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文檔簡(jiǎn)介
1.下列關(guān)于cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)的說法中,不正確的是()A.cDNA文庫(kù)中只含有某種生物的部分基因,基因組文庫(kù)中含有某種生物的全部基因B.如果某種生物的cDNA文庫(kù)中的某個(gè)基因與該生物的基因組文庫(kù)中的某個(gè)基因控制的性狀相同,則這兩個(gè)基因的結(jié)構(gòu)也完全相同C.cDNA文庫(kù)中的基因都沒有啟動(dòng)子D.一種生物的cDNA文庫(kù)可以有許多種,但基因組文庫(kù)只有一種解析:cDNA文庫(kù)中的DNA來源于mRNA的反轉(zhuǎn)錄過程,所以該DNA(或基因)與該生物體內(nèi)的原DNA在結(jié)構(gòu)上是有區(qū)別的,如不含有啟動(dòng)子、內(nèi)含子等。答案:B2.基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。根據(jù)圖判斷下列操作正確的是()A.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割B.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割C.質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割D.質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割解析:因?yàn)槟康幕蛞邢露|(zhì)粒只要切開,酶Ⅱ識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC,單獨(dú)使用時(shí)可以把目的基因和質(zhì)粒都切斷,限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,只能把它們切開,單獨(dú)使用時(shí)不能切下,所以切目的基因用限制酶Ⅱ切割,質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割;因?yàn)橛孟拗泼涪袂懈钯|(zhì)粒時(shí)破壞了GeneⅡ,所以只能用GeneⅠ作為標(biāo)記基因。答案:D3.限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。下圖表示四種質(zhì)粒和目的基因,其中,箭頭所指部位為酶的識(shí)別位點(diǎn),質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因。適于作為圖示目的基因運(yùn)載體的質(zhì)粒是()解析:由圖可知,質(zhì)粒B上無標(biāo)記基因,不適合作為運(yùn)載體;質(zhì)粒C和D的標(biāo)記基因上都有限制性內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)。質(zhì)粒A有標(biāo)記基因且MunⅠ的切點(diǎn)不在標(biāo)記基因上。答案:A4.上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛。他們還研究出一種可大大提高基因表達(dá)水平的新方法,使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍,標(biāo)志著我國(guó)轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進(jìn)了一大步。以下與此有關(guān)的敘述中,正確的是()A.所謂“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有更多的人白蛋白基因B.可將白蛋白基因?qū)肱5穆鸭?xì)胞中,通過組織培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛C.人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白,是因?yàn)橹辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中才有人白蛋白基因D.運(yùn)用基因工程技術(shù)讓牛合成人白蛋白,該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異解析:“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白質(zhì)。動(dòng)物細(xì)胞的全能性較難實(shí)現(xiàn),用牛的卵細(xì)胞不能培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛。轉(zhuǎn)基因牛的每個(gè)正常細(xì)胞中都含有人白蛋白基因,人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白,是因?yàn)槿税椎鞍谆蛑辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。答案:D5.(2013·浙江寧波八校聯(lián)考)下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌D細(xì)胞內(nèi),產(chǎn)生“工程菌”的示意圖。所用的載體為質(zhì)粒A。若已知細(xì)菌D細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因,質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌后,其上的基因能得到表達(dá)。能表明目的基因已與載體結(jié)合,并被導(dǎo)入受體細(xì)胞的結(jié)果是()A.在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)繁殖的細(xì)菌B.在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上都不能生長(zhǎng)繁殖的細(xì)菌C.在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)繁殖,但在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)繁殖的細(xì)菌D.在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)繁殖,但在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)繁殖的細(xì)菌解析:由題圖可知,人生長(zhǎng)激素基因插入質(zhì)粒后將四環(huán)素抗性基因破壞,該基因不再表達(dá)。因此,含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)繁殖,但在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)繁殖。