【不同培養(yǎng)條件對(duì)煙草青枯病菌生長(zhǎng)的影響實(shí)證探析8100字（論文）】

不同培養(yǎng)條件對(duì)煙草青枯病菌生長(zhǎng)的影響實(shí)證分析摘要關(guān)于煙草青枯菌在生長(zhǎng)過(guò)程中所遭受的各種影響，總結(jié)了以下幾個(gè)因素：第一個(gè)是9種陽(yáng)離子；第二個(gè)是碳源；第三個(gè)是氮源；第四個(gè)是PH值。根據(jù)對(duì)比結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同的陽(yáng)離子對(duì)煙草青枯菌所造成的影響程也不同。如若濃度條件在1mmol/L以下，那么Ca2+、K+等離子對(duì)在很小程度上影響青枯菌生長(zhǎng)，而Cu2+、Al3+則在較大程度上影響青枯菌生長(zhǎng)；如若濃度條件在10mmol/L以下，那么Mn2+、Fe2+等離子對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)有著強(qiáng)烈的抑制作用；如若濃度條件在30mmol/L以下，那么Ca2+、K+等離子對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)有著明顯的抑制作用；如若濃度在Mg2+在60mmol/L以下，對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)環(huán)境有良好的輔助作用。除此之外，根據(jù)大量研究結(jié)果所得，當(dāng)PH值達(dá)到7時(shí)，是最適合青枯菌生長(zhǎng)的環(huán)境，蔗糖是最適合的碳源，蛋白胨是最適合的氮源，最不利于青枯菌生長(zhǎng)的是硝態(tài)氮氮源。關(guān)鍵詞：煙草青枯病菌；陽(yáng)離子；碳氮源；pH值目錄TOC\o"1-3"\h\u12519一、緒論 319581（一）研究背景 389（二）研究目的與意義 310651（三）文獻(xiàn)綜述 45445二、相關(guān)理論概述 414883三、材料與方法 6310821、供試菌株 6168042、不同陽(yáng)離子 7265503、不同pH值 716454、不同碳、氮源 740841、不同陽(yáng)離子 7145992、不同pH 9186353、不同碳、氮源 99399四、結(jié)論與討論 1010937參考文獻(xiàn) 13緒論研究背景煙草在生產(chǎn)過(guò)程中經(jīng)常受到各種各樣的病蟲(chóng)害入侵，其中最為嚴(yán)重的是青枯病的危害，青枯病的病原體是茄科雷爾氏菌。這種病害的物理范疇屬于明顯的維管束病害，煙草感染到這種病害會(huì)讓整顆植株都病菌迅速侵蝕，值得重視的是，會(huì)對(duì)植物的根莖造成嚴(yán)重的破壞，導(dǎo)致病株的根莖腐爛，莖部會(huì)大量呈明顯的黑色條斑。在1864年，印度尼西亞地區(qū)首次出現(xiàn)這類病菌，最后，迅速擴(kuò)散至產(chǎn)煙國(guó)家，對(duì)煙株造成了致命性的重要病害[3-4]，為每個(gè)國(guó)家的煙草產(chǎn)業(yè)帶來(lái)了極大的損失，成了煙草生長(zhǎng)的最大威脅。如今，對(duì)我國(guó)的各大產(chǎn)煙省都有所影響，隨著自然氣候、土壤環(huán)境的變化，該病蟲(chóng)害在我國(guó)呈蔓延趨勢(shì)。煙草青枯病的誘因是由以下三個(gè)主觀因素導(dǎo)致的：第一個(gè)就是煙草苗；第二個(gè)是病原菌；第三個(gè)是環(huán)境條件。青枯病的致病力對(duì)煙草作物的生命有著嚴(yán)重的威脅。關(guān)于病原菌的致病力，主要是寄宿到煙草本體以后，致使煙草植株被病菌侵蝕的現(xiàn)象。