中藥美白霜的制備及理化性質(zhì)研究

中藥美白霜的制備及理化性質(zhì)研究

許多美麗的人都追求白人皮膚。特別是對(duì)于生活在黃土中的亞洲女性來說，白人皮膚是一個(gè)重要的整形主題。有統(tǒng)計(jì)顯示在中國(guó)美白類化妝品銷售額5年間增長(zhǎng)了10倍,其巨大的市場(chǎng)潛力不容忽視。人類皮膚的顏色由多種因素決定,但主要取決于黑色素的含量及分布。目前,公認(rèn)的黑色素形成過程為:黑色素細(xì)胞組織中的酪氨酸在酪氨酸酶的作用下,經(jīng)多巴、多巴醌、多巴色素、二羥基吲哚等中間體逐步轉(zhuǎn)變成黑色素。目前大多數(shù)美白化妝品都是以酪氨酸酶為作用靶點(diǎn),通過美白活性成分抑制酪氨酸酶的活性來減少黑色素的生成,達(dá)到美白的效果。早期用于美白化妝品中的美白活性成分有汞類化合物、類激素和氫醌等,這些化合物一般作用迅速,美白效果明顯,但其毒性大,易在體內(nèi)沉積,造成人體內(nèi)臟衰竭,或?qū)ζつw刺激性大,易導(dǎo)致細(xì)胞病變,已被世界各國(guó)明令禁止使用。目前化妝品中添加的皮膚美白劑應(yīng)符合兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn):一是對(duì)酪氨酸酶活性有較高的抑制率,能顯著地減少黑色素的生成;二是有較高的安全性,對(duì)人體皮膚無毒無刺激性。以中藥活性成分作為美白產(chǎn)品添加劑,因其毒副作用小,安全性高,經(jīng)濟(jì)有效,倍受人們青睞,已成為美白化妝品行業(yè)的一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)。本文選擇美白產(chǎn)品中常用的7種中藥,分別進(jìn)行醇提和水提,將得到的提取物進(jìn)行酪氨酸酶活性抑制率的比較,篩選3~4種抑制率較高的提取物,并將其以一定比例復(fù)配,制得一種中藥美白霜。1儀器和檢測(cè)方法儀器:UV1102紫外可見分光光度計(jì)(上海天美科技儀器技術(shù)有限公司);FSH-2型可調(diào)高速勻漿機(jī)(金壇市富華儀器有限公司);TDL80臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);RE5052旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)。試劑:L-酪氨酸(Aladdin試劑有限公司);硬脂酸(成都科龍化工試劑廠);無水羊毛脂(天使百世化工有限公司);單硬脂酸甘油酯(上海潤(rùn)捷化學(xué)試劑有限公司);三乙醇胺(天津富宇精細(xì)化工有限公司);二甲基硅油(天津永大化學(xué)試劑開發(fā)中心);吐溫-80(廣東光華化學(xué)試劑廠);白芷、白鮮皮、白蘞、白蒺藜、白芍、白茯苓、白芨(購(gòu)自廣州至信藥材有限公司);其它試劑均為分析純。2方法和結(jié)果2.1成分的提取選取白芷、白鮮皮、白蘞、白蒺藜、白芍、白茯苓、白芨藥材按水回流和50%乙醇回流兩種方法提取其美白有效成分。(1)水回流提取:取中藥材5g,加12倍量蒸餾水,室溫浸泡0.5h,再加熱回流提取2h,過濾,取濾液,10000r/min離心10min,取上清液減壓濃縮,真空干燥,得水提物。(2)乙醇回流提取:取中藥材5g,加12倍量50%乙醇,室溫浸泡0.5h,再加熱回流提取2h,過濾,取濾液,10000r/min離心10min,取上清液減壓濃縮,真空干燥,得醇提物。2.2中藥美白成分的選擇2.2.1pbs/hs法酪氨酸酶溶液的配制:稱取去皮切碎馬鈴薯20g,按1:1(m/v)的比例加入磷酸鹽緩沖液(pH6.8)20mL,高速勻漿1min,于3000r/min離心15min,傾出上清液。用移液管移取10mL上清液于25mL棕色瓶中加入PBS(pH6.8)溶液定容,冰水浴備用,2h內(nèi)用完。