微生物和微生物學(xué)檢驗課件

19微生物和微生物學(xué)檢驗《微生物和微生物學(xué)檢驗》19微生物和微生物學(xué)檢驗緒論19微生物和微生物學(xué)檢驗一、微生物（microorganisms）：概念：一群肉眼看不見的微小生物，包括：細(xì)菌、螺旋體、立克次體、衣原體、支原體、放線菌（原核）、病毒（非細(xì)胞）、真菌（真核）。原核與真核細(xì)胞的區(qū)別：細(xì)胞核的區(qū)別19微生物和微生物學(xué)檢驗最新生物進化分類法：

古細(xì)菌：(Archaeobacteria)

嵌合進化或共生進化真細(xì)菌：真核生物：19微生物和微生物學(xué)檢驗微生物與人類的關(guān)系：（1）大多數(shù)不致病，甚至是對人、動、植物有益和必需的，如：固氮菌；釀酒、制醋、抗生素、腸道正常菌群。（2）病原微生物:pathogenicmicroorganisms19微生物和微生物學(xué)檢驗二、微生物學(xué)(microbiology)：微生物的進化分類、生命活動規(guī)律及與動植物、人類、自然相互關(guān)系。按研究對象分：細(xì)菌、病毒、真菌學(xué)按應(yīng)用領(lǐng)域分：工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)按研究方向分：基礎(chǔ)微生物、分子微生物學(xué)、微生態(tài)學(xué)等19微生物和微生物學(xué)檢驗醫(yī)學(xué)微生物學(xué)(medicalmicrobiology)：與醫(yī)學(xué)有關(guān)病原微生物的生物性狀、致病機理、免疫性及有關(guān)技術(shù)和理論的應(yīng)用。臨床微生物學(xué)(clinicalmicrobiology)：測重研究感染性疾病診斷方法，提供診斷依據(jù)和指導(dǎo)用藥。19微生物和微生物學(xué)檢驗三、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)發(fā)展簡史1、微生物學(xué)的經(jīng)驗時期：（１）釀酒、制醋、腌臘等食品生產(chǎn)、保存；（２）師道南《天愚集》：清乾隆年間，“東死鼠，西死鼠，人見死鼠如見虎。鼠死未幾日，人死如圻堵”；“三人行未十步路，忽死兩人橫截路”

（３）人痘接種法：免疫最早概念。19微生物和微生物學(xué)檢驗2．實驗微生物學(xué)時期（17世紀(jì)始）：

顯微鏡＋培養(yǎng)基（１）微生物的發(fā)現(xiàn)：列文虎克、巴斯德（發(fā)現(xiàn)微生物的作用，創(chuàng)立巴氏消毒法）、李斯特、郭霍氏（固體培養(yǎng)、染色技術(shù)）郭霍氏法則：①、②、③、④。逐漸被淘汰。新的病原確定方法：核酸確定法

（２）免疫學(xué)的興起、分離：牛痘、巴斯德（霍亂、炭疽、狂犬疫苗）、白喉抗毒素動物血清治愈白喉。（３）抗生素的發(fā)現(xiàn)：目前遇到的問題：濫用導(dǎo)致耐藥性增高19微生物和微生物學(xué)檢驗3．現(xiàn)代微生物學(xué)時期：近二、三十年（1）新病原微生物的發(fā)現(xiàn)a．傳統(tǒng)病原卷土重來；b．新型病原。（2）致病機理的深入研究a．采用新技術(shù)；b.各種致病因素的分子機理及調(diào)控。19微生物和微生物學(xué)檢驗（3）診斷技術(shù)的發(fā)展：三大標(biāo)記技術(shù)各種分子生物學(xué)技術(shù)：核酸雜交，PCR，微量化，自動化。（4）各種新型疫苗的研制傳統(tǒng)疫苗、亞單位疫苗、基因工程疫苗、DNA疫苗。（5）免疫學(xué)獨立遠(yuǎn)遠(yuǎn)超越感染免疫的范疇。19微生物和微生物學(xué)檢驗思考：（１）預(yù)測微生物學(xué)發(fā)展下一階段；（２）目前科學(xué)界研究熱點？19微生物和微生物學(xué)檢驗4．基因組微生物學(xué)（１）微生物在基因組前時代在生物學(xué)研究中的地位；（２）結(jié)構(gòu)簡單，可做為模型，模式生物；（３）在基因組時代，作為急先鋒；（４）微生物基因組的研究成功，必然極大地改變微生物學(xué)科現(xiàn)狀。因此，微生物學(xué)研究正面臨前所未有地機遇和挑戰(zhàn)。從上看出，醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的發(fā)展，也是各種技術(shù)方法的發(fā)展，也是臨床微生物學(xué)的發(fā)展歷史。19微生物和微生物學(xué)檢驗四、臨床微生物學(xué)的任務(wù)１．研究感染性疾病的病原體特征：傳統(tǒng)的病原微生物條件致病菌２．提供快速、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷；３．指導(dǎo)合理使用抗生素；目前檢驗科的主要任務(wù)。４．對醫(yī)院感染進行監(jiān)控。19微生物和微生物學(xué)檢驗五、臨微學(xué)習(xí)方法：重要性：與畢業(yè)后工作緊密相關(guān)。（１）平時注意預(yù)習(xí)、復(fù)習(xí)；（２）對內(nèi)容上，緊緊圍繞診斷，診斷又是由各種典型特性建立的方法來進行的