答案:C6.下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法,錯(cuò)誤的是()A.蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu),使之更加符合人類需要B.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作,定向改變分子的結(jié)構(gòu)C.蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界中不曾存在的新型蛋白質(zhì)分子D.蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分,又稱為第二代基因工程解析:由于基因的結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),因此,要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造,最終還必須通過改造基因來完成,而不是直接對(duì)蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作。答案:B7.(2013·長(zhǎng)沙調(diào)研)下圖是從酵母菌中獲取某植物需要的控制某種酶合成的基因的流程,結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問題:酵母菌—eq\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(\o(→,\s\up7(①),\s\do5(提取))\x(DNA)\o(→,\s\up7(),\s\do5(構(gòu)建))\x(\a\al(基因組,文庫(kù)))\o(→,\s\up7(A),\s\do5(篩選))\x(\a\al(含目的基,因的菌株))\o(→,\s\up7(),\s\do5(分離))\x(\a\al(目的基,因Ⅰ)),\o(→,\s\up7(),\s\do5(提取))\x(mRNA)\o(→,\s\up7(B))\x(cDNA)\o(→,\s\up7(),\s\do5(構(gòu)建))\x(\a\al(cDNA,文庫(kù)))\o(→,\s\up7(C),\s\do5(篩選))\x(\a\al(含目的基,因的菌株))\o(→,\s\up7(),\s\do5(分離))\x(\a\al(目的基,因Ⅱ))))(1)圖中cDNA文庫(kù)________基因組文庫(kù)(填“大于”、“等于”或者“小于”)。(2)①過程提取的DNA需要________的切割,B過程是________。(3)為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因,可用________擴(kuò)增的方法,其原理是________。(4)目的基因獲取之后,需要進(jìn)行________,其組成必須有________以及標(biāo)記基因等,此步驟是基因工程的核心。(5)將該目的基因?qū)肽畴p子葉植物細(xì)胞,常采用的方法是________,其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是________;可以用________技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。(6)如果要想使該酶活性更強(qiáng)或具有更強(qiáng)的耐受性,需要對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,這要通過蛋白質(zhì)工程。首先要設(shè)計(jì)預(yù)期的______,再推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列,找到相對(duì)應(yīng)的______。(7)除植物基因工程碩果累累之外,在動(dòng)物基因工程、基因工程藥物和基因治療等方面也取得了顯著成果,請(qǐng)列舉出至少兩方面的應(yīng)用:______________________________________________________________________________________________。解析:cDNA文庫(kù)為部分基因,它小于代表該物種全部基因的基因組文庫(kù);獲取目的基因的方法包括直接分離法、人工合成法及用PCR技術(shù)直接擴(kuò)增目的基因等。目的基因?qū)腚p子葉植物常用的方法為農(nóng)桿菌感染法,目的基因?qū)牒罂捎肈NA分子雜交法進(jìn)行檢測(cè)。答案:(1)小于(2)限制酶逆轉(zhuǎn)錄(3)PCR技術(shù)DNA復(fù)制(4)基因表達(dá)載體的構(gòu)建啟動(dòng)子、終止子、目的基因(復(fù)制原點(diǎn)可不答)(5)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法目的基因是否整合到植物細(xì)胞的染色體上DNA分子雜交(6)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)脫氧核苷酸序列(7)乳腺生物反應(yīng)器;體外基因治療復(fù)合型免疫缺陷綜合癥(其他合理答案也可)8.據(jù)圖表回答問題:幾種限制酶識(shí)別序列切割位點(diǎn)表限制酶SmaⅠEcoRⅠPstⅠ切割位點(diǎn)CCC↓GGGGGG↑CCCG↓AATTCCTTAA↑GCTGCA↓GG↑ACGTC(1)假設(shè)所用的限制酶均能將所識(shí)別的位點(diǎn)完全切開,采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切含有目的基因的DNA,能得到________種DNA片段。如果將質(zhì)粒載體和含目的基因的DNA片段只用EcoRⅠ酶切,酶切產(chǎn)物再加入DNA連接酶,其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有________、________、________。(2)為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體酶切后的末端任意連接,酶切時(shí)應(yīng)該選用的酶是____________、______________。解析:(1)含目的基因的DNA分子上含有2個(gè)EcoRⅠ和1個(gè)PstⅠ的酶切位點(diǎn),三個(gè)切點(diǎn)全部切開,則形成4種DNA片段。質(zhì)粒與含目的基因的DNA片段都用EcoRⅠ切割,目的基因兩端和質(zhì)粒的切口處的黏性末端相同,只考慮兩個(gè)DNA片段相連,則會(huì)形成三種連接產(chǎn)物,即質(zhì)粒與質(zhì)粒相連、質(zhì)粒與目的基因相連、目的基因與目的基因相連。為了防止自連,可選用EcoRⅠ和SmaⅠ兩種酶同時(shí)切割。答案:(1)4質(zhì)粒載體—質(zhì)粒載體連接物目的基因—目的基因連接物質(zhì)粒載體—目的基因連接物(2)EcoRⅠSmaⅠ9.