第4章 血液成分制備技術(shù)課件

第四章

血液成分制備技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握紅細(xì)胞、血小板、血漿及凝血因子制備質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及保存方法。熟悉輻照血液制備及血液制品的病毒滅活過程及質(zhì)量控制。了解粒細(xì)胞的制備及造血干細(xì)胞制備技術(shù)目錄第一節(jié)紅細(xì)胞的制備第二節(jié)血小板的制備第三節(jié)血漿及冷沉淀凝血因子的制備第四節(jié)粒細(xì)胞的制備第五節(jié)輻照血液第六節(jié)造血干細(xì)胞的制備技術(shù)第七節(jié)血液制劑的病毒滅活全血占體重8％50kg：4000ml血漿55-60%血細(xì)胞40－45％“全血”并不全紅細(xì)胞：變成球形或桑葚型，脆性增加

白細(xì)胞：壽命只有5天，粒細(xì)胞死亡最快，淋巴細(xì)胞最后血小板：24小時內(nèi)50%喪失功能，72小時后完全失去止血功能不穩(wěn)定凝血因子：24小時50%喪失功能

血漿：pH值逐漸降低，K+逐漸升高所以，提倡成分輸血!血液及血液成分蛋白制劑血漿制劑紅細(xì)胞制劑凝血因子冷沉淀血小板制劑成分血定義：通常指在一定的條件下采用特定的方法將全血中一種或多種血液成分分離出而制成的血液制劑與單采成分血的統(tǒng)稱。常用的成分血：紅細(xì)胞、血漿、血小板常用的成分血1.紅細(xì)胞：濃縮紅、懸浮紅、去白紅細(xì)胞懸浮紅、洗滌紅、冰凍紅、年輕紅、輻照紅等；2.血漿：新鮮冰凍血漿、冰凍血漿、病毒滅活新鮮冰凍血漿、病毒滅活冰凍血漿、冷沉淀凝血因子等；3.血小板：濃縮血小板、單采血小板、洗滌血小板等；4.白細(xì)胞：濃縮白細(xì)胞、濃縮粒細(xì)胞、單采粒細(xì)胞等。成分血的制備方法1.將采血袋采集的全血用大容量低溫離心機(jī)，利用虹吸或擠壓的方法分離成一種或幾種血液成分。如懸浮紅、去白細(xì)胞懸浮紅、新鮮冰凍血漿等。2.使用血細(xì)胞分離機(jī)從符合要求的獻(xiàn)血者血液中采集出一種或幾種血液成分，同時其他血液成分還輸給獻(xiàn)血者。如單采血小板。血液成分的制備方法手工血細(xì)胞分離機(jī)手工方法分離血液成分多連袋系統(tǒng)大容量低溫離心機(jī)各種血液成分密度不同B四聯(lián)袋(連有紅細(xì)胞添加劑的子袋)

各種血液成分的相對密度血小板為1.030～1.060，16×10-15L淋巴細(xì)胞為1.050～1.078，450×10-15L粒細(xì)胞為1.080～1.095，230×10-15L紅細(xì)胞為1.090～1.111，87×10-15L，血漿為1.025～1.030一次性全自動血液成分分離機(jī)采血器第一節(jié)紅細(xì)胞的制備類型：一、濃縮紅細(xì)胞二、去白細(xì)胞濃縮紅細(xì)胞三、懸浮紅細(xì)胞四、去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞五、洗滌紅細(xì)胞六、冰凍紅細(xì)胞與冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞七、年輕紅細(xì)胞一、濃縮紅細(xì)胞（redbloodcells）定義：是指采用特定的方法將采集到多聯(lián)塑料血袋內(nèi)的全血中的大部分血漿分離出后剩余部分所制成的紅細(xì)胞成分血。(仍含有少量白細(xì)胞和血小板）濃縮紅細(xì)胞（redbloodcells）制備方法：用二聯(lián)袋采集200ml或400ml全血于主袋內(nèi)；將二聯(lián)袋在2~6℃低溫離心機(jī)離心5~6分鐘（離心力4400*g），離心8分鐘，沉淀紅細(xì)胞；在低溫操作臺上用分漿夾將大部分血漿分入轉(zhuǎn)移袋內(nèi)；用高頻熱合機(jī)切斷二聯(lián)袋間的連接管，制成濃縮紅細(xì)胞制劑。濃縮紅細(xì)胞的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察無色澤異常、溶血、凝塊、氣泡等情況；血袋完好，并保留注滿全血經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少35cm容量來源于200ml全血：120ml±12ml來源于300ml全血：180ml±18ml來源于400ml全血：240ml±24ml血細(xì)胞比容0.65~0.80血紅蛋白含量來源于200ml全血：含量≥20g來源于300ml全血：含量≥30g來源于400ml全血：含量≥40g儲存期末溶血率﹤紅細(xì)胞總量的0.8%無菌試驗無細(xì)菌生長血液保存液

