臨床微生物標(biāo)本的送檢與采樣指南

臨床微生物標(biāo)本的送檢與采樣指南臨床微生物標(biāo)本的送檢與采樣指南呼吸道標(biāo)本采集及運輸一、上呼吸道標(biāo)本1、送檢指征上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、會厭炎等，凡具有以下狀況任何一項者1、送檢指征上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、會厭炎等，凡具有以下狀況任何一項者疑似患者。1.1病毒性一般感冒伴有明顯咽痛時，疑心為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細菌培育。2細菌性咽扁桃體炎：明顯咽痛、咽部發(fā)紅、畏寒、發(fā)熱，體溫可達C以上。1.3喉嚨痛、咳嗽、喉部有膿樣分泌物等臨床病癥。1.4上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管-支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進展細菌培育。2、標(biāo)本采集上呼吸道標(biāo)本包括鼻、鼻咽、咽拭子標(biāo)本。應(yīng)依據(jù)臨床表現(xiàn)和感染部位劑的棉拭子，預(yù)先用無菌生理鹽水或養(yǎng)分肉湯蘸濕拭子，并直取感染部位，削減污染。2.11.3喉嚨痛、咳嗽、喉部有膿樣分泌物等臨床病癥。1.4上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管-支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進展細菌培育。2、標(biāo)本采集上呼吸道標(biāo)本包括鼻、鼻咽、咽拭子標(biāo)本。應(yīng)依據(jù)臨床表現(xiàn)和感染部位劑的棉拭子，預(yù)先用無菌生理鹽水或養(yǎng)分肉湯蘸濕拭子，并直取感染部位，削減污染。2.1鼻拭子的采集：最好使用擴鼻器，先用拭子拭去鼻黏膜外表的分泌物并丟棄，用第2個試子蘸取無菌生理鹽水或養(yǎng)分肉湯，插入鼻孔采集病灶標(biāo)本。2.2咽拭子的采集：采集標(biāo)本時患者先用清水漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，用無菌的鼻咽拭子〔一端彎曲的金屬棉拭〕由口腔進入，越過舌根到咽假設(shè)咽部明顯發(fā)紅或有假膜存在時，應(yīng)在局部擦拭取標(biāo)本〔最好拭子從膜底下擦拭。采或扁桃體上擦拭。33.1檢查時間：應(yīng)于抗菌藥物應(yīng)用之前。時間上無嚴格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，也應(yīng)晨起后采集為佳。通路，也應(yīng)晨起后采集為佳。3.2采集頻率：重復(fù)采集標(biāo)本的頻率一般每日最多1次。423.2采集頻率：重復(fù)采集標(biāo)本的頻率一般每日最多1次。42小時，假設(shè)不能馬上接2小時內(nèi)接種平板，以防細菌死亡。5、留意事項5.1應(yīng)于抗菌藥物治療前采集鼻咽喉拭子標(biāo)本。5.2標(biāo)本采集前數(shù)小時不得用消毒藥物漱口或涂抹病灶局部。5.3以防污染。5.45.5采集扁桃體標(biāo)本時，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.6采集標(biāo)本時應(yīng)戴口罩和手套，以防傳染。5.7咽部是呼吸和食物的通路，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.8最好采集5.5采集扁桃體標(biāo)本時，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.6采集標(biāo)本時應(yīng)戴口罩和手套，以防傳染。5.7咽部是呼吸和食物的通路，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.8最好采集2份拭子，以便利直接涂片染色鏡檢和接種培育。用，由于其所含的脂肪酸對病原菌有害。二、下呼吸道標(biāo)本1、送檢指征但凡發(fā)熱、咳嗽和咳痰，痰呈膿性、黏稠或血性，并伴有胸痛、氣急，X線檢查提示有炎癥標(biāo)本。