朱玉賢《現(xiàn)代分子生物學》（第5版）配套題庫【考研真題＋章節(jié)題庫】

第一部分考研真題精選4.原核生物啟動序列-10區(qū)的共有序列稱為()。[揚州大學2019研]6.Western雜交的對象是()。[揚州大學2019研]D.既是RNA,又是DNA7.DNA變性是指()。[浙江海洋大學2019研]8.下面哪一個是蛋白合成的起始密碼子()。[揚州大學2019研]9.寡聚dT-纖維素柱層析用于()。[浙江海洋大學2019研]A.從總DNA中分離純化質(zhì)粒DNAB.從總核蛋白中分離DNPC.除去雜蛋白D.從總RNA中純化mRNA10.下列關(guān)于DNA復制的說法錯誤的是()。[揚州大學2019研]B.需要DNA連接酶11.下列對蛋白質(zhì)修飾會引起蛋白降解的是()。[揚州大學2019研]B.磷酸化12.在E.coli細胞中DNA聚合酶I的作用主要是()。[浙江海洋大學2019研]B.E.coliDNA合成的起始江海洋大學2019研]14.蛋白質(zhì)生物合成的方向是()。[揚州大學2019研]A.從C→N端C.從N端和C端同時進行B.都有放射性D.都不含放射性16.遺傳密碼的主要破譯者是()。[揚州大學2019研]D.Griffth17.某DNA分子中腺嘌呤的含量為15%,則胞嘧啶的含量應(yīng)為()。[浙江海洋大學2019研]50%—15%=35%。因此答案選D。18.蛋白質(zhì)的合成場所()。[揚州大學2019研]C.細胞核D.葉綠體1.看家基因[暨南大學2019研]2.外顯子[揚州大學2019研]4.基因芯片[浙江海洋大學2019研]6.RNA甲基化[暨南大學2018研]8.無義突變[揚州大學2019研]9.斷裂基因[浙江海洋大學2019研]13.核糖體RNA[暨南大學2018研]14.翻譯[浙江海洋大學2019研]15.Intron[暨南大學2019研]16.操縱子[揚州大學2019研]17.Probe[寧波大學2019研]19.CircularRNA[暨南 20.原位雜交(ISH)[浙江海洋大學2019研]21.Tm[揚州大學2019研]22.基因治療[暨南大學2018研]23.Geneticengineering[寧波大學殊的氨酰-tRNA合成酶識別的tRNA,即在3'端接25.端粒酶[暨南大學2018研]26.基因治療[浙江海洋大學2019研]27.Ribosomalbindingsite[武漢科技大學2019研]上游約8～13核苷酸處，存在一段由4～9個29.衰減子[揚州大學2019研]30.Repressorprotein[寧波大學2019研]32.SD序列[揚州大學2019研]33.microsatelliteDNA[寧波大學2019研]34.Northernblothybr35.shRNA[暨南大學2019研]36.逆轉(zhuǎn)錄[揚州大學2019研]27.GFP[寧波大學2019研]38.復制型轉(zhuǎn)座[浙江海洋大學2019研]41.單細胞測序[暨南大學2018研]43.反式作用因子[浙江海洋大學2019研]46.表觀遺傳學[暨南大學2019研]傳學分支學科。表觀遺傳的類型有DNA修飾(如DNA甲基化)、組蛋白修飾、47.轉(zhuǎn)化[浙江海洋大學2019研]48.藍白斑篩選[暨南大學2018研]49.multigenefamily[寧50.轉(zhuǎn)錄組[暨南大學2018研]學2019研](2)蛋白質(zhì)合成(2)真核生物mRNA的特征是5'端的帽子及3'的多(A)結(jié)構(gòu)：磷酸基團并能通過其3'-OH位與下一個核苷酸的5'磷酸基團形成二酯鍵，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的起始序列為3.簡述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用?