ACD保養(yǎng)液（枸櫞酸鹽-葡萄糖-枸櫞酸）pH5.0321天CPD保養(yǎng)液（枸櫞酸鹽-葡萄糖-枸櫞酸-磷酸鹽）pH5.6321天CPDA保養(yǎng)液(枸櫞酸鹽-葡萄糖-枸櫞酸-磷酸鹽-腺嘌呤)pH5.6335天加入磷酸鹽加入腺嘌呤可提高PH使2,3-DPG下降速度減慢可以促進(jìn)ATP的合成，利于紅細(xì)胞活性的維持濃縮紅細(xì)胞（redbloodcells）保存：溫度為4℃±2℃，保存期：含ACD、CPD保養(yǎng)液的保存期為21天，含CPDA-1保養(yǎng)液的保存期為35天。定義：使用白細(xì)胞濾器去除濃縮紅細(xì)胞中幾乎所有白細(xì)胞，并使殘留在紅細(xì)胞中白細(xì)胞數(shù)量低于一定數(shù)值的紅細(xì)胞成分血。對采集的全血通過白細(xì)胞濾器進(jìn)行過濾，后再按濃縮紅細(xì)胞制備方法制備。二、去白細(xì)胞濃縮紅細(xì)胞

白細(xì)胞濾器去白細(xì)胞濃縮紅細(xì)胞的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)無色澤異常、溶血、凝塊、氣泡等情況；血袋完好，并保留注滿全血經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少35cm容量標(biāo)示量（ml）±10%血紅蛋白含量來源于200ml全血：含量≥18g來源于300ml全血：含量≥27g來源于400ml全血：含量≥36g血細(xì)胞比容0.60~0.75白細(xì)胞殘留量來源于200ml全血：殘余白細(xì)胞≤2.5×106個來源于300ml全血：殘余白細(xì)胞≤3.8×106個來源于400ml全血：殘余白細(xì)胞≤5.0×106個儲存期末溶血率﹤紅細(xì)胞總量的0.8%無菌試驗無細(xì)菌生長定義：采用特定的方法將采集到多聯(lián)塑料血袋內(nèi)的全血中的大部分血漿分離出后，向剩余物加入紅細(xì)胞添加液制成的紅細(xì)胞成分血。三、懸浮紅細(xì)胞（redbloodcellsinadditivesolution）制備方法：全血采集及血漿分離方法同濃縮紅細(xì)胞；將紅細(xì)胞保存液袋管道上的塑料卡子折斷，把紅細(xì)胞保存液加入主袋內(nèi)，使紅細(xì)胞與保存液充分混勻用高頻熱合機(jī)切斷連接管，制成懸浮紅細(xì)胞保存：溫度為4℃±2℃，MAP、SAGM添加液保存35天，AS系列添加液保存期為42天.懸浮紅細(xì)胞（redbloodcellsinadditivesolution）紅細(xì)胞保養(yǎng)液MAP（甘露醇-腺嘌呤-磷酸鹽）SAGM（生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇）CPDA-1AS-1、AS-3、AS-5生理鹽水等懸浮紅細(xì)胞的制備方法懸浮紅細(xì)胞的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察無色澤異常、溶血、凝塊、氣泡等情況；血袋完好，并保留注滿全血經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少35cm容量標(biāo)示量（ml）±10%血細(xì)胞比容0.50~0.65血紅蛋白含量來源于200ml全血：含量≥20g來源于300ml全血：含量≥30g來源于400ml全血：含量≥40g儲存期末溶血率﹤紅細(xì)胞總量的0.8%無菌試驗無細(xì)菌生長定義：使用白細(xì)胞濾器去除懸浮紅細(xì)胞中幾乎所有白細(xì)胞，并使殘留在紅細(xì)胞中白細(xì)胞數(shù)量低于一定數(shù)值的紅細(xì)胞成分血。對采集的全血通過白細(xì)胞濾器進(jìn)行過濾，后再按懸浮紅細(xì)胞制備方法制備。四、去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞

