2024高級(jí)生物化學(xué)復(fù)習(xí)題

2024年高級(jí)生化復(fù)習(xí)題五組匯總

2024年高級(jí)生化蛋白質(zhì)復(fù)習(xí)題

蛋白質(zhì)的定義：

一種由DNA編碼的L型氨基酸通過(guò)a碳原子上的氨基和竣基間形成酰胺鍵，連接而成肽鏈，經(jīng)翻譯后加工形成具有特

定空間構(gòu)象和生物功能的生物大分子。

L蛋白質(zhì)有哪些主要功能？

>催化作用：酶

>結(jié)構(gòu)、機(jī)械支持：纖維蛋白原、微管蛋白等細(xì)胞骨架組成蛋白

>運(yùn)輸（及跨膜運(yùn)輸）：血紅蛋白，離子通道蛋白

>免疫愛(ài)護(hù)：抗體、凝血酶、毒蛋白（蛇、蜂毒）

>生長(zhǎng)和分化的限制：胰島素、正/負(fù)調(diào)控因子、阻遏蛋白

>神經(jīng)沖動(dòng)的產(chǎn)生和傳遞：突觸后膜受體蛋白

>信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

>電子傳遞：鐵氧還蛋白、電子傳遞蛋白

>貯存功能：鐵蛋白、肌紅蛋白

>其他：甜蛋白，節(jié)肢彈性蛋白

2.蛋白質(zhì)的分類

（一）按組成分類

>簡(jiǎn)潔蛋白質(zhì)：僅由氨基酸組成的蛋白質(zhì)

依據(jù)其溶解性又可分為7類

清蛋白albumin精蛋白protamine

球蛋白globulin組蛋白histone

醇溶（谷）蛋白prolamine硬蛋白scleroprotein

谷蛋白glutelin

>結(jié)合蛋白質(zhì)：由氨基酸和非蛋白質(zhì)組分，以共價(jià)結(jié)合或非共價(jià)形式結(jié)合的蛋白質(zhì)

依據(jù)其結(jié)合的非蛋白質(zhì)組分又可分為8類

糖蛋白（glycoprotein）：含糖量4%

粘蛋白（mucoprotein）：結(jié)合氨基多糖

核蛋白(nucleoprotein)金屬蛋白(metalloprotein)

脂蛋白(lipoprotein)：血紅素蛋白(hemoprotein)

磷蛋白(phosphprotein)黃素蛋白(flavoprotein)

（二）按分子形態(tài)和溶解性分類

?球狀蛋白質(zhì)globularproteins

分子接近球狀或橢球狀，多肽鏈折疊緊密，溶解度較好，能結(jié)晶。

?纖維狀蛋白質(zhì)fibrousproteins

分子很不對(duì)稱，通常為規(guī)則線性或片層結(jié)構(gòu)。膠原蛋白、彈性蛋白、角蛋白、絲心蛋白通常不溶于水或稀鹽溶液

?膜蛋白質(zhì)membraneproteins

與細(xì)胞的各種膜系統(tǒng)結(jié)合而存在，以其疏水殘基與膜的烽鏈相互作用

（三）按功能分類

?活性蛋白質(zhì)activeprotein

在生命運(yùn)動(dòng)過(guò)程中一切有活性的蛋白質(zhì)以及他們的前體。酶激素蛋白運(yùn)輸與貯存蛋白質(zhì)

?非活性蛋白質(zhì)passiveprotein

主要包括一大類擔(dān)當(dāng)生物的愛(ài)護(hù)或持作用的蛋白質(zhì)。膠原蛋白彈性蛋白絲心蛋白

（四）按二級(jí)結(jié)構(gòu)單元排列方式分類

-全a域

-全B域

-交替的a/B

-非交替a+B

-不規(guī)則小蛋白（富含二硫鍵或配體）

3.按二級(jí)結(jié)構(gòu)單元排列方式對(duì)球形蛋白（或結(jié)構(gòu)域戊U分的五種類型：

-全a域：例如珠蛋白型a螺旋

-全S域：

1,反平行8型結(jié)構(gòu):木瓜蛋白酶

2.“希臘鑰匙”反平行B桶：刀豆素

3.平行B螺旋：抗凍蛋白

-交替的a/0：a/B相間型蛋白：細(xì)胞色素C

-非交替a+a/6分別型蛋白：綠色熒光蛋白

-不規(guī)則小蛋白（富含二硫鍵或配體）

1.富含二硫鍵的蛋白：胰島素等

2.富含金屬離子的蛋白：鐵氧化還原蛋白

4.蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的比較

通常所指的蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是指這些成熟蛋白質(zhì)的氨基酸殘基序列。

1）不同種屬來(lái)源的同一蛋白質(zhì)比較

?揭示生物進(jìn)化的信息

親緣關(guān)系相近的種屬中，同源蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)有更大的相同性。

例如：

?細(xì)胞色素C（cytc）存在于全部具有線粒體呼吸鏈的生物體中

?細(xì)胞色素C的三維結(jié)構(gòu)在進(jìn)化過(guò)程中守恒

?一級(jí)結(jié)構(gòu)與高級(jí)結(jié)構(gòu)的辨證關(guān)系

一級(jí)結(jié)構(gòu)確定高級(jí)結(jié)構(gòu)，高級(jí)結(jié)構(gòu)選擇一級(jí)結(jié)構(gòu)。

?同源蛋白質(zhì)的氨基酸序列分析揭示血紅蛋白、肌紅蛋白有著一個(gè)共同的進(jìn)化祖先一珠蛋白。

2）功能相像的蛋白質(zhì)比較

?確定蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)上的同源性和保守區(qū)

功能越相近的蛋白質(zhì)，結(jié)構(gòu)上的同源性越高。（與功能相關(guān)聯(lián)的氨基酸殘基序列也常稱為motif）,依據(jù)“近親”

蛋白質(zhì)的motif類型，可劃分蛋白質(zhì)家族。

例如：絲氨酸蛋白酶：

本家族成員與底物的結(jié)合部位各不相同，但共有水解蛋白質(zhì)的催化活性。均含有與催化活性相關(guān)的由Ser-Asp-His組

成的電荷中繼系統(tǒng)。

3）功能相差較遠(yuǎn)的蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)比較

?建立蛋白質(zhì)超家族（superfamily）

?發(fā)覺(jué)蛋白質(zhì)含有的新motif或結(jié)構(gòu)域，并揭示可能的新功能。

例如：1.肺泡表面活性物質(zhì)A的脫輔基蛋白（PSA）：

1985年，測(cè)定了PSA的氨基酸依次

1986年，測(cè)定了肝細(xì)胞表面半乳糖結(jié)合蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)，發(fā)覺(jué)二者有很大一段肽段高度同源（半乳糖結(jié)合蛋白的糖識(shí)別

域，CRD）,證明白PSA是糖結(jié)合蛋白。

2.建立了C類動(dòng)物凝集素超家族

5.蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)的類型有哪些？

蛋白質(zhì)的額二級(jí)結(jié)構(gòu)是指多肽鏈主鏈骨架（不含R側(cè)鏈）中的各個(gè)肽斷所形成的規(guī)則或者無(wú)規(guī)則的空間構(gòu)象；更

是完整肽鏈結(jié)構(gòu)（三級(jí)結(jié)構(gòu)）的結(jié)構(gòu)單元（即構(gòu)象單元）

二級(jí)結(jié)構(gòu)類型主要有：螺旋結(jié)構(gòu)（a-螺旋和五-螺旋）、B-折疊、回折、B-發(fā)夾和Q環(huán)、無(wú)規(guī)卷曲。

螺旋結(jié)構(gòu)：

a.a-螺旋（3.613-螺旋，非整數(shù)螺旋）

第n個(gè)氨基酸的C=0與n+4個(gè)氨基酸的N-H（NH基團(tuán)）形成H鍵。3.6個(gè)氨基酸殘基/圈，上升0.54nm/圈螺。C

原子相鄰的兩個(gè)二面角都是恒定值，全部肽鍵都呈反式。肽鏈中氨基酸殘基的R側(cè)鏈分布在螺旋的外側(cè)。a-螺旋是一

個(gè)偶極矩；末端是極性的，并且總是處于蛋白質(zhì)表面。自然蛋白質(zhì)的a-螺旋幾乎都以右手螺旋為主。

非典型的a-螺旋aH：N-H…。不在一條直線上，不能形成其次圈螺旋往往在a-螺旋末端形成aII。

影響a-螺旋形成的因素：

在多肽鏈中連續(xù)出現(xiàn)帶同種電荷的極性氨基酸，使螺旋不穩(wěn)定；

在多肽鏈中只要出現(xiàn)Pr。，a-螺旋就被中斷，產(chǎn)生一個(gè)彎曲或結(jié)節(jié)；

Gly的R基團(tuán)太小，難形成a-螺旋所需的兩面角，故也能破壞a-螺旋；

b.31。-螺旋

第n個(gè)殘基的段基C=O與第n+3個(gè)殘基-NH形成氫鍵。

c.螺旋（4.416-螺旋，非整數(shù)螺旋）

第n個(gè)殘基的鍛基C=O與第n+5個(gè)殘基-NH形成氫鍵，氫鍵閉環(huán)16個(gè)