2、標(biāo)本采集時間2.1以晨痰為好。多數(shù)患者晨痰較多，即使對談量少的患者，也以早晨采集最為簡潔。對支氣管擴張癥與支氣管相通的患者，早晨起床后進展體位引流，可采集大量痰液。對支氣管擴張癥與支氣管相通的患者，早晨起床后進展體位引流，可采集大量痰液。2.2在應(yīng)用抗菌藥物之前采集標(biāo)本。2.2在應(yīng)用抗菌藥物之前采集標(biāo)本。3、采集方法合格的標(biāo)本采集是取得正確檢驗結(jié)果的關(guān)鍵，因此臨床工作人員要教會患者如何采集或親自去采集，取得深部的痰液而不是唾液。3.1自然咳痰法：患者早晨起床后，用冷開水〔無菌生理鹽水〕反復(fù)漱口〔用濕牙刷刷口腔黏膜、舌頭和牙齦5至10口腔黏膜、舌頭和牙齦5至10分鐘，勿用牙膏〕后用力自氣管咳出第一口痰〔戴假牙者取出假牙后漱口。對于痰量少或無痰的患者可進展誘導(dǎo)咳痰，及承受霧化吸入加溫至45°C的100g/LNaCl溶液，使痰液易于排出。將痰采集于無菌容器中盡快送檢。本。此法患者常不愿承受。3.3胃內(nèi)采痰法：該方法于早晨空腹時，將胃管插入胃內(nèi)，用注射器抽取胃液。適用于核分支桿菌培育，其陽性率比咳痰高10%左右。3.4核分支桿菌培育，其陽性率比咳痰高10%左右。3.4人工氣道采痰法：通過氣管切口插管，負壓吸引取得痰液，可用于厭氧菌培育。3.5小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，盡快送檢。4、標(biāo)本的運送4.1標(biāo)本采集后盡快〔小于2小時〕送至試驗室，不準(zhǔn)時運送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。4.2嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。4.24°C冰箱保存〔疑肺炎鏈球菌感染、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌感染標(biāo)本不能冷藏，以免雜菌生長，但保存標(biāo)本應(yīng)在4小時內(nèi)處理。4.3對可疑烈性呼吸道傳染病〔如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等〕的患者檢驗標(biāo)本，在采集、運輸或保存過程中必需留意生物安全防護。5集、運輸或保存過程中必需留意生物安全防護。55.15.25.2標(biāo)本采集后應(yīng)馬上送檢。5.3結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多。5.4肺部感染的患者可能患有菌血癥，應(yīng)同時做血液培育。5.5一般不主見承受肉湯增菌或高選擇性培育基來對標(biāo)本進展增菌或分別培育。5.6氣管插管24h后會有定值菌，僅當(dāng)消滅臨床肺炎病癥〔發(fā)熱和浸潤〕時，否則切勿培育氣管吸出物，因培育結(jié)果可能與疾病不符。附注：LentinoandLucks評價用于臨床痰培育的標(biāo)本有如下狀況：5.3結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多。5.4肺部感染的患者可能患有菌血癥，應(yīng)同時做血液培育。5.5一般不主見承受肉湯增菌或高選擇性培育基來對標(biāo)本進展增菌或分別培育。5.6氣管插管24h后會有定值菌，僅當(dāng)消滅臨床肺炎病癥〔發(fā)熱和浸潤〕時，否則切勿培育氣管吸出物，因培育結(jié)果可能與疾病不符。附注：LentinoandLucks評價用于臨床痰培育的標(biāo)本有如下狀況：1.MurrayWashington的痰質(zhì)量分級系統(tǒng)，48%的送往試驗室的痰培育未通過質(zhì)量分級，而較多的是口腔分泌物；2.26.5%的膿痰標(biāo)原來自未顯示出反射學(xué)和臨床病癥證據(jù)的病人；3.40%的痰標(biāo)原來自未深入祛痰而較多的是口腔分泌物的病人;4.臨床血液培育標(biāo)本采集、運輸、處理血流感染的發(fā)生進展可以嚴峻威逼患者的生命，其正確診斷不僅可以削減抗菌藥物的誤用和濫用，同時可以大大地改善患者的預(yù)后，降低患者的病死率，削減醫(yī)療花費。