研究目的與意義煙草青枯病是由茄科勞爾氏菌導(dǎo)致的，對(duì)煙草的危害極大，屬于致命性病菌，在煙草領(lǐng)域的傳播范圍極廣。我國(guó)華東等地區(qū)農(nóng)作物青枯菌災(zāi)害，發(fā)病率頻繁，就目前而言，并沒(méi)有特效藥和有效措施可以控制青枯病對(duì)農(nóng)作物的危害，只能提高農(nóng)作物的營(yíng)養(yǎng)水平，從施肥技術(shù)上來(lái)保護(hù)植物的健康，為農(nóng)作物提供充足的養(yǎng)分，使農(nóng)作物達(dá)到最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)，提高自身的抗病菌性。植物的生長(zhǎng)離不開(kāi)礦物質(zhì)元素的補(bǔ)充，礦物質(zhì)是滿足農(nóng)作物生長(zhǎng)條件的基礎(chǔ)，與此同時(shí)，還需要大劑量的微量元素。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，礦物元素的適當(dāng)補(bǔ)充可以有效預(yù)防病原菌的形成，制約病原菌的傳播力。無(wú)論是溫室大棚或者是自然環(huán)境下的田間地頭，礦物質(zhì)以及微量元素，都會(huì)有效抵抗病害的成長(zhǎng)發(fā)展效率，這種機(jī)理?xiàng)l件目前尚未涉足研究。對(duì)于微量元素的營(yíng)養(yǎng)為農(nóng)作物青枯病所產(chǎn)生各種影響的探究，研究側(cè)重點(diǎn)別從以下兩個(gè)途徑入手：第一個(gè)是有機(jī)肥的搭配；第二個(gè)是相關(guān)的土壤改良。就目前而言，從一種或者多種微量元素對(duì)農(nóng)作物青枯菌所帶來(lái)影響方面的研究少之甚少，雖然也有文獻(xiàn)對(duì)微量元素與病原菌之間的關(guān)系有著相關(guān)的記載，但只是淺層次的理論概述，對(duì)維量元素與農(nóng)作物青枯病之間的關(guān)系深入剖析還不夠完整。而且，每個(gè)國(guó)家和地區(qū)的青枯病誘因、微量元素和土壤環(huán)境的差異，都會(huì)對(duì)青枯病的抑制有著不同的效果，此論文研究了9種陽(yáng)離子等礦物質(zhì)元素對(duì)農(nóng)作物青枯病所產(chǎn)生的影響，為農(nóng)作物的青枯病防治，而研發(fā)的新型農(nóng)作物保護(hù)產(chǎn)品，提供相相的參考價(jià)值，為有效防止該病菌的發(fā)展和預(yù)防工作做好鋪墊。文獻(xiàn)綜述鄭世燕［12］通過(guò)對(duì)室內(nèi)作物的研究，證明了煙草作物在原有的營(yíng)養(yǎng)條件下，增加cab等礦物質(zhì)元素可有效防控青枯菌對(duì)煙草作物的危害。吳衛(wèi)玲［13］在研究中認(rèn)為，硼酸鈉的濃度可有效抑制青枯菌的生成，兩者之間的濃度有密切的關(guān)系。若硼酸鈉濃度大于或等于0.5mmol/L時(shí)，對(duì)農(nóng)作物青枯病的生長(zhǎng)有嚴(yán)重的影響。譚軍［9］通過(guò)各種研究認(rèn)為，在添加了相關(guān)微量元素的土壤環(huán)境中，鋅元素和銅元素對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)有著抑制作用。若鈣濃度達(dá)到2mmol/L，對(duì)青枯菌生長(zhǎng)環(huán)境的抑制作用尤為明顯；將9種陽(yáng)離子和青枯菌生長(zhǎng)關(guān)系帶來(lái)的影響進(jìn)行研究，當(dāng)濃度條件為1mmol/L時(shí)，Ca2+等離子對(duì)農(nóng)作物青枯菌的抑制效果最佳，在很大程度上認(rèn)可了譚軍［9］的研究結(jié)果。譚軍［9］在研究中，將離子的濃度范圍控制的比較狹隘，范圍最高為1mmol/L，并不是可有效抑制青枯菌的生長(zhǎng)最佳濃度。