大黃中蒽醌類成分的提取、分離和鑒定(實驗報告)

大黃中蒽醌類成分的提取、分離和鑒定實驗目的（1）熟悉蒽醌類成分的提取分離方法

（2）掌握pH梯度提取法的原理和操作技術

（3）學習蒽醌類化合物鑒定方法實驗器材材料及試劑：大黃粗粉、濃硫酸、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、濃鹽酸、乙酸乙酯、石油醚、乙醚、普通濾紙、薄層層析硅膠板（2.5cm×10cm）、廣泛PH試紙、剪刀、鉛筆、尺子儀器：500mL圓底燒瓶、球形冷凝管（30cm）、橡皮管、燒杯、滴管、層析缸（廣口瓶）、250mL分液漏斗、布氏漏斗、抽濾瓶、水浴鍋、集熱式磁力攪拌器、磁子、循環(huán)水式多用真空泵、鐵架臺等。實驗原理大黃為蓼科植物,味苦,性寒,具有瀉熱通腸、涼血解毒、逐瘀通經(jīng)等功效。其主要成分為為蒽醌化合物，含量約為3%~5%，大部分與葡萄糖結合苷，游離苷元有大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚等。其中，大黃酸具有羧基，酸性最強；大黃素具有β-酚羥基，酸性第二；蘆薈大黃素連有羥甲基，酸性第三；大黃素甲醚和和大黃酚的酸性最弱。根據(jù)以上化合物的酸度差異，可用堿性強弱不同的溶液進行梯度萃取分離。大黃酸R1=HR2=COOH

大黃素R1=CH3R2=OH

蘆薈大黃素R1=CH2OHR2=H

大黃素甲醚R1=CH3R2=OCH3

大黃酚R1=CH3R2=H實驗內(nèi)容大黃素的提取、分離流程圖

大黃粗粉120%H2SO4150ml加熱1h,抽濾、干燥濾餅150ml乙醚回流提取1h乙醚層5%NaHCO3萃取水層（紫紅色）乙醚層HCl5%Na2CO3大黃酸沉淀（粗品）水層（紅色）乙醚層HCl0.25%NaOH大黃素沉淀（粗品）水層（紅色）蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚沉淀（混合物）具體操作步驟1.游離蒽醌的提?。?）酸水解：稱取大黃粗粉10g，加20%H2SO4水溶液150mL，在水浴上加熱1小時，放冷，抽濾，濾餅用NaOH溶液洗至近中性（pH約為6），于70℃干燥后，研碎，置250mL圓底燒瓶中，加入乙醚150mL回流提取1小時（調(diào)45（2）蒽醌類成分的提?。阂颐烟崛∫航?jīng)薄層層析檢查有大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素、2.pH梯度萃取法的原理是什么？如何利用該方法分離大黃中的5種游離羥基蒽醌化合物？答：pH梯度萃取法的原理是由于溶劑系統(tǒng)pH變化而改變了它們的存在狀態(tài)（游離型或解離型），從而改變了他們在溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)。由于各羥基蒽醌結構上的不同所表現(xiàn)的酸性不同，用pH梯度萃取法分離他們；大黃酚和大黃素甲醚酸性相近，利用其極性的差異，用柱色譜分離之。3.結合本實驗，思考設計實驗方案所需因素？答：游離蒽醌的提取要控制溫度，回流不宜太劇烈。要注意堿液濃度及萃取時的靜置時間對實驗結果的影響。參考文獻（1）吳立軍主編，《天然藥物化學實驗指導》北京；人民衛(wèi)生出版社，2011（2）康廷國主編，《中成藥薄層色譜鑒別》.北京：人民出版社，1995（3）徐選明，劉新大黃中大黃素提取工藝的優(yōu)化中國中醫(yī)藥信息