實(shí)驗(yàn)室生物安全管理程序

實(shí)驗(yàn)室生物安全管理程序醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的特殊環(huán)境通常會造成一定程度的生物污染，包括對實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員和環(huán)境的污染，這些污染通常主要由處理污染性物質(zhì)時(shí)的操作不當(dāng)造成。針對實(shí)驗(yàn)室生物污染，采取適當(dāng)?shù)纳锇踩雷o(hù)是十分必要的。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)是指實(shí)驗(yàn)室工作人員所處理的實(shí)驗(yàn)對象含有致病的微生物的其毒素時(shí)，通過在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造，個(gè)體防護(hù)裝置，嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的工作及操作程序和規(guī)程等方面采取綜合措施，確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對象侵染，確保周圍環(huán)境不受其污染。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的內(nèi)容包括：安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝置和措施（一級防護(hù)），嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作及規(guī)程。1、目的，有效地針對科室進(jìn)行全面的生物安全管理，確保工作人員的安全。2、范圍適用于科室各專業(yè)實(shí)驗(yàn)室。注（1）、本實(shí)驗(yàn)室除HIV初篩實(shí)驗(yàn)室為二級生物實(shí)驗(yàn)室外，其他實(shí)驗(yàn)室均為一級生物實(shí)驗(yàn)室。（2）本科室成立了生物安全小組，由7人組成。3、職責(zé)3.1、科主任負(fù)責(zé)任命生物安全小組，指導(dǎo)，規(guī)范其工作。3.2、生物安全小組組長負(fù)責(zé)安全小組日常工作的安排。3.3、生物安全小組負(fù)責(zé)科室安全的具體工作。4、工作程序4.1、生物安全小組組成4.1.1、科主任指定安全小組組長4.1.2、經(jīng)年度考核，從科室成員中選拔具有高度責(zé)任心和實(shí)驗(yàn)室知識的技術(shù)骨干，由科主任命為生物安全小組安全成員。由7人組成。安全小組成員任期一年，任期中出現(xiàn)特殊情況科主任可對之罷免。4.2、實(shí)驗(yàn)室生物安全的維護(hù)和檢查4.2.1、生物安全小組制定針對安全操作和安全裝備的檢查方案，至少每年檢查一次。4.2.2、生物安全小組建立安全清單，為回顧性檢查提供資料并進(jìn)行記錄，形成《安全記錄》。4.2.3、對危險(xiǎn)品、危險(xiǎn)區(qū)進(jìn)行鑒定并加以標(biāo)識。4.2.4、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按規(guī)定及時(shí)報(bào)告所有的事件和潛在的危險(xiǎn)因素。4.2.5、安全小組應(yīng)定期對工作人員進(jìn)行安全培訓(xùn)教育，并對各種緊急情況下應(yīng)急措施進(jìn)行培訓(xùn)。4.2.6、若發(fā)生職業(yè)暴露應(yīng)及時(shí)報(bào)告科主任和生物安全小組人員。4.3、警告標(biāo)記和標(biāo)簽的建立。4.3.1、對不同危險(xiǎn)程度的實(shí)驗(yàn)工作區(qū)進(jìn)行標(biāo)識。4.3.2、對高度危險(xiǎn)區(qū)域要張貼危險(xiǎn)公告。4.3.3、裝存危險(xiǎn)物質(zhì)的容器必須貼上標(biāo)簽，其內(nèi)容應(yīng)詳細(xì)。5、安全操作規(guī)程5.1、一級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室5.1.1、在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)禁止吸煙5.1.2、禁止在實(shí)驗(yàn)室放置食物、飲料及類似的存在有潛在的從手到口的接觸途徑的其他物質(zhì)。禁止用實(shí)驗(yàn)室的冰箱（柜）儲存食物。5.1.3、處理腐蝕性或毒性物質(zhì)時(shí)必須做好防護(hù)工作。應(yīng)使用安全鏡、面罩或其他的眼睛和面部防護(hù)用品。5.1.4、在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)，病區(qū)應(yīng)穿白大衣或隔離衣，服裝應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的要求。5.1.5、應(yīng)穿著舒適，防滑并能保護(hù)整個(gè)腳面的鞋子。5.1.6、在實(shí)驗(yàn)工作區(qū)頭發(fā)不可下垂，避免與污染物質(zhì)接觸或影響實(shí)驗(yàn)操作，有此類危險(xiǎn)的植物應(yīng)避免帶入工作區(qū)。不可留長胡須。5.1.7、由實(shí)驗(yàn)工作區(qū)進(jìn)入非污染區(qū)要洗手，接觸污染物后要立即洗手。5.1.8、實(shí)驗(yàn)室禁止堆積過多的垃圾，至少應(yīng)每日清理一次。5.1.9、禁止在實(shí)驗(yàn)工作區(qū)存放個(gè)人物品。5.1.10、在實(shí)驗(yàn)室指定清潔區(qū)和非清潔區(qū)，非本室工作人員禁止進(jìn)入工作區(qū)。5.1.11、從移液器吸取液體、禁止口吸。5.1.12、按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。5.1.13、每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒。5.1.14、所有培養(yǎng)物，廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須進(jìn)行滅活，高壓滅活。需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室滅活的物品必須放在專用密閉容器內(nèi)。5.1.15、生活垃圾和醫(yī)用垃圾一定要分開裝放。5.2、二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室

