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43I 2 2 2 4 6 本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定12規(guī)范性引用文件3.13.23.3通過外部觀察或其他方法確定母牛發(fā)情程度的方4.1精液品質4.2母牛5冷凍精液的貯存2冷凍精液應浸泡在液氮生物容器中貯存，液氮生物容器應符合GB/T5458有關規(guī)定。包裝好的冷凍精液由一個液氮容器轉換到另一液氮容器時，在液氮容器外停留時間不得超6.2器具準備6.3冷凍精液解凍6.4精液質量檢查輸精前，用手掏凈母牛直腸宿糞后，再用溫水6.6輸精裝槍通過母牛的外部表現(xiàn)癥狀和外生殖器官的變化判斷母牛是否發(fā)情和發(fā)情程7.2直腸檢查通過直腸檢查卵巢，觸摸卵泡發(fā)育程度，判斷發(fā)情程度及排卵時間，見附8.1.1觸摸卵泡38.1.2外部觀察法母牛接受爬跨后8h～12h是適宜輸精時間。如采用兩次輸精，第二次輸精時間為母牛接受爬跨后8.2輸精部位8.3直腸把握輸精法9妊娠檢查9.2直腸檢查9.3超聲波診斷9.4妊娠特異性糖蛋白（PAGs）診斷對配種28d后的牛采血，用檢測試劑盒（PAG-ELISA）測定PAGs，按檢測試劑盒說明4A.1玻璃器皿A.2金屬器械56用一次性采血針和5mL采血管，對配種28d～30d的母牛尾根酒精消毒采血2mL～3mL,采血管做好標記和填寫采樣單，靜置1h，3000g離心10min，離心后血清可直接用于檢測，不立即檢測的血清C.3.2用封口膜將微孔板密封以防蒸發(fā)，輕輕搖勻，在20℃的恒溫培養(yǎng)箱孵育C.3.3孵育后，去掉膜，翻轉微孔板C.3.4洗滌后，向微孔內加入檢測溶液，輕輕搖勻，隨后在20℃的恒溫培養(yǎng)箱孵育C.3.6洗滌后，再向孔內加入酶標抗體，輕
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