那研究當(dāng)中，離子的濃度范圍控制的較為廣泛，能夠明顯的看出，離子的濃度越高，對(duì)青枯菌的抑制效果越明顯。若M2的濃度為90mmol/L的最高濃度時(shí)，才能夠有效抑制青枯菌的生長(zhǎng)；若在1至60mmol/L之間時(shí)，Mg2+則無(wú)法滿足對(duì)青枯菌的抑制條件。將以上研究結(jié)果做出總結(jié)，不同陽(yáng)離子所產(chǎn)生的不同影響，對(duì)青枯病的抑制程度也不同，這與相關(guān)煙草農(nóng)作物的施肥環(huán)境提供了參考依據(jù)。相關(guān)理論概述（一）青枯病的病原菌與危害關(guān)于農(nóng)作物青枯病的概念，主要是由青枯雷爾氏菌引起的細(xì)菌性土傳播病害，后來(lái)被泛指為青枯菌。截止目前，在世界上最常用的青枯菌類型分類法，包含以下三種：第一種是按照寄主面積大小來(lái)分類；第二種是按照生化結(jié)構(gòu)的生理特點(diǎn)來(lái)分類；第三種是根據(jù)生化變種結(jié)構(gòu)來(lái)分類，并根據(jù)菌種基因的演化類型作為架構(gòu)框架[1]。由于青枯菌的特殊基因原理，傳播速度快、破壞力強(qiáng)大，煙草作物一旦沾染上青枯菌便會(huì)立刻死亡。農(nóng)作物青枯病的發(fā)病率極高，發(fā)病時(shí)最為明顯的特點(diǎn)是：從植株的根莖部位到葉片部位均被病菌侵蝕成腐爛狀態(tài)，并且，無(wú)論是植株在幼苗期、成苗期或壯苗期都會(huì)受到病菌的侵害。當(dāng)農(nóng)作物遭到青枯菌破壞時(shí)，在病發(fā)初期，整個(gè)植株會(huì)有一半枯萎，將整個(gè)病株拔出土壤以外，便會(huì)發(fā)現(xiàn)根莖部位近一半腐爛變黑，沒(méi)有被病菌侵害的另一半呈正常狀態(tài)。有的病株在發(fā)病期間，先由支片葉脈之間產(chǎn)生變異，莖部會(huì)呈現(xiàn)條狀黑斑，病菌的侵蝕范圍越來(lái)越廣，黑色條斑逐漸擴(kuò)散至病株的頂端以及葉柄上面。病發(fā)中期，整棵病株葉片呈萎靡狀態(tài)，條狀黑斑逐漸變得腐爛不堪，連植株的根部都受到嚴(yán)重的侵蝕，變成腐爛狀，將病株的根莖分別切開(kāi)，用兩個(gè)拇指輕輕的擠壓，便從根莖的導(dǎo)管處擠出黃白色的膿狀物，病株的葉脈和根莖導(dǎo)管全部變成黑色。病發(fā)后期，病菌將吞蝕整顆植株，根莖部位變成腐爛和空腔，唯一只剩下木質(zhì)結(jié)構(gòu)。世界各地幾乎都有青枯菌的危害所在，嚴(yán)重限制了農(nóng)作物的健康生長(zhǎng)，目前，農(nóng)作物青枯菌雖然沒(méi)有全球性爆發(fā)，但部分地區(qū)受到青枯菌的危害特別嚴(yán)重，偶爾還會(huì)和其它病菌混合發(fā)生，譬如：煙草黑脛病和根結(jié)線蟲(chóng)病等，病發(fā)呈最嚴(yán)重狀態(tài)時(shí)，會(huì)導(dǎo)致大片面積的煙草死亡。被青枯菌侵染過(guò)的煙葉，再經(jīng)過(guò)烤煙工藝后，煙霧顏色清雜，行態(tài)光滑，此現(xiàn)象證明了煙葉的化學(xué)成分產(chǎn)生了變異，降低了煙草的使用價(jià)值，減少了煙農(nóng)的經(jīng)濟(jì)收益。如今，為了有效防止青枯菌所造成的煙草減產(chǎn)，主要實(shí)施了以下幾種方法：第一種是種植抗病菌品種；第二種是利用生物防治方法；第三種是利用科學(xué)的化學(xué)防治；第四種是專業(yè)的農(nóng)業(yè)防治。青菇菌是一種土壤傳播性病菌，對(duì)于青枯菌的防治方法，并沒(méi)有產(chǎn)出特效藥，而煙草的結(jié)構(gòu)與其他農(nóng)作物不同，實(shí)現(xiàn)套種的難度極大，生物防治的結(jié)果并不理想。