在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對(duì)提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價(jià)值。右圖所示是獲得轉(zhuǎn)基因萵苣的技術(shù)流程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:(1)獲取目的基因的主要途徑包括從自然界已有的物種中分離和________。(2)①過程需要的酶有________、________。(3)重組質(zhì)粒除了帶有抗凍蛋白基因afp以外,還必須含有啟動(dòng)子、終止子和________,這樣才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體。(4)如果受體細(xì)胞C1是土壤農(nóng)桿菌,則將目的基因?qū)胨哪康氖抢棉r(nóng)桿菌的________,使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞C2,并將其插入到受體細(xì)胞C2中________上,使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá),形成轉(zhuǎn)基因萵苣。經(jīng)②過程獲得的轉(zhuǎn)基因萵苣中的目的基因是否表達(dá),在分子水平上可用________法進(jìn)行檢測(cè),如果出現(xiàn)雜交帶,說明目的基因已經(jīng)表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)品,轉(zhuǎn)基因萵苣培育成功。解析:(1)獲取目的基因的主要途徑有從自然界已有的物種中分離和人工合成。(2)①過程為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程,需要用到限制酶和DNA連接酶。(3)一個(gè)完整的基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因。(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的是農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上,進(jìn)而使目的基因能夠穩(wěn)定遺傳和表達(dá)。檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)可采用抗原——抗體雜交法。答案:(1)(用逆轉(zhuǎn)錄等方法進(jìn)行)人工合成(2)限制酶DNA連接酶(3)標(biāo)記基因(4)轉(zhuǎn)化作用染色體DNA抗原—抗體雜交10.(2013·淄博一模)轉(zhuǎn)基因生物作為生物反應(yīng)器,用于生產(chǎn)人們所需要的藥用蛋白,如激素、抗體、疫苗、酶等。下圖是通過生物工程培育能產(chǎn)生人胰島素?zé)煵莸倪^程。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)構(gòu)建表達(dá)載體的A過程中,需要用到的工具酶有________和________。(2)D過程采用的方法是________。若把重組質(zhì)粒導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞,常采用的方法是________。(3)E過程采用的技術(shù)主要包括________和________兩個(gè)階段。(4)如果利用DNA分子雜交原理對(duì)再生植株進(jìn)行檢測(cè),F(xiàn)過程應(yīng)該用________作為探針。解析:構(gòu)建表達(dá)載體的A過程中,需要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。重組質(zhì)粒導(dǎo)入不同生物的受體細(xì)胞方法不同,微生物常用Ca2+處理,植物細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法。植物組織培養(yǎng)技術(shù)的核心是脫分化和再分化。如果利用DNA分子雜交原理對(duì)再生植株進(jìn)行檢測(cè),F(xiàn)過程應(yīng)該用放射性同位素標(biāo)記的胰島素基因作為探針,因?yàn)槟康幕蚴且葝u素基因。答案:(1)限制酶DNA連接酶(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法(3)脫分化再分化(4)放射性同位素標(biāo)記的胰島素基因11.(2013·江蘇百校聯(lián)考)科學(xué)家通過探究DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶的活性,從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖,以尋找一種抑制腫瘤增長(zhǎng)的新途徑。方法思路:①構(gòu)建干擾質(zhì)粒________[插入針對(duì)人體端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶亞基(hTERT)的mRNA的干擾序列]和對(duì)照質(zhì)粒PSG—CTR(插入不針對(duì)人體任何DNA序列的對(duì)照組序列)。②用空質(zhì)粒PSG(不含目的基因)、干擾質(zhì)粒PSG—AS和對(duì)照質(zhì)粒分別感染肝癌細(xì)胞。③一段時(shí)間后觀察檢測(cè)細(xì)胞的________。計(jì)算細(xì)胞凋亡率,繪制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。結(jié)果如下圖:請(qǐng)回答下列問題。請(qǐng)回答下列問題(1)完成方法思路中的空格:①________;③__________________________________________________________。(2)在構(gòu)建質(zhì)粒時(shí),要將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞并用________培養(yǎng)基進(jìn)行篩選鑒定,然后再提取。因此,在構(gòu)建的表達(dá)載體質(zhì)粒上必須含有________。(3)端粒酶可以通過以自身的________為模板,________為原料來合成端粒DNA。(4)分析DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)能否抑制腫瘤細(xì)胞的增殖?解析:(1)題干中指出干擾質(zhì)粒是PSG—AS。題圖中有端粒酶活性細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞數(shù)(生長(zhǎng)情況),因此,端粒酶活性、細(xì)胞凋亡情況、細(xì)胞生長(zhǎng)情況是檢測(cè)指標(biāo)
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