生物中圖版學(xué)案：第五章第二節(jié)植物種苗脫毒技術(shù)

學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精第二節(jié)植物種苗脫毒技術(shù)掌握植物種苗脫毒的基本過程。一、種苗脫毒把莖尖分生組織從感染病毒的植株上剝離，在離體條件下進(jìn)行組織培養(yǎng),從而獲得不含病毒的脫毒苗，這一過程稱為種苗脫毒.二、脫毒苗的培養(yǎng)實例1．馬鈴薯脫毒苗的培養(yǎng)（1）取材和消毒將欲脫毒的馬鈴薯塊莖催芽，剪芽并剝?nèi)ネ馊~，用自來水沖洗10min,在無菌室內(nèi)用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％的漂白粉溶液消毒后，用無菌水沖洗2～3次。（2)剝離和接種取馬鈴薯芽的尖端1～2cm，在解剖鏡下，用解剖刀小心地除去莖尖周圍的葉片組織，露出頂端圓滑的分生區(qū)，用解剖針細(xì)心剝?nèi)∷璧那o尖（約0.1～0。5cm)，接種于MS培養(yǎng)基上,切面接觸培養(yǎng)基。(3）培養(yǎng)于25℃、1500～3000lx光照下培養(yǎng)，當(dāng)長成3～4片葉的小植株時，即可移栽。2．草莓脫毒苗的培養(yǎng)3．探究切取莖尖的最佳長度在進(jìn)行種苗脫毒時，切取的莖尖越小，脫毒效果就越好，但組織培養(yǎng)的速度就越慢，越不容易成活；如果切取的莖尖大一些，組織培養(yǎng)雖容易成功，但脫毒效果卻很差。污染的預(yù)防污染就是指在組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)容器內(nèi)滋生菌斑，使培養(yǎng)材料不能正常生長發(fā)育，從而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗的現(xiàn)象。植物組織培養(yǎng)不同于扦插、分根、葉插等常規(guī)無性繁殖。由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，所以對培養(yǎng)條件的要求較高，對無菌操作的要求非常嚴(yán)格。污染有兩種類型:（1）細(xì)菌污染：菌斑呈黏液狀,界限比較明顯,一般接種后1～2天即能發(fā)現(xiàn)。主要是大腸桿菌和鏈球菌。一般是由接種人員造成的。（2）真菌污染：菌斑呈絨毛狀、絮狀，界限不明顯,伴有不同顏色的孢子,接種后3～10天才能發(fā)現(xiàn)。主要是霉菌污染，可能是植物材料滅菌不當(dāng)造成的?？梢酝ㄟ^以下措施做好預(yù)防.（1）防止外植體帶菌。①選擇好外植體采集時期和采集部位。外植體采集以春秋為宜，優(yōu)先選擇地上部分作為外植體，陰雨天勿采，晴天下午采,采前噴殺蟲劑、殺菌劑或套塑料袋。②在室內(nèi)或無菌條件下進(jìn)行預(yù)培養(yǎng).③外植體嚴(yán)格滅菌。做滅菌效果試驗，多次滅菌和交替滅菌。（2）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌。①分裝時，注射器勿與瓶接觸，培養(yǎng)基勿黏瓶口。②檢查封口膜是否有破損。③扎瓶口要位置適當(dāng)、松緊適宜。④保證滅菌時間和高壓鍋內(nèi)溫度。⑤接種工具用前徹底滅菌.⑥工作服、口罩、帽子等布質(zhì)品定期進(jìn)行濕熱滅菌。（3）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程.如一定要規(guī)范著裝，操作過程中不說話等。（4）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔.①污染瓶經(jīng)高壓滅菌后再清潔.②接種環(huán)境定期熏蒸消毒、紫外燈照射或用臭氧滅菌和消毒.③定期對培養(yǎng)室消毒、防止高溫。對外植體進(jìn)行表面消毒時,既要考慮到藥劑的消毒效果,又要考慮到植物的耐受力。不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)別對待。消毒用過的有毒藥品應(yīng)收集后統(tǒng)一交給有關(guān)專業(yè)部門處理，以免引起環(huán)境污染。一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)材料被污染,特別是真菌性污染，一定不要打開培養(yǎng)瓶。應(yīng)先將所有被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌后，再打開培養(yǎng)瓶進(jìn)行清洗.題型種苗脫毒技術(shù)【例題】甘薯種植多年后易積累病毒而導(dǎo)致品種退化。目前生產(chǎn)上采用莖尖分生組織離體培養(yǎng)的方法快速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質(zhì)和產(chǎn)量水平。這種通過分生組織離體培養(yǎng)獲得種苗的過程不涉及細(xì)胞的（）.A．有絲分裂B．分化C．減數(shù)分裂D．全能性解析：莖尖分生組織離體培養(yǎng)的基本原理是細(xì)胞的全能性，在組織培養(yǎng)過程中通過脫分化才能成為愈傷組織，又經(jīng)過再分化、細(xì)胞有絲分裂，成為具有根和芽的植物體。此過程不涉及減數(shù)分裂。答案：C1馬鈴薯利用它的塊莖進(jìn)行無性繁殖，種植的世代多了以后往往會感染病毒而減產(chǎn)，為此農(nóng)戶都希望得到無病毒的幼苗進(jìn)行種植.獲得無病毒植株的最佳辦法是（）。A．選擇優(yōu)良品種進(jìn)行雜交B．進(jìn)行遠(yuǎn)緣植物體細(xì)胞雜交C．利用芽體進(jìn)行組織培養(yǎng)D．人工誘導(dǎo)基因突變解析：馬鈴薯被植物病毒侵染后引起品質(zhì)下降,可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行脫毒。具體做法是選取含病毒最少或無病毒的植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，可獲得無病毒植株。答案：C2影響植物組織培養(yǎng)的因素包括（）。①培養(yǎng)基的配制②外植體的選?、奂に氐倪\(yùn)用④消毒⑤溫度、pH、光照A．①②③④⑤B．①②③C．①②③④D．①②③⑤解析：離體的植物組