苦參堿類生物堿的研究進展

苦參堿類生物堿的研究進展

多藥殘留（mdr）是腫瘤細(xì)胞對化療藥物的反應(yīng)，其他結(jié)構(gòu)、作用目標(biāo)和作用機制不同的腫瘤藥物也會導(dǎo)致交叉效應(yīng)，這是腫瘤有效治療的主要障礙之一?？鄥A類生物堿是以苦參堿為代表的化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的一類生物堿,它們廣泛存在于豆科植物苦參(SophoraflavescensAit)、苦豆子(S.AlopecuroidesL)及廣豆根(S.SubprostrataChunetT.Chen)中,此類生物堿還包括氧化苦參堿、槐果堿、槐定堿、槐醇堿、槐胺堿和氧化槐果堿等多種生物堿。近年來研究表明苦參堿類生物堿具有抗腫瘤作用,同時也能逆轉(zhuǎn)多種腫瘤的多藥耐藥,增強臨床上常用化療藥物的抗腫瘤活性,本文就苦參堿類生物堿多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用研究進展進行綜述。1苦參堿對小鼠細(xì)胞的作誘導(dǎo)朱金水等建立了多藥耐藥人胃癌SGC-7901細(xì)胞和多藥耐藥人胃癌MKN-45細(xì)胞的裸鼠皮下移植瘤模型,發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿逆轉(zhuǎn)多藥耐藥細(xì)胞SGC-7901對化合物NM-3(一種新的抗血管生成小分子異香豆素衍生物)的耐藥性,從而誘導(dǎo)裸鼠體內(nèi)人胃癌細(xì)胞的凋亡,增強裸鼠體內(nèi)胃癌細(xì)胞對化療的療效和敏感性,同時氧化苦參堿逆轉(zhuǎn)多藥耐藥細(xì)胞MKN-45對化合物鹽酸伊利替康(CPT-11)的耐藥性,誘導(dǎo)裸鼠體內(nèi)人胃癌細(xì)胞的凋亡,增強裸鼠體內(nèi)胃癌對化療的敏感性和療效。費新紅等研究重組人白細(xì)胞介素-2(rhIL-2)和苦參堿單獨或聯(lián)合治療小鼠多藥耐藥微小殘留白血病,結(jié)果顯示rhIL-2和苦參堿單獨應(yīng)用均有顯著抑制微小殘留白血病細(xì)胞增生的作用,而聯(lián)用無明顯協(xié)同作用。李貴海等通過研究苦參堿對化療誘導(dǎo)的MDR模型小鼠S180腫瘤細(xì)胞獲得性多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用及其作用機制,發(fā)現(xiàn)苦參堿可以逆轉(zhuǎn)經(jīng)模擬臨床化療順鉑+5-氟尿嘧啶+環(huán)磷酰胺(PFC)方案誘導(dǎo)的小鼠S180腫瘤細(xì)胞多藥耐藥,通過降低化療誘導(dǎo)后耐藥細(xì)胞P-gp、肺耐藥蛋白(LRP)的表達率和DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶活性,減少細(xì)胞黏附因子CD54的表達,增加對細(xì)胞凋亡因子Fas、Trail表達率,促進耐藥S180細(xì)胞的凋亡,說明苦參堿通過對相關(guān)生物活性物質(zhì)的調(diào)節(jié),從而產(chǎn)生對腫瘤細(xì)胞多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用,同時其作用程度與生物堿的結(jié)構(gòu)相關(guān)。2細(xì)胞外科實驗2.1苦參堿對k562/vin細(xì)胞的誘導(dǎo)表達作用李文瑜等研究表明苦參堿(50mg·L-1)和氧化苦參堿(50mg·L-1)均能增加白血病多藥耐藥細(xì)胞系K562/A02對柔紅霉素的敏感性,兩者均可顯著降低阿霉素對K562/A02細(xì)胞的IC50(苦參堿IC50由14.92mg·L-1降至8.29mg·L-1,氧化苦參堿由34.9mg·L-1降至13.3mg·L-1),部分逆轉(zhuǎn)了K562/A02對柔紅霉素耐藥性,其機制均通過下調(diào)K562/A02細(xì)胞膜糖蛋白P-gp的表達,降低經(jīng)P-gp介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)柔紅霉素外排能力,使化療藥物在白血病細(xì)胞內(nèi)能達到有效濃度,殺滅耐藥的白血病細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞耐藥性。王雙等研究用甲孕酮和苦參堿單獨及聯(lián)合用藥、塞來昔布和苦參堿單獨及聯(lián)合應(yīng)用,阿霉素的胞內(nèi)攝取和細(xì)胞凋亡百分率明顯提高,細(xì)胞對阿霉素的耐藥性有明顯逆轉(zhuǎn),兩藥聯(lián)合應(yīng)用時優(yōu)于單獨給藥。