在目前，通常是以農(nóng)業(yè)防治為主[2]，對(duì)于抗病植株的培育，是防止青枯菌病害最實(shí)惠最有效的方式，因此，加強(qiáng)培育青枯病的抗病品種，是有效抑制病害的重要手段。煙草品種質(zhì)量的篩選是實(shí)現(xiàn)煙草培育的基礎(chǔ)，此論文筆者針對(duì)煙草植株資源，通過(guò)人工接種的系統(tǒng)性青枯菌抗病品種進(jìn)行篩選，有助于提煉有效的抗病原介質(zhì)，為未來(lái)培育抗病菌品種提供有力的參考條件。根據(jù)煙草青枯菌的致病類型，可分為強(qiáng)、中、弱三種，并且這三種類型對(duì)植株的影響有非常明顯的差異?，F(xiàn)在主要栽種的煙草品種對(duì)弱毒性病菌具有一定的抗病能力，但是抗病時(shí)效性較短，基本維持在3至5年以內(nèi)，之后便會(huì)失去耐抗性[3]，植株的品種質(zhì)量多樣性研究有利于開(kāi)發(fā)種質(zhì)資源[4]，通過(guò)考察和搜集等各種方法，可有效豐富種質(zhì)資源庫(kù)，因此，對(duì)煙草抗性基因進(jìn)行研究，為培育抗性品種帶來(lái)了非常重要的意義。（二）青枯病分布與流行趨勢(shì)隨著天然氣候的影響以及自然環(huán)境的改變，全球的氣溫逐漸回暖，有利于青枯菌的生存環(huán)境，在全國(guó)范圍內(nèi)有明顯的擴(kuò)大趨勢(shì)，對(duì)我國(guó)而言，青枯菌的病發(fā)率以南方煙區(qū)最為頻繁，主要布局在廣東省、福建省等煙區(qū)的危害尤為突出，甚至?xí)斐蓺缧缘钠茐?。最近幾年，青枯菌病害有向北方地區(qū)逐步擴(kuò)散的趨向，并且，山東省和河南省已出現(xiàn)過(guò)此類病菌的報(bào)道，局部危害相對(duì)較大，青枯菌病害的發(fā)展為煙草生產(chǎn)和行業(yè)的發(fā)展帶來(lái)了重大的影響。（三）青枯病抗性鑒定方法關(guān)于傳統(tǒng)的青枯菌測(cè)定方法，主要包括以下三種：第一種是通過(guò)網(wǎng)室接種；第二種是人工病圃方法；第三種是自然病圃方法。培育煙草的抗病品種，可有效推動(dòng)煙草種植和生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展，通過(guò)對(duì)抗病品種的不同抗病能力進(jìn)行對(duì)比和研究，為有效培育煙草的抗病品種提供參考和借鑒，提高培育品質(zhì)，增強(qiáng)抗病能力。在福建地區(qū)，常用的是傳統(tǒng)的人工病圃方法，以此方法對(duì)煙草品種的抗病能力進(jìn)行區(qū)別和鑒定，這種方法雖然對(duì)清姑菌的鑒定和新品種培育方面都有顯著的效果，由于鑒定周期過(guò)長(zhǎng)，需要利用整個(gè)生產(chǎn)季節(jié)才能得出結(jié)論，在很大程度上增加了鑒定成本，降低了培育效率。三、材料與方法（一）試驗(yàn)材料1、供試菌株在培育過(guò)程中，將菌株Tb590作為煙草青枯病菌的實(shí)驗(yàn)病株，是華南農(nóng)業(yè)大學(xué)的細(xì)菌研究室所提供的儲(chǔ)存資料。在實(shí)驗(yàn)時(shí)，先活化菌株，取部分菌落接種至LB培養(yǎng)液中，然后24h培養(yǎng)30℃搖床，此用法適用于各種菌落測(cè)定實(shí)驗(yàn)。相關(guān)的LB培養(yǎng)液包括：10g/L的胰蛋白胨、5g/L的酵母提取物、5g/L的氯化鈉，pH值為7.0。相關(guān)的陽(yáng)離子培養(yǎng)液配比：先準(zhǔn)備適量的LB培養(yǎng)液，在LB培養(yǎng)液的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)里，分別加入各種試劑：包括CaCl2、KCl等，將各種陽(yáng)離子配制成濃度為1、10mmol/L等濃度不同的LB培養(yǎng)液，再將HCl的pH值調(diào)整為7，利用試管分別儲(chǔ)存，按照5mL每管的容量進(jìn)行消毒和滅菌。