原子。

B■?折疊：

a.B-折疊股

每股B-sheetstrand的平均長(zhǎng)度約20A（2nm）,相當(dāng)于6.5個(gè)氨基酸殘基，通常3-10個(gè)氨基酸殘基。單股B-sheetstrand

是不穩(wěn)定的。多股（2or2以上）的B-sheetstrand之間通過(guò)氫鍵聯(lián)接可形成穩(wěn)定的片層結(jié)構(gòu)一B-折疊片。

人8-折疊片或6-片層結(jié)構(gòu)

肽鏈按層排列，由相鄰肽鏈形成有規(guī)則的氫鍵維持結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性；相鄰肽鏈走向可以是平行或反平行的；肽鏈中

氨基酸殘基的R分布于片層的上下；大多數(shù)蛋白質(zhì)的折疊片都是非平面的。它們向右手方向扭曲，變成右手扭曲片

層。

c.8-突起：

折疊股中額外插入的一個(gè)殘基或有一折疊股中的一個(gè)殘基沒(méi)有參與和相鄰B-折疊股間的氫鍵形成。

回折：

多肽鏈中，常常出現(xiàn)的180轉(zhuǎn)彎的結(jié)構(gòu)。轉(zhuǎn)角是最短的連接，也是最短的緊密環(huán)。

a.B-轉(zhuǎn)角

由4個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，第n個(gè)氨基酸的C=0與n+3個(gè)氨基酸的N-H形成H鍵。多存在蛋白質(zhì)分子表

面，多由親水氨基酸殘基組成。

b.Y-轉(zhuǎn)角

由3個(gè)氨基酸組成，含有2個(gè)H鍵，180°轉(zhuǎn)角。

8-發(fā)夾和Q環(huán)

a.B-發(fā)夾

由一條伸展的多肽鏈彎曲形而成的兩條等長(zhǎng)、彼此相鄰、反向平行的肽段

構(gòu)成；兩條肽段靠氫鍵聯(lián)系，氫鍵有1-6個(gè)；此構(gòu)象包含10-11個(gè)氨基酸殘基

b.Q環(huán)

可以看成是轉(zhuǎn)角的延長(zhǎng)，最常見(jiàn)的是由6~8或6~16個(gè)殘基組成的肽段。

無(wú)規(guī)卷曲

有一些局部結(jié)構(gòu)的肽段（約10%）,相對(duì)于規(guī)則或部分規(guī)則的二級(jí)結(jié)構(gòu)是無(wú)規(guī)則的,其結(jié)構(gòu)具有更大的隨意性。大多

構(gòu)成蛋白質(zhì)和酶的活性中心。

6.什么是拉氏構(gòu)象圖？

蛋白質(zhì)主鏈中有3類不同的二面角，分別為：巾、巾、3。側(cè)鏈的二面角稱為Xj、X2等，確定非鍵合原子間的

最小接觸距離，以6作橫坐標(biāo)，巾作縱坐標(biāo)作圖，將允許區(qū)、部分允許區(qū)、不允許區(qū)標(biāo)注在圖中即可得到拉氏構(gòu)象圖。

允許區(qū)：

區(qū)域內(nèi)成對(duì)的二面角所確定的主鏈構(gòu)象是允許的。非鍵合原子之間的距離，最小接觸距離。

部分允許區(qū)（臨界限制區(qū)）：

成對(duì)的二面角所確定的主鏈骨架構(gòu)象是不完全允許的。此構(gòu)象中非鍵合原子間的距離小于最小接觸距離，但大于

極限值（比最小接觸距離小0.01-0.02nm）?

完全不允許區(qū)：

成對(duì)二面角所確定的主鏈骨架的構(gòu)象是完全不允許的，非鍵合原子間的距離小于極限值。

拉氏構(gòu)象圖的應(yīng)用：

對(duì)主鏈構(gòu)象探討起到的作用；

可用于推斷檢查所得到的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)模型的正誤。

7.a角蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

>僅有a螺旋（二級(jí)結(jié)構(gòu)）的簡(jiǎn)潔重復(fù)；

>原纖絲內(nèi)含多個(gè)二聚體結(jié)構(gòu)，二聚體結(jié)構(gòu)的中心是由兩個(gè)右手螺旋的多肽鏈復(fù)繞成左手超螺旋棒狀結(jié)構(gòu)；

>含大量疏水殘基；

>鏈間由二硫鍵連接，一般認(rèn)為每4個(gè)螺圈就有一個(gè)交聯(lián)鍵，Cys含量較高（Cys>18%）,依據(jù)含硫量可分為：硬角蛋

白和軟角蛋白。

>性質(zhì)：有很好的伸縮性能。

8.絲心蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)【選擇性回答】

>自然的B角蛋白除絲心蛋白外（絲心蛋白屬于8角蛋白），大多數(shù)鳥類和爬行動(dòng)物的羽毛、皮膚、爪、啄和鱗片

中均含B角蛋白。a角蛋白充分伸展后可逆地轉(zhuǎn)變?yōu)?角蛋白。

>絲心蛋白由反平行B折疊片以平行的方式積累成多層結(jié)構(gòu)；

>B折疊構(gòu)象中含約50個(gè)重復(fù)單位：（Gly-Ala）2-Gly-Ser-Gly-Ala-Ala-Gly-（Ser-Gly-Ala-GlyAla-Gly）8-Tyr-

>Gly位于折疊片平面的一側(cè)，Ser和Ala等都在平面的另一側(cè)；

>鏈間主要以氫鍵連接，層間主要靠范德華作用維系；

>?具有很高的抗張強(qiáng)度?具有松軟的特性?不能拉伸的性質(zhì)

9.膠原蛋白的原膠原分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

①原膠原分子是膠原蛋白的基本結(jié)構(gòu)單位

②每個(gè)原膠原分子由三條a鏈（a-肽鏈）組成的三股螺旋結(jié)構(gòu)（右手超螺旋），每條a鏈為左手螺旋；

③每條a鏈約含1000個(gè)氨基酸殘基，a鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)96%遵守（Gly-X-Y）n,X多為Pro；Y多為Hyp或Hly

④三股螺旋鏈間靠H-鍵和范得華作用維系，膠原纖維可以通過(guò)分子內(nèi)和分子間的交聯(lián)得到進(jìn)一步增加和穩(wěn)定。分子內(nèi)

交聯(lián)N-末端區(qū)（非螺旋區(qū)）內(nèi)賴氨酸殘基之間進(jìn)行的。

⑤原膠原分子間形成的空穴區(qū)作為糖結(jié)合部位，可能在骨骼形成中起作用。

10.什么是兩可肽？

蛋白質(zhì)多肽鏈中的某一肽段在不同條件下存在可能形成a-螺旋和B-折疊兩種不同形式二級(jí)結(jié)構(gòu)，這樣的肽段被稱為

兩可肽。

另附【可不答】：舉例：

五肽段：VAHAL（Val_Ala_His_Ala_Leu）

丙糖磷酸異構(gòu)酶：a螺旋；

灰色鏈霉菌蛋白水解酶A：B折疊

五肽段：VNTFV（Val-Asn-Thr-Phe-Val）

無(wú)脊椎血紅蛋白：a螺旋；

核糖核酸酶：B折疊

可能的影響因素：鄰近殘基的二級(jí)結(jié)構(gòu)傾向；肽鏈中遠(yuǎn)程肽段的影響；肽段是處于分子表面還是被包埋在分子內(nèi)部。

11.影響蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)變更的因素

>蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)是通過(guò)骨架上的瑛基和酰胺基團(tuán)之間形成的氫鍵維持的，氫鍵是穩(wěn)定二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要作用力。假

如對(duì)氫鍵進(jìn)行破壞，就可以影響蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)。其中，酸堿度，溫度，溶劑還有極端變形條件都有可能變更

蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)。

>pH能影響氨基酸的帶電荷性，如多聚賴氨酸在pH7不形成a螺旋，因?yàn)樵诖藀H下Lys的R基帶正電荷，靜電排

斥，不能形成內(nèi)氫鍵，而在pHU時(shí)自發(fā)形成a螺旋。

>非極端的溫度變更也可以變更蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)，比如多聚賴氨酸在PH=11.8時(shí)，4℃構(gòu)象為a螺旋，而在52。。時(shí),

變?yōu)锽折疊。

>特殊的溶劑可以變更蛋白溶液中的二級(jí)結(jié)構(gòu)，比如水溶液中的伴刀豆球蛋白A的a螺旋量為2%,但是在70%的氯

乙醇溶液中，a螺旋含量可以上升到55%。再比如水溶液中的彈性蛋白酶的a螺旋量為7%,但是在十二烷基硫酸

鈉溶液中，a螺旋含量可以上升到35%。

>強(qiáng)酸、強(qiáng)堿可以使蛋白質(zhì)變性，是因?yàn)閺?qiáng)酸、強(qiáng)堿可以使蛋白質(zhì)中的氫鍵斷裂。也可以和游離的氨基或竣基形成