李旭芬等研究探討苦參堿對K562及其多藥耐藥細(xì)胞K562/Vin、K562/dox的誘導(dǎo)凋亡作用及其細(xì)胞生物學(xué)影響,結(jié)果顯示苦參堿可抑制K562細(xì)胞hTERT-mRNA表達,降低K562/Vin細(xì)胞表面P-gp表達,增強長春新堿對K562/Vin的細(xì)胞毒性,誘導(dǎo)K562細(xì)胞及其多藥耐藥細(xì)胞K562/Vin、K562/dox的凋亡。丁艷芳等研究表明苦參堿可部分逆轉(zhuǎn)人白血病K562/ADM細(xì)胞對阿霉素的耐藥性,其逆轉(zhuǎn)機制與增加細(xì)胞內(nèi)藥物積累有關(guān)。陳怡用環(huán)孢菌素A聯(lián)合苦參堿作用于K562/ADM細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)環(huán)孢菌素A和苦參堿對K562/ADM均有明顯的抑制作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用效果優(yōu)于單獨應(yīng)用,具有協(xié)同作用,通過下調(diào)P-gp的表達是其可能的主要機制。2.2苦參堿對kjt細(xì)胞增殖的影響戰(zhàn)濤研究苦參堿對大鼠肝癌細(xì)胞株CRBH-7919細(xì)胞及其多藥耐藥細(xì)胞株CRBH-7919/mdr1的作用,結(jié)果顯示苦參堿可以抑制CRBH-7919及CRBH-7919/mdr1細(xì)胞的增殖并在一定程度上逆轉(zhuǎn)多藥耐藥細(xì)胞的耐藥性,提示苦參堿可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而達到殺傷腫瘤細(xì)胞的作用,并可克服腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥現(xiàn)象。胥雄陽等發(fā)現(xiàn)苦參堿對人肝癌細(xì)胞QGY及其耐藥細(xì)胞株QGY/CDDP的生長有抑制作用,細(xì)胞的P-gp、MRP蛋白表達下調(diào),Bax蛋白表達上調(diào),部分逆轉(zhuǎn)人肝癌耐藥細(xì)胞QGY/CDDP的耐藥。顧偉等發(fā)現(xiàn)肝力注射液(苦參堿和鹽酸川芎嗪按5:1的質(zhì)量比配伍)可部分逆轉(zhuǎn)人肝癌耐藥細(xì)胞株BEL-7402/5-Fu對5-氟尿嘧啶的獲得性耐藥,呈濃度依賴性,同時增強耐藥細(xì)胞攝取阿霉素的能力。2.3苦參堿對4gs-pcr細(xì)胞中ndp的誘導(dǎo)表達作用顧政一等進行胃癌多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑研究顯示氧化苦參堿均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR細(xì)胞的增殖。王俊霞等用磺酰羅丹明B(SRB)法測定苦參堿和氧化苦參堿對多藥耐藥人胃癌細(xì)胞株SGC7901/VCR耐藥細(xì)胞的增殖抑制率,計算IC50、IC10、耐藥倍數(shù)及逆轉(zhuǎn)倍數(shù),同時用流式細(xì)胞術(shù)檢測羅丹明123的熒光強度變化,結(jié)果表明苦參堿和氧化苦參堿可體外逆轉(zhuǎn)細(xì)胞株SGC7901/VCR對長春新堿的耐藥作用,且氧化苦參堿的逆轉(zhuǎn)作用強于苦參堿。由于苦參堿和氧化苦參堿均能增加SGC7901/VCR細(xì)胞對P-gp底物羅丹明123的攝取,推測逆轉(zhuǎn)作用可能與抑制P-gp有關(guān)。孫亭立等研究不同濃度苦參堿處理SGC7901/VCR細(xì)胞72h后可以逆轉(zhuǎn)SGC7901/VCR對VCR的耐藥,且呈劑量依賴性,苦參堿(0.5mg·mL-1)與SGC7901/VCR細(xì)胞共同培養(yǎng)24h后,細(xì)胞中多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)的表達顯著降低,逆轉(zhuǎn)機制可能與下調(diào)MRP表達有關(guān)。鄧皖利等用槐定堿干預(yù)SGC7901/DDP細(xì)胞48h后,其耐藥細(xì)胞增殖受到抑制,凋亡率增加,B7-H1蛋白表達下調(diào),對人結(jié)腸癌SGC7901/DDP多藥耐藥細(xì)胞具有逆轉(zhuǎn)作用,增加順鉑的細(xì)胞殺傷作用,其逆轉(zhuǎn)機制可能是通過調(diào)控B7-H1基因而發(fā)揮作用。姜鐵軍對苦參堿抑制胃癌細(xì)胞增殖的作用機制進行研究,結(jié)果顯示苦參堿抑制胃癌細(xì)胞系MKN-45翻譯起始因子eIF4E和抑制蛋白4E-BP的磷酸化水平,呈劑量和時間依賴性,同時可抑制Erkl/2MAPK活性而減弱eIF4E和4E-BP的磷酸化水平。