導(dǎo)管相關(guān)性血流感染以及感染性心內(nèi)膜炎診斷標(biāo)準(zhǔn)、快速鑒定血培育中的念珠菌、報告試驗結(jié)果，強調(diào)試驗室準(zhǔn)時與臨床溝通，提高血流感染診斷水平的重要意義。11小時，在此期間，應(yīng)同時〔或間隔30-60min〕采集2-3套血培育，只有在疑心患者有感染性心內(nèi)膜炎或其它血管內(nèi)感染〔如導(dǎo)管相關(guān)性感染〕時，才有必要間隔較長時間屢次采集血培育。2在每次敗血癥期間，推舉采集2-3套血培育。對于****，不應(yīng)僅做1套血培育，不僅1套血培育的結(jié)果較難解釋。由于在開頭抗菌治療后，患者血液中的致病菌不會馬上去除，2-5〔非感染性心內(nèi)膜炎，應(yīng)在6小時重復(fù)培育以推斷其是否為簡單性金葡菌敗血癥。3****，采血量在2-30ml時致病菌的檢測與液中的致病菌不會馬上去除，2-5〔非感染性心內(nèi)膜炎，應(yīng)在6小時重復(fù)培育以推斷其是否為簡單性金葡菌敗血癥。3****，采血量在2-30ml時致病菌的檢測與血量成正比，雖然采血量增長至40ml〔甚至更高〕時血培育陽性率仍在提高，但已經(jīng)不再與采血量成正比。對于嬰幼兒，采血量不應(yīng)超過患兒總血量的1%。4酵母菌引起的。假設(shè)僅做需氧培育，每套培育應(yīng)使用2個需氧瓶并保證有足夠的血量。5和葡萄糖酸洗必泰優(yōu)于聚維酮碘，碘酊與葡萄糖酸洗必泰效果相近。碘酊應(yīng)作用30s，碘伏應(yīng)作用1.5-2min。葡萄糖酸洗必泰也應(yīng)作用30s，它較少引起過敏，因而在靜脈穿刺后不需擦掉，但不能用于2個月以內(nèi)的生兒皮膚消毒。6除抗凝劑，由于其抗菌作用通?？梢员慌嘤行♂屜?。至。2小時內(nèi)送至試驗室，延遲上時機延緩甚至阻礙病原菌生長。培育瓶在室溫僅能存放數(shù)小時。切忌將培育瓶冷藏或冷凍，冷藏或冷凍會導(dǎo)致局部病原菌死亡，冷凍可能導(dǎo)致培育瓶裂開。7至。2小時內(nèi)送至試驗室，延遲上時機延緩甚至阻礙病原菌生長。培育瓶在室溫僅能存放數(shù)小時。切忌將培育瓶冷藏或冷凍，冷藏或冷凍會導(dǎo)致局部病原菌死亡，冷凍可能導(dǎo)致培育瓶裂開。7標(biāo)識錯誤或沒有標(biāo)識的培育瓶；破損或滲漏的培育瓶；凝血。臨床尿液標(biāo)本采集1、送檢指征尿路感染、腎結(jié)核、泌尿系結(jié)石、膀胱排空受損或前列腺增生等患者，消滅尿頻、尿急、尿痛等膀胱刺激病癥，肉眼膿尿或血尿，尿常規(guī)檢查有白細胞或亞硝況應(yīng)采集尿液標(biāo)本送檢。2、標(biāo)本采集2.11次尿液送檢，4小時以上。疑似沙門菌感染、鉤端螺旋體感染時，一般在發(fā)病2周左右采集尿液培育。2.2采集方法4小時以上。疑似沙門菌感染、鉤端螺旋體感染時，一般在發(fā)病2周左右采集尿液培育。2.2采集方法2.2.1清潔中段尿采集法：囑患者留取標(biāo)本前一天晚上少飲水，晨起女性用肥皂水清洗外陰部〔男性翻轉(zhuǎn)，清洗尿道口留取中段尿10-15ml于滅菌容器內(nèi)，馬上加蓋送檢。5-10ml尿液送檢。此法有肯定的苦痛，患者難以承受。主要用于厭氧菌培育或留取標(biāo)本標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本采集。此法可避開尿液標(biāo)本污染。2.2.3導(dǎo)尿法：去前段去前段15ml，再留取10-15ml膀胱尿液于滅菌容器內(nèi)送檢。次法可削減尿液標(biāo)本的污染，準(zhǔn)確地反映感染狀況。但有可能將下尿道細菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。尿液5-10ml，置于滅菌容器中送檢；或消毒后解開接口，棄去導(dǎo)尿管前段尿，留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢，長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換導(dǎo)尿管后留取尿標(biāo)本。2.2.4集尿法：疑心結(jié)核分枝桿菌感染時，可用一清潔容器，留24小時尿取其沉渣10-15ml污染，準(zhǔn)確地反映感染狀況。但有可能將下尿道細菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。