鹽，在變更過(guò)程中也有化學(xué)鍵的斷裂和生成，因此，可以看作是一個(gè)化學(xué)變更。同時(shí)極端的高溫也可以斷裂氫鍵,

甚至影響三級(jí)結(jié)構(gòu)。

12.多肽鏈主鏈的空間限制是哪兩個(gè)方面

>一、肽鍵的部分雙鍵性質(zhì)：肽鍵C、0、N原子間共振相互作用，使得肽鍵雖是單鍵卻有部分雙鍵性質(zhì)，不能夠自

由旋轉(zhuǎn)。同時(shí)，六個(gè)原子被束縛在同一平面上，形成了剛性的肽平面（兩個(gè)a碳在對(duì)角位置，肽鍵呈反式構(gòu)型）。

>二、肽平面與a碳原子的二面角力和巾：兩相鄰肽平面之間，能以共同的a碳為定點(diǎn)旋轉(zhuǎn)，繞a碳-N鍵旋轉(zhuǎn)角度

是小角，a碳與C旋轉(zhuǎn)角為中角。小和力稱為二面角，也是構(gòu)象角。二面角所確定的構(gòu)象是否存在，主要取決于

兩個(gè)相鄰肽單位中，非鍵合原子之間的接近有無(wú)阻礙。由拉氏構(gòu)想圖得知，同時(shí)等于00時(shí)的構(gòu)象事實(shí)上并不能存

在，因?yàn)閮蓚€(gè)相鄰平面上的酰胺基H原子和跋基O原子的接觸距離比其范德華半徑之和小，因此將發(fā)生空間重疊。

這樣的構(gòu)象是立體化學(xué)所不允許的。①180和巾0不允許，因?yàn)閮蓚€(gè)嫌基氧原子接觸距離最小，斥力最大。中0和

中180不允許，因?yàn)閮蓚€(gè)亞氨基氫原子接觸距離最小，斥力最大。

>綜上，上訴兩個(gè)因素使得能夠存在于蛋白質(zhì)中的主鏈構(gòu)象大大削減，從而對(duì)空間構(gòu)想進(jìn)行限制。

13.形成蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域的意義

（1）各個(gè)結(jié)構(gòu)域分別折疊，其動(dòng)力學(xué)上更有利；

（2）結(jié)構(gòu)域自身緊密裝配，結(jié)構(gòu)域之間的柔性連接使每個(gè)結(jié)構(gòu)域間可以較大幅度的相對(duì)運(yùn)動(dòng)；

（3）多個(gè)結(jié)構(gòu)域形成的間隙部位往往是蛋白質(zhì)的功能部位，結(jié)構(gòu)域的相互作用有利于蛋白質(zhì)分子產(chǎn)生別構(gòu)效應(yīng)。

14.蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)折疊的規(guī)律主要有哪些？

蛋白質(zhì)的基本單位為氨基酸，而蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)指的就是其氨基酸序列，蛋白質(zhì)會(huì)由所含氨基酸殘基的親水性、疏

水性、帶正電、帶負(fù)電等特性通過(guò)殘基間的相互作用而折疊成一立體的三級(jí)結(jié)構(gòu)。

（1）蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)折疊信息來(lái)自一級(jí)結(jié)構(gòu)；

（2）在體外，折疊可以是自發(fā)的；

（3）在給定環(huán)境條件下，總是實(shí)行低自由能的構(gòu)像狀態(tài)；

（4）多肽鍵的折疊具有手性效應(yīng)；

（5）折疊傾向于疏水側(cè)鍵在分子內(nèi)部，親水側(cè)鍵分布于分子表面。

15.什么是二硫鍵異構(gòu)酶PDI和肽基脯氨酰異構(gòu)酶PPI?

PDI：proteindisulfideisomerase,是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中一種重要的折疊催化劑，催化蛋白質(zhì)形成正確配對(duì)的二硫

鍵（氧化活性），在加速新生肽鏈折疊中間體二硫鍵的改組中起重要作用（或催化錯(cuò)誤配對(duì)二硫鍵的重排），

并具有分子伴侶活性。（課件答案在l-2p38）

PPI：peptidylprolylcis-transisomerse,也叫肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶。不含Pro殘基的蛋白質(zhì)，反式的氨

基酸亞氨基的肽鍵是更穩(wěn)定的，順式構(gòu)象所占比例極少，新合成的多肽鏈中，脯氨酸氨基酸端形成的肽

鍵（Xaa-Pro）基本都是反式的；而在球形蛋白質(zhì)（含pro殘基的蛋白質(zhì)）中大約10%Xaa-Pro肽基是順

式的，催化Xaa-Pro肽鍵順?lè)词綐?gòu)象變更的酶就是肽基脯氨酰異構(gòu)酶。（課件答案在1-2p40）

16.蛋白質(zhì)溶液的濃縮方法及原理

（課件答案在2-2p32網(wǎng)上更為具體答案鏈接://wenku.baidu

/link?url=wCfGq23-H25Vu6UL-CB4w7j7B12pOz7755M3Qf7fsIGSZbNJiZ3xFo6CfRrnKx30mx5oc54tXpyLe46bZMRhHIls-

0UygMoFnbbmF7zQrde）

超濾法：基本原理是在常溫下以肯定壓力和流量，利用不對(duì)稱微孔結(jié)構(gòu)和半透膜介質(zhì)，依靠膜兩側(cè)的壓力差作為推動(dòng)

力，以錯(cuò)流方式進(jìn)行過(guò)濾，使溶劑及小分子物質(zhì)通過(guò)，大分子物質(zhì)和微粒子如蛋白質(zhì)等被濾膜阻流。將蛋白質(zhì)樣品裝

入適當(dāng)?shù)某瑸V管中，經(jīng)肯定時(shí)間離心，溶劑穿過(guò)超濾管濾膜流出而使蛋白質(zhì)溶液得以濃縮。

鹽析法：硫酸銹鹽析法最為常用。高濃度的鹽粒子在蛋白質(zhì)溶液中可與蛋白質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)水分子，使溶液中自由水分子數(shù)減

小，從而破壞蛋白質(zhì)表面的水化膜，降低其溶解濃度，使之從溶液中沉淀出來(lái)，即使蛋白質(zhì)在高濃度中性鹽中析出而

濃縮的過(guò)程。

透析袋濃縮法：是在透析技術(shù)的基礎(chǔ)上改良而來(lái)，即將透析液換成可以吸水的溶液或固體吸附劑，從而達(dá)到濃縮蛋白

質(zhì)的效果。將蛋白質(zhì)樣品封閉在透析袋中，再將透析袋包埋于甘油、聚乙二醇8000等試劑之中，放置于4℃,透析袋

中溶劑將被吸出而達(dá)到濃縮的效果。

有機(jī)試劑沉淀法（如丙酮、乙醇、甲醇等）：有機(jī)溶劑加入水中可使溶劑的介電常數(shù)降低，增加了相反電荷的吸引力，

從而破壞蛋白質(zhì)的水化層及表面電荷而使蛋白質(zhì)沉淀。

非離子多聚物沉淀法：最常用的多聚物是聚乙二醇，有兩種方法，1）選用兩種水溶性非離子多聚物組成液液兩相體系，

不等量安排，而造成分別。此方法基于不同生物分子表面結(jié)構(gòu)不同，有不同安排系數(shù)。并外加離子強(qiáng)度、PH值和溫度

等影響，從而擴(kuò)大分別效果。2）選用一種水溶性非離子多聚物，使生物大分子在同一液相中，由于被排斥相互凝合而

沉淀析出。該方法操作時(shí)先離心除去大懸浮顆粒，調(diào)整溶液PH值和溫度至適度，然后加入中性鹽和多聚物至肯定濃度,

冷貯一段時(shí)間，即形成沉淀。

冷凍干燥法：將待干燥物在低溫下快速凍結(jié)后，在高真空條件下將其中的冰升華為水蒸氣，除去冰晶，待升華結(jié)束后

再進(jìn)行解析干燥，除去部分結(jié)合水的的干燥方法，最終達(dá)到濃縮蛋白質(zhì)的目的。

17.凝膠過(guò)濾柱層析的原理及測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的原理

凝膠過(guò)濾柱層析的原理：凝膠過(guò)濾層析也稱分子篩層析、排阻層析。是利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，依據(jù)

被分別物質(zhì)的分子大小不同來(lái)進(jìn)行分別。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)，大部分為一些交聯(lián)的聚糖

（如葡聚糖或瓊脂糖）類物質(zhì)，小分子物質(zhì)能進(jìn)入其內(nèi)部，流下時(shí)路程較長(zhǎng)，而大分子物質(zhì)卻被解除在外部，下來(lái)的路程

短，當(dāng)一混合溶液通過(guò)凝膠過(guò)濾層析柱時(shí)，溶液中的物質(zhì)就按不同分子量篩分開(kāi)了

測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的原理：用一系列已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)品放入同一凝膠柱內(nèi)，在同一條件下層析，記錄每一分鐘成分

