馬鈴薯鐮刀屬真菌病害檢測技術規(guī)程_第1頁
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1馬鈴薯鐮刀屬真菌病害檢測技術規(guī)程本文件規(guī)定了馬鈴薯鐮刀屬真菌病害檢測的原理、儀器設備和用具、形態(tài)檢驗、致病性測定、PCR鐮刀屬真菌(Fusariumspp.)是一種重要的植物病原菌,屬無性真菌類,有性時期為子囊菌門學特征,回接致病性測定及PCR反應結(jié)果為鑒定依據(jù),將上述各項措施綜合形成一套超凈工作臺、顯微鏡、高壓滅菌鍋、光照培養(yǎng)箱、PCR儀、離心機、凝膠電泳儀、漩渦震蕩儀、水接種針、手術刀、鑷子、挑針、載玻片、蓋玻片、滴管、離心管、培養(yǎng)皿、三角瓶、酒精燈。切,或切取表皮凹陷病斑處進行觀察,觀察是26.2病原菌分離培養(yǎng)和純化PDA培養(yǎng)基上,在25℃恒溫下光照、黑暗交替各12h培養(yǎng)5d。待組織長出菌絲后,挑取菌絲體轉(zhuǎn)移到新的PDA培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。待菌落長至培養(yǎng)皿2/3時6.3病原菌形態(tài)學鑒定月牙形,2~5個分隔,多為3個分隔,大小3μm~8μm×11μm~70μm;厚垣孢子球形,表面不光滑,發(fā)病情況。如出現(xiàn)與病樣一致的癥狀則判定病原菌能夠引起8.2對照設置以菌株DNA為模板,利用鐮刀菌屬真菌的特異性引物8.4結(jié)果判定擴增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增出長度介于700bp~750bp之間的清晰單一34A.1

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