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臨床常用免疫學(xué)檢查講稿臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第1頁免疫學(xué)診療:用免疫學(xué)方法確定疾病相關(guān)因子、監(jiān)測疾病過程、判斷療效及預(yù)后,包括對疾病相關(guān)因子診療和輔助診療,以及檢測機體免疫功效狀態(tài)。
臨床常見免疫學(xué)檢驗:血清免疫球蛋白檢測,血清補體檢測,細(xì)胞免疫檢測,肝炎病毒標(biāo)志物檢測,感染免疫檢測,腫瘤標(biāo)志物檢測,本身抗體檢測及其它免疫檢測。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第2頁一.體液免疫功效檢測
檢測血清免疫球蛋白及其類別(尤其是IgG、IgA和IgM)和水平,可為診療免疫缺點性疾病和免疫增殖性疾病提供主要參數(shù)。
檢測針對疫苗或感染因子特異性抗體及其水平,可較直接反應(yīng)機體特異性體液免疫功效狀態(tài)。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第3頁1.免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)含有抗體活性和抗體樣結(jié)構(gòu)球蛋白,由漿細(xì)胞產(chǎn)生,存在于血液、體液、外分泌液及個別細(xì)胞表面。分五類:IGG、IGM、IGA、IGD、IGE?!?〕.IgG、IgM、IgA檢測:IgG是血清中主要抗體成份,占總Ig75%是唯一能經(jīng)過胎盤Ig,經(jīng)過自然被動免疫取得。IgM是Ig中分子量最大者,亦是最早出現(xiàn)抗體為五聚體,在機體早期免疫防御中起主要作用。IgA分血清型與分泌型,尤以分泌型IgA在局部抗感染、抗過敏起主要免疫屏障。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第4頁檢測方法:免疫擴(kuò)散法及免疫比濁法參考值:各個年紀(jì)階段有差異臨床意義:(1).Ig均增高常見于慢性肝病、淋巴瘤、SLE、RA、MM等(2).單一Ig增高:見于免疫增殖性疾病如MM(IGG),巨球蛋白血癥(IGM)(3).Ig降低:重復(fù)呼吸道感染者常見IGA單一降低2.IgG亞類測定分四類:IgG1IgG2IgG3IgG4與免疫缺點病和變態(tài)反應(yīng)性疾病相關(guān)3.IgE測定血清含量低但與I型變態(tài)反應(yīng)疾病相關(guān)IgEELISA法0.1~0.9mg/L?
IgE增高:見于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、RA和各種過敏性疾病。?
IgE降低:見于丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長久用免疫抑制劑者和共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第5頁測定方法:ELISA法參考值:0.1~0.9mg/L意義:?
IgE增高:見于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、RA和各種過敏性疾病。?
IgE降低:見于丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長久用免疫抑制劑者和共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第6頁二.血清M蛋白(monoclonalimmunoglobulins)測定測定方法:蛋白電泳法、免疫比濁法和免疫電泳法參考值:陰性意義:檢測到M蛋白,提醒單克隆免疫球蛋白增殖性疾病。見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病和半分子病等臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第7頁三.血清補體檢測?
基礎(chǔ)概念補體(complement):是一組含有酶原活性糖蛋白,由傳統(tǒng)路徑9種成份C1-C9、旁路路徑3種成份及其衍生物組成,參加滅活病原體免疫反應(yīng),也參加破壞本身組織和本身細(xì)胞而造成免疫損傷。1.補體CH50
方法:試管法參考值:50000-100000u/l
意義:反應(yīng)補體傳統(tǒng)路徑活化活性程度。1、CH50
增高見于急性炎癥、組織損傷和一些惡性腫瘤;2、CH50降低見于腎小球腎炎、本身免疫病、感染性心內(nèi)膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第8頁2.補體C3方法:單向免疫擴(kuò)散法(1.14±0.27g/L)
免疫比濁法(0.85-1.70g/L)意義:1、增高見于急性炎癥、傳染病早期、腫瘤和排異反應(yīng);2、減低見于70%以上急性腎小球腎炎、、85%以上鏈球菌感染后腎炎、78%狼瘡性腎炎患者。還見于活動性SLE和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第9頁2.補體C4方法:單向免疫擴(kuò)散法(0.553-0.109g/L)意義:1、升高見于急性風(fēng)濕熱、結(jié)節(jié)性動脈周圍炎、皮肌炎、關(guān)節(jié)炎、和組織損傷等;2、降低見于本身免疫性肝炎、狼瘡性腎炎、SLE、1型糖尿病、胰腺癌、多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、
IgA腎病和遺傳性IgA缺乏癥。3.補體C1q方法:單向免疫擴(kuò)散法(0.197-0.04g/L)意義:1、增加見于骨髓炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、過敏性紫癜等;2、降低見于SLE和混合性結(jié)締組織病等。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第10頁4.BF方法:單向免疫擴(kuò)散法(0.1-0.4g/L)意義:增高見于一些本身免疫病、腎病綜合征、慢性腎炎、惡性腫瘤;2、減低見于肝病、急性腎小球腎炎、本身免疫性溶血性貧血。第二節(jié)細(xì)胞免疫檢測
主要包含有T細(xì)胞、B細(xì)胞、K細(xì)胞、NK細(xì)胞及其亞群;臨床常對淋巴細(xì)胞數(shù)量,表面標(biāo)志物及功效進(jìn)行檢測,以了解機體細(xì)胞免疫功效.臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第11頁?