我科二級生物安全實(shí)驗(yàn)室為HIV初篩實(shí)驗(yàn)室。5.2.1、與5.1.1~5.1.15相同5.2.2、實(shí)驗(yàn)室入口貼有生物危險(xiǎn)標(biāo)志，內(nèi)部顯著位置須貼上有關(guān)的生物危險(xiǎn)信息，注明危險(xiǎn)因子，生物安全級別，負(fù)責(zé)人姓名。5.2.3、禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。5.2.4、工作人員應(yīng)接受必需的免疫接種和檢測（如乙型肝炎疫苗、卡介苗），建立工作人員的健康檔案。5.2.5、必要時(shí)收集從事危險(xiǎn)性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，應(yīng)有檢測報(bào)告，如有問題及時(shí)處理。5.2.6、將生物安全程序納入標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范或生物安全手冊，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人專門保管，工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作。5.2.7、工作人員要接受有關(guān)的潛在危險(xiǎn)知識的培訓(xùn)，掌握預(yù)防職業(yè)暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)。5.2.8、盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。5.2.9、應(yīng)用一次性注射器，用過的針頭禁止折彎，剪斷，折斷，重新蓋帽，從注射器取下，禁止用手直接操作。用過的針頭、注射器必須直接分開放入放穿透的容器中，消毒浸泡。由醫(yī)院專門負(fù)責(zé)部門人員進(jìn)行處理。5.2.10、禁止用手處理破碎的玻璃器具，裝有污染針，利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。5.2.11、實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒。5.2.12、人員暴露感染性物質(zhì)時(shí)，及時(shí)向科主任或安全管理小組人員匯報(bào)，并記錄事故經(jīng)過和處理方案。6、記錄《安全記錄》6.1、實(shí)驗(yàn)室工作人員健康檔案記錄6.2、實(shí)驗(yàn)室消毒記錄6.3、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理記錄。附錄1生物安全術(shù)語與定義1、生物安全：避免危險(xiǎn)因子造成實(shí)驗(yàn)人員暴露，向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施。2、生物因子：一切微生物和生物活性物質(zhì)。3、病原體：可使人、動物或植物致病的生物因子。4、危害廢棄物：有潛在的生物危險(xiǎn)、可燃、腐蝕、有毒、放射和起破壞作用的對人、環(huán)境有害的一切廢棄物。5、氣溶膠：懸浮于氣體介質(zhì)中的粒徑一般為0.001-100微米的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。6、一級屏障：是操作者和被操作對象之間的隔離，也稱一級隔離。如生物安全帽、手套、口罩、眼鏡、個(gè)體防護(hù)裝備等。7、二級屏障：是生物安全實(shí)驗(yàn)室和外部環(huán)境的隔離，也稱二級隔離。8、生物安全實(shí)驗(yàn)室：通過防護(hù)屏障，達(dá)到生物安全要求的生物實(shí)驗(yàn)室和動物實(shí)驗(yàn)室。附錄2