[浙江海洋大學2019研](1)信使RNA(mRNA)(2)轉(zhuǎn)運RNA(tRNA)(3)核糖體RNA(rRNA)(1)轉(zhuǎn)錄起始復合物的形成(2)反式作用因子(3)轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控(1)核糖體RNA(rRNA):(2)轉(zhuǎn)運RNA(tRNA):(5)小RNA:小RNA是一類非編碼RNA,通過與mRNA堿基互補配對來參與mRNA的可變剪切。性比僅含有3.1kb上游DNA克隆的轉(zhuǎn)錄活性大50倍，其原因是什么?[浙江海洋大學2019研]9.什么是DNA損傷?生物體DNA損傷與哪些因素有關(guān)?生物細胞有哪些機制來處理DNA損傷，并進行DNA損傷修復?[武漢科技大學2019研]11.簡述熒光定量PCR的原理及應(yīng)用。[暨南大學2019研]o會導致RNA聚合酶的暫停，破壞RNA-DNA雜合鏈5'端的正常結(jié)構(gòu)。18.典型的DNA重組實驗通常包括哪些步驟。[暨南大學2018研](1)提取供體生物的目的基因(或稱外源基因)片段和載體質(zhì)粒。20.何為DNA重組技術(shù)?其主要步驟為何?[浙江海洋大學2019研]21.何為RNA干擾?其作用機制怎樣?[暨南大學2019研]22.試述什么是SUMO及SUMO化修飾的生物學意義。[揚州大學2019研]23.RecA蛋白是怎樣調(diào)節(jié)SOS反應(yīng)?[浙江海洋大學2019研](1)當細胞內(nèi)出現(xiàn)過長的單鏈DNA時，細胞內(nèi)的RecA蛋白識別并與之結(jié)合形成一種特殊的24.簡述Sanger雙脫氧鏈終止法的原理。[武漢科技大學2019研](1)第一層折疊組裝是DNA分子圍繞著組蛋白組裝成核小體，此時DNA體積減小了6倍。(2)第二次折疊是每6個核小體盤旋為一圈，形成直徑為30nm的染色質(zhì)絲，此時致密程度增加4030.蛋白質(zhì)合成后的加工修飾內(nèi)容有哪些?[浙江海洋大學2019研]b.常見的IS都是很小的DNA片段(約1千堿基對),末端具有反向重復序列，轉(zhuǎn)座時往往復制宿主靶位點一小段(4～15堿基對)DNA,形成位于IS兩端的正向重復序列。即TnA家族，是指沒有IS的、體積龐大的轉(zhuǎn)座子(5000bp以上),帶有3個基因，兩翼帶有38bp的(4)轉(zhuǎn)座的應(yīng)用如下：3.為什么細菌的RNA聚合酶能在恰當?shù)膮^(qū)域停止轉(zhuǎn)錄?[浙江海洋大學2019研]會導致RNA聚合酶的暫停，破壞RNA-DNA雜合鏈5'端的正常結(jié)構(gòu)。a.人工合成b.互補DNA(cDNA)的克隆學2019研]7.蛋白質(zhì)合成體系主要包括哪些成分?各有何作用?(至少7種)[浙江海洋大學2019研](1)PCR和細胞內(nèi)DNA復制的相同點⑥擴增DNA的時候都會經(jīng)歷DNA雙鏈的解開(變性),寡聚核酸與單鏈DNA的結(jié)合(退火),以及DNA聚合酶開始合成DNA(延伸)的三個過程。⑤用75%冷的乙醇洗滌沉淀，4℃,7500g以下，離心5min,棄上清。(2)檢測RNA質(zhì)量的方法如下：ATGTCCGAAGTAATCGAAGAACATCTTCTCAGCGATAATTCTGATGATTCCAGCTCGGTCTAC………GGACGAACCACGAAGAGApET-28a多克隆位點如下重組蛋白C端帶His標簽。(1)酶切位點前后應(yīng)添加1～6個保護堿基，以提高限制性核酸內(nèi)切酶的切割效率。(2)His標簽位于酶切位點的下游，且靠近終止密碼子，且mRNA的翻譯方向是由N端向C端，所(3)引物長度一般在18～27bp,且與目的片段有合適的互補長度以保證引物可以順利結(jié)合。上游引物可為(5'端至3'端):下游引物可為(5'端至3'端):3.寫出原核表達實驗步驟。(1)按上述步驟提取該組織的RNA,反轉(zhuǎn)錄為cDNA。(4)將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入感受態(tài)的大腸桿菌BL21中，涂布，根據(jù)載體所攜帶的抗性標記篩選出穩(wěn)定遺傳(5)搖菌、擴大培養(yǎng)，待菌液生長到對數(shù)生長期，收集菌體，裂解、收集蛋白質(zhì)。