白細(xì)胞濾器去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)無色澤異常、溶血、凝塊、氣泡等情況；血袋完好，并保留注滿全血經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少35cm容量標(biāo)示量（ml）±10%血紅蛋白含量來源于200ml全血：含量≥18g來源于300ml全血：含量≥27g來源于400ml全血：含量≥36g血細(xì)胞比容0.45~0.60白細(xì)胞殘留量來源于200ml全血：殘余白細(xì)胞≤2.5×106個來源于300ml全血：殘余白細(xì)胞≤3.8×106個來源于400ml全血：殘余白細(xì)胞≤5.0×106個儲存期末溶血率﹤紅細(xì)胞總量的0.8%無菌試驗無細(xì)菌生長定義：采用特定的方法將保存期內(nèi)的全血、懸浮紅細(xì)胞用大量等滲溶液洗滌，去除幾乎所有血漿成分和部分非紅細(xì)胞成分，并將紅細(xì)胞懸浮在氯化鈉注射液或紅細(xì)胞添加液中所制成的紅細(xì)胞成分血。五、洗滌紅細(xì)胞（washedredbloodcells）制備方法：血漿分離方法同懸浮紅細(xì)胞；將多聯(lián)袋內(nèi)鹽水注入紅細(xì)胞袋內(nèi)，混勻后將管路夾?。?℃低溫離心機(jī)離心8分鐘，棄上清和白膜層；重復(fù)操作三次，加入氯化鈉注射液制成洗滌紅細(xì)胞。制備洗滌紅細(xì)胞時的血漿清除率應(yīng)≥98%，白細(xì)胞清除率應(yīng)≥80%,紅細(xì)胞回收率應(yīng)≥70%。洗滌紅細(xì)胞（washedredbloodcells）洗滌紅細(xì)胞的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察無色澤異常、溶血、凝塊、氣泡等情況；血袋完好，并保留注滿洗滌紅細(xì)胞或全血經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少20cm容量200ml全血或懸浮紅細(xì)胞制備的：125ml±12.5ml300ml全血或懸浮紅細(xì)胞制備的：188ml±18.8ml400ml全血或懸浮紅細(xì)胞制備的：250ml±25ml血紅蛋白含量來源于200ml全血：含量≥18g來源于300ml全血：含量≥27g來源于400ml全血：含量≥36g上清蛋白質(zhì)含量來源于200ml全血：含量＜0.5g來源于300ml全血：含量＜0.75g來源于400ml全血：含量＜1.0g儲存期末溶血率﹤紅細(xì)胞總量的0.8%無菌試驗無細(xì)菌生長保存：溫度為2~6℃，最好6小時內(nèi)輸注，一般不超過24小時。洗滌紅細(xì)胞（washedredbloodcells）定義：