實(shí)驗(yàn)中所運(yùn)用的試劑，都是來(lái)自國(guó)產(chǎn)的分析純。碳源所采用的培養(yǎng)液為：酵母膏NaH2PO40.5g/L等。氮源所采用的培養(yǎng)液為：葡萄糖Na2HPO42.13g/L等。2、不同陽(yáng)離子取新鮮的Tb590菌液50μL放置24h以后，將陽(yáng)離子培養(yǎng)液分別接種其中，每種濃度重復(fù)接種三種陽(yáng)離子，24h培養(yǎng)30℃搖床。利用接種和不接種兩種方式，培養(yǎng)0h的LB培養(yǎng)液并進(jìn)行對(duì)比和分析，并使用分光亮度計(jì)來(lái)測(cè)定最佳吸收值。3、不同pH值在青枯病菌的生長(zhǎng)環(huán)境中，使用LB培養(yǎng)液，采用HCl對(duì)pH值進(jìn)行調(diào)節(jié)，分別為3、4等。關(guān)于青枯菌的接種和測(cè)定方法可參考1.2部分。4、不同碳、氮源分別將葡萄糖、蔗糖等按照1%的比例，加入到碳源培養(yǎng)液中，分別生成不同成份的碳源營(yíng)養(yǎng)液；分別將NaNO3、牛肉膏等按照1%的比例，加入到氮源培養(yǎng)液中，分別生成不同成份的氮源培養(yǎng)液。關(guān)于青枯菌的接種和測(cè)定方法可參考1.2部分。（二）結(jié)果與分析1、不同陽(yáng)離子濃度各不相同的Ca2+對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)環(huán)境會(huì)產(chǎn)生不同程度的影響，如若Ca2+濃度達(dá)到1和10mmol/L時(shí)，有利于青枯菌的生長(zhǎng)，顯示的1.0左右的OD600值。如若濃度達(dá)到大于或等于30mmol/L時(shí)，則對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)有明顯的顯抑制作用，所顯示的0.0805的下降值為OD600。如若Ca2+濃度達(dá)到90mmol/L時(shí)，則對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)起著完全抑制的作用（表1）。如下表所見(jiàn)，如若K+的濃度為10和1mmol/L時(shí)，那么有利于青枯菌的生長(zhǎng)，如若K+濃度大于或等于30mmol/L時(shí)，則會(huì)有效抑制青枯菌的生長(zhǎng)。如若Mg2+濃度小于或等于60mmol/L時(shí)，則也利于青枯菌的生長(zhǎng)和發(fā)展。并且?guī)捉M之間的OD600值沒(méi)有明顯的變化；除非，Mg2+濃度大于或等于90mmol/L時(shí)，則會(huì)對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)才起到顯著的抑制作用。上圖說(shuō)明，若離子為1mmol/L的濃度時(shí)，則非常利于青枯菌生長(zhǎng)；若離子大于或等于10mmol/L濃度時(shí)，則明顯的抑制了青枯菌的生長(zhǎng)；若Fe2+為60和90mmol/L濃度時(shí)，高于30mmol/L的OD值時(shí)，或許是實(shí)驗(yàn)的誤差值，有待更深入的探究。根據(jù)濃度不同的Al3+，對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果說(shuō)明，若Al3+為10mmol/L的濃度時(shí)，青枯菌的生長(zhǎng)要比在1和30mmol/L濃度環(huán)境下生長(zhǎng)的更好，若Al3+為大于或等于60mmol/L濃度時(shí)，則會(huì)對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)起到明顯的抑制作用。