(6)將總蛋白制備成溶液通過鎳柱，由于A蛋白攜帶有His標簽，可以被吸附在鎳柱上，然后加緩沖液將吸附在鎳柱上的A蛋白洗脫下來，即可得到A蛋白溶液。第二部分章節(jié)題庫1953年，Watson和Crick提出()。D.遺傳物質(zhì)通常是DNA而非RNA1.分子生物學2.基因復制轉(zhuǎn)錄復制轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)2.比較基因(gene)和開放閱讀框(openreadingframe,ORF)兩個概念內(nèi)涵的異同。以及在編碼片段間(外顯子)的間斷切割序列(內(nèi)含子)。開放閱讀框都被非編碼序列(即內(nèi)含子)插A.延伸溫度B.退火溫度C.熔解溫度D.降解溫度2.DNA的復性過程()。B.可以由低溫產(chǎn)生C.是磷酸二酯鍵的形成3.下面關(guān)于復制轉(zhuǎn)座的敘述中，不正確的是()。B.要求有轉(zhuǎn)座酶D.要求有解離酶C.4種dNDP【解析】合成DNA時的底物是dNTP(4種脫氧核糖核苷酸),包括dATP,dTTP,dCTP,dGTP;合成RNA時的底物是NTP(4種核糖核苷酸),包括ATP,UTP,CTP,GTP。6.生物體內(nèi)天然狀態(tài)的DNA幾乎都以()形式存在。7.下列關(guān)于雙鏈DNA堿基含量關(guān)系，錯誤的是()。B.按3'→5方向進行D.需要DNA聚合酶的作用9.在切口平移反應(yīng)中加入EcoliDNApolI的原因是()。A.啟動子B.轉(zhuǎn)座子菌Ti(tumorinducing)或Ri(rootinducing)質(zhì)粒中的一段DNA序列11.DNA受熱變性時()。D.加入互補RNA鏈冷卻可形成DNA-RNA雜交分子12.直接抑制DNA復制的抗癌藥是()13.下列可能引起移碼突變的是()。A.點突變E.插入3個或3的倍數(shù)個核苷酸【解析】移碼突變是指DNA分子由于某位點堿基的缺失或插入(不是3或3的倍數(shù)),引起閱讀框發(fā)15.(多選)引發(fā)體的組成包括()。B.一個防止DNA降解的單鏈結(jié)合蛋白16.(多選)DNA連接酶在體內(nèi)的主要作用是()。D.也可以連接RNA分子17.(多選)下述關(guān)于DNA聚合酶的描述中，哪些是錯誤的?()18.(多選)核酸變性可發(fā)生下列哪種效應(yīng)?()E.溶液黏度下降【答案】BCDE【解析】核酸變性是指在物理或化學因素的作用下，維系核酸二級結(jié)構(gòu)的氫鍵和堿基堆積力受到破壞，DNA雙鏈解旋變?yōu)閱捂湣：怂嶙冃院螅?60nm的紫外吸收明顯增高，產(chǎn)生增色效應(yīng)。同時，黏度下降、浮力密度升高、沉降速度加快，生物學功能全部或部分喪失。1.染色體中DNA與結(jié)合成復合體，并形成串珠樣的_結(jié)構(gòu)。【答案】組蛋白；核小體【解析】核小體是由DNA和組蛋白(H1、H2A、H2B、H3、H4)形成的染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)。2.DNA高級結(jié)構(gòu)的主要形式是結(jié)構(gòu)，可以分為和兩大類。【答案】超螺旋；正超螺旋；負超螺旋【解析】DNA的高級結(jié)構(gòu)是指DNA的二級、三級結(jié)構(gòu)，主要形式是超螺旋，包括正超螺旋和負超螺旋。3.DNA復制時的RNA引物是由的活性切除的?！敬鸢浮緿NA聚合酶I;5'→3'外切核酸酶4.在DNA復制和修復過程中修補大片段DNA損傷的酶為0【答案】DNA聚合酶I5.真核生物中有5種DNA聚合酶。它們是：和_?！敬鸢浮緿NA聚合酶α;DNA聚合酶β;DNA聚合酶y;DNA聚合酶8;DNA聚合酶ε【解析】DNA聚合酶是指以親代DNA為模板，催化底物dNTP分子聚合為子代DNA的一類酶。真6.DNA連接酶催化一條DNA鏈末端的和相鄰的另一條鏈末端的之間形成3'-5'真核生物DNA連接酶連接DNA的能量由_提供?！