采用特定的方法將自采集日期6天內(nèi)的全血或懸浮紅細(xì)胞中的紅細(xì)胞分離出，并將一定濃度和容量的甘油與其混合后，使用速凍設(shè)備進(jìn)行速凍或直接置于-65℃以下的條件下保存的紅細(xì)胞成分血。冰凍紅細(xì)胞解凍后清除幾乎所有的甘油，懸浮于氯化鈉注射液中，稱為冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞。六、冰凍紅細(xì)胞與冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞最大優(yōu)點：可以長期保存。臨床用途：多用于保存稀有血型。方法：高濃度甘油慢凍法低濃度甘油超速冷凍法1.甘油化前的血液制劑準(zhǔn)備ACD—2天，CPDA-1—6天2.甘油化：高濃度甘油慢凍法：終濃度40%，保存于-65℃及以下低溫冰箱凍存。中濃度20%，保存于-120℃以下。低濃度14%，保存于-150℃。操作完畢室溫放置30min。3.解凍：37～40℃水浴，不斷搖動，時間4～6min。4.洗滌脫甘油：梯度洗滌。制備方法：解凍去甘油紅細(xì)胞的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察無色澤異常、溶血、凝塊、氣泡等情況；血袋完好，并保留注滿解凍去甘油紅細(xì)胞或全血經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少20cm容量來源于200ml全血：200ml±20ml來源于300ml全血：300ml±30ml來源于400ml全血：400ml±40ml血紅蛋白含量來源于200ml全血：含量≥16g來源于300ml全血：含量≥24g來源于400ml全血：含量≥32g游離血紅蛋白含量≤1g/L白細(xì)胞殘留量來源于200ml全血：含量＜2×107個來源于300ml全血：含量＜3×107個來源于400ml全血：含量＜4×107個甘油殘留量≤10g/L無菌試驗無細(xì)菌生長保存：含有20%甘油的冰凍紅細(xì)胞在-120℃以下保存，含有40%甘油的冰凍紅細(xì)胞在-65℃以下保存，保存期自采血之日起10年，解凍洗滌后4℃±2℃保存，24小時內(nèi)輸注。冰凍紅細(xì)胞（frozenredbloodcells）定義：是一種具有較多的網(wǎng)織紅細(xì)胞、酶活性相對較高、平均細(xì)胞年齡較小的紅細(xì)胞制劑制備方法：1.離心、特制擠壓板法2.離心分離鉗法3.血細(xì)胞分離機(jī)法保存：同懸浮紅細(xì)胞，但半衰期可達(dá)45天。七、年輕紅細(xì)胞第二節(jié)血小板的制備和保存類型濃縮血小板混合濃縮血小板單采血小板定義：采集后置于室溫保存和運(yùn)輸?shù)娜诓杉?h內(nèi)或采集后置于20~24℃保存和運(yùn)輸?shù)娜?4小時內(nèi)，在室溫條件下將血小板分離出，并懸浮于一定量血漿內(nèi)的成分血。制備方法：富血小板血漿（PRP）法、白膜法（buffercoat）法、機(jī)分法一、濃縮血小板（concentratedplatelets）PRP法