T細(xì)胞免疫檢測1.
T細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(1).E-玫瑰花形成試驗:用于檢測T細(xì)胞數(shù)量。其臨床意義:①降低;見于免疫缺點性疾病,如惡性腫瘤、免疫性疾病、大面積燒傷、多發(fā)性神經(jīng)炎等。②升高:見于甲亢、甲狀腺炎、重癥肌無力、慢性活動性肝炎、SLE活動期和器官移植排斥反應(yīng)等。(2)T細(xì)胞分化抗原測定①CD3:參考值(IFA法)61%-85%意義:降低見于本身免疫性疾病,如SLE、RA等②CD4:參考值(IFA法)28%-58%意義:降低見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺點病、愛滋病、應(yīng)用免疫抑制劑者臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第12頁③CD8+:參考值(IFA法)19%-48%意義:減低見于本身免疫性疾病或變態(tài)反應(yīng)性疾?、蹸D4+/CD8+:參考值(IFA法)1.66±0.33意義:①比值增高見于惡性腫瘤、本身免疫性疾病、病毒感染、變態(tài)反應(yīng)等;②比值降低見于愛滋??;③監(jiān)測器官移植排斥反應(yīng)時比值增高提醒可能發(fā)生排斥反應(yīng)。?
注:當(dāng)CD1-8都增高可能為T細(xì)胞型急性淋巴細(xì)胞白血病
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第13頁?
B細(xì)胞免疫檢測1.B細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測:B細(xì)胞表面有表面抗原(CD19、CD20、CD21、CD22、CD40等)與表面受體(BCR、CKR、CR、FC等)BCR又稱B細(xì)胞表面免疫球蛋白(SmIg),是B細(xì)胞特征性表面標(biāo)志,其類別隨B細(xì)胞發(fā)育階段不一樣而改變。(1).B細(xì)胞表面免疫球蛋白(SmIg)測定:主要用于檢測外周血B細(xì)胞百分率。臨床意義:①SmIg減低見于免疫缺點性疾??;②SmIg升高見于慢性淋巴細(xì)胞性白血病、多毛細(xì)胞白血病和原發(fā)性巨球蛋白血癥。原發(fā)性巨球蛋白血癥患者SmIgM陽性細(xì)胞可占78%。臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第14頁(2).B細(xì)胞分化抗原測定:臨床意義:①升高見于急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病和Burkitt淋巴瘤等;②降低見于無丙種球蛋白血癥、使用化療或免疫抑制劑后。?
淋巴細(xì)胞功效檢測(1).T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗:反應(yīng)T細(xì)胞免疫功效。臨床意義同T細(xì)胞花結(jié)形成試驗。但Down綜合征時顯著增高。
(2).混合淋巴細(xì)胞反應(yīng):反應(yīng)機體整體細(xì)胞免疫功效,還可用于HLA細(xì)胞學(xué)分型臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第15頁?