敬鸢浮?'磷酸根；3'羥基；磷酸二酯鍵；ATP【解析】DNA連接酶主要功能是將DNA分子中的5'磷酸基團同3'羥基端鏈接起來，形成磷酸二酯鍵，從而把兩段相鄰的DNA鏈連成完整的鏈，在DNA復制、修復中起著重要作用。真核生物中利用ATP提供能量，原核生物中由煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)提供能量。7.在光復活過程中，光復活酶作用于,使它復原為【答案】嘧啶二聚體；嘧啶【解析】光復活作用是一種高度專一的DNA直接修復過程，只著用于由于紫外線引起的DNA嘧啶二聚體(主要為TT),使其復原為嘧啶。8.DNA修復包括3個步驟：對DNA鏈上不正常堿基的識別與切除，對已切除區(qū)域的重新合成，對剩下切口的修補?！敬鸢浮緿NA切割酶；DNA聚合酶；DNA【解析】DNA修復是指細胞對DNA損傷后的一種反應(yīng)，包括錯配修復、光修復、切除修復、重組修復、誘導修復等。其中切除修復的步驟為：DNA切割酶對DNA鏈上不正常堿基的識別與切除、DNA聚【解析】DNA的二級結(jié)構(gòu)包括右手螺旋(如A-DNA和B-DNA)和左手螺旋(如Z-DNA)。6.基因組DNA復制時，先導鏈的引物是DNA,后隨鏈的引物是RNA。()2.復制子3.岡崎片段6.單核苷酸的多態(tài)性12.復制叉14.染色體結(jié)構(gòu)域(domainofachromosome)16.回文序列(palindrome)17.滾環(huán)復制(rollingcirclereplication)18.突變(mutation)7.簡述利用雙脫氧末端終止法(Sanger法)測定DNA一級結(jié)構(gòu)的原理。①插入序列(IS):兩端有IR,只編碼轉(zhuǎn)座酶，結(jié)果是使插入的IS兩端形成了DR或靶重復；(1)核酸的帶電荷性質(zhì)(2)核酸的高分子性質(zhì)(3)核酸的紫外吸收1.以下有關(guān)大腸桿菌轉(zhuǎn)錄的敘述，哪一項是正確的?()【解析】RNA聚合酶作用以NTP(ATP,UTP,CTP,GTP)作為底物，合成RNA鏈；需要ATP提3.已知一mRNA中有600個核苷酸，那么它的基因雙鏈中C和A總共的堿基數(shù)是()。系。根據(jù)①,該基因雙鏈中共有600個堿基對，1200個核苷酸；根據(jù)②,在該基因雙鏈中A與T的數(shù)目A.病毒單鏈負鏈RNA直接作為mRNAD.單鏈負鏈RNA病毒的基因組只編碼tRNA【解析】含有負鏈RNA的病毒(如狂犬病毒),由單鏈負鏈RNA先合成單鏈正鏈DNA,而后再轉(zhuǎn)錄D.病毒和噬菌體6.下面有關(guān)RNA編輯的描述，不正確的是()。A.改變了DNA所編碼的遺傳信息7.真核mRNA后加工的順序是()。8.用高聚脫氧胸苷酸纖維素(oligo-dT纖維素)分離純化mRNA的層析方法稱為()。D.反相層析9.下列哪種RNA的剪接需要剪接體參與?()B.放線菌素DC.鵝膏蕈堿B.絕大部分啟動子都存在一10bp處的TATA區(qū)和-35bp處的TTGACA區(qū)D.在原核生物中，-35區(qū)與一10區(qū)之間的距離大約是16～19,小于15bp或大于20bp都會降低啟動12.單鏈DNA分子5'-pCpGpGpTpA-3',能夠與下列哪一種RNA單鏈分子進行雜交?()A.回文結(jié)構(gòu)E.多聚A序列一個富含GC堿基的二重對稱區(qū)(又稱回文結(jié)構(gòu)),由這段DNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA容易形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。2.DNA的合成方向,RNA的轉(zhuǎn)錄方向,蛋白質(zhì)4.大腸桿菌RNA聚合酶的亞基組成為06.通常原核生物的終止子在終止點之前均有一個,其產(chǎn)生的RNA可形成_o7.真核生物mRNA轉(zhuǎn)錄后的成熟步驟主要包括5.真核生物的5S、18S和28SrRNA通常組成一個單位進行轉(zhuǎn)錄。