白膜法濃縮血小板濃縮血小板的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)呈黃色云霧狀液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿血小板經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少15cm容量來源于200ml全血：容量為25ml~38ml來源于300ml全血：容量為38ml~57ml來源于400ml全血：容量為50ml~76ml儲存期末pH6.4~7.4血小板含量來源于200ml全血：含量≥2.0×1010個來源于300ml全血：含量≥3.0×1010個來源于400ml全血：含量≥4.0×1010個紅細(xì)胞混入量來源于200ml全血：混入量≤1.0×109個來源于300ml全血：混入量≤1.5×109個來源于400ml全血：混入量≤2.0×109個無菌試驗無細(xì)菌生長保存：保存：溫度為22℃±2℃，振蕩頻率60次/分鐘。濃縮血小板容器為普通血袋的濃縮血小板保存期為24小時，濃縮血小板容器為專用血袋的濃縮血小板保存期為5天。定義：是指采用待定的方法將2袋或2袋以上的濃縮血小板合并在同一血袋內(nèi)的成分血?；旌?～7袋濃縮血小板，PLT≥2.5×1011個保存：溫度22℃±2℃，并持續(xù)輕緩振搖。匯集后保存期為6h且不超過原保存期。二、混合濃縮血小板混合濃縮血小板的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)呈黃色云霧狀液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿血小板經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少15cm容量標(biāo)示量（ml）±10%儲存期末pH6.4～7.4血小板含量≥2.0×1010個×混合單位數(shù)紅細(xì)胞混入量≤1.0×109個×混合單位數(shù)無菌試驗無細(xì)菌生長定義：使用血細(xì)胞分離機(jī)在全封閉的條件下自動將符合要求的獻(xiàn)血者血液中的血小板分離并懸浮于一定量血漿內(nèi)的單采成分血。從單個獻(xiàn)血者體內(nèi)采集1～2個成人劑量的血小板(≥2.50×1011,且白細(xì)胞殘留量低）。三、單采血小板（apheresisplatelets）制備要求：獻(xiàn)血者選擇應(yīng)符合《GB18467獻(xiàn)血者健康檢查要求》獻(xiàn)血前1周不得服用阿司匹林、雙嘧達(dá)莫等藥物每次可獻(xiàn)1~2個治療單位，全年采集總量不超過10L獻(xiàn)血間隔不少于2周，不大于24次/年單采血小板（apheresisplatelets）血細(xì)胞分離機(jī)分兩種：（1）連續(xù)性單采：一根為采血管路，另一根為血液回輸管路（2）采非連續(xù)性單采：只需要一根管道與獻(xiàn)血者相連，既用于血液采集，又用于血液回輸。保存：同濃縮血小板。單采血小板質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)呈黃色云霧狀液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿血小板經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少15cm容量儲存期為24h的單采血小板容量：125ml～200ml儲存期為5d的單采血小板容量：250ml～300ml儲存期末pH6.4～7.4血小板含量≥2.5×1011個白細(xì)胞殘留量≤5.0×106個/袋紅細(xì)胞混入量≤8.0×109個/袋無菌試驗無細(xì)菌生長單采血小板與濃縮采血小板比較單采血小板濃縮血小板單袋血小板數(shù)量≥2.5×1011個≥2.0×1010個混入紅細(xì)胞數(shù)較少較多混入白細(xì)胞數(shù)較少較多保存時間1d~5d多為1d交叉配血不需要需要血小板配型可能不可能所需供者數(shù)單個多個無效輸注出現(xiàn)遲出現(xiàn)早止血效果好差去白細(xì)胞單采血小板質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)呈黃色云霧狀液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿血小板經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少15cm容量儲存期為24h的單采血小板容量：125ml～200ml儲存期為5d的單采血小板容量：250ml～300ml儲存期末pH6.4～7.4血小板含量≥2.5×1011個白細(xì)胞殘留量≤5.0×106個/袋紅細(xì)胞混入量≤8.0×109個/袋無菌試驗無細(xì)菌生長第三節(jié)血漿及冷沉淀凝血因子的制備一、血漿新鮮冰凍血漿病毒滅活新鮮冰凍血漿單采新鮮冰凍血漿冰凍血漿（普通）病毒滅活冰凍血漿定義：在全血采集后6小時內(nèi)，在全封閉的條件下，將分離出的新鮮液體血漿經(jīng)速凍后并保存于-20℃以下冰箱即為新鮮冰凍血漿?？捎枚?lián)袋、三聯(lián)袋和四聯(lián)袋來制備。制備方法：全血分離方法同濃縮紅細(xì)胞；將分出的血漿迅速凍結(jié)即成。保存：溫度為-20℃以下，保存期為1年，解凍后2~6℃保存，24小時內(nèi)輸注。（一）新鮮冰凍血漿（freshfrozenplasma）新鮮冰凍血漿的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察融化后的新鮮冰凍血漿，應(yīng)呈黃色澄清液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿新鮮冰凍血漿經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少10cm容量標(biāo)示量（ml）±10%血漿蛋白含量≥50g/LⅧ因子含量≥0.7IU/mL無菌試驗無細(xì)菌生長定義：指采集后儲存于冷藏環(huán)境中的全血按新鮮冰凍血漿的要求分離出血漿，在速凍前采用亞甲藍(lán)病毒滅活技術(shù)進(jìn)行病毒滅活并速凍呈固態(tài)的成分血。制備方法：

