高油酸花生四級(jí)種子生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程DB41-T 1927-2019

ICS65.020.01

B05

DB41

河南省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB41/T1927—2019

高油酸花生四級(jí)種子生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

2019-11-21發(fā)布2020-02-21實(shí)施

河南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

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前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉娟、徐靜、臧秀旺、郝西、張俊、鄭崢、湯豐收、齊飛艷、石磊、張忠信、

韓鎖義、郭秀璞、杜紅、王蒙、易明林、張香萍、王桂芳。

I

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高油酸花生四級(jí)種子生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高油酸花生育種家種子、原原種、原種和大田用種的四級(jí)種子生產(chǎn)要求和方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于高油酸花生四級(jí)種子生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T3543.5農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程真實(shí)性和品種純度鑒定

GB5009.168食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪酸的測定

GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

GB/T7415主要農(nóng)作物種子貯藏

GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則

NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則

NY/T855花生產(chǎn)地環(huán)境技術(shù)條件

NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則

NY/T2237植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南花生

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

高油酸花生

種子脂肪中油酸含量≥75%的花生。

3.2

四級(jí)種子

在種子生產(chǎn)中，以育種家種子為種源，運(yùn)用重復(fù)繁殖技術(shù)路線，按世代順序繁殖的育種家種子、原

原種、原種和大田用種的種子。

3.3

育種家種子

育種家育成的最初種子，具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用白色標(biāo)簽作標(biāo)記。

3.4

原原種

由育種家種子直接繁殖而來，具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用白色標(biāo)簽作標(biāo)記。

3.5

原種

1

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由原原種直接繁殖而來，具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用紫色標(biāo)簽作標(biāo)記。

3.6

大田用種

由原種繁殖用于大田生產(chǎn)的種子，具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用藍(lán)色標(biāo)簽作標(biāo)記。

4育種家種子

4.1種子來源

育種家種子。由育種者通過保種圃繁殖。

4.2地塊選擇

種子圃應(yīng)選擇地勢平坦、土層深厚、質(zhì)地疏松、富含有機(jī)質(zhì)、排灌方便、遠(yuǎn)離污染源的地塊，產(chǎn)地

環(huán)境應(yīng)符合NY/T855的要求。

育種家保種圃應(yīng)選擇上年未種過花生的田塊，且周圍50m之內(nèi)不得種其它花生品種。

4.3整地

及時(shí)耕翻，精細(xì)整地，做到上虛下實(shí)、平整無坷垃；耕地前應(yīng)施足底肥。

4.4種植

4.4.1種子發(fā)芽率測試

播種前應(yīng)進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，種子發(fā)芽率應(yīng)≥80%。

4.4.2播種期

播種期應(yīng)以連續(xù)5日土壤5cm地溫穩(wěn)定在18℃以上為宜。

4.4.3種植方式

單粒點(diǎn)播，行距35cm～40cm，株距17cm～20cm，行端設(shè)走道0.8m～1m。四周設(shè)1m～2m保護(hù)

區(qū)，保護(hù)區(qū)種植同品種同類別種子。

4.4.4田間管理

4.4.4.1施肥

每666.7m2施純氮6kg～10kg，五氧化二磷5kg～7kg，氧化鉀6kg～8kg。缺鈣地塊，每

666.7m2增施鈣肥（石膏）40kg～50kg。肥料使用應(yīng)符合NY/T496的要求。

也可隨播種隨施肥，肥料用量：三元復(fù)合肥（氮、磷、鉀：15-15-15）40kg/666.7m2～50kg/666.7

m2左右，種肥與種子分離，防止燒種。

4.4.4.2水分管理

開花下針期至飽果期應(yīng)及時(shí)旱澆澇排。灌溉用水應(yīng)符合GB5084的要求。

4.4.4.3化學(xué)調(diào)控

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高肥水田塊或有旺長趨勢的田塊，株高達(dá)到30cm～35cm時(shí)，應(yīng)及時(shí)葉面噴施植物生長延緩劑，延