2.4苦參堿誘導(dǎo)分析張金廷等發(fā)現(xiàn)不同濃度的苦參堿對口腔上皮癌KB細(xì)胞及其多藥耐藥細(xì)胞KBv200的增殖有抑制作用,使細(xì)胞生長停滯在S期,同時出現(xiàn)細(xì)胞體積縮小、細(xì)胞質(zhì)空泡化、細(xì)胞核碎裂等凋亡現(xiàn)象,表明苦參堿可誘導(dǎo)KB及KBv200細(xì)胞凋亡,克服腫瘤的多藥耐藥現(xiàn)象。陳鴻雁等研究表明苦參堿逆轉(zhuǎn)KBV200耐藥細(xì)胞株對順鉑、平陽霉素、環(huán)磷酰胺的耐藥作用較弱,逆轉(zhuǎn)KBV200耐藥細(xì)胞株對長春新堿、阿霉素耐藥的作用較強,苦參堿分別與長春新堿和阿霉素聯(lián)合作用后,可使KBV200耐藥細(xì)胞株P(guān)-gp的表達水平下降,從而逆轉(zhuǎn)其耐藥性。2.5ps-3模型黃宇賢等研究發(fā)現(xiàn)苦參堿能提高5種人耐藥鼻咽癌細(xì)胞NKG2D配體(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)的表達率,增強NK細(xì)胞對靶細(xì)胞的敏感性和殺傷力,說明苦參堿通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達NK細(xì)胞活化性配體(MICA/B、ULBP1-3),從而使腫瘤細(xì)胞對Allo-NK細(xì)胞的殺傷敏感性增強。葉琳等研究氧化苦參堿對鼻咽癌耐藥細(xì)胞株HNE-1(200)的逆轉(zhuǎn)作用,發(fā)現(xiàn)苦參堿可以降低P-gp表達,但不影響mRNA表達,能一定程度逆轉(zhuǎn)阿霉素等耐藥細(xì)胞株的耐藥性。張俊等通過逐漸遞增法誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞HONE1產(chǎn)生耐順鉑細(xì)胞株HONE1/DDP,耐藥細(xì)胞株經(jīng)非毒性濃度苦參堿及其衍生物處理后,苦參堿可以明顯增加HONE1/DDP細(xì)胞周期G0/G1,苦參堿衍生物可以減少HONE1/DDP的細(xì)胞周期S期,苦參堿及其衍生物均能降低MRP1、BAX的表達,提高BCL-2,降低BAX/BCL-2比值,說明苦參堿及其衍生物具有逆轉(zhuǎn)HONE1/DDP對順鉑耐藥的作用,通過下調(diào)MRP1的表達、降低BAX/BCL-2比值及改變細(xì)胞周期分布是其可能的作用機制。2.6苦參堿對人墻胱癌細(xì)胞凋亡率的影響閆明等表明環(huán)孢霉素A和苦參堿能顯著降低阿霉素對人膀胱癌耐藥細(xì)胞株T24/ADM的IC50,兩藥聯(lián)合應(yīng)用時呈協(xié)同效應(yīng)。環(huán)孢霉素A與苦參堿分別通過影響P-gp蛋白的功能與表達而發(fā)揮逆轉(zhuǎn)作用。劉兆輝等研究不同濃度苦參堿對人膀胱癌耐藥細(xì)胞株T24/ADM的耐藥逆轉(zhuǎn)作用,結(jié)果表明不同濃度苦參堿能提高細(xì)胞凋亡率,降低P-gp的表達,苦參堿濃度與細(xì)胞凋亡率呈正比關(guān)系,與P-gp量呈反比關(guān)系,充分說明了苦參堿對T24/ADM有耐藥逆轉(zhuǎn)作用,50μg·mL-1為最佳逆轉(zhuǎn)濃度。呂建裕等發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿對人乳腺癌耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADM具有逆轉(zhuǎn)作用,經(jīng)氧化苦參堿處理后胞膜P-gp的表達量明顯下降,具有直接抗腫瘤活性。3創(chuàng)新蛋白表達羅素霞等探討凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosis,IAP)survivin家族新成員,參與細(xì)胞凋亡和細(xì)胞分裂雙相調(diào)控,在已檢測的多種人類腫瘤中均高表達,目前研究發(fā)現(xiàn)survivin高表達同紫杉醇(PTX)類藥物耐藥密切相關(guān)在晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中表達及其與紫杉醇化療療效的關(guān)系,應(yīng)用免疫組化方法檢測組織survivin表達水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn)survivin蛋白在NSCLC中高表達,survivin蛋白陽性表達組中,加用苦參堿組化療有效率提高,生存時間延長,推測苦參堿可能通過抑制survivin蛋白,促進紫杉醇引起的細(xì)胞凋亡。4基于p-gp的作藥藥綜上所述,近年來對苦參堿類生物堿逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的研究報道較多,并且趨向于從分子角度闡明其作用