,水分含量14.6%,pH值9.9。1.2腐植酸鈉對需要添加的反應物的影響選4只安裝有永久性瘤胃瘺管和十二指腸瘺管的中國美利奴(新疆型)細毛羊,采用4×4拉丁方設計,分別添喂腐植酸鈉0、2、4、6g/d(分別稱之為腐植酸鈉0g組、2g組、4g組和6g組),以研究添加不同水平的腐植酸鈉對綿羊瘤胃消化代謝的影響。每期試驗預試期11d,正試期6d,正試期前3d采集瘤胃液,后3d采集十二指腸食糜。1.3玉米秸稈的精特性試驗動物單籠飼養(yǎng),每只羊每日喂給混合精料320g(混合精料配方見表1),棉籽殼400g,分別于9:00、21:00兩次等量飼喂,自由采食粉碎的玉米秸稈,先精后粗,自由飲水。腐植酸鈉每天分兩次等量混合于精料中讓動物充分采食。每日記錄試驗羊?qū)嶋H采食量。1.4樣品的采集和處理1.4.1飼料樣品的收集正試期開始,連續(xù)采集6d的剩料,陰干混合后以四分法采樣貯存于樣品袋中,同時采集所喂的精、粗料樣品貯存,備常規(guī)分析。1.4.2瘤ph測定以正試期早晨采食時間為0h,分別于0、1.5、3、6、9、12h采集瘤胃液30mL,立即測定其pH值,然后用200目的尼龍袋過濾,于濾液中滴加2～3滴飽和氯化汞溶液,標號,-20℃冷凍保存?zhèn)錅y。連續(xù)采集3d,測定時將3d所采集的同一時間點的樣品等量均勻混合。1.4.3東南角相對人的東南角,把食糜作為一個時間點的食糜量表1,2.在正試期的后3d采集十二指腸食糜樣品。分別于正試期第4天的1:00、7:00、13:00、19:00,第5天的3:00、9:00、15:00、21:00,第6天的5:00、11:00、17:00、23:00,各采集十二指腸食糜20mL,將每只羊12個時間點的食糜等量混勻,于-20℃冰箱內(nèi)保存,待測。1.5纖維原料的測定瘤胃液pH值采用Cyberscan510型pH計直接測定;鈣的測定參考傅啟高(1996)方法測定;NH3-N采用氧化鎂蒸餾法測定,每次瘤胃液蒸餾量為2mL;樣品干物質(zhì)、有機物、木質(zhì)素、纖維素、酸性洗滌纖維(ADF)、中性洗滌纖維(NDF)、磷等的測定根據(jù)動物營養(yǎng)常規(guī)分析方法測定(楊勝,1993)。粗蛋白測定采用RapidNⅢ(德國ElementarAnalysensysteme生產(chǎn))氮分析儀測定。瘤胃液中乙酸、丙酸、丁酸含量參考趙景嬋等(2001)的方法,采用AtlantisdC18(Waters公司,5μm,4.6mm×150mm)柱反相高效液相色譜法(RP-HPLC)進行分離,外標法定量。1.6統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用SPSS11.0軟件進行分析,試驗數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差表示,均值的多重比較采用Duncan法進行。2腐植酸鈉對監(jiān)獄大鼠體內(nèi)瘤胃液氨態(tài)氮、程序和基本蛋白的影響2.1添加不同水平的腐植酸鈉對綿羊瘤胃液pH的影響由表3可知,無論添喂腐植酸鈉與否,采食后各組綿羊瘤胃液pH值表現(xiàn)出相同的變化趨勢,在采食后0～1.5h,各組的pH值均緩慢上升,且在1.5h達到峰值,從1.5～6hpH都有所下降,并在6h到達最低點。采食后3h,添喂腐植酸鈉都顯著降低了瘤胃液pH值(P<0.05),各腐植酸鈉添加組之間則很接近(P>0.05)。2.2添加不同水平的腐植酸鈉對綿羊瘤胃液NH3-N濃度的影響由表4可知,各試驗組瘤胃液NH3-N濃度表現(xiàn)為相同的波動性變化。采食后1.5h,各組瘤胃液NH3-N濃度均出現(xiàn)峰值;采食后3h,各腐植酸鈉添加組瘤胃液氨態(tài)氮濃度分別比對照組降低了13.75%(P<0.01)、18.09%(P<0.01)和16.03%(P<0.01),但各腐植酸鈉添加組之間沒有顯著不同。采食后9h,與6g組相比,2g組、4g組綿羊的瘤胃液NH3-N濃度顯著下降(P<0.05)。