緩劑應(yīng)符合NY/T1276和GB/T8321的規(guī)定。施藥后10d～15d，如果主莖仍有旺長趨勢，可再噴施一次。

4.4.4.4病蟲害防治

病蟲草害防治方法見附錄A，藥劑使用應(yīng)符合NY/T1276和GB/T8321的規(guī)定。

4.5收獲

4.5.1收獲期地溫要求

收獲期最低地溫應(yīng)不低于12℃。

4.5.2收獲要求

摘果裝袋，做到單收、單運(yùn)、單脫，種子袋內(nèi)外應(yīng)附標(biāo)簽，嚴(yán)防機(jī)械混雜。

4.6晾曬與貯藏

種子晾曬時(shí)，氣溫不低于12℃。莢果水分低于10%，單運(yùn)單貯。種子貯藏應(yīng)符合GB/T7415的要求。

4.7真實(shí)性和品種純度鑒定

4.7.1表型鑒定

4.7.1.1田間鑒定

按品種地上部的性狀典型性和地下部的莢果性狀典型性進(jìn)行鑒定，淘汰非典型單株。鑒定、淘汰應(yīng)

在苗期、開花期、收獲期等不同階段分次進(jìn)行，直至性狀典型一致。鑒定方法按NY/T2237執(zhí)行。

4.7.1.2油酸含量檢測

油酸含量測定的方法按GB5009.168的要求進(jìn)行；其油酸含量指標(biāo)應(yīng)符合高油酸花生品種指標(biāo)要求

和該品種本質(zhì)特征。

4.7.2分子鑒定

采用固定數(shù)目的單核苷酸多態(tài)性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）引物，通過與標(biāo)準(zhǔn)樣品

比較或與SNP指紋數(shù)據(jù)比對(duì)平臺(tái)比對(duì)的方式，對(duì)品種真實(shí)性進(jìn)行驗(yàn)證或身份鑒定。具體檢測方法見

附錄B。

5原原種

5.1種子來源

育種家種子。

5.2地塊選擇

繁種田周圍30m之內(nèi)不得種植其它花生品種。其它應(yīng)符合4.2的要求。

5.3整地

符合4.3的要求。

3

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5.4種植

符合4.4的要求。

5.5收獲

符合4.5的要求。

5.6晾曬和貯藏

符合4.6的要求。

5.7真實(shí)性和品種純度鑒定

符合4.7的要求。

6原種

6.1種子來源

原原種。

6.2地塊選擇

繁種田周圍30m之內(nèi)不得種植其它花生品種。其它應(yīng)符合4.2的要求。

6.3整地

符合4.3的要求。

6.4種植

單粒播種。行距30cm～35cm，株距13cm～16cm，四周設(shè)3m～5m保護(hù)區(qū)，保護(hù)區(qū)種植同品種同

類別種子。

6.5收獲

符合4.5的要求。

6.6晾曬和貯藏

符合4.6的要求。

6.7真實(shí)性和品種純度鑒定

符合4.7的要求。

7大田用種

7.1種子來源

原種。

7.2地塊選擇

4

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應(yīng)盡量選擇上年未種過花生的田塊，若只能在連作花生田繁種，該田塊上年所種花生必須為高油酸