自然殺傷細(xì)胞免疫檢測
自然殺傷細(xì)胞活性測定:可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染指標(biāo)之一。在血液系統(tǒng)腫瘤、實體瘤、免疫缺點病,愛滋病和一些病毒感染者活性降低;宿主抗移植物反應(yīng)者活性升高。?中性粒細(xì)胞吞噬、殺菌功效檢測反應(yīng)機體抗感染免疫能力臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第16頁第四節(jié)感染免疫檢測病原體及其代謝產(chǎn)物進(jìn)入人體后刺激機體免疫系統(tǒng),產(chǎn)生對應(yīng)免疫產(chǎn)物,免疫產(chǎn)物進(jìn)入血液。臨床多利用凝集試驗、補體結(jié)合試驗、沉淀試驗、免疫熒光發(fā)(IFA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、放射免疫法(RIA)等伎倆檢測血清中免疫產(chǎn)物或病原體抗原成份,幫助一些感染性疾病診療或早期診療。多年來伴隨分子生物學(xué)發(fā)展,能夠利用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)或DNA探針分子雜交技術(shù)對病原體核酸進(jìn)行檢測,幫助確定病原學(xué)診療。一.細(xì)菌感染免疫檢測臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第17頁1.抗鏈球菌溶血素“
O”測定?
病人感染A群溶血性鏈球菌一周后ASO開始升高,4-6周達(dá)高峰,可連續(xù)幾個月或幾年,見于活動性風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、急性腎小球腎炎、急性上呼吸道感染、皮膚軟組織感染。?
抗體滴度逐步下降提醒疾病緩解。2.肥達(dá)氏(Widal)反應(yīng):幫助傷寒與副傷寒診療。參考值:O凝集價<1:80
傷寒H凝集價<1:160副傷寒A、B、C凝集價<1:80意義:⑴O升高,H正常⑵O正常,H升高⑶O升高,H升高⑷O升高,A、B、C均升高臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第18頁3.結(jié)核桿菌抗體:輔助結(jié)核病診療。4.結(jié)核桿菌DNA檢測:能夠確定結(jié)核病診療,但應(yīng)預(yù)防假陽性。5.C反應(yīng)蛋白測定急性時相反應(yīng)蛋白,含有激活補體,促進(jìn)吞噬和免疫調(diào)理作用臨床意義:1).組織損傷2).各種細(xì)菌性感染3).風(fēng)濕熱4).惡性腫瘤,器官移植后排斥反應(yīng),妊娠等
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第19頁二.病毒感染免疫檢測1.漢坦病毒抗體IgM:幫助腎綜合征出血熱早期診療。2.乙腦病毒抗體IgM:幫助乙腦早期診療。3.輪狀病毒抗體IgM、IgG;輪狀病毒RNA:陽性提醒現(xiàn)癥感染。4.柯薩奇病毒抗體IgM、IgGIgM陽性示現(xiàn)癥感染。當(dāng)IgM抗體陰性IgG陽性提醒既往感染5.EB病毒抗原、抗體測定:抗-VCAIgM陽性常見于傳染性單核細(xì)胞增多癥;抗-VCAIgA陽性主要見于鼻咽癌
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第20頁三.TORCH感染免疫檢測1.弓形蟲抗體IgM和IgGIgM陽性提醒現(xiàn)癥感染,IgG陽性提醒既往感染。2.巨細(xì)胞病毒抗體IgM、IgG:IgM陽性示現(xiàn)癥感染或病毒活動期。IgG既往或潛伏感染。巨細(xì)胞病毒DNA:陽性提醒現(xiàn)癥感染。3.風(fēng)疹病毒抗體測定4.HSV抗體測定四.寄生蟲感染免疫檢測1.血吸蟲感染:1).環(huán)卵沉淀試驗2).血吸蟲抗體IgM和IgE:陽性提醒現(xiàn)癥感染,早期診療指標(biāo)。IgG陽性提醒既往感染。2.囊蟲抗體測定:囊蟲特異性IgG陽性提醒囊蟲病
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第21頁?