()6.原核生物轉(zhuǎn)錄啟動子有3個重要部位：—10區(qū)、-35區(qū)和SD序列。1.轉(zhuǎn)錄因子2.啟動子合成的DNA鏈。可作為模板轉(zhuǎn)錄為RNA的那條鏈該鏈與轉(zhuǎn)錄的RNA堿基互補(A-U,G-C)。在轉(zhuǎn)錄過5.內(nèi)含子和外顯子6.轉(zhuǎn)錄步，轉(zhuǎn)錄是mRNA以及非編碼RNA(tRNA、rRNA等)的合成步驟。7.順式作用元件8.mRNA帽子9.核心酶13.剪接體(spliceosome)答：(1)轉(zhuǎn)錄起始階段(2)終止階段5.真核生物轉(zhuǎn)錄的前體hnRNA如何加工為成熟的mRNA?會在第6位N原子(N?)位置發(fā)生甲基化。(2)真核生物的mRNA通常具有5'端帽子和3'端poly(A)尾巴，轉(zhuǎn)錄起始前的-25bp區(qū)段多有典RNA種類簡寫生理功能核蛋白體組成蛋白質(zhì)合成模板核不均一RNA成熟mRNA的前體小核RNA參與hnRNA的剪接對基因的表達起調(diào)節(jié)作用核酶(2)增強子的類型第4章生物信息的傳遞(下)——從mRNA到蛋白質(zhì)1.下列敘述不正確的是()。2.決定tRNA攜帶的氨基酸種類的是()。因子因子的特異位點結(jié)合；保持30S亞基的穩(wěn)定性，4.在原核生物蛋白質(zhì)合成過程中，核糖體小亞基與mRN5.關(guān)于遺傳密碼的論述，哪些是不正確的?()7.下列哪個氨基酸是先以前體形式結(jié)合到多肽中，然后再進行加工的?()8.嘌呤霉素抑制蛋白質(zhì)生物合成的機制是()。D.結(jié)構(gòu)與甲硫氨酰tRNA相似，與甲硫氨酰競爭結(jié)合tRNAA.在mRNA分子的起始密碼子上游8～13個核苷酸處的順序密碼子AUG上游約8個堿基位置，幫助招募核糖體RNA,并將核糖體比對并結(jié)合到信使RNA(mRNA)10.與tRNA中的反密碼子為GCU配對的mRNA中的密碼子是()。11.蛋白質(zhì)翻譯后的修飾主要包括()。A.乙?；?2.以下關(guān)于蛋白質(zhì)翻譯的說法中，哪一項是錯誤的?()C.原核生物的30S亞基先與IF-3結(jié)合，然后與tRNA結(jié)合，最后再與mRNA結(jié)合D.真核生物mRNA的帽子結(jié)構(gòu)能促進翻譯的起始1.核糖體是合成的場所，主要存在于和,其功 ,位于肽鏈的端。起始tRNA是,它攜帶的氨基酸是。4.蛋白質(zhì)的生物合成中，每增加一個氨基酸要消耗個高能鍵。【答案】61;3;1;無義11.細胞內(nèi)存在一種稱為泛素的蛋白質(zhì)，它的主要作用是14.有六個密碼子的氨基酸為和,而僅有一個密和色氨酸(Try)只有1個密碼子外，其它氨基酸都有2～成多肽鏈中用于指導蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)移(定位)的N-末端的氨基酸序列(有時不一定在N端)。6.在蛋白質(zhì)合成中，起始合成時起始tRNA結(jié)合在核糖體的A位上。()9.葉綠體的rRNA核糖體是由16S、5S、23S、5.8S組成的。()2.SD序列莖(與TyC環(huán)聯(lián)接)和氨基酸接受莖(又稱CCA莖，因所有tRNA的分子末端均含胞苷酸(C)、胞苷酸4.遺傳密碼5.終止密碼子7.可譯框架、可讀框(ORF)8.信號肽9.移碼突變10.起始因子(原核中IF,真核中eIF)11.氨酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsyn-thetase)的核苷酸序列與轉(zhuǎn)錄生成的RNA的序列一致(在RNA中是以U取代了DNA中的13.分子伴侶(molecularchaperone)假尿嘧啶(ψ)和甲基化的嘌呤(mG,mA)等。AA-tRNA·EF-Tu·GTP復合物并與核糖體的A位點相結(jié)合(3)移位：核糖體向mRNA的3'方向移動一個密碼子，使得帶有第二個氨基酸(現(xiàn)已成為二肽)的1.為什么說“tRNA為第二遺傳密碼”?tRNA有哪些種類?