品種。

7.3整地

符合4.3的要求。

7.4種植

播種采取穴播，行距35cm～40cm，穴距17cm～20cm，每穴兩粒。要求連片種植，一場一種或一

村一種，嚴(yán)防混雜。

7.5收獲

符合4.5的要求。

7.6晾曬和貯藏

符合4.6的要求。

7.7真實(shí)性和品種純度鑒定

符合4.7的要求。

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附錄A

（規(guī)范性附錄）

主要病蟲草害防治方法

花生主要病蟲草害防治方法見表A.1。

表A.1夏花生主要病蟲草害防治方法

種類防治對(duì)象防治時(shí)期防治方法

用80%代森錳鋅可濕性粉劑400倍液，或40%多菌靈膠懸劑1000

葉斑病和網(wǎng)斑病發(fā)病率達(dá)到5%～7%倍液，或75%百菌清可濕性粉劑600～800倍液進(jìn)行莖葉噴霧，

每667m2用藥液75kg，每隔10d左右噴1次，連噴2～3次。

每8kg～10kg種子用25%多菌靈可濕性粉劑100g拌種，或用

播種前

花生專用包衣劑包衣。

根腐病和莖腐病

每667m2用40%的多菌靈膠懸劑或70%的甲基托布津100g，兌

發(fā)病初期

病害水80kg～100kg，根部噴淋。

預(yù)防及時(shí)防治蚜蟲、葉蟬、薊馬等傳播媒介，杜絕病毒來源。

病毒病用5%的菌毒清水劑200～400倍液葉面噴霧，每667m2用藥液

發(fā)病初期

40㎏～50㎏，7d～10d噴1次，連噴2～3次。

播種前選用高抗青枯病的花生品種。

青枯病噴施72%農(nóng)用鏈霉素、新植霉素、20%噻菌銅溶液等，每667m2

發(fā)病初期

用藥液50㎏～75㎏，每7d～10d噴1次，連噴2次～3次。

播種前用辛硫磷拌種，或用花生專用包衣劑包衣。

物理防治：在田間放置黑光燈誘殺成蟲。

蠐螬化學(xué)防治：每667m2用50%辛硫磷乳油或40%毒死蜱乳油0.2kg～

6月下旬至7月中下旬

0.25kg，拌毒土撒施。

蟲害生物防治：田間撒施白僵菌或綠僵菌或Bt菌劑。

蚜蟲百株有蚜250頭左右10%高效吡蟲啉可濕性粉劑4000倍液，葉面噴施。

1.8%阿維菌素乳油2000～4000倍液或20%甲氰菊酯乳油1500～

紅蜘蛛有螨植株在5%以上2000倍液，每667m2用藥液40kg，7d～10d噴1次，連噴2～

3次。

每667m2用50%的乙草胺乳油150mL或72%的異丙甲草胺乳油

草害芽前雜草播種時(shí)

100mL～200mL，兌水50kg噴施。

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BA

附錄B

（規(guī)范性附錄）

花生品種真實(shí)性分子標(biāo)記鑒定方法

B.1引物合成

利用已遴選的14個(gè)核心SNP引物和36個(gè)擴(kuò)展SNP引物作為品種真實(shí)性驗(yàn)證和身份鑒定的檢測引物，

構(gòu)建已知品種的SNP指紋數(shù)據(jù)比對(duì)平臺(tái)。

根據(jù)真實(shí)性驗(yàn)證或身份鑒定的要求，采用序貫式方法，選定SNP引物。

SNP引物采用ULTRPAGE的方式進(jìn)行純化，將Primer_AlleleFAM（36umol/μL）、Primer_AlleleHEX

（36umol/μL）、Primer_Common（90umol/μL）三種引物溶解后按體積比1:1:1混勻?yàn)镵ASP引物Mix。

B.2DNA提取

在種子生產(chǎn)基地隨機(jī)取樣，供檢樣品為葉片或種子，采用混合樣品檢測（至少含有30個(gè)個(gè)體），先

單獨(dú)提取DNA，再取等量DNA混合。

DNA提取方法應(yīng)保證提取的DNA數(shù)量和質(zhì)量符合PCR擴(kuò)增的要求，DNA無降解，溶液的紫外光吸光

度OD260與OD280的比值宜介于1.8～2.0。

DNA提取可選CTAB法或試劑盒法。

B.3PCR擴(kuò)增

SNP反應(yīng)可以在96等不同規(guī)格孔板進(jìn)行，體系的總體積可相應(yīng)采用10μL或5μL，在板上設(shè)無模

板對(duì)照。

B.4SNP基因分型

將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用能檢測熒光信號(hào)的檢測平臺(tái)（如可以檢測FAM和HEX波長熒光的酶標(biāo)儀FLUOstar

Omega及實(shí)時(shí)定量PCR儀）進(jìn)行讀板，并根據(jù)熒光量比值進(jìn)行SNP分型。

B.5結(jié)果計(jì)算與表示

統(tǒng)計(jì)位點(diǎn)差異記錄的結(jié)果，計(jì)算差異位點(diǎn)數(shù)，核實(shí)差異位點(diǎn)的引物編號(hào)。

檢測結(jié)果用供檢樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品比較的位點(diǎn)差異數(shù)表示，檢測結(jié)果的容許差距不大于2個(gè)位點(diǎn)。對(duì)

于在容許差距范圍內(nèi)且提出有異議的樣品，可按照GB/T3543.5的規(guī)定進(jìn)行田間小區(qū)種植鑒定。

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DB41/T1927—2019

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉娟、徐靜、臧秀旺、郝西、張俊、鄭崢、湯豐收、齊飛艷、石磊、張忠信、

韓鎖義、郭秀璞、杜紅、王蒙、易明林、張香萍、王桂芳。

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DB41/T1927—2019

高油酸花生四級(jí)種子生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高油酸花生育種家種子、原原種、原種和大田用種的四級(jí)種子生產(chǎn)要求和方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于高油酸花生四級(jí)種子生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T3543.5農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程真實(shí)性和品種純度鑒定

GB5009.168食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪酸的測定

GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

GB/T7415主要農(nóng)作物種子貯藏

GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則

NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則

NY/T855花生產(chǎn)地環(huán)境技術(shù)條件

NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則

NY/T2237植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南花生

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

高油酸花生

種子脂肪中油酸含量≥75%的花生。

3.2

四級(jí)種子