1.連接病毒滅活耗材2.流經(jīng)亞甲藍(lán)進(jìn)入光照袋3.熱合分離棄去原血漿袋4.光照30min后濾除亞甲藍(lán)保存：同新鮮冰凍血漿。（二）病毒滅活新鮮冰凍血漿病毒滅活新鮮冰凍血漿質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)呈黃色或淡綠色澄清液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿病毒滅活冰凍血漿經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少10cm容量標(biāo)示量（ml）±10%血漿蛋白含量≥50g/LⅧ因子含量≥0.5IU/mL亞甲藍(lán)殘留量≤0.30umol/L無菌試驗無細(xì)菌生長定義：使用血細(xì)胞分離機(jī)在全封閉的條件下自動將符合要求的獻(xiàn)血者血液中的血漿分離出并在6h內(nèi)速凍呈固態(tài)的成分血。制備方法：按血細(xì)胞分離機(jī)操作程序執(zhí)行保存：同新鮮冰凍血漿（三）單采新鮮冰凍血漿定義：采用特定的方法在全血的有效期內(nèi)將血漿分離出并冰凍呈固態(tài)的成分血，或從新鮮冰凍血漿分離出冷沉淀凝血因子后將剩余部分冰凍呈固態(tài)的成分血。（四）普通冰凍血漿（frozenplasma）制備途徑：1.新鮮冰凍血漿保存期超過1年后可改為普通冰凍血漿；2.制備冷沉淀后的血漿冰凍后為普通冰凍血漿；3.全血6h以上但有效期內(nèi)血漿分離冰凍為普通冰凍血漿。保存：溫度為-18℃以下，保存期為4年。

解凍后2~6℃保存，24小時內(nèi)輸注。普通冰凍血漿（frozenplasma）普通冰凍血漿的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察融化后的新鮮冰凍血漿，應(yīng)呈黃色澄清液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿新鮮冰凍血漿經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少10cm容量標(biāo)示量（ml）±10%血漿蛋白含量≥50g/L無菌試驗無細(xì)菌生長定義：

采用亞甲藍(lán)病毒滅活技術(shù)，對在全血的有效期內(nèi)分離出的血漿，或從新鮮冰凍血漿中分離出冷沉淀凝血因子后剩余的血漿，進(jìn)行病毒滅活并在冰凍呈固態(tài)的成分血。制備方法：同病毒滅活新鮮冰凍血漿。保存：同冰凍血漿。（五）病毒滅活冰凍血漿病毒滅活冰凍血漿的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)呈黃色或淡綠色澄清液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿病毒滅活冰凍血漿經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少10cm容量標(biāo)示量（ml）±10%血漿蛋白含量≥50g/L亞甲藍(lán)殘留量≤0.30umol/L無菌試驗無細(xì)菌生長二、冷沉淀凝血因子類型：冷沉淀的制備與保存冷沉淀的質(zhì)量控制要求制備冷沉淀的注意事項定義：新鮮血漿快速冰凍并置-80℃凍存2周后在1～5℃條件下不溶解的白色沉淀物，其被加熱至37℃時呈溶解的液態(tài)。主要含凝血因子Ⅷ、Fg等制備方法：pool方法水溶融化離心法虹吸法冷沉淀凝血因子：保存：溫度為-18℃以下，保存期為1年。解凍后2~6℃保存，24小時內(nèi)輸注。

37℃融化后，盡快使用或室溫保存4小時內(nèi)輸注，不得再次冰凍或冷藏。冷沉淀凝血因子（cryoprecipitatedantihemophilicfactor）冷沉淀凝血因子的質(zhì)量控制項目和要求質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察融化后的冷沉淀凝血因子，應(yīng)呈黃色澄清液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿血漿經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少10cm容量標(biāo)示量（ml）±10%纖維蛋白原含量來源于200ml全血：≥75g來源于300ml全血：≥113g來源于400ml全血：≥150gⅧ因子含量來源于200ml全血：≥40IU來源于300ml全血：≥60IU來源于400ml全血：≥80IU無菌試驗無細(xì)菌生長第四節(jié)粒細(xì)胞的制備粒細(xì)胞制劑主要含中性粒細(xì)胞。制備方法：粒細(xì)胞手工制備粒細(xì)胞單采制備分類定義：用制備成分血用的全血經(jīng)離心將富含血小板的血漿收集為白細(xì)胞濃縮液。缺點：由于從400ml全血分離制備的白細(xì)胞濃縮液僅含粒細(xì)胞1.0*10^9，為達(dá)到治療劑量，需多人份的混合，造成病毒感染機(jī)會增多，白細(xì)胞抗原刺激產(chǎn)生的同種免疫反應(yīng)增多，另外由于含淋巴細(xì)胞較多，對免疫低下的患者可能導(dǎo)致輸血相關(guān)性移植物抗宿主病。由于以上弊病，血站已多不制備。一、手工制備粒細(xì)胞定義：