在血清學(xué)試驗中,若能以某種病原體特異性抗原檢測到針對某種病原體特異性IgM抗體,或以特異性抗體尤其是單克隆抗體檢測到病原體抗原成份,或以多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)或DNA探針分子雜交技術(shù)檢測到病原體核酸,則含有早期診療意義,甚至確診意義。但要注意假陽性或假陰性問題,尤其是在分析PCR結(jié)果時更應(yīng)注意,因為PCR含有高度特異性和高度敏感性,稍有不慎即被污染造成假陽性。第五節(jié).腫瘤標(biāo)志物檢驗?zāi)[瘤標(biāo)志物(TM):指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中,由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者由機體對腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生一類物質(zhì),主要用于腫瘤普查、輔助診療、觀察療效和判斷預(yù)后。
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第22頁常見腫瘤標(biāo)志物檢測及臨床意義:分三類1.蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物:包含甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原125(CA125)、癌抗原15-3(CA15-3)、組織多肽抗原(TPA)、前列腺特異抗原(PSA)鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(SCC)等。甲胎蛋白主要用于原發(fā)性肝癌輔助診療,另外生殖腺胚胎癌、胃癌和胰腺癌血中AFP也可增高。CEA顯著增高見于胰腺癌、結(jié)腸癌、肺癌和乳腺癌。婦科腫瘤尤其是卵巢癌CA125水平顯著升高。CA15-3主要用于乳腺癌輔助診療和療效觀察。PSA可用于前列腺癌輔助診療、療效觀察以及轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)判斷。SCC在上皮細(xì)胞源性惡性腫瘤中升高。
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第23頁2.糖脂類腫瘤標(biāo)志物:包含癌抗原-50(CA-50)、癌抗原72-4(CA72-4)、癌抗原242(CA242)、糖鏈抗原19-9(CA19-9)等。CA-50增高見于大個別惡性腫瘤,動態(tài)觀察其水平改變對癌腫療效、預(yù)后判斷、復(fù)發(fā)檢測頗有價值。CA72-4是卵巢腫瘤和胃腸道腫瘤標(biāo)志物。CA242是胰腺癌和結(jié)腸癌標(biāo)志物。CA19-9在胰腺癌、膽道腫瘤和胃腸道癌中水平顯著升高。3.酶類腫瘤標(biāo)志物:包含前列腺酸性磷酸酶(PAP)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、異常凝血酶原(APT)、α-L-巖藻糖苷酶(AFU)等。PAP對前列腺癌療效觀察、有沒有復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后判斷有主要意義。NSE是神經(jīng)母細(xì)胞瘤和小細(xì)胞肺癌標(biāo)志物。APT和AFU在肝細(xì)胞肝癌中水平顯著升高。
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第24頁第六節(jié)本身免疫檢測抗核抗體:?ANA陽性:血清滴度>1:40為陽性。最多見于未治療SLE,活動期SLE幾乎100%陽性。也可見于其它本身免疫性疾病??购丝贵w共有4種熒光核型:均質(zhì)型,見于SLE、SS、PSS、MCTD;邊緣型,見于SLE、SS;顆粒型,見于SLE、RA;核仁型,見于PSS、Crest征。?
抗脫氧核糖核酸測定:分為抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA)、抗單鏈DNA抗體(ss-DNA)、抗Z-DNA抗體??闺p鏈DNA抗體檢測有主要臨床意義,它見于活動期SLE,陽性率70%-90%。
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第25頁
組織和細(xì)胞抗體檢測:?抗線粒體抗體(AMA):正常人群陽性率低于10%。許多肝臟疾病可檢出AMA,原發(fā)性膽汁性肝硬化無癥狀患者為90.5%,有癥狀患者為92.5%;慢性活動性肝炎可達(dá)90%以上;但膽總管和肝外膽管阻塞為陰性。?抗甲狀腺球蛋白抗體(抗-TG):陽性見于90%-95%橋本甲狀腺炎,52%-58%甲亢和35%甲癌。另外,40歲以上健康婦女檢出率為18%。
臨床常用免疫學(xué)檢查講稿第26頁抗甲狀腺微粒體抗體(抗-TM):抗-TM陽性檢出率:橋本甲狀腺炎為50%-100%,甲減為88.9%,甲狀腺腫瘤為13.1%,單純性甲狀腺腫為8.6%,亞甲炎為17.2%-25%。?
抗乙酰膽堿受體抗體:對診療重癥肌無力有意義,敏感性和特異性高,大約90%患者陽性,其它眼肌障礙者全部陰性??勺鳛橹匕Y肌無力療效觀察指標(biāo)。?
抗平滑肌抗體:狼瘡性肝炎患者陽性率高達(dá)80%,急性肝炎患者陽性率70%,但在發(fā)病一周時出現(xiàn),3個月后消逝失。
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