各自的功能是什么?④在模板mRNA編碼區(qū)5端形成核糖體-mRNA-起始tRNA復合物并將甲酰甲硫氨酸(原核)或甲硫氨酸(真核)放入核糖體P位點。④真核生物eIF種類多(10多種),而原核生物IF種類少(3種)。第5章分子生物學研究法(上)ONA、RNA及蛋白質(zhì)操作技術(shù)2.對限制性內(nèi)切核酸酶的作用，下列描述哪個不正確?()D.切割生物DNA分子4.關(guān)于感受態(tài)細胞性質(zhì)的描述，下面哪項說法不正確?()A.具有可誘導性C.具有可轉(zhuǎn)移性C.信號肽序列D.多克隆位點8.下面關(guān)于多克隆位點(multipleclonesite,MCS)的描述中，不正確的是()。9.(多選)進行重組體的篩選時，下列哪些方法說明外源基因進行了表達?()10.(多選)報告基因()。性>環(huán)狀?！敬鸢浮?;回文序列鑒定RNA分子。5.引物在基因工程中至少有4個方面的用途：T,正好與PCR產(chǎn)物上突出的A配對。 13.在切口移位標記探針時，DNaseI處理DNA的溫度應(yīng)控制在,溫度過高會使,不利2.某一內(nèi)切酶在一環(huán)狀DNA上有3個切點，用此酶切割環(huán)狀DNA可得到3個片段。()2.分子雜交3.多聚酶鏈式反應(yīng)(PCR)7.蛋白質(zhì)組學8.基因工程9.衛(wèi)星DNA11.質(zhì)粒 12.限制與修飾系統(tǒng)(restriction-mo13.細菌人工染色體文庫，BAC文庫(bacterial2.重組DNA(基因工程)的主要步驟。的RNA,留下獨特的RNA用于文庫4.什么是cDNA文庫?同基因組文庫有何差別?(2)基因組文庫與cDNA文庫的差別8.怎樣將一個平末端DNA片段插入到EcoRI限制位點中去?②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降第6章分子生物學研究法(下)基因功能研究1.噬菌體展示可用來研究()。2.Western雜交是用于下列雜交技術(shù)中的哪一個?()3.基因敲除(knockout)的方法一般是用來闡明()。4.檢測DNA片段和蛋白質(zhì)的相互作用常用的技術(shù)為()。5.有關(guān)穿梭質(zhì)粒載體的描述正確的是()。6.下列關(guān)于噬菌斑篩選法描述不正確的是()。7.藍白試驗篩選時，IPTG的作用是()。B.誘導o肽的合成D.作為顯色反應(yīng)的指示劑B.亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)9.目前在轉(zhuǎn)基因小鼠中常用的基因敲除技術(shù)(geneknockout)的原理是()。B.離體定向誘變10.傳統(tǒng)的SAGE技術(shù)用()個堿基的標簽代表一個基因。11.FRET可以用來測量()范圍內(nèi)大分子之間的距離。12.酵母單雜交系統(tǒng)可用來研究()。D.酵母蛋白質(zhì)性質(zhì)13.用于研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)是()。D.凝膠阻滯分析【解析】基因工程(geneticengineering)又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是20世紀70年代發(fā)8.常用的定點突變方法一般有及1.凝膠滯緩實驗(EMSA)2.斑點雜交3.核酸原位雜交4.基因芯片答：基因芯片又稱DNA芯片，是指采用原7.噬菌體展示技術(shù)8.穿梭載體(shuttlevector)10.酵母單雜交系統(tǒng)(yeastone-hybidsystem)11.隨機擴增多態(tài)性DNA(randomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD)13.原位雜交技術(shù)(insituhybfidization,ISH) 14.基因定點突變(site-directedmutagenesis)16.