使用血液單采機(jī)在全封閉的條件下自動將符合要求的獻(xiàn)血者血液中的粒細(xì)胞分離出并懸浮于一定量血漿內(nèi)的單采成分血。用血液單采機(jī)可以1次從1位獻(xiàn)血者單采獲得足夠輸注量的粒細(xì)胞。

二、單采粒細(xì)胞(一)制備方法利用血液單采機(jī)并根據(jù)設(shè)定的粒細(xì)胞單采程序，采集獻(xiàn)血者血液中的粒細(xì)胞。因一次采集量為(1.5～3.0)x1010個粒細(xì)胞，所以在采集前需讓獻(xiàn)血者口服一定劑量的粒細(xì)胞動員劑(皮質(zhì)類固醇類藥物或使用粒細(xì)胞集落刺激因子)，使骨髓和邊緣池的粒細(xì)胞釋放進(jìn)人循環(huán)池，從而提高外周血中粒細(xì)胞的含量。

二、單采粒細(xì)胞二、單采粒細(xì)胞質(zhì)量控制項目要求外觀肉眼觀察應(yīng)無色澤異常，無溶血、凝塊、氣泡及重度乳糜等情況；血袋完好，并保留注滿單采粒細(xì)胞經(jīng)熱合的導(dǎo)管至少20cm容量150～500ml中性粒細(xì)胞含量≥1.0×1010個/袋紅細(xì)胞混入量血細(xì)胞比容≤0.15無菌試驗無細(xì)菌生長

(三)保存溫度：20～24℃保存期：24小時，應(yīng)輻照后使用，且宜盡早使用。二、單采粒細(xì)胞第五節(jié)輻照血液

定義：是指使用照射強(qiáng)度為25～30Gy的γ射線對血液制劑進(jìn)行照射，使血液制劑中的T淋巴細(xì)胞失去活性所制成的成分血。

冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞和血漿成分不需輻照處理，紅細(xì)胞成分應(yīng)在全血采集后14天內(nèi)完成輻照，經(jīng)輻照后的血液制劑，其質(zhì)量控制要求與原血液制劑的要求相同。輻照血液

受血者有先天性和繼發(fā)性細(xì)胞免疫功能低下時，輸人含有免疫活性的淋巴細(xì)胞血液或血液成分，易引起輸血相關(guān)性移植物抗宿主病(TA-GVHD)。該病無特效治療，死亡率高，故應(yīng)特別重視預(yù)防。輸注γ射線輻照血液或血液成分是預(yù)防TA-GVHD的有效方法！輻照血液(一)制備方法1.輻照劑量：既能滅活淋巴細(xì)胞又能維持其他成分血功能與活力且引起損傷最小為原則，并以被福照物質(zhì)的吸收量來計算。吸收量以戈瑞(Gy)為單位，其大小取決于照射量。2.血液輻照質(zhì)量保證(1)照射劑量:中心劑量定位25Gy,其他部位不低于15Gy。(2)劑量分布:核對中心劑量率，并測定照射物表面的相對劑量分布。(3)放射性物質(zhì)衰變的校正。一、輻照血液的制備(二)γ射線輻照血對血細(xì)胞的影響