微生物危害程度分級1、危害等級1（低個(gè)體危害，低群體危害）：不會導(dǎo)致健康工作者和動物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。2、危害等級2

（中等個(gè)體危害，有限群體危害）：能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者，群體，家畜或環(huán)境不會引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重致病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。3危害等級3

（高個(gè)體危害，低群體危害）：能引起人類或動物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體。4危害等級4

（高個(gè)體危害、高群體危害）：能引起人類或動物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，或動物與人，或人與動物，或動物與動物之間傳播的病原體。血常規(guī)質(zhì)控：混勻次數(shù)對質(zhì)控結(jié)果的影響一般商品化血常規(guī)質(zhì)控以血漿為基礎(chǔ)，加入人紅細(xì)胞、模擬白細(xì)胞以及血小板。往往操作人員只注重了質(zhì)控品的有效期，沒有注意過混勻次數(shù)對于血常規(guī)質(zhì)控穩(wěn)定性的影響?；靹虼螖?shù)過少會導(dǎo)致細(xì)胞無法均勻分布，混勻次數(shù)過多又會導(dǎo)致細(xì)胞破壞，尤其是紅細(xì)胞，影響質(zhì)控品的穩(wěn)定性。按照說明書規(guī)定，我們要求每次血常規(guī)質(zhì)控于室溫靜置10~15分鐘，輕柔顛倒質(zhì)控品8～10次。為了探討混勻次數(shù)對血常規(guī)質(zhì)控品穩(wěn)定性的影響，我們使用同一批次的血常規(guī)質(zhì)控品，分別顛倒混勻10次、20次、30次、40次，連續(xù)檢測5天，比較CV值的大小。案例經(jīng)過保證每日室內(nèi)質(zhì)控在控后，取同批號實(shí)驗(yàn)用血常規(guī)現(xiàn)質(zhì)控品，于室溫靜置10～15分鐘。雙手掌心相對，質(zhì)控品瓶蓋向上，將質(zhì)控品豎直向上夾于掌心。來回搓動雙手，讓質(zhì)控品在雙手間豎直滾動。持續(xù)

20～30秒，顛倒質(zhì)控品8～10次，上述整個(gè)過程切勿震蕩。實(shí)驗(yàn)共分為4組，分別重復(fù)上述過程1次、2次、3次、4次即混勻10次、20次、30次、40次。連續(xù)檢測5天，觀察每組各項(xiàng)參數(shù)CV的大小，結(jié)果見表1。發(fā)現(xiàn)其中WBCRBC以及PLT的CV增高明顯，見圖1。同時(shí)，我們也發(fā)現(xiàn)各項(xiàng)參數(shù)的值也會隨著混勻次數(shù)的增加發(fā)生改變，我們以第一組的檢測值為基準(zhǔn)，計(jì)算另外幾個(gè)分組與第一組的偏差，結(jié)果見表2。案例分析血常規(guī)質(zhì)控品由于工藝的特殊性，其基質(zhì)為人血漿，加入人紅細(xì)胞、模擬白細(xì)胞以及血小板，隨著混勻次數(shù)過多會導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生破壞，當(dāng)混勻次數(shù)超過每次40下，白細(xì)胞、紅細(xì)胞以及血小板的檢測值明顯降低，這三項(xiàng)參數(shù)的變異系數(shù)

CV也隨之增加。實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作使用血常規(guī)質(zhì)控品，往往注重的都是質(zhì)控品的有效期，忽視混勻次數(shù)，血常規(guī)質(zhì)控?zé)o法分裝，同一支質(zhì)控品在有效期