熒光共振能量轉(zhuǎn)移(fluorescenceresonanceenergytransfer,FR個基團(受體)的吸收光譜有一定的重疊，當這兩個熒光基團間的距離合適時(一般小于100A),就可觀DNA,何者為閉環(huán)DNA。(1)從電泳凝膠中回收三種DNA分子。(3)在選擇平板上長菌落的為閉環(huán)DNA, 在細胞培養(yǎng)和小鼠血清中分別減少了94.2%和84.5%,肝細胞中的HBcAg下降了99%。(2)在基因藥物的研制和開發(fā)方面。根據(jù)21個寡核苷酸siRNA能夠抑制同源mRNA的表達，可以(2)瓊脂糖凝膠電泳c.瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)均勻，含水量大(約占98%～99%),近似自由電泳，樣品擴散度較自由電泳小，g.進行第二次電泳。(1)同位素原位雜交技術(shù)第7章原核基因表達調(diào)控1.下列哪個操縱子中沒有衰減子序列?()2.下列有關(guān)SD序列的說法，哪個是正確的?()3.下列關(guān)于基因表達調(diào)控的論述正確的是()?？剡@個系統(tǒng)的是()。A.色氨酸期、晚早(delayearly)期和晚(late)期3個時期early)期、晚早(delayearly)期和晚(late)期3個時期7.操縱子一般是由()組成的。正調(diào)節(jié)負調(diào)節(jié)是I否ⅢA.I:開啟；Ⅱ:關(guān)閉；Ⅲ:關(guān)閉；IV:開啟A.乳精C.大腸桿菌的SOS反應(yīng)啶的7核苷酸序列互補的富含嘌呤的3～7個核苷酸序列(AGGAGG),是核糖體小亞基與mRNA結(jié)合并13.下面哪項不屬于原核生物操縱子的結(jié)構(gòu)?()B.終止子D.內(nèi)含子14.cAMP在轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用中將出現(xiàn)下列哪種現(xiàn)象?()一個調(diào)控這個系統(tǒng)?()3.根據(jù)操縱子對能調(diào)節(jié)它們的小分子的應(yīng)答反應(yīng)的性質(zhì)，可分為操縱子和操縱子。8.原核生物的基因調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平上，根據(jù)調(diào)控機制的不同可分為和。在第遏1.1953年WatsonJ.D.&CrickF.H.C.提出了操縱子模型。()在1961年首次提出來的。而1953年WatsonJ.D.和CrickF.H.C.提出的是DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。14.在原核基因操縱子中都有CRP位點。()2.管家基因基因位點(金黃色葡萄球菌),某些時候可能到10個基因位點(致傷弧菌)。3.誘導表達4.反式作用因子5.負調(diào)控6.操縱子7.前導肽9.cAMP受體蛋白(CRP)11.魔斑12.結(jié)構(gòu)基因(1)可誘導的基因調(diào)控4.為什么操縱區(qū)(operator)和啟動子(promoter)突變總是順式顯性(cis-dominat)、反式隱性 (tram-recessive)突變?而編碼阻抑蛋白(repressofprotein)的基因突變，則既是順式顯性、又是反色氨酸密碼子處停止，阻止了1:2配對，而使2:3配對，因此不能形成3:4被正常翻譯，核糖體阻止2:3配對導致3:4配對，終止信號出現(xiàn)，從而導致轉(zhuǎn)錄(1)結(jié)構(gòu)方面(組織形式)的區(qū)別(2)表達方式方面的區(qū)別(7)糖酵解途徑中位于葡萄糖-6-磷酸與甘油之間的某個代謝產(chǎn)物是腺苷酸環(huán)化酶的抑制劑。9.為什么半乳糖操縱子需要兩個轉(zhuǎn)錄起始位點?(2)生長過程中細胞必須隨時合成差向異構(gòu)酶，以保證尿苷二磷酸的供應(yīng)。