DB1304-T 417-2022 噬菌體防控雞源沙門(mén)菌技術(shù)規(guī)程

DB1304邯 鄲市 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB

1304/

T417—2022噬菌體防控雞源沙門(mén)菌技術(shù)規(guī)程 邯鄲市市場(chǎng)監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB1304/

T417—2022 本文件按照

GB/T

給出的規(guī)則起草。本文件由河北工程大學(xué)提出。本文件起草單位：河北工程大學(xué)、峰峰礦區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局

。汲如芬、王海忠、支龍彬。IDB1304/

T417—20221 范圍本文件規(guī)定了雞源沙門(mén)菌及其噬菌體分離鑒定、噬菌體懸浮液的制備、防控措施等技術(shù)要求。本文件適用于雞源沙門(mén)菌的噬菌體預(yù)防和治療。2 規(guī)范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB

食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

食品微生物學(xué)檢驗(yàn)

沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)N

Y/

T

畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)NY/T541動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)采樣方法NY/T555 動(dòng)物產(chǎn)品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌的檢測(cè)方法NY/T

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全要求通則3 術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4 沙門(mén)菌的分離鑒定參照NY/T

采集樣品后，按照GB

4789.4-2016分離鑒定沙門(mén)菌。5 噬菌體混懸液的制備5.1

r/min

經(jīng)

0.22

5.2 噬菌體的分離純化。將鑒定的沙門(mén)菌作為誘導(dǎo)菌，利用雙層瓊脂平板法培養(yǎng)噬菌體，挑選大小一致噬菌斑，再利用雙層瓊脂平板法純化培養(yǎng)噬菌體。吸取噬菌體純化液，加至電鏡專(zhuān)用銅網(wǎng)上，用

特征的噬菌體進(jìn)行純化。5.3寬譜噬菌體的篩選。將鑒定的沙門(mén)菌菌液接種于雙層平板，靜置，再取噬菌體懸液滴于雙層瓊脂

種類(lèi)病原菌菌株的數(shù)量篩選寬譜噬菌體。1心

10

心

10

0.22

μm

PFU/mL）5.4 噬菌體混懸液的制備。將

0.5

3

液體培養(yǎng)基后，分別加入

100μL

同種病原菌菌液，37

℃

220

r/min

16

h。4

℃條件下

8000

r/min

離44

℃保存。5.5

℃倒置培養(yǎng)

h，觀察培養(yǎng)平板有無(wú)菌落生長(zhǎng)。若有細(xì)菌菌落生長(zhǎng)，應(yīng)重新過(guò)濾或制備噬菌體混懸液。6 防控6.1

沙門(mén)菌噬菌體混懸液加水，混勻，用稀釋液噴灑地面及料槽，每周

1

次。6.2 及時(shí)清除病死雞。7 治療7.1 消除病原。參照

6.1

噬菌體混懸液凈化雞舍環(huán)境病原菌。嚴(yán)重病例，可同時(shí)配合藥物治療。7.2 輔助治療。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好乳房衛(wèi)生，提高奶?？共×Γ煌瑫r(shí)參照

用消毒液、噬菌體混懸液噴灑雞舍地面和料槽。8 生物安全實(shí)驗(yàn)室操作參照