的洗脫體積V,該體積V與相應(yīng)蛋白質(zhì)分子量的自然對(duì)數(shù)成反比，以此做曲線，在肯定分子量范圍內(nèi)可得始終線，即分

子量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定未知物質(zhì)的分子量時(shí)，可將此樣品加在測(cè)定了標(biāo)準(zhǔn)曲線的凝膠柱內(nèi)洗脫后，依據(jù)物質(zhì)的洗脫體

積，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出它的的分子量。

18.離子交換柱層析的原理

離子交換柱層析的原理：該方法是通過(guò)帶電的溶質(zhì)分子與離子交換層析介質(zhì)中可交換離子進(jìn)行交換而達(dá)到分別純化的

目的；填料在肯定PH、鹽濃度的下帶電荷，低鹽上樣的蛋白質(zhì)溶液，與填料帶相反電荷的蛋白質(zhì)可以結(jié)合到中柱上，

雜蛋白隨流淌相穿柱而過(guò)，使蛋白質(zhì)得到肯定的分別。提高洗脫液的鹽濃度或變更pH值，由于蛋白質(zhì)所帶的相反電荷

不同，與填料有不同的結(jié)合實(shí)力，則在不同的鹽濃度或不同的pH值下被洗脫下來(lái)，達(dá)到進(jìn)一步分別的目的。

離子交換層析分為陽(yáng)離子離子交換柱和陰離子離子交換柱。

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液的pH高于pl時(shí)，蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷，可結(jié)合到陰離子離子交換柱上（填料帶正電荷）。

19.固定化金屬螯合親和層析純化His-tagged蛋白質(zhì)的原理

>固定化金屬螯合親和層析是建立在蛋白質(zhì)表面暴露一些氨基酸殘基與固定化金屬離子的親和力的不同來(lái)進(jìn)行蛋白

質(zhì)分別的一項(xiàng)技術(shù)，它以配基簡(jiǎn)潔、吸附量大、分別條件溫柔、通用性強(qiáng)等特點(diǎn)，漸漸成為分別純化蛋白質(zhì)等生

物工程產(chǎn)品最有效的技術(shù)之一。

>（作用原理：固定化金屬螯合親和層析是建立在蛋白質(zhì)表面的氨基酸與固定化金屬離子的親和力的不同來(lái)進(jìn)行蛋

白質(zhì)分別的一項(xiàng)技術(shù)。過(guò)渡態(tài)金屬離子能夠與電子供體，如氮、硫、氧等原子以配位鍵結(jié)合，金屬離子上剩余的

空軌道是電子供體的配位點(diǎn)，當(dāng)它在溶液中會(huì)被水分子或陰離子占據(jù)。然而，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)表面氨基酸殘基與金屬離

子的結(jié)合力較強(qiáng)時(shí)，氨基酸殘基的供電原子就會(huì)與金屬離子結(jié)合形成復(fù)合物，取代原先結(jié)合的水分子或陰離子，

這樣就能使蛋白質(zhì)分子結(jié)合在固體表面。能與螯合反應(yīng)的基團(tuán)很多，例如氨基酸中的氨基和竣基，以及某些氨基

酸側(cè)鏈基團(tuán)含有孤對(duì)電子的活性原子，但是，由于蛋白質(zhì)表面的氨基酸的種類、數(shù)量、位置和空間構(gòu)象不同，因

而具體運(yùn)用時(shí)依據(jù)金屬配基的親和力大小不同，選擇不同的金屬配基加以分別純化）

>特殊適合分別純化變性蛋白，尤其是帶6個(gè)組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白，這種蛋白質(zhì)對(duì)金屬離子有很高的結(jié)合力，在

分別純化后再用化學(xué)法或酶法將標(biāo)簽切掉，從而得到目標(biāo)蛋白。過(guò)程大致為：（1）His-tagged蛋白質(zhì)通常在N端

或者C端帶有6個(gè)His蛋白標(biāo)簽，這些His蛋白能專一性地結(jié)合在螯合有Ni2+（或Zn2+或Co2+）親和柱上，雜合

蛋白則通過(guò)親和柱而與His-tagged蛋白質(zhì)分別；（2）增大洗脫液中的咪陛濃度。高濃度咪嗖與His-tagged蛋白質(zhì)

競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合柱中的Ni2+,從而將His-tagged蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)。

20.蛋白質(zhì)免疫印跡western-blot的原理

蛋白質(zhì)免疫印跡（Westernblottingo門mmunoblotting）：利用抗原抗體的特異性反應(yīng)在蛋白質(zhì)混合液中定性及半定量檢

測(cè)某種蛋白質(zhì)的方法。一般由凝膠電泳、樣品的印跡和免疫學(xué)檢測(cè)三個(gè)部分組成。

蛋白質(zhì)混合液先經(jīng)SDS凝膠電泳，使待測(cè)樣品中的蛋白質(zhì)按分子量大小在凝膠中分成帶；把凝膠中已分成條帶的

蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到一種固相支持物（如硝酸纖維素膜即NC膜、PVDF膜）即為印跡過(guò)程；再用蛋白溶液（如10%的BSA）

處理以封閉膜上剩余的疏水結(jié)合位點(diǎn)，最終在膜上進(jìn)行抗原抗體特異性反應(yīng)：用所要探討的蛋白質(zhì)的一抗處理，印跡

中只有待探討的蛋白質(zhì)的位置上結(jié)合著一抗；處理過(guò)的印跡進(jìn)一步用適當(dāng)標(biāo)記的二抗處理，處理后，帶有標(biāo)記的二抗

與一抗結(jié)合，可以指示一抗的位置，即是待探討的蛋白質(zhì)的位置，這樣就可以利用二抗上所帶的標(biāo)記來(lái)鑒定、檢測(cè)目

的蛋白。

21.SDS（雙向電泳分別蛋白質(zhì)）的原理及其實(shí)際應(yīng)用

蛋白質(zhì)的雙向電泳的第一向?yàn)榈入娋劢梗↖soelectrofocusing,IEF），依據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同進(jìn)行分別；其次向?yàn)镾DS-聚

丙烯酰胺凝膠電泳（SDS）,按亞基分子量大小進(jìn)行分別。經(jīng)過(guò)電荷和分子量?jī)纱畏謩e后，可以得到蛋白質(zhì)分子

的等電點(diǎn)和分子量信息。

蛋白質(zhì)雙向電泳是將蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和分子量?jī)煞N特性結(jié)合起來(lái)進(jìn)行蛋白質(zhì)分別并用考馬斯亮藍(lán)染色獲得蛋白質(zhì)的

電泳分別圖譜的技術(shù)，具有較高的辨別率和靈敏度，己成為蛋白質(zhì)特殊是困難體系中的蛋白質(zhì)檢測(cè)和分析的一種強(qiáng)有

力的生化手段。

SDS-PAGE因易于操作，而具有廣泛的用途，是很多探討領(lǐng)域的重要的分析技術(shù)。其主要應(yīng)用有：

①蛋白質(zhì)純度分析

②蛋白質(zhì)分析量的測(cè)定，依據(jù)遷移率大小測(cè)定蛋白質(zhì)亞基的分子量

③蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定

④蛋白質(zhì)水解的分析

⑤免疫沉淀蛋白的鑒定

⑥免疫印跡的第一步

⑦蛋白質(zhì)修飾的鑒定

⑧分別和濃縮用于產(chǎn)生抗體的抗原

⑨分別放射性標(biāo)記的蛋白質(zhì)

⑩顯示小分子多肽

22.測(cè)定蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)時(shí)，X-射線晶體衍射技術(shù)與NMR技術(shù)各有哪些優(yōu)點(diǎn)和

局限？

1）NMR優(yōu)勢(shì)：

可測(cè)定溶液中的蛋白質(zhì)構(gòu)象，無(wú)需蛋白質(zhì)結(jié)晶

不破壞蛋白質(zhì)分子構(gòu)象

能測(cè)定蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的變更過(guò)程

能探討蛋白質(zhì)分子間的以及蛋白質(zhì)與其他配體之間的相互作用

NMR不足：

很多時(shí)候達(dá)不到X-射線晶體衍射技術(shù)的精度

能測(cè)定的蛋白質(zhì)的分子量相對(duì)較小

2）X-射線晶體衍射技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

方法成熟，適用于能長(zhǎng)出較好單晶的蛋白質(zhì)

辨別率高，可高通量化

X-射線蛋白質(zhì)晶體衍射技術(shù)不足：

須要培育對(duì)稱性好的、適于衍射的蛋白質(zhì)單晶，該步驟是蛋白質(zhì)晶體衍射技術(shù)的瓶頸須要解決相位問(wèn)題

23.氣象擴(kuò)散法培育蛋白質(zhì)晶體的原理：（比較具體，選擇性回答）

?首先：蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)分析的分析就是須要進(jìn)行晶體培育，晶體培育：獲得適用的單晶（關(guān)鍵步驟）結(jié)構(gòu)測(cè)定的精度