對血小板影響較小，對紅細(xì)胞有一定影響，因此γ射線輻照血不宜長時間貯存。一、輻照血液的制備(三)保存1.輻照全血或輻照紅細(xì)胞:保存溫度為2~6℃;輻照應(yīng)在全血采集后14天內(nèi)完成，輻照后保存期為14天。2.輻照血小板:輻照對血小板功能影響較小，可在其保存期內(nèi)任何時間輻照。保存溫度、保存期與原制劑相同，輻照后宜盡快使用。3.輻照粒細(xì)胞:粒細(xì)胞在制備后應(yīng)立即輻照并輸注，不得保存。一、輻照血液的制備二、輻照血液的質(zhì)量控制1.血液輻照儀的旋轉(zhuǎn)盤的旋轉(zhuǎn)情況2.輻照儀計時器的校正3.輻照儀放射劑量分布4.輻照儀放射性漏出的評估5.可視性放射性敏感性標(biāo)簽6.輻照后紅細(xì)胞保存時間1.免疫功能嚴(yán)重?fù)p害者2.免疫功能低下者：老年人(年齡>50歲)、低體重的新生兒、早產(chǎn)兒等。3.供血者與受血者有親緣關(guān)系者(一般指I、II級親屬血液)。4.輸血量較大者以及6個月以下的嬰兒：輸血、新生兒溶血病換血等患者。三、輻照血液的臨床應(yīng)用第六節(jié)造血干細(xì)胞的制備技術(shù)造血干細(xì)胞移植（HSCT）：指對患者進(jìn)行全身照射、化療、免疫抑制劑處理后，輸入從供者骨髓、外周血或臍帶血中分離出的造血干細(xì)胞，以使其重建造血及免疫功能。造血干細(xì)胞移植過程包括：①大劑量化療或化療+放療，以清除腫瘤細(xì)胞并使植入的造血細(xì)胞能夠植活；②輸入造血干細(xì)胞；③在造血干細(xì)胞植活前的支持治療；④免疫抑制劑預(yù)防移植物抗宿主病。不同來源造血干細(xì)胞的優(yōu)缺點干細(xì)胞來源優(yōu)點缺點備注骨髓含豐富的造血干細(xì)胞含淋巴細(xì)胞比外周血干細(xì)胞少，GVHD較少采集時需要麻醉較外周血干細(xì)胞中祖細(xì)胞少是傳統(tǒng)的造血干細(xì)胞來源，已有豐富經(jīng)驗外周血干細(xì)胞（PBSC)含大量干細(xì)胞含大量淋巴細(xì)胞，移植物抗腫瘤效果更強(qiáng)供者需要G-CSF進(jìn)行動員，花費時間較長更多用于自體HSCT多用于減低劑量預(yù)處理方案的異基因HSCT臍帶血干細(xì)胞采集對母親及嬰兒均無危險傳播感染性疾病的可能性較小容易獲得淋巴細(xì)胞免疫功能不成熟淋巴細(xì)胞免疫功能不成熟，需要更長時間才能產(chǎn)生移植物抗腫瘤效應(yīng)能為兒童提供足夠的干細(xì)胞，而對大體重兒童及成人來說細(xì)胞數(shù)量不足越來越多的作為兒童無血緣供者移植的首選一、外周血造血干細(xì)胞（PBSC）（一）外周血造血干細(xì)胞動員定義：指將造血干/組細(xì)胞從骨髓中動員到外周血的過程。動員方法包括應(yīng)用造血生長因子、骨髓抑制性化療，或骨髓抑制性化療＋造血生長因子。一、外周血造血干細(xì)胞（一）外周血造血干細(xì)胞動員1.腫瘤患者Auto-PBSC移植：一般采用化療+造血生長因子進(jìn)行動員，化療結(jié)束后第1天開始用G-CSF或GM-CSF，連續(xù)應(yīng)用直至PBSC采集結(jié)束。2.異體供者：只能單獨使用造血生長因子進(jìn)行動員，劑量為G-CSF10mg/kg/d，皮下注射，連續(xù)注射4～8天，一般于用藥第4或第5天采集PBSC（二）PBSC采集和處理采用全自動血細(xì)胞分離機(jī)連續(xù)分離外周血中單個核細(xì)胞。所采集的CD34+細(xì)胞數(shù)量應(yīng)達(dá)到2×106/kg受者體重。二、臍帶血干細(xì)胞臍血干細(xì)胞及免疫細(xì)胞功能不成熟，因而GVHD發(fā)生率及嚴(yán)重程度低于其它干細(xì)胞移植。臍帶血干細(xì)胞移植（cordbloodtransplantation,CBT）不要求HLA完全相合。臍帶血應(yīng)在胎盤娩出過程中或娩出后15分鐘內(nèi)進(jìn)行采集。第七節(jié)血液制劑的病毒滅活

輸血是臨床治療的重要手段，但還可能引起不良反應(yīng)和副作用，主要的不良反應(yīng)是輸血可以傳播疾病，造成受血者感染。從科學(xué)發(fā)展的趨勢分析，輸血不可能達(dá)到“零危險”，