2019年臨床醫(yī)學(xué)檢驗技師考試《微生物檢驗》輔導(dǎo)講義 培養(yǎng)基

培養(yǎng)基

?考點

▽培養(yǎng)基的組成成分

▽培養(yǎng)基的種類

▽分離培養(yǎng)基的選擇

【內(nèi)容講解】

培養(yǎng)基：

由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品。

用途：用于細菌的分離純化培養(yǎng)、傳代、菌種保存，還可用于研究細菌的生理、生化特性，是對病原

菌分離鑒定的重要環(huán)節(jié)和必不可少的手段。

一、培養(yǎng)基的組成成分

（一）營養(yǎng)物質(zhì)

（二）凝固物質(zhì)

（三）抑制劑和指示劑

（一）營養(yǎng)物質(zhì)

細菌需要的營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)含有

——水、氮源、碳源、無機鹽類和生長因子。

1.蛋白陳：

蛋白豚是制備培養(yǎng)基時最常用的成分之一，提供細菌生長繁殖所需要的氮源。

種類：植物豚和動物陳。營養(yǎng)互補。

優(yōu)點：蛋白陳易溶于水，遇酸不沉淀，不因受高溫而凝固，并為兩性電解質(zhì)，有緩沖作用。

缺點：吸水性強，應(yīng)注意干燥密封保存。

2.肉浸液：

是用新鮮牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。

肉浸液可為細菌提供氮源和碳源,但肉浸液中所含氮物質(zhì)過少而不能滿足細菌的需要，因此在制備培

養(yǎng)基時應(yīng)再加入現(xiàn)?2%的蛋白陳和0.5%氯化鈉。

3.牛肉膏：

由肉浸液經(jīng)長時間加熱濃縮而制成。

糖類在加熱過程中被破壞，所以其營養(yǎng)價值低于肉浸液，但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養(yǎng)基的基礎(chǔ)

成分。

4.糖類、醇類：

為細菌生長提供碳源和能源。

除葡萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分外，其他糖類和醇類主要用于鑒定細菌所做的發(fā)酵反

應(yīng)。

5.血液：

血液中既含有蛋白質(zhì)、多種氨基酸、糖類、無機鹽類等營養(yǎng)物質(zhì)，又能提供輔酶（如V因子）、血紅

素（X因子）等特殊生長因子。

用途：加入血液用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細菌。

根據(jù)細菌在血液培養(yǎng)基中的溶血現(xiàn)象而進行鑒定。

6.無機鹽類：

提供細菌生長的各種元素，如：鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。

7.雞蛋和動物血清：

是某些細菌生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，所以僅用于制備一些特殊的培養(yǎng)基。

8.生長因子：是細菌生長所必需的，但需要量很小。

（二）凝固物質(zhì)