依靠于晶體所能達(dá)到的衍射辨別率。

?其次：晶體必需滿意的兩個(gè)條件：

1.單晶，足夠大（大于0.1mm3）；

2.結(jié)晶過(guò)程，形成晶核晶核長(zhǎng)大

?影響晶體生長(zhǎng)的因素

樣品純度：包括勻稱性，樣品最好是新制備的；

濃度：限制相宜的過(guò)飽和度，形成少量晶核；

pH：長(zhǎng)出不同晶型的晶體；

溫度：一般溫度上升，蛋白質(zhì)溶解度增大；

離子強(qiáng)度：鹽析與鹽溶；

有機(jī)添加劑：可降低蛋白質(zhì)溶解度。

?原理1（老師課件）：在一個(gè)封閉體系中，液池內(nèi)緩沖液中的各種試劑濃度均略高于蛋白質(zhì)液滴中的濃度（液池內(nèi)

不含蛋白質(zhì)），通過(guò)體系內(nèi)蒸汽擴(kuò)散，溶劑分子從液滴向液池遷移，使液滴內(nèi)鹽濃度增高，蛋白質(zhì)溶解性降低，達(dá)

到過(guò)飽和而結(jié)晶。用氣相擴(kuò)散法進(jìn)行試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)是沉淀劑的濃度梯度可以很便利地進(jìn)行調(diào)整，從而使蛋白質(zhì)溶液

緩慢地形成過(guò)飽和溶液，晶體生長(zhǎng)的速度得到了很好的限制。

?原理2（網(wǎng)上找尋易于理解）：也就是將含有高濃度的蛋白質(zhì)（10-50mg/ml）溶液加入適當(dāng)?shù)娜軇?，漸漸降低蛋白質(zhì)

的溶解度，使其接近自發(fā)性的沈淀狀態(tài)時(shí)，蛋白質(zhì)分子將在整齊的堆棧下形成晶體。舉例來(lái)說(shuō)，我們將蛋白質(zhì)溶

于低濃度（~1QM）的硫酸鏤溶液中，將它放置于一密閉含有高濃度（~2QM）硫酸鏤溶液的容器中，由氣相平衡，可

以緩慢提高蛋白質(zhì)溶液中硫酸鏤的濃度，進(jìn)而達(dá)成結(jié)晶的目的。

?留意事項(xiàng)：

1.硅化處理：

載樣蓋玻片必需硅化，以防止蛋白質(zhì)樣品的擴(kuò)散延長(zhǎng)。

2.懸滴法：樣品用量少，1-53，液滴體積不能過(guò)大。坐滴法：樣品用量大，液滴體積50Pl,可長(zhǎng)出大的晶體，重

復(fù)性好。

24.蛋白質(zhì)翻譯后修飾有哪些方式？

細(xì)胞中幾乎全部的蛋白質(zhì)在從核糖體合成后都有化學(xué)上的變更，這些變更可能變更蛋白質(zhì)的活性、壽命（lifespan）或

細(xì)胞定位。

?化學(xué)修飾

①乙?；鹤钇毡榈幕瘜W(xué)修飾（80%的蛋白），多肽鏈N-端乙酰化

②磷酸化：Ser、Thr和Tyr側(cè)鏈

a.通過(guò)蛋白質(zhì)磷酸化激酶將ATP的磷酸基轉(zhuǎn)移到蛋白的特定位點(diǎn)上的過(guò)程。

b.大部分細(xì)胞過(guò)程事實(shí)上是被可逆的蛋白磷酸化所調(diào)控的。

c.至少有30%的蛋白被磷酸化修飾。

d.磷酸化的作用位點(diǎn)為蛋白上的Ser,Thr,Tyr殘基。

f.在磷酸化調(diào)整過(guò)程中，細(xì)胞的形態(tài)和功能都發(fā)生變更。

g.可逆的磷酸化過(guò)程幾乎涉及全部的生理及病理過(guò)程，如細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、腫瘤發(fā)生、新陳代謝、神經(jīng)活動(dòng)、肌肉收縮以

及細(xì)胞的增殖、發(fā)育和分化等。

③糖基化：Asn、Ser和Thr側(cè)鏈

a.蛋白質(zhì)的糖基化是低聚糖以糖昔的形式與蛋白上特定的氨基酸殘基共價(jià)結(jié)合的過(guò)程。

b.蛋白質(zhì)糖基化可以依據(jù)氨基酸和糖的連接方式分為四類：0位糖基化、N位糖基化、C位甘露糖化以及

GPI（糖基磷脂酰肌醇錨定蛋白）錨定連接。

c.蛋白質(zhì)的糖基化影響蛋白的功能，在很多生物過(guò)程中起著重要的作用，如免疫愛(ài)護(hù)、病毒的復(fù)制、細(xì)胞

生長(zhǎng)、細(xì)胞與細(xì)胞之間的黏附、炎癥的產(chǎn)生等。

d.很多蛋白，如轉(zhuǎn)錄因子、核小孔蛋白、熱休克蛋白、RNA聚合酶H、致癌基因翻譯產(chǎn)物、酶等，都發(fā)覺(jué)

了糖基化的翻譯后修飾方式。

④泛素化：在目的蛋白質(zhì)鏈內(nèi)的Lys側(cè)鏈上加上泛素分子鏈，接著由蛋白酶體水解

a.泛素由76個(gè)氨基酸組成，高度保守，普遍存在于真核細(xì)胞內(nèi)。

b.共價(jià)結(jié)合泛素的蛋白質(zhì)能被蛋白酶體識(shí)別并降解，這是細(xì)胞內(nèi)短壽命蛋白和一些異樣蛋白降解的普遍

途徑。

c.與消化道內(nèi)進(jìn)行的蛋白質(zhì)水解不同，整個(gè)水解過(guò)程須要能量參與。

d.泛素標(biāo)簽具有多功能性。比如：

導(dǎo)致細(xì)胞的紊亂和細(xì)胞凋亡

細(xì)胞器的生物合成

新蛋白生成

蛋白質(zhì)輸運(yùn)

泛素化還可以影響蛋白質(zhì)細(xì)胞內(nèi)定位、影響DNA修復(fù)及轉(zhuǎn)錄調(diào)控。

⑤膜蛋白末端或其旁邊加上長(zhǎng)的脂鏈基團(tuán)

a.脂肪酰錨定蛋白

b.異戊二烯基錨定膜蛋白

25.什么是分子伴侶蛋白？P11

定義：一組從細(xì)菌到人廣泛存在的蛋白質(zhì)，非共價(jià)地與新生肽鏈和解折疊的蛋白質(zhì)肽鏈結(jié)合，并幫助它們折疊和轉(zhuǎn)運(yùn),

通常不參與靶蛋白的生理功能，大都具備ATPase活性，與目的蛋白的結(jié)合依靠ATP的水解。

分子伴侶是細(xì)胞中一大類蛋白質(zhì)，是由不相關(guān)的蛋白質(zhì)組成的一個(gè)家系，它們介導(dǎo)其它蛋白質(zhì)的正確裝配，但自己不成

為最終功能結(jié)構(gòu)中的組分。分子伴侶的概念有三個(gè)特點(diǎn)：

①凡具有這種功能的蛋白，都稱為分子伴侶,盡管是完全不同的蛋白質(zhì)；

②作用機(jī)理是不清晰的,故用了“介導(dǎo)”二字，以模糊其辭，“幫助”二字可理解為:通過(guò)催化的或非催化的方式，加速或減

緩組裝的過(guò)程，傳遞組裝所須要的空間信息,也可能抑制組裝過(guò)程中不正確的副反應(yīng)。

③分子伴侶肯定不是最終組裝完成的結(jié)構(gòu)的組成部分，但不肯定是一個(gè)分別的實(shí)體。如一些蛋白水解酶的前序列，以及一

些核糖核蛋白體的加工前的部分,若具分子伴侶的作用，也稱為分子伴侶。組裝的涵意比較廣，主要指:幫助新生肽的折疊、

幫助新生肽成熟為活性蛋白、幫助蛋白質(zhì)跨膜定位、亞基組裝等。

26.什么是固有無(wú)結(jié)構(gòu)蛋白？P59

是指生理?xiàng)l件下缺乏剛性折疊結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)松散，肽鏈呈無(wú)規(guī)卷曲構(gòu)象，但卻具有明確功能的蛋白質(zhì)。但這類蛋白不能

行使酶等具有剛性結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)所具有的功能。固有無(wú)序化不僅指一種具體的蛋白，也指一種蛋白質(zhì)中的無(wú)序化區(qū)域

(nativelyunfoldeddomain,NUD),其結(jié)構(gòu)是多種動(dòng)態(tài)互變構(gòu)象的集合。總體而言，此類蛋白質(zhì)或區(qū)域的氨基酸殘基組成

中親水氨基酸比例含量上升，疏水氨基酸含量降低。又稱為自然無(wú)折疊蛋白質(zhì)(nativelyunfoldedprotein,NUP)或固有無(wú)

序化蛋白(intrinsicallydisorderedprotein,IDP)o

固有無(wú)序化蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能特點(diǎn)：

>是結(jié)構(gòu)松散，肽鏈以伸展的狀態(tài)存在

>氨基酸組成上總體而言：此類蛋白質(zhì)中的親水氨基酸比例含量上升，疏水氨基酸含量降低

固有無(wú)序化蛋白質(zhì)/區(qū)域的功能

>固有無(wú)序化蛋白質(zhì)/區(qū)域的功能可能歸屬于2個(gè)方面，但是它們不能行使酶等具有剛性結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)具有的功能。