除此之外，上圖還說(shuō)明，在1mmol/L濃度的環(huán)境下，陽(yáng)離子成份的不同，對(duì)青枯菌生長(zhǎng)也帶來(lái)了各種變化。在1mmol/L濃度下，Mg2+等有利于青枯菌的生長(zhǎng)，Ca2+等和Zn2+對(duì)可有效抑制青枯菌的生長(zhǎng)，并且抑制效果和Mg2+等有明顯的差異；測(cè)定結(jié)果表明Cu2+和Al3+明顯的抑制了菌落的生長(zhǎng)，該結(jié)果與其他離子之間有明顯的不同；若陽(yáng)離子為10mmol/L濃度時(shí)，那么，Mg2+利于促進(jìn)青枯菌生長(zhǎng)；其中，Ca2+、K+、Zn2+等可有效抑制青枯菌的生長(zhǎng)，其測(cè)定結(jié)果和Ca2+、K+有著非常明顯的區(qū)別。如若陽(yáng)離子為30mmol/L濃度時(shí)，那么，只有Mg2+可在較小程度上影響青枯菌的生長(zhǎng)，其余的離子都可以抑制青枯菌的生長(zhǎng)，而且效果非常明顯，但是濃度為10mmol/L時(shí)，對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響差異化較為突出。就以上測(cè)定結(jié)果而言，則說(shuō)明了最符合青枯菌生長(zhǎng)的環(huán)境是在1和10mmol/L濃度下的Ca2+等離子；另外，離子Mg2+對(duì)青枯菌生長(zhǎng)環(huán)境的影響相對(duì)微弱；較高濃度下的9種陽(yáng)離子，明顯抑制著青枯菌的生長(zhǎng)，效果最佳的為Ca2+離子。在10mmol/L的同一種濃度中，表示了Mg2+離子是青枯菌的生長(zhǎng)最佳環(huán)境；而Ca2+和K+離子等可有效抑制菌落的生長(zhǎng)和發(fā)展。根據(jù)研究結(jié)果還可以看出，不同的陽(yáng)離子在濃度為1mmol/L的條件下，對(duì)青枯菌的生長(zhǎng)沒(méi)有產(chǎn)生任何限制，反而長(zhǎng)勢(shì)嬌好。如若濃度在1mmol/L的環(huán)境下，離子Cu2+和Al3+可明顯的抑制青枯菌的生長(zhǎng)。2、不同pH當(dāng)pH值為3至9時(shí)，則有利于菌落的繁殖；當(dāng)pH值為6至8時(shí)，則有利于菌落成長(zhǎng)；當(dāng)pH值為7時(shí)，則為菌落生長(zhǎng)的最佳環(huán)境。3、不同碳、氮源通過(guò)各種測(cè)定結(jié)果表明，煙草的青枯菌在各種條件下所培育出來(lái)的生長(zhǎng)效果有著不同的差異，但是在蔗糖和甘露醇的碳源環(huán)境下，生長(zhǎng)的非常不錯(cuò)。而菌落在不同的氮源環(huán)境里，成長(zhǎng)的差異也非常明顯；在牛肉膏環(huán)境下，生長(zhǎng)的比較不錯(cuò)，而在蛋白胨中為最佳。番茄的青枯菌最有效的抑制營(yíng)養(yǎng)是鈣物質(zhì)，能夠起到很好的病菌防控作用，因此，在營(yíng)養(yǎng)液中加入適量的鈣元素，可有效抑制青枯菌的擴(kuò)散，低鈣濃度對(duì)青枯菌的抑制率為56.8%，中鈣濃度對(duì)青枯菌的抑制率為77.1%；高鈣濃度對(duì)青枯菌的抑制率為100%，測(cè)定結(jié)果清晰地表明了鈣元素能夠有效遏制青枯菌的發(fā)病率，此項(xiàng)測(cè)定結(jié)果可以明顯看出，如若Ca2+的濃度大于或等于30mmol/L時(shí)，可有效抑制該病害的發(fā)生；如若Ca2+的濃度為90mmol/L時(shí)，則可完全抑制青枯菌的生長(zhǎng)。由此可見(jiàn)，高鈣含量的土壤環(huán)境可有效降低該病害的發(fā)生率，是由于高濃度的鈣可以抑制菌落擴(kuò)散的原因，在這個(gè)方面還需要加強(qiáng)研究。