最常用的凝固物質(zhì)為瓊脂,特殊情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。

瓊脂是從石花菜中提取出來的一種半乳糖膠，具有98℃以上融化，45℃以下凝固成凝膠狀態(tài)的特性。

（三）抑制劑和指示劑

目的：進行選擇、鑒定及判斷結(jié)果的需要。

1.抑制劑

目的在于抑制非檢出菌（非病原菌）的生長，以利于檢出菌（病原菌）的生長。

常用的有膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及一些染料和某些抗生素等。

2.指示劑：

目的是為了便于觀察細菌是否利用和分解培養(yǎng)基中的糖、醇類。

常用的有酚紅、中性紅、甲基紅、澳甲酚紫、漠麝香草酚藍、中國藍等酸堿指示劑。美藍常用作氧化

還原指示劑。

二、培養(yǎng)基種類

（-）按培養(yǎng)基的用途分類

（二）按培養(yǎng)基的性狀分類

（-）按培養(yǎng)基的用途分類

培養(yǎng)基

作用舉例

種類

基礎(chǔ)培廣泛用于細菌的增菌、檢驗，也是制備其他培養(yǎng)基

普通肉湯.悴通與脂『板

養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。

營養(yǎng)培供營養(yǎng)要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌

血瓊脂平板、巧克力血平板

養(yǎng)基生長

利用細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、

鑒別培

不同，在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑，伊紅-美藍瓊脂和動力-叫1跺-尿素

喬基

通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細菌。（MIU）培養(yǎng)基

選擇培在培養(yǎng)基中加入抑制劑，去抑制標(biāo)本中的雜菌生長，

培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂

養(yǎng)基有助于對所選擇的細菌種類的生長。

厭氧培

培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基皰肉培養(yǎng)基、琉基乙醇酸鈉培養(yǎng)基

養(yǎng)基

細菌L

型培養(yǎng)針對細胞壁缺損的細菌L型采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基

荃

（二）按培養(yǎng)基的性狀分類

培養(yǎng)基種類作用舉例

常用于增菌培養(yǎng)，也用于接種純菌觀察其生長表

液體培養(yǎng)基肉湯培養(yǎng)基

現(xiàn)

半固體培養(yǎng)液體培養(yǎng)基中加入0.3~0.5%瓊

多用于觀察細菌的動力，保存菌種

基脂

液體培養(yǎng)基中加入L5?2.0%瓊

固體培養(yǎng)基用于微生物的分離純化、鑒定及藥敏試驗

脂

三、分離培養(yǎng)基的選擇

（―）血平板

適于各類細菌的生長。

（二）巧克力血平板

其中含有V和X因子，適于接種疑有嗜血桿菌、奈瑟菌等的標(biāo)本。

（三）中國藍平板或伊紅美藍平板

可抑制革蘭陽性細菌，有選擇地促進革蘭陰性細菌牛長，是較好的弱選擇性培養(yǎng)基。

發(fā)酵型革蘭陰性桿菌因分解乳糖能力不同，在此平板上菌落顏色不同，便于鑒別菌種。

（四）麥康凱平板

具中等強度選擇性，抑菌力略強，有少數(shù)革蘭陰性菌不生長。

在麥康凱平板上能否牛.長，是非發(fā)酵菌鑒定的一個依據(jù)。

（五）SS瓊脂

有較強的抑菌力，用于志賀菌和沙門菌的分離。

因選擇性過強，使用時最好加一種弱選擇平板以配對互補。

（六）堿性瓊脂或TCBS瓊脂

用于從糞便中分離霍亂弧菌及其他弧菌。

（七）血液增菌培養(yǎng)基

用于從血液、骨髓中分離常見病原菌。

（八）營養(yǎng)肉湯

用于標(biāo)本及各類細菌的增菌。

【例題】液體培養(yǎng)基主要用于

A.鑒別菌種

B.觀察細菌的運動能力

C.觀察細菌的菌落形態(tài)

D.增菌

E.抑制雜菌生長

O[答疑編號502383080101]

【正確答案】D

【例題】下列培養(yǎng)基與其分類的組合中不正確的是

A.蛋白陳水一基礎(chǔ)培養(yǎng)基

B.克氏雙糖鐵瓊脂一鑒別培養(yǎng)基

C.膽鹽肉湯管一營養(yǎng)培養(yǎng)基

D.SS培養(yǎng)基一選擇培養(yǎng)基

E.高滲培養(yǎng)基一特殊培養(yǎng)基

1[答疑編號502383080102]

【正確答案】C

【例題】用于培養(yǎng)腸道致病菌的強選擇性培養(yǎng)基是

A.中國籃平板

B.SS平板

C.雙糖鐵培養(yǎng)基

D.乳糖發(fā)酵管

E.巧克力平板

?J[答疑編號502383080103]

【正確答案】B

【例題】有關(guān)血瓊脂平板，敘述錯誤的是

A.常用血液為羊血

B.血液滅菌后才能加入培養(yǎng)基中

C.血液含量一般為10%左右

D.瓊