>固有無(wú)序化蛋白質(zhì)多數(shù)是非管家蛋白質(zhì)，起調(diào)控作用，因此：可稱為“管家”的“助手”。

>固有無(wú)序化在分子識(shí)別方面重要功能

>具有通過(guò)調(diào)控結(jié)構(gòu)傾向而兼?zhèn)涓咛禺愋耘c低親和力的特征，通過(guò)變更合適結(jié)合位置的結(jié)構(gòu)可與多個(gè)分子結(jié)合，引

導(dǎo)：“一”對(duì)“多”的信號(hào)傳導(dǎo)通路多個(gè)不同序列可預(yù)知結(jié)合，具有結(jié)合共同性。

2024年高級(jí)生化酶學(xué)復(fù)習(xí)題

(感謝酶組同學(xué)：李正鵬、李小曼、劉晴、張鳳、邵莉萍、趙峰、丁慶倩、肖艷青、董榮榮、孫先花、屈亞芳、邱海

陽(yáng)的共同努力，感謝大家！)

一、名詞說(shuō)明：

1.酶的活性中心(activecenter)：是酶分子上干脆與底物結(jié)合，并進(jìn)行催化作用的部位。

2.酶催化作用的專一性：專一性是區(qū)分底物分子與底物類似物分子的實(shí)力。反應(yīng)的專一性保證了產(chǎn)物的純度。

3.別構(gòu)酶:是與代謝調(diào)整有關(guān)的酶，大多數(shù)處于代謝的關(guān)鍵位置。本身的活性也受到嚴(yán)格的調(diào)整。是以構(gòu)想變更影響催

化活性的酶。別構(gòu)酶都是寡聚酶。

4.酶的化學(xué)本質(zhì)：①酶是具有催化活性的蛋白質(zhì)。②核酶是具有催化活性的RNA。

5.核酶酶活力：核酶(ribozyme)是具有催化功能的RNA分子，是生物催化劑，可降解特異的mRNA序列。核酶又稱核

酸類酶、酶RNA、核酶類酶RNA。核酶酶活力指核酶催化肯定化學(xué)反應(yīng)的實(shí)力。

6.酶活力單位：1個(gè)酶活力單位，是指在特定條件下，在Imin內(nèi)轉(zhuǎn)化1Nmol底物的酶量，或是轉(zhuǎn)化1口mol底物的有

關(guān)基團(tuán)的酶量。1IU=1umol,min-l

7.酶的比活力：酶的比活力Specificactivity是指單位重量的蛋白質(zhì)中所具有酶的活力單位數(shù)，反映了酶的純度。

單位：U/mg

8.酶的活性中心：酶的活性中心activecenter是酶分子上干脆與底物結(jié)合，并進(jìn)行催化作用的部位。包括結(jié)合部位

和催化部位。結(jié)合部位：酶與底物結(jié)合的部位，確定酶的專一性；催化部位：參與催化的部位，確定酶的催化實(shí)力。

9.活化能：反應(yīng)物從基態(tài)達(dá)到過(guò)渡態(tài)所需的能量

10.酶原激活：從酶無(wú)活性的前體轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘拿傅倪^(guò)程，這個(gè)過(guò)程是不行逆的。

11.共價(jià)催化：酶與底物形成短暫的共價(jià)鍵，穩(wěn)定了過(guò)渡態(tài)復(fù)合物，降低了反應(yīng)的活化能，加快反應(yīng)速度，稱為酶的共

價(jià)催化。包括親核催化和親電催化。

12鄰近效應(yīng)：由于酶與底物的結(jié)合，使分子間的反應(yīng)成為分子內(nèi)的反應(yīng)，有效濃度相對(duì)提高的效應(yīng)。

13.定向效應(yīng)：應(yīng)物與反應(yīng)物，酶與反應(yīng)物間正確取位的效應(yīng)。

14.誘導(dǎo)酶：在細(xì)胞中加入特定的誘導(dǎo)物后，誘導(dǎo)產(chǎn)生的酶。

15.共價(jià)調(diào)整酶：能在兩種不同的酶的催化下發(fā)生可逆共價(jià)修飾，使其在有活性形式和無(wú)活性形式之間相互轉(zhuǎn)變，從而

調(diào)整酶活性。磷酸化是可逆共價(jià)修飾中最常見(jiàn)的類型。

16.核酶(ribozyme)是具有催化活性的RNA,其化學(xué)本質(zhì)是核糖核酸(RNA),卻具有酶的催化功能。

17.米氏常數(shù)：(KM),酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度，是探討酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)最重要的常數(shù)

18.同工酶：催化的化學(xué)反應(yīng)相同；酶蛋白本身的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成不同，亞基組成不同，氨基酸組成不同，理化性質(zhì)

和免疫性能不同。

19.別構(gòu)效應(yīng):調(diào)整物與酶的別構(gòu)中心結(jié)合后，引起酶蛋白構(gòu)象的變更，影響酶的活性中心與底物結(jié)合，從而調(diào)整酶促

反應(yīng)的速度及代謝過(guò)程。

二、簡(jiǎn)答題：

1.酶的結(jié)構(gòu)組成：

絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)

(1)具有蛋白質(zhì)的化學(xué)組成；

(2)具有一、二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)；

(3)具有蛋白質(zhì)的各種性質(zhì)；

(4)具有活性中心。

依據(jù)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可分為：?jiǎn)误w酶：只含一條多肽鏈。

寡聚酶：含有2條或2條以上的多肽鏈。

多酶體系：幾種酶比此嵌合形成的體系

依據(jù)酶的化學(xué)組成又可分為單成分酶和雙成分酶

2.誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)：

1）酶與底物在相互作用過(guò)程中，底物誘導(dǎo)酶活性中心發(fā)生構(gòu)象變更，

2）底物分子中的敏感鍵產(chǎn)生張力并“變形”。

"誘導(dǎo)契合”學(xué)說(shuō)指出，酶并不是事先就以一種與底物互補(bǔ)的形態(tài)存在,而是在受到誘導(dǎo)之后才形成互補(bǔ)的形態(tài)。底物一

旦結(jié)合上去,就能誘導(dǎo)酶蛋白的構(gòu)像發(fā)生相應(yīng)的變更,從而使酶和底物契合而形成酶-底物絡(luò)合物，并引起底物發(fā)生反

應(yīng)。

3.酶催化作用的機(jī)理：

酶能短暫地與反應(yīng)物結(jié)合形成過(guò)渡態(tài)，從而降低了活化能，從而加速反應(yīng)。但

酶降低反應(yīng)活化能的關(guān)鍵緣由是過(guò)渡態(tài)穩(wěn)定作用。

4.酶降低反應(yīng)活化能的緣由

（一）酶與底物的結(jié)合

1）、酶與底物的結(jié)合有鄰近效應(yīng)與定向效應(yīng)鄰近效應(yīng)是由于酶與底物的結(jié)合，使分子間的反應(yīng)成為分子內(nèi)的反應(yīng)，

有效濃度相對(duì)提高的效應(yīng)。定向反應(yīng)是反應(yīng)物與反應(yīng)物，酶與反應(yīng)物間正確取位的效應(yīng)。

2）、酶與底物間的弱相互作用是降低反應(yīng)分子的自由度，幫助底物擺脫水的束縛，誘導(dǎo)酶分子的構(gòu)象發(fā)生變更，補(bǔ)償

底物變形所需的能量。在底物與酶結(jié)合的過(guò)程中，釋放了部分有序的水分子，增加了燧。有利于底物分子與酶分子形

成氫鍵和離子鍵。

3）、酶活性中心的疏水微環(huán)境酶在活性部位內(nèi)形成一個(gè)疏水的微環(huán)境，有利于中間產(chǎn)物的生成和穩(wěn)定。少數(shù)極性的

或可離子化的氨基酸殘基在疏水環(huán)境中催化反應(yīng)。

（二）酶對(duì)底物的催化

1）酸堿催化：質(zhì)子供體和質(zhì)子受體間的催化反應(yīng)。功能基團(tuán)的解離常數(shù)和供應(yīng)或接受質(zhì)子的速度是影響酸堿催化的因

素。

2）共價(jià)催化：酶與底物形成短暫的共價(jià)鍵，穩(wěn)定了過(guò)渡態(tài)復(fù)合物，降低了反應(yīng)的活化能，加快反應(yīng)速度，稱為酶的共

價(jià)催化，包括親核催化和親電催化。親核催化是酶分子中具有非共用電子對(duì)的親核基團(tuán)攻擊缺少電子的，具有部分正

電性的原子，形成短暫的共價(jià)鍵，穩(wěn)定了過(guò)渡態(tài)中間產(chǎn)物。親電催化是酶蛋白分子中的親電基團(tuán)攻擊底物分子中富含

