T-GZTPA 0012-2022 貴州茶葉中吡蟲啉的快速檢測方法膠體金法

ColloidalColloidalgoldmethodforrapiddeterminationofImidaclopridI本標準按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本標準的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本標準由貴州省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗測試中心提出。本標準由貴州省綠茶品牌發(fā)展促進會提出并歸口。本標準起草單位：貴州省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗測試中心、貴州國芯生物科技有限公司、貴州省綠茶品牌發(fā)展促進會。本標準主要起草人：賴飛、張興倫、龐宏宇、王志、王曉鷺、祝愿、王藝蓉、劉佳、蘇美丞、丁靜、周雪麗、向章敏、方舒婷、令狐克勇、何國書、楊梅、羅維超。1貴州茶葉中吡蟲啉的快速檢測方法膠體金法本標準規(guī)定了吡蟲啉農(nóng)藥殘留的膠體金檢測方法的原理、試劑與設(shè)備、分析步驟、結(jié)果判定。本標準適用于茶葉中吡蟲啉農(nóng)藥殘留的快速檢測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T2102茶葉抽樣技術(shù)規(guī)范GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法3術(shù)語與定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理利用免疫測定中競爭法原理，在檢測區(qū)包被一定量的包被抗原，對照區(qū)包被膠體金標記的羊抗鼠抗體，通過膠體金標記的特異性抗體與試樣中吡蟲啉以及檢測區(qū)被固定的吡蟲啉完全抗原之間的競爭反應，觀測在試紙條的檢測區(qū)和對照區(qū)呈現(xiàn)的反應結(jié)果（試紙條出現(xiàn)色帶），然后根據(jù)色帶有無和顏色深淺，判定檢測結(jié)果。5試劑與設(shè)備5.1吡蟲啉膠體金快速檢測試劑盒，試劑盒中包括試紙條、陽性參考品（達到檢測限濃度的農(nóng)藥標品）、陰性參考品（含0.5%吐溫的0.15M磷酸鹽緩沖液）、甲醇、樣品處理液（0.02MPBSpH7.4磷酸鹽緩沖液）和檢測液。試紙條用鋁箔袋密封包裝。5.2除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，所有實驗用水為GB/T6682中規(guī)定的二級5.3天平百分之一電子天平。5.4微量移液器10μL-200μL，100μL-1000μL。5.5一次性PE手套防水，防油污，防細菌，耐酸耐堿。25.6離心管2mL離心管、10mL離心管。6分析步驟6.1試樣制備按NY/T2102茶葉抽樣技術(shù)規(guī)范進行抽樣，檢測前帶上一次性PE手套（5.5稱取1.0g±0.05g茶葉樣品，放入10mL離心管（5.6）中，加入5mL甲醇（5.1震蕩后靜置2min，即為樣品提取液，取100μL樣品提取液加入一管裝有500μL的樣品處理液的2mL離心管中（5.6）搖勻即樣品待檢液。6.2試樣測定6.2.1撕開包裝袋，取出試紙條；6.2.2將70ul待檢液（6.1）滴入試紙條取樣端，待檢液在層析作用下向試紙條的尾端側(cè)6.2.3反應5min后，觀察檢測區(qū)和對照區(qū)的色帶條數(shù)和顏色深淺；6.2.4用試劑盒內(nèi)的陽性參考品（5.1）、陰性參考品（5.1）和檢測液（5.1）進行同樣操作，以協(xié)助結(jié)果判定。7結(jié)果判定對照陽性參考品和陰性參考品的測定結(jié)果，根據(jù)試紙條檢測區(qū)（檢測線）和對照區(qū)（控制線）色帶有無和顏色深淺，按照圖1和如下原則進行結(jié)果判定。7.1在試紙條的質(zhì)控區(qū)未出現(xiàn)色帶，判定為無效；7.2僅在試紙條質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)一條紅線，判定為陽性；7.3在試紙條檢測區(qū)及質(zhì)控區(qū)各出現(xiàn)一條紅線，判定為陰性；7.4在試紙條質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)一條紅線，檢測區(qū)現(xiàn)一條陰影線，判定為臨界值。出現(xiàn)臨界值時，需重復檢測兩次以上。38質(zhì)控參數(shù)檢測試紙條需滿足：茶葉中吡蟲啉殘留的檢測限達到0.5mg/kg；陽性樣品的符合率≥95%，陰性參考品的符合率≥95%，假陰性率為0，假陽性率≤5%；10分鐘內(nèi)完成單次檢測；在室溫條件下避光保存6個月以上。9檢測限和特異性9.1檢測限茶葉中吡蟲啉殘留的檢測限為0.5mg/kg（GB2763-