2.3添加不同水平的腐植酸鈉對綿羊瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響由表5可以看出,對乙酸而言,在采食后3h,各腐植酸鈉添加組的瘤胃液乙酸顯著高于對照組(P<0.05),在其余各時間點均不顯著。采食后3h,各腐植酸鈉添加組的瘤胃液丙酸濃度高于對照組(P<0.05);在采食后9h,4g組和6g組的瘤胃丙酸濃度高于2g組和對照組(P<0.05)。在采食后9h和12h,各腐植酸鈉添加組的瘤胃液丁酸濃度高于對照組(P<0.05)?？倱]發(fā)性脂肪酸濃度在采食后9h,各腐植酸鈉添加組高于對照組(P<0.05),但4g組和6g組之間差異不顯著。2.4添加不同水平的腐植酸鈉對干物質(zhì)等在瘤胃的表觀消失量(率)及到達小腸粗蛋白的影響從表6可以看出,隨著腐植酸鈉添加量的增加,干物質(zhì)、有機物和纖維素的前胃消失量和消失率均有增加的趨勢,且添加量為4g/d時各量達到最大值,添加量為6g/d時各量卻有所下降。各試驗組與對照組相比,4g組干物質(zhì)、有機物的前胃消失量和消失率差異顯著(P<0.05),6g組干物質(zhì)的前胃消失量差異顯著(P<0.05);纖維素和半纖維素的消失量和消失率有所提高,但各組之間差異不顯著(P>0.05)。微生物蛋白到達小腸量有隨腐植酸鈉添加量的增加而增加的趨勢。2g組、4g組和6g組到達小腸的微生物蛋白量分別比對照組提高了5.02%(P>0.05)、9.63%(P>0.05)和14.7%(P>0.05)。2g組和4g組過瘤胃蛋白到達小腸量分別比對照組增加了3.58%和6.37%,但兩組均與對照組差異不顯著(P>0.05)。3腐植酸鈉添加對酶系統(tǒng)和微生物合成的影響3.1添加不同水平的腐植酸鈉對綿羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響瘤胃液pH值是反映瘤胃發(fā)酵水平的綜合性指標。一般情況下瘤胃pH值變動范圍在5.0～7.5之間,并隨采食時間呈周期性變化,通常于采食后2～6h達最低值(韓正康,1988)。在本試驗條件下,添加腐植酸鈉后瘤胃內(nèi)pH處在這一變化范圍之內(nèi)。在本試驗中,各腐植酸鈉添加組的瘤胃液pH值在采食后3h顯著低于對照組,在采食后9h仍有相似的作用趨勢。各腐植酸鈉添加組的瘤胃液氨態(tài)氮濃度在采食后3h極顯著低于對照組(P<0.01)。其原因可能是添加腐植酸鈉具有吸附氨的作用(John,2006),也與腐植酸鈉促進瘤胃微生物合成有關(陳偉華等,1983)。乙酸、丙酸、丁酸等揮發(fā)性脂肪酸是瘤胃發(fā)酵的主要終產(chǎn)物,其含量和組成反映了瘤胃消化代謝活動程度。在本試驗中,乙酸、丙酸、丁酸的濃度在采食后的各個時間的變化與瘤胃液pH具有相似的變化規(guī)律,各腐植酸鈉添加組瘤胃的乙酸濃度在采食后3h、丙酸濃度在采食后3h和9h、丁酸濃度在采食后3h和9h分別高于對照組,說明腐植酸鈉對瘤胃消化代謝具有一定的促進作用。3.2添加不同水平的腐植酸鈉對干物質(zhì)等在瘤胃的表觀消失量(率)及微生物合成的影響添加腐植酸鈉對干物質(zhì)、有機物等在瘤胃消化的影響報道少見。在本試驗條件下,添加腐植酸鈉顯著提高瘤胃內(nèi)干物質(zhì)和有機物的瘤胃消失量和消失率(P<0.05)。纖維素和半纖維素的前胃消失量和消失率有隨添加量的增加而增加的趨勢,但差異不顯著。這與上述腐植酸鈉對綿羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響相吻合。隨著腐植酸鈉添加量的增加,微生物蛋白到達小腸量有增加的趨勢(P>0.05),提示腐植酸鈉具有促進瘤胃微生物合成的作用。陳偉華等(1983)報道,在飼喂含尿素山羊的日糧中添加腐植酸鈉,可促進瘤胃微生物的生長。蔣安文等(1999)試驗證明,腐植酸鈉可以吸附在尿素消化中被瘤胃微生物分解出來的過多氨氣,被腐植酸鈉