電子的原子或帶部分負(fù)電荷的原子，形成共價(jià)鍵，穩(wěn)定了過(guò)渡態(tài)中間產(chǎn)物。

3）金屬離子催化金屬激活酶：金屬離子與酶結(jié)合不緊，金屬離子與酶的催化效率有關(guān)。

金屬酶：金屬離子與酶結(jié)合很緊，金屬離子與酶的催化活性有關(guān)。

（三）酶通常運(yùn)用幾種催化機(jī)制綜合作用

5.酶的分類與命名

（一）酶的分類命名包括習(xí)慣命名法和國(guó)際系統(tǒng)命名法。

（1）習(xí)慣命名法：

1.一般采納底物而命名：如蛋白水解酶等；對(duì)水解酶類，只要底物名稱即可，如蔗糖酶、蛋白酶等。

2.依據(jù)其催化反應(yīng)的性質(zhì)來(lái)命名：如水解酶、轉(zhuǎn)氨酶等。

3.結(jié)合1、2的命名：如琥珀酸脫氫酶、乳酸脫氫酶、磷酸己糖異構(gòu)酶等

（2）國(guó)際系統(tǒng)命名法，每種酶都有一個(gè)系統(tǒng)名稱和習(xí)慣名稱，分類編號(hào)方案如下：

1.氧化還原酶類：催化氧化還原反應(yīng)

2.轉(zhuǎn)移酶類：催化功能基團(tuán)的轉(zhuǎn)移反應(yīng)

3.水解酶類：催化水解反應(yīng)

4.裂合酶類：催化從底物上移去一個(gè)基團(tuán)從而形成雙鍵的反應(yīng)及逆反應(yīng)

5.異構(gòu)酶類：催化各種同分異構(gòu)體間的相互轉(zhuǎn)變

6.連接酶類：催化一切必需與ATP分解相偶聯(lián)，并由兩種物質(zhì)合成一種物質(zhì)的反應(yīng)。

（二）國(guó)際分類編號(hào)方案

第一個(gè)數(shù)字：酶的類別

其次個(gè)數(shù)字：酶的亞類

第三個(gè)數(shù)字：酶的亞-亞類

第四個(gè)數(shù)字：酶在亞-亞類中的排序

編號(hào)前冠以EC,是國(guó)際酶學(xué)會(huì)縮寫

6.酶的化學(xué)本質(zhì)以及與一般催化劑的共性和特性

答：化學(xué)本質(zhì)：酶是活細(xì)胞合成的生物催化劑，絕大多數(shù)的酶是具有催化活性的蛋白質(zhì)，有些RNA也具有催化活性。

酶與其它催化劑的共性：

(1)催化效率高

(2)只改變更學(xué)反應(yīng)的速度，不改變更學(xué)反應(yīng)的平衡

(3)降低反應(yīng)所需的活化能

酶作為催化劑的特性

(1)比非酶催化劑效率高

(2)作用條件溫柔

(3)具有高度專一性

7.酶作用的專一性的類型有哪些

專一性是酶區(qū)分底物分子與底物類似物分子的實(shí)力。反應(yīng)的專一性保證了產(chǎn)物的純度(幾乎可以達(dá)到100冊(cè)。

類型有如下：

1、結(jié)構(gòu)專一性(非立體化學(xué)專一性)：

鍵專一性：外切核酸酶

基團(tuán)專一性：a-D-葡萄糖甘酶

肯定專一性：06-甲基鳥喋吟轉(zhuǎn)甲基酶

2、立體異構(gòu)專一性：

旋光異構(gòu)專一性

幾何異構(gòu)專一性

光學(xué)異構(gòu)專一性

8.酶作用的專一性假說(shuō)一一誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)

酶與底物在相互作用過(guò)程中，底物誘導(dǎo)酶活性中心發(fā)生構(gòu)象變更，底物分子中的敏感鍵產(chǎn)生張力并“變形”。

誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)認(rèn)為酶表面并沒(méi)有一種與底物互補(bǔ)的固定形態(tài)，而是在酶與底物的相互作用過(guò)程中，底物誘導(dǎo)酶活性中

心發(fā)生構(gòu)象變更，從而使酶和底物契合而形成酶-底物絡(luò)合物，并引起底物發(fā)生反應(yīng)。

9.酶活性中心的定義、組成/結(jié)構(gòu)、共同特征

酶的活性中心定義：是指酶分子上干脆與底物結(jié)合，并進(jìn)行催化作用的部位。

包括：結(jié)合部位：酶與底物結(jié)合的部位，確定酶的專一性。

催化部位：參與催化的部位，確定酶的催化實(shí)力。

酶活性中心的組成：

(1)單成分酶的活性中心由酶蛋白上的少數(shù)幾個(gè)氨基酸組成。

雙成分酶中，除了酶蛋白上的幾個(gè)氨基酸，輔基或輔酶分子上的某一部分往往也參與活性中心的組成。

活性中心的基團(tuán)都是必需基團(tuán)。

酶活性中心的共同特征：

(1)活性中心只占酶分子中很小的一部分

(2)活性中心具有三維結(jié)構(gòu)，多肽鏈的盤繞折疊使得這些氨基酸殘基得以在空間上接近，并形成適當(dāng)?shù)娜S結(jié)構(gòu)。

(3)活性中心由疏水氨基酸形成口袋，極性氨基酸參與反應(yīng)。

(4)底物靠弱鍵與酶結(jié)合

(5)活性中心的氨基酸殘基在一級(jí)結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠(yuǎn)，甚至不在一條多肽鏈上。

10.過(guò)渡態(tài)學(xué)說(shuō)是什么？

答：“過(guò)渡態(tài)”是底物分子被激活的不穩(wěn)定態(tài)，不同于反應(yīng)中間物，它具有最高能量，又處在一個(gè)短暫的分子瞬間。

過(guò)渡態(tài)出現(xiàn)在反應(yīng)物的化學(xué)鍵處于即將生成或斷裂的過(guò)程中，能生成產(chǎn)物或再返回生成反應(yīng)物。酶能短暫地與反應(yīng)物

結(jié)合形成過(guò)渡態(tài)，從而降低了活化能，但不變更反應(yīng)的AG。

過(guò)渡態(tài)學(xué)說(shuō)是指反應(yīng)中，酶E與底物S形成不穩(wěn)定的過(guò)渡態(tài)ES*復(fù)合物,ES*再分解成產(chǎn)物P和酶E,即E+S=ES*一

E+P

IL酶降低反應(yīng)活化能的緣由：

一.酶降低反應(yīng)活化能的關(guān)鍵緣由是過(guò)渡態(tài)穩(wěn)定作用

(1)一個(gè)酶的活性中心應(yīng)當(dāng)在形態(tài)和化學(xué)性質(zhì)上與底物的過(guò)渡態(tài)互補(bǔ)。

(2)酶與底物之間的最多、最強(qiáng)的反應(yīng)只能發(fā)生在ESX中。

(3)全部能夠穩(wěn)定ES：[的因素都能夠加速反應(yīng)。

⑷削減的活化能(X)實(shí)質(zhì)是額外能量的補(bǔ)充。其中：

大部分來(lái)自于酶與底物的特異結(jié)合、定向所產(chǎn)生的能量；少部分來(lái)自于各種催化作用。

二.酶降低反應(yīng)活化能的緣由

(1)酶與底物的結(jié)合:鄰近效應(yīng)與定向效應(yīng);酶與底物間的弱相互作用

(2)酶活性中心的疏水微環(huán)境

(3)酶對(duì)底物的催化

酸堿催化

共價(jià)催化

金屬離子催化

(4)酶通常運(yùn)用幾種催化機(jī)制

12.米氏方程的應(yīng)用及意義(應(yīng)用題)

意義：

(1)酶的特征常數(shù)：只與酶的性質(zhì)有關(guān)。

(2)推斷酶活性中心的性質(zhì)：近似表現(xiàn)酶與底物的親和力；酶的專一性、最適底物。

可以利用米氏方程計(jì)算出KM(米氏常數(shù))；Vmax(最大反應(yīng)速度)；kcat(酶的轉(zhuǎn)換數(shù))kcat/KM(酶催化效

率的度量)，為實(shí)際的生產(chǎn)和生活供應(yīng)理論和實(shí)踐的依據(jù)。

三種題型

(1)假如要求反應(yīng)速度v達(dá)到Vmax的99%,其底物濃度應(yīng)為：

v=Vmax[S]/(KM+[S])

99%Vmax=Vmax[S]/(KM+[S])

99%X(KM+[S])=[S]

[S]=99KM

(2)已知某個(gè)酶的[S]=3KM,求反應(yīng)速度v相當(dāng)于Vmax的百分率。

v=Vmax[S]/(KM+[S])

v=Vmax?3KM/(KM+3KM)

v=%Vmax

v=75%Vmax

(3)一個(gè)酶促反應(yīng)中，反應(yīng)速度與底物濃度的值如下：

[S](mmol?L-1):2.03.35.010.0

v(mmol?L_1min-1):2.53.13.64.2

(1)請(qǐng)用雙倒數(shù)作圖法計(jì)算KM和Vmax并畫圖。

(2)假如酶的濃度為4X10-5mmol?LT,請(qǐng)計(jì)算kcat(提示：kcat是每秒每個(gè)活性中心的反應(yīng)速度，單位是sT)。

1/[S]:0.500.300.200.10

1/v:0.400.320.280.24

KM=2.0mmol

Vmax=5.0mmol-lmin_1

kcat=Vmax4-[E]