四、結(jié)論與討論優(yōu)質(zhì)的種子資源是培育抗病品種的基礎(chǔ)條件，對(duì)現(xiàn)在使用的煙草品種進(jìn)行抗性鑒定是提高抗源的最佳方式。因受收到天然氣侯和自然環(huán)境等各種因素的影響，煙草品種所產(chǎn)生的抗病能力也各有不同，因此，在選擇推廣種植品種時(shí)要根據(jù)當(dāng)?shù)氐膶?shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇，由于我國(guó)煙草病蟲(chóng)害呈上升趨勢(shì)，而且沒(méi)有可靠有效的防治方法，又因?yàn)榭共∑贩N得不到有效的推廣或者產(chǎn)生的抗病能力不夠，品質(zhì)大不如前等因素影響，抗此病害品種的培育方面也存在著很多問(wèn)題，比如鑒定網(wǎng)絡(luò)的不完善，綜合性較好的抗本缺乏等[12]，限制了我國(guó)對(duì)抗該病害品種培育的發(fā)展，因此，要建立完善的培育體系，保障鑒定結(jié)果的真實(shí)可靠性，創(chuàng)新研究高抗品種，加大推廣種植技術(shù)以及高抗品種的種植，擴(kuò)大宣傳力度，提供病蟲(chóng)害宣傳防治知識(shí)，關(guān)于有效減少該病害的產(chǎn)生問(wèn)題，向煙民提供了以下方法：在煙草的種植期或者生長(zhǎng)期，如若發(fā)現(xiàn)病株要立即拔除，防止大面積擴(kuò)散。采用150ml的青枯立克，30ml的大蒜油，混合30斤清水，對(duì)該病區(qū)或者五厘米以內(nèi)的病區(qū)范圍給予灌根處理以及葉面噴霧，三天一次為一個(gè)周期，連續(xù)澆灌三個(gè)周期，每株用量可參考土壤的濕潤(rùn)程度，根據(jù)植株大小進(jìn)行判斷，標(biāo)準(zhǔn)為每株罐頭。根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件和自然環(huán)境，選擇種植不同的抗病品種。與其它農(nóng)作物輪流種植，以三年為一個(gè)期限。4、加強(qiáng)培育抗病品種。5、提前種植。6、提倡使用農(nóng)家肥。7、大面積種植以后加強(qiáng)田間管理。8、發(fā)現(xiàn)病株后立即拔出并用生石灰消毒，采用高畦栽培方式，及時(shí)排水，防止洪澇。該病害的防治可以根據(jù)普通農(nóng)作物的防治方式結(jié)合使用，可以有效減少病害所帶來(lái)的破壞，提高煙民收益。再通過(guò)對(duì)青枯病并做出的抗病鑒定實(shí)驗(yàn)中，所得出的鑒定結(jié)果并不是準(zhǔn)確的抗體，反復(fù)的實(shí)驗(yàn)也會(huì)得出不同差異的結(jié)果。煙草種子播種到土壤里會(huì)受到土壤環(huán)境、太陽(yáng)光照、水分子的蒸發(fā)量和土壤的濕度影，對(duì)鑒定結(jié)果也會(huì)有所影響，而不同的品種所需要的最佳生長(zhǎng)時(shí)間也不盡相同[13]，因此，會(huì)出現(xiàn)種種誤差。如果制定了合理的品種對(duì)照表可以按照詳細(xì)的比例配置，找到最佳的抗病方式，可有效減少病菌的危害。室內(nèi)的抗性鑒定可有效減來(lái)因素所造成的抗性建立影響，在室內(nèi)做鑒定實(shí)驗(yàn)可以為田間鑒定提供參考依據(jù)，室內(nèi)鑒定的主要優(yōu)勢(shì)在于：第一，可有效減少外界的干擾，進(jìn)行規(guī)?；呐嘤N植，便于集中管理，可對(duì)雜交的后代進(jìn)行相關(guān)的研究，可以對(duì)優(yōu)良的育種材料在多種條件下和不同菌群接種的實(shí)驗(yàn)，便于測(cè)定適合于煙草生長(zhǎng)的最佳環(huán)境，有利于抗病性研究的鑒定和評(píng)價(jià)[11]。