抓特性、去共性（３）注意新動向。19微生物和微生物學(xué)檢驗第一篇微生物學(xué)

細(xì)菌學(xué)總論19微生物和微生物學(xué)檢驗一、細(xì)菌(bacterium)的形態(tài)與結(jié)構(gòu)（一）形態(tài)：個體微小、形態(tài)各異球菌（coccus）桿菌(Bacillus)弧菌與彎曲菌螺旋菌及螺旋體不規(guī)則形。19微生物和微生物學(xué)檢驗（二）結(jié)構(gòu)：

19微生物和微生物學(xué)檢驗１．基本結(jié)構(gòu)：包括胞壁、胞膜、胞漿及核質(zhì)細(xì)胞壁：主要成分――肽聚糖。19微生物和微生物學(xué)檢驗

Ｎ－乙酰胞壁酸

聚糖骨架

β－１.4糖苷鍵

Ｇ－

Ｎ－乙酰葡糖胺四肽側(cè)鏈Ｇ＋

五肽橋（苷氨酸）Ｇ＋菌肽聚糖厚、層數(shù)多、立體狀堅固。

19微生物和微生物學(xué)檢驗圖金黃色葡萄球糖細(xì)胞細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)圖大腸桿菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)19微生物和微生物學(xué)檢驗

膜磷壁酸Ｇ＋菌細(xì)胞壁壁磷壁酸特殊結(jié)構(gòu)表面蛋白：SPA、M蛋白Ｇ－菌細(xì)胞壁磷脂特殊結(jié)構(gòu)脂蛋白

類脂Ａ：毒性部分(外膜)脂多糖（LPS，內(nèi)毒素）：

核心多糖：屬和組特異特異多糖：種和型特異19微生物和微生物學(xué)檢驗Ｇ＋和Ｇ－菌細(xì)胞壁差異：特征革蘭氏陽性菌

革蘭氏陰性菌

強度較堅韌較疏松厚度厚，20～80nm薄，5～10nm肽聚糖層數(shù)多，可達(dá)50層少，1～3層肽聚糖含量多，可占胞壁干重50～80%少，占胞壁干重10～20%磷壁酸+-外膜-+結(jié)構(gòu)三維空間（立體結(jié)構(gòu)）二維空間（平面結(jié)構(gòu)）19微生物和微生物學(xué)檢驗Ｌ型細(xì)菌：細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌。高滲培養(yǎng)基中：油煎蛋樣菌落。在臨床上注意Ｌ型帶來的漏診。19微生物和微生物學(xué)檢驗2.特殊結(jié)構(gòu)莢膜(capsule)：（１）保護作用；（２）致病作用：侵襲力；（３）免疫原性；（４）鑒別與分型。19微生物和微生物學(xué)檢驗鞭毛(flagellum)：運動器官，Ｈ抗原。19微生物和微生物學(xué)檢驗菌毛(Pilus)：（１）普通菌毛：粘附素；（２）性菌毛：１－４根，長而粗，Ｆ＋菌轉(zhuǎn)移Ｆ質(zhì)粒，耐藥及毒力質(zhì)粒。19微生物和微生物學(xué)檢驗芽胞(Spore)：不利環(huán)境中的一種抵抗形式，是休眠體而非繁殖體。19微生物和微生物學(xué)檢驗二、細(xì)菌的繁殖與新陳代謝：掌握幾個概念：１．自養(yǎng)菌、異養(yǎng)菌；２．需氧菌、專性厭氧菌、兼性厭氧菌、微需氧菌。19微生物和微生物學(xué)檢驗專性厭氧菌有氧不生長，原因有二：①厭氧菌缺乏細(xì)胞色素與細(xì)胞色素氧化酶，因此不能氧化那些氧化還原電勢較高的氧化型物質(zhì)。②厭氧菌缺乏過氧化氫酶、過氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能清除有氧環(huán)境下所產(chǎn)生的超氧離子（O2-）和過氧化氫（H2O2），因而難以存活。19微生物和微生物學(xué)檢驗３．群體細(xì)菌的生長繁殖曲線：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期19微生物和微生物學(xué)檢驗四、消毒與滅菌掌握幾個概念：消毒（Disinfection）：殺滅病原微生物的方法。滅菌（Sterilization）：殺滅物體上所有的微生物（包括病原體和非病原體的繁殖體和芽胞）的方法。無菌（Asepsis）：物體上或容器內(nèi)無活菌存在的意思。防腐（Antisepsis）：防止或抑制微生物生長繁殖的方法。19微生物和微生物學(xué)檢驗五、微生物的遺傳變異（一）遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)染色體