=5.0mmol-lmin-14-4X10-5mmol,L-1

=2X103s-1

13.溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響及緣由

1）最適溫度酶的活性最高；將酶促反應(yīng)速度最大的某一溫度范圍,稱為酶的最適溫度。

2）化學(xué)反應(yīng)的速度隨溫度增高而加快，但大部分酶是蛋白質(zhì)，可隨溫度的上升而變性。在溫度較低時(shí)，酶活性較低,

反應(yīng)速度隨溫度上升而加快。但溫度超過(guò)肯定范圍后，酶受熱變性的因素占優(yōu)勢(shì)，反應(yīng)速度反而隨溫度上升而減慢。

到上限溫度時(shí)將變性失活，不具有催化活性。即溫度上升使酶促反應(yīng)速度加快。但是：溫度上升也可使酶逐步變性。

以溫度對(duì)反應(yīng)速度v作圖，曲線呈“鐘型”。

14.pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響及緣由

影響：某一pH值時(shí)，反應(yīng)具有最大速度，此pH稱為酶的最適pH

緣由：

1）pH影響酶蛋白氨基酸側(cè)鏈的解離。

2）過(guò)酸、過(guò)堿影響酶蛋白的構(gòu)象。

3）pH影響底物的解離。但是這種狀況比較少見(jiàn)。

以pH對(duì)反應(yīng)速度v作圖，曲線呈“鐘型

246810

pH

15.試比較酶的活性中心中抑制作用類型（可作圖表說(shuō)明）

三種抑制作用的比較

抑制作用類型VmaxKM

無(wú)抑制劑VmaxKM

競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用不變?cè)黾?/p>

非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用降低不變

反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用降低降低

抑制作用是指使酶活性下降，但不引起酶蛋白變性的作用。抑制作用分為可逆抑制作用和不行逆抑制作用兩種類型。

依據(jù)引起抑制作用的物質(zhì)即抑制劑的特征將可逆抑制作用分為競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用和反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作

用。

（1）可逆抑制作用指抑制劑與酶的結(jié)合是非共價(jià)結(jié)合，是可逆的，可用透析法除去來(lái)復(fù)原酶的活性。

①競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用

抑制劑與底物的結(jié)構(gòu)類似，二者都可以與酶的活性中心結(jié)合，但不能同時(shí)結(jié)合，即二者競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心。抑制原理

是抑制劑與酶可逆地結(jié)合形成EI復(fù)合物，但不能分解為E和P。

②非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用

抑制劑和底物在不同的部位與酶結(jié)合，二者并不相互影響。抑制原理是形成的ESI復(fù)合物不能分解為產(chǎn)物

③反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用

這類抑制劑不能與游離的酶結(jié)合，只能與ES復(fù)合物結(jié)合。抑制原理是形成的ESI復(fù)合物不能分解為產(chǎn)物。

(2)不行逆抑制作用指抑制劑常以共價(jià)鍵與酶蛋白中的某些基團(tuán)結(jié)合，使酶失活，不能用透析、超濾等物理方法除去

以復(fù)原酶的活性。常用不行逆抑制劑有有機(jī)磷化合物、有機(jī)汞、有機(jī)碎化合物、氟化物以及烷化劑等。

16.別構(gòu)酶的特點(diǎn)及作用機(jī)理

特點(diǎn)：(1)別構(gòu)酶都寡聚酶，分子中包括活性中心和別構(gòu)中心。二者可位于同一亞基，也可位于不同亞基

(2)具有R、T兩種構(gòu)象；R型對(duì)底物親和力高；T型對(duì)底物親和力低。

(3)別構(gòu)酶具有別構(gòu)效應(yīng)，通過(guò)酶分子本身的構(gòu)象變更來(lái)變更酶的活性。

(4)別構(gòu)酶動(dòng)力學(xué)曲線呈“S”形。

(5)是與代謝調(diào)整有關(guān)的酶，大多處于代謝的關(guān)鍵位置。

(6)本身的活性也受到嚴(yán)格的調(diào)整。

作用機(jī)理：調(diào)整物與酶的別構(gòu)中心結(jié)合后，引起酶蛋白構(gòu)象的變更，影響酶的活性中心與底物結(jié)合，從而調(diào)整酶促反

應(yīng)的速度及代謝過(guò)程。

(1)序變模型：別構(gòu)酶的構(gòu)象是以序變方式進(jìn)行的，當(dāng)配體不存在時(shí)，別構(gòu)酶只存在“T”構(gòu)像，當(dāng)配體與一個(gè)亞基

結(jié)合，可引起該亞基構(gòu)象發(fā)生變更。這個(gè)亞基一配體復(fù)合體又能使鄰近亞基易于發(fā)生同樣的構(gòu)象變更，即夠影響相鄰

亞基對(duì)下一個(gè)配體的親和力。當(dāng)其次個(gè)配體結(jié)合后，又可導(dǎo)致第三個(gè)亞基發(fā)生類似變更，如此依次傳遞，直至最終全

部的亞基都處于相同的構(gòu)象。

(2)齊變模型：主見(jiàn)別構(gòu)酶全部的亞基或者全部是堅(jiān)實(shí)緊密的，不利于結(jié)合底物的“T”狀態(tài)，或者全部是松散的，

利于結(jié)合底物的“R”狀態(tài)。這兩種狀態(tài)間的轉(zhuǎn)變對(duì)每個(gè)亞基都是同步的，齊步發(fā)生的，“T”狀態(tài)中的亞基的排列是

對(duì)稱的，變?yōu)镽狀態(tài)后，蛋白亞基的排列仍舊是對(duì)稱的。

2024年高級(jí)生化糖學(xué)復(fù)習(xí)題

（感謝糖組同學(xué)：張宇薇、王帥、張琳、季超、張宇、劉靖、白金瑞的共同努力，感謝大家?。?/p>

（注：有工劃線的內(nèi)容為老師上課解答內(nèi)容，其他內(nèi)容為小組成員補(bǔ)充）

1.糖綴合物：糖與蛋白質(zhì)或脂類共價(jià)結(jié)合形成的一類化合物，包括：糖蛋白、糖脂、GPI融合蛋白。

2.寡糖素：寡糖素通常是指植物或微生物細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)多糖水解產(chǎn)生的,有生理活性的寡聚糖或其混合物。可以誘導(dǎo)植

物產(chǎn)生防衛(wèi)反應(yīng)的活性物質(zhì)。

3.凝集素：是指一種從各種植物，無(wú)脊椎動(dòng)物和高等動(dòng)物中提純的糖蛋白或結(jié)合糖的蛋白，能凝集紅血球（含血型物

質(zhì)），故名凝集素。是一類識(shí)別于糖的蛋白質(zhì)。

4.糖蛋白：糖與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合形成的一類化合物,幾乎全部的真核生物分泌蛋白和膜蛋白都是糖基化修飾的蛋白。

5.GPI蛋白：糖基磷脂酰肌醇蛋白，糖和脂形成的化合物，作用是把蛋白質(zhì)固定在細(xì)胞膜上。

6.蛋白聚糖：由蛋白質(zhì)與糖通過(guò)共價(jià)或非共價(jià)鍵結(jié)合而成的一類大分子。基本單元是糖氨聚糖（glycosaminoglycan,

GAG）。

7.Tunicamycin（衣霉素）：特異抑制劑，阻抑N-糖鏈合成的第一步，也就是說(shuō)N-乙?；咸烟羌由隙喙酱嫉哪且徊健?/p>

可抑制具有被膜（envelope,含糖蛋白）的病毒的繁殖。作用機(jī)理是抑制合成糖蛋白糖鏈必需的擬脂（多菇醇，dolichol）

中間產(chǎn)物的生成。

8.糖昔酶：是一類水解糖昔鍵的水解酶，作用于各種糖昔或寡糖上。

9.糖基轉(zhuǎn)移酶：是一類將核昔糖（eg：UDP-葡萄糖GDP-半乳糖）或是脂連接糖上的單糖轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)（eg：絲氨酸天

冬氨酸等形成0糖鏈或N-糖鏈）或其他糖鏈等受體上的一類轉(zhuǎn)移酶。

10.糖脂：是糖與脂類共價(jià)結(jié)合形成的物質(zhì)的總稱。

復(fù)習(xí)題：

1、酵母細(xì)胞中蛋白質(zhì)的GPI修飾如何介導(dǎo)蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)？

①GPI的上的供體是一個(gè)脂載體上合成的前體，當(dāng)一個(gè)蛋白翻譯完成以后，假如C端有GPI信號(hào)的蛋白，會(huì)在轉(zhuǎn)氨

酶作用下被識(shí)別，將GPI信號(hào)切除以后，剩下的C端與GPI錨相連接；

②蛋白連接到GPI錨上以后，進(jìn)行脂肪鏈的重構(gòu)，重構(gòu)以后脂肪鏈發(fā)生變更，脂的重構(gòu)導(dǎo)致GP（蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)肯定

區(qū)域聚集；

③其次位甘露糖上的磷酸乙醇胺基團(tuán)被水解，去乙醇胺修飾的甘露糖被P