尿液5-10ml，置于滅菌容器中送檢；或消毒后解開接口，棄去導(dǎo)尿管前段尿，留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢，長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換導(dǎo)尿管后留取尿標(biāo)本。2.2.4集尿法：疑心結(jié)核分枝桿菌感染時，可用一清潔容器，留24小時尿取其沉渣10-15ml送檢。3、標(biāo)本采集量結(jié)果可能不行靠。4、標(biāo)本采集容器容器應(yīng)當(dāng)承受不與尿液成分發(fā)生反響的惰性材料；容器應(yīng)干凈、無菌、加蓋、封閉、防滲漏，且不含防腐劑和抑制劑；容器應(yīng)廣口，具有較寬的底部，容器應(yīng)在40ml左右，容器蓋應(yīng)易于開啟。52小時〔夏季保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存，C冷藏保存時間不得超過4小時，但應(yīng)留意冷藏保存的標(biāo)本不能用于淋病奈瑟菌培育。糞便標(biāo)本采集1腹瀉、大便每日≥3次，糞便的性狀特別，可為稀便、水樣便、黏液便、膿血便及血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等；病情嚴峻者，因大量喪失水分引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克；糞便涂片鏡檢白細胞腹瀉、大便每日≥3次，糞便的性狀特別，可為稀便、水樣便、黏液便、膿血便及血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等；病情嚴峻者，因大量喪失水分引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克；糞便涂片鏡檢白細胞≥5個/HP；抗菌藥物治療后腹瀉；來自疫區(qū)的患者等。2、采集方法2.1自然排便采集法盛于無菌容器內(nèi)或置于保存液或增菌液中送檢，假設(shè)不能準(zhǔn)時送檢，按1：10比例與pH7.0磷酸鹽甘油緩沖液〔0.03mol/L磷酸鹽緩沖液與等體積甘油混勻〕混合保存，或置于Cary-Blair運送培育基中，以防病原菌死亡而影響檢出率。2.2直腸拭子采集法鹽水、保存液或增菌液潤濕的肛門采樣拭子或玻璃采便器插入肛門，****約4-5cm。兒童約2-3cmCary-Blair運送培育基中或或置于Cary-Blair運送培育基中，以防病原菌死亡而影響檢出率。2.2直腸拭子采集法鹽水、保存液或增菌液潤濕的肛門采樣拭子或玻璃采便器插入肛門，****約4-5cm。兒童約2-3cmCary-Blair運送培育基中或pH7.0磷酸鹽甘油緩沖液中送檢。3一般用拭子采集大于2g的標(biāo)本送檢，假設(shè)標(biāo)本為水樣，采集大于2ml的標(biāo)本置于無菌容器中送檢。4、采集時間及頻率4.1采集時間盡可能在發(fā)病早期〔急性期〔3日以內(nèi)〕和應(yīng)用抗菌藥物治療之前，2周以后采集標(biāo)本送檢。4.2采集頻率重復(fù)采集標(biāo)本的頻率每日最多1次。5、標(biāo)本的運送5.12Cary-Blair4°C冰箱保存，但保存時間不能超過24小時。Cary-BlairGN肉湯中送檢，室溫運送時間不超過2小時，4°C冰箱保存時間不超過24小時。5.3高度疑心霍亂弧菌感染的標(biāo)本運送必需符合特別標(biāo)本的安全要求。穿刺液標(biāo)本采集一、腦脊液標(biāo)本的采集、運送送檢指征：發(fā)熱、頭痛、惡心，嘔吐、頸強直和反射增加等病癥，疑心為腦膜炎的患膜炎，采集腦脊液送檢。膜炎，采集腦脊液送檢。2.采集時間脊液標(biāo)本。3.2.采集時間脊液標(biāo)本。3.采集方法及采集量〔留意嚴格無菌操作檢測細菌或病毒，腦脊液量應(yīng)大于或等于1ml,假設(shè)用于檢測真菌或抗酸桿菌，腦脊液。4.標(biāo)本的運送15分鐘內(nèi)送至試驗室。假設(shè)延誤送檢，標(biāo)本應(yīng)置于室溫保存，但保存時間不超過24小時，但送檢延遲可能對苛氧菌的檢出有影響。腦脊液標(biāo)本不行放冰箱保存，以防某些細菌死亡〔如腦膜炎奈瑟菌，肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。二、胸腹水標(biāo)本的采集和運送1.