樣品溶液的配制:用PBS(pH6.8)將上述7種中藥的水提取和醇提物分別配制成10mg/mL的溶液,過濾,備用。2.2.2lpbs溶液測(cè)定前,精密移取A1測(cè)試樣:2mLPBS+1mLL-酪氨酸溶液;A2測(cè)試樣:3mLPBS溶液;A3測(cè)試樣:1mLL-酪氨酸溶液+1mLPBS溶液;A4測(cè)試樣:2mLPBS溶液,每組平行操作3份。先置37℃水浴中保溫10min后立即分別添加土豆酪氨酸酶溶液1mL,分別向A3、A4中加入樣品溶液1mL混勻,然后在37℃水浴恒溫反應(yīng)2min立即于475nm處測(cè)吸光度,記錄數(shù)據(jù)。酪氨酸酶活性抑制率I(%)=[(A1-A2)-(A3-A4)]/(A1-A2)×100%。A1為未加中藥的加酶混合液;A2未加中藥和酶的混合液;A3為加中藥和酶的混合液;A4加中藥而未加酶的混合液。結(jié)果可見白芷水提取物、白蘞、白鮮皮的醇提物對(duì)酪氨酸酶活性的抑制較強(qiáng),故選取白芷水提物和白蘞、白鮮皮醇提物來制備中藥美白霜。2.3中藥美白霜的制備2.3.1酯化學(xué)成分將含碳質(zhì)低效林白芷5g,白蘞5g,白鮮皮5g,單硬脂酸甘油酯1.0~1.5g,二甲基硅油3.0g,無水羊毛脂2.0g,液體石蠟5.0g,硬脂酸4.0~6.0g,十六醇4.0~6.0g,甘油3.0g,丙二醇3.0g,吐溫-601.5~3.0g,三乙醇胺0.1~0.5g,尼泊金乙酯0.15g,氮酮1.0g,茉莉香精3滴,去離子水加至100g。2.3.2油相對(duì)比的確定白芷水回流提取,白蘞、白鮮皮乙醇回流提取,合并提取液,減壓濃縮至1g浸膏。按處方量取單硬脂酸甘油酯、二甲基硅油、無水羊毛脂、液體石蠟、硬脂酸、十六醇、尼泊金乙酯,加熱至80℃保溫過濾得油相;另取甘油、丙二醇、吐溫-60、三乙醇胺、水,加熱至80℃保溫過濾得水相;在一定轉(zhuǎn)速下將油相緩慢加到水相,高速勻質(zhì)5min(均質(zhì)2min時(shí)加入中藥浸膏),攪拌冷卻,待溫度降至45℃加入氮酮、香精,攪拌均勻即得中藥美白霜。2.3.3乳化劑的hlb值和乳化溫度以制得美白霜的外觀性狀(光澤度、細(xì)膩度及粘度)、耐熱耐寒性、離心試驗(yàn)為質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)基質(zhì)處方中硬脂酸的量、十六醇的量,乳化劑HLB值和乳化溫度作為考察因素對(duì)美白霜制備工藝進(jìn)行優(yōu)化。影響因素最大的為十六醇的量,四個(gè)因素最佳配比水平為A3B1C3D2,即硬脂酸的量為6.0g,十六醇的量為4.0g,乳化劑HLB值為12,乳化溫度為75℃。2.4美白霜ph值的測(cè)定(1)外觀性狀本美白霜質(zhì)地輕盈,呈米黃色膏狀,粘稠性較好,涂抹在皮膚上滋潤(rùn)而不油膩,清爽度較好。(2)pH值取本品5g,加水50ml稀釋,pH計(jì)測(cè)定其pH值,測(cè)得美白霜的pH值為5.4,符合化妝品的pH范圍4.5~6.5的要求。(3)顯微觀察乳化效果取化妝霜0.01g于載玻片上,用蓋玻片輕壓膏體,讓化妝霜均勻分布于載波片上,用顯微鏡直接觀察,粒徑越小,分布越均勻,則乳化效果越好。結(jié)果見圖1?？梢娭频玫拿腊姿捷^小,分布非常均勻規(guī)則。3不同底物對(duì)酪氨酸酶活性的影響皮膚的美白機(jī)制即是黑色素的抑制機(jī)制。當(dāng)前大多數(shù)美白化妝品是以酪氨酸酶為作用靶點(diǎn),通過抑制酪氨酸酶的活性以減少黑色素的生成,從而達(dá)到美白皮膚的效果。有人曾分別以L-酪氨酸與L-多巴為底物進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)L-酪氨酸為底物時(shí),化合物對(duì)酪氨酸酶活性呈現(xiàn)較強(qiáng)的抑制作用。故本實(shí)驗(yàn)選擇以L-酪氨酸為底物,測(cè)定中藥提取物對(duì)酪氨酸酶的抑制作用,該方法簡(jiǎn)單易行,準(zhǔn)確可靠。美白