第二，關(guān)于煙草品種帶來(lái)的影響，即便種植在同一個(gè)環(huán)境里，也會(huì)產(chǎn)生著各種差異，可能是由于本身抗體的喪失導(dǎo)致的，但是抗體的喪失是由于受到外部病菌的侵蝕造成的，因此，筆者表示，同一個(gè)環(huán)境下種植的煙草所產(chǎn)生抗病力的不同，與品種無(wú)關(guān)。第三，關(guān)于煙草的治病性影響，同一個(gè)品種的煙草，在不同的生長(zhǎng)環(huán)境里所產(chǎn)生的抗病效果也不一致，但環(huán)境的不同，導(dǎo)致了該病害的致病性也有著不同程度的差異，關(guān)于青枯病的致病性，要根據(jù)青枯病的類型以及煙草的品種進(jìn)行劃分，生長(zhǎng)環(huán)境不同的煙草品種所產(chǎn)生的抗病能力也不同，上述是對(duì)煙草品種所產(chǎn)生的抗性差異因素的揣測(cè)。在本實(shí)驗(yàn)中選用了18種抗性為種植品種所產(chǎn)生的28種抗性能力，可將中抗品種加以推廣，參考種植的品種是否能夠?qū)崿F(xiàn)大規(guī)模種植，需加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)有助于得到更準(zhǔn)確的參考依據(jù)。本次鑒定是通過(guò)不同陽(yáng)離子對(duì)煙草青枯菌的生長(zhǎng)所產(chǎn)生的抑制效果，利用化學(xué)試劑來(lái)進(jìn)行多組的研究，通過(guò)研究表明，影響青枯菌生長(zhǎng)環(huán)境的因素有很多種，比如種植的煙草品種不同，也會(huì)對(duì)青枯菌所產(chǎn)生的抗性帶來(lái)影響，還包括，自然環(huán)境和土壤環(huán)境的影響，煙草植株所產(chǎn)生的抗病能力也會(huì)跟著產(chǎn)生影響，因此，還需要加大實(shí)驗(yàn)力度來(lái)研發(fā)更多的抗病品種以及研制抗青枯病的有效產(chǎn)品。參考文獻(xiàn)［1］番華彩，唐嘉義，秦小萍.煙草青枯病防治研究進(jìn)展［J］.云南大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2008，30（S1）：31-35.［2］李勇，卓東.煙草青枯病綜合防治方法及其研究進(jìn)展［J］.南方農(nóng)業(yè)，2011（12）：43-45.［3］尹立紅，馬志卿，陳安良，等.礦質(zhì)元素與植物抗病蟲(chóng)草害關(guān)系研究進(jìn)展［J］.西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2003（10）：157-161.［4］慕康國(guó)，趙秀琴，李健強(qiáng)，等.礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)與植物病害關(guān)系研究進(jìn)展［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，5（1）：84-90.［5］SpannTM，SchunmannAW.Mineralnutritioncontributestoplantdiseaseandpestresistance［J］.edis.ifas.ufl.edu，2010：1-5.［6］DatnoffEL，ElmerWH，HuberDM.Mineralnutritionandplantdisease［M］.TheAmericanPhytopayhologicalSociety，St.Paul，2007.［7］李紅麗，李清飛，郭夏麗，等.調(diào)節(jié)土壤微生態(tài)防治煙草青枯病［J］.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006（2）：57-60.［8］王麗麗，石俊雄，袁賽飛，等.微生物有機(jī)肥結(jié)合土壤改良劑防治煙草青枯病［J］.土壤學(xué)報(bào)，2013，50（1）：150-156［9］譚軍，劉雨虹，劉影，等．