送檢指征1.1胸水：患者多伴有胸痛，發(fā)熱，假設(shè)胸腔積液未渾濁，乳糜性，血性或膿性是應(yīng)送檢。1.2腹水：有腹脹，腹痛，嘔吐，腹部壓痛，肌緊急，腸鳴音減弱或消逝等病癥的患保存，但保存時間不超過24小時，但送檢延遲可能對苛氧菌的檢出有影響。腦脊液標(biāo)本不行放冰箱保存，以防某些細菌死亡〔如腦膜炎奈瑟菌，肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。二、胸腹水標(biāo)本的采集和運送1.送檢指征1.1胸水：患者多伴有胸痛，發(fā)熱，假設(shè)胸腔積液未渾濁，乳糜性，血性或膿性是應(yīng)送檢。1.2腹水：有腹脹，腹痛，嘔吐，腹部壓痛，肌緊急，腸鳴音減弱或消逝等病癥的患者，腹部積液增多且為滲出液時，應(yīng)送腹水培育。2.采集時間日采集。3.采集方法3.1漿膜腔積液標(biāo)本由臨床醫(yī)師行胸腔穿刺術(shù)，腹腔穿刺術(shù)或心包穿刺術(shù)分別采集，留意嚴格無菌操作。3.2送檢標(biāo)本最好留取中段液體于滅菌容器中，或直接接種于血培育瓶中，標(biāo)本采集量1~5ml，不能用拭子蘸取標(biāo)本送檢；對于非臥床透析患者的腹膜炎診斷要采集最少50ml標(biāo)本才有利于檢出病原體。如查結(jié)核分枝桿菌則約需10ml。3.3標(biāo)本采集后假設(shè)注入無菌小瓶或無菌試管中，應(yīng)在容器中先參加滅菌肝素然后再加入標(biāo)本〔或直接注入血培育瓶，以防止穿刺液凝固l肝素可抗凝l標(biāo)本，但抗凝劑可能影響苛氧菌的分別抗凝劑可能影響苛氧菌的分別。4、標(biāo)本的運送一般胸腹水標(biāo)本采集后4、標(biāo)本的運送一般胸腹水標(biāo)本采集后15分鐘內(nèi)應(yīng)送至微生物室，如不能準(zhǔn)時送檢室溫保存不超過4小時。假設(shè)做真菌培育需C保存。膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集、運送及處理1、送檢指征局部病癥：紅、腫、熱、痛和功能障礙時化膿性感染的五個典型特征。但隨病程遲早、病變范圍、位置深淺不同，五個病癥不肯定全部表現(xiàn)。病變范圍小或位置較小時，局部病癥可不明顯。早、病變范圍、位置深淺不同，五個病癥不肯定全部表現(xiàn)。病變范圍小或位置較小時，局部病癥可不明顯。全身病癥：輕重不一。感染較重者常有發(fā)熱、頭痛、全身不適、乏力食欲減退等，一般均有白細胞計數(shù)增加，核左移及CRP上升。病程較長時，可有水和電解質(zhì)紊亂，血漿蛋白削減，肝糖原大量消耗，可消滅養(yǎng)分不良、貧血、水腫等病癥。全身性感染嚴重的患者可發(fā)生感染性休克。1.3一般均有白細胞計數(shù)增加，核左移及CRP上升。病程較長時，可有水和電解質(zhì)紊亂，血漿蛋白削減，肝糖原大量消耗，可消滅養(yǎng)分不良、貧血、水腫等病癥。全身性感染嚴重的患者可發(fā)生感染性休克。1.3疑為以下疾病時需送檢1.3.1軟組織的急性化膿性炎癥：如癤、癰、急性蜂窩織炎、丹毒等。炎、鼻竇炎、化膿性扁桃體炎、急性化膿性中耳炎、急性化膿性乳突炎、急性***炎、急性膽囊炎、急性梗阻性化膿性膽管炎、心包炎、結(jié)核性腹膜炎。1.3.3膿腫：扁桃體膿腫、咽部膿腫、咽旁膿腫、牙齦膿腫、腦膿腫、肺膿腫、肝膿腫、膿胸、腹腔膿腫、腎皮質(zhì)化膿性感染、腎四周炎和腎周膿腫、直腸肛管四周膿腫。1.3.4創(chuàng)傷感染：外傷感染、術(shù)后切口感染、導(dǎo)管感染、臍帶殘端感染。2、采集方法2.1膿胸、腹腔膿腫、腎皮質(zhì)化膿性感染、腎四周炎和腎周膿腫、直腸肛管四周膿腫。1.3.4創(chuàng)傷感染：外傷感染、術(shù)后切口感染、導(dǎo)管感染、臍帶殘端感染。2、采集方法2.1開放性膿腫：開放性膿腫標(biāo)本包括眼〔結(jié)膜、角膜、耳〔外耳、扁桃體、術(shù)后切〔最好從膿腫底部或膿腫壁取樣另一個用于革蘭涂片染色。而瘺管則以無菌方法實行組織碎片，置于無菌試管中送檢。另一個用于革蘭涂片染色。而瘺管則以無菌方法實行組織碎片，置于無菌試管中送檢。2.2癰、淋巴結(jié)膿腫、乳腺膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腦膿腫、腎周膿腫、闌尾膿腫、胸腔膿腫、腹腔積液、心包積液、腹腔膿腫、關(guān)節(jié)