質(zhì)粒（plasmid）：細(xì)菌存在于染色體外的少部分（約1～2%）DNA，可決定細(xì)菌的一些生物學(xué)特性。轉(zhuǎn)位因子：插入順序、轉(zhuǎn)座子、轉(zhuǎn)座噬菌體19微生物和微生物學(xué)檢驗

質(zhì)粒的生物學(xué)性質(zhì)：1．質(zhì)粒并非細(xì)菌生存所必不可少的遺傳物質(zhì)。

2．質(zhì)粒的傳遞（轉(zhuǎn)移）是細(xì)菌遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的一個重要方式。

3．質(zhì)?？勺孕惺セ蚪?jīng)人工處理而消失。

4．質(zhì)粒可以獨立復(fù)制。

5．可有幾種質(zhì)粒同時共存在于一個細(xì)菌內(nèi)。19微生物和微生物學(xué)檢驗（二）細(xì)菌的變異現(xiàn)象形態(tài)與結(jié)構(gòu)變異培養(yǎng)特性變異毒力變異耐藥性變異19微生物和微生物學(xué)檢驗（三）細(xì)菌變異的機制突變基因的轉(zhuǎn)移和重組轉(zhuǎn)化（transformation）是受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段，通過與染色體重組，獲得了供體菌的部分遺傳特性。轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)是噬菌體為媒介，把供細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，導(dǎo)致后者基因改變的過程。接合(conjugation)是兩個通過直接接觸，在暫時的溝通中進行基因轉(zhuǎn)移的過程。19微生物和微生物學(xué)檢驗19微生物和微生物學(xué)檢驗(四)遺傳變異研究的實際意義在細(xì)菌分類上的應(yīng)用在診斷中的應(yīng)用在預(yù)防中的應(yīng)用在治療中的應(yīng)用檢查致癌物質(zhì)的作用在遺傳工程方面的應(yīng)用19微生物和微生物學(xué)檢驗六、微生物的致病性與感染（一）微生物與宿主的關(guān)系

常居菌

正常菌群過路菌（１）抵抗力下降；（２）長期化療、放療、

條件致病菌：免疫抑制劑患者；（３）外傷；

（４）菌群失調(diào)：菌群失調(diào)癥。19微生物和微生物學(xué)檢驗正常菌群的生理意義：（１）生物拮抗；（２）促進機體免疫；（３）與衰老有關(guān)：雙歧桿菌；（４）合成維生素和細(xì)菌素。19微生物和微生物學(xué)檢驗（二）細(xì)菌的致病物質(zhì)及作用：１．細(xì)菌的表面成分：參與粘附、定植和侵入；２．毒素及毒性蛋白和酶：外毒素：內(nèi)毒素：19微生物和微生物學(xué)檢驗細(xì)菌外毒素舉例細(xì)菌種類革蘭氏染色引起疾病毒素名稱毒素作用方式白喉桿菌+白喉白喉毒素壞死性霍亂弧菌-霍亂腸毒素引起小腸過度分泌液體鼠疫桿菌-鼠疫鼠疫毒素可能壞死性破傷風(fēng)桿菌+破傷風(fēng)破傷風(fēng)溶血毒素溶血性心臟毒素破傷風(fēng)痙攣毒素引起骨骼肌痙攣產(chǎn)生莢膜桿菌+

氣性壞疽α-毒素溶血性卵磷脂酶，壞死性β-毒素溶血性心臟毒素λ-毒素溶蛋白性19微生物和微生物學(xué)檢驗

外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別區(qū)別要點外毒素內(nèi)毒素存在部位