(3)在沒有外源半乳糖的情況下，細胞通過半乳糖差向異構(gòu)酶(galE產(chǎn)物)的作用由UDP-葡萄糖(4)galmRNA組成型合成水平已高于lac操縱子所合成的lacmRNA水平，顯然這部分mRNA是在(5)如果只有S?一個啟動子，那么由于這個啟動子的活性依賴于cAMP-CRP,當培養(yǎng)基中有葡萄糖存在時就不能合成異構(gòu)酶。當加入唯一的啟動子是S?時，那么,即使在有葡萄糖存在的情況下，半乳糖也(6)無論從必要性或經(jīng)濟性方面考慮，都需要一個不依賴于cAMP-CRP的啟動子(S?)進行本底水平的組成型合成，以及一個依賴于cAMP-CRP的啟動子(S?)對高水平合成進行調(diào)節(jié)。只有在S?活性完全被cAMP-CRP控制時，調(diào)控作用才是有效的。10.在細菌lac和trp操縱子上，為什么阻遏蛋白編碼的基因不一定要和結(jié)構(gòu)基因連在一起?反式作用因子。大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基因表達后，可通過另一基因的作用，從而激活另一基因的轉(zhuǎn)錄，這種調(diào)節(jié)蛋白即為反式作用因子。編碼反式作用因子調(diào)控的靶序列(基因)可以不在同一染色體上。11.簡述基因的表達與調(diào)控機理。答：(1)基因的表達的機理為DNA與RNA的復制，維持生命的延續(xù)。朊病毒的蛋白質(zhì)，是正常蛋白質(zhì)的一個異構(gòu)體。能使正常的蛋白質(zhì)發(fā)生異構(gòu)化，成為新的朊病毒，表現(xiàn)為：蛋白質(zhì)→蛋白質(zhì)。但本質(zhì)上可以說是一種(2)基因表達調(diào)控的機理基因表達存在時空差異性。不同的生活時期基因表達存在的時間特異性和不同。細胞中(或同一物種的不同個體中)存在空間特異性。具體的調(diào)控機理在不同生物有不同特點，主要有真核生物的調(diào)控與原核①原核生物的調(diào)控主要通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控，以開啟或關(guān)閉某些基因的表達來適應(yīng)環(huán)境條件。環(huán)境因子常是調(diào)控的誘導物，群體中第8章真核基因表達調(diào)控A.鋅指結(jié)構(gòu)4.基因表達時的順式作用元件包括()。D.轉(zhuǎn)錄因子5.細胞蛋白激酶根據(jù)底物蛋白質(zhì)被磷酸化的氨基酸殘基種類可分為3類，不包括()。B.酪氨酸型D.天冬氨酸型6.直接受cAMP調(diào)節(jié)的分子是()。D.蛋白激酶BB.增強子8.真核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中，反式作用因子局部結(jié)構(gòu)形式(基元)不包括()。D.亮氨酸拉鏈11.(多選)真核基因經(jīng)常被斷開()。式12.(多選)下列哪些基因以典型的串聯(lián)形式存在于真核生物基因組?()B.組蛋白基因13.(多選)關(guān)于DNA甲基化的說法正確的是()。14.(多選)可變剪接()。15.(多選)染色體上5'-mCpG修飾對基因表達的影響途徑，最佳選擇是()。1.哺乳類RNA聚合酶IⅡ啟動子中常見的元件TATA、GC、CAAT所對應(yīng)的反式作用蛋白因子分別是 5.真核生物的mRNA加工過程中，5端加上,在3端加上后者由催化。如果子被切除，外顯子通過RNA剪接過程連接在一起。在此過程中涉及的RNA分子(如U1和U2等)被統(tǒng)8.轉(zhuǎn)錄因子TFIIIA的DNA結(jié)構(gòu)域具有花式，而API的DNA結(jié)構(gòu)域則具有花式。1.基因家族4.基因重排6.核心啟動子7.轉(zhuǎn)錄因子8.增強子9.結(jié)構(gòu)域10.螺旋-轉(zhuǎn)折-螺旋(HTH)11.鋅指結(jié)構(gòu)12.受體13.G蛋白15.第二信使 20.反式作用因子(trans-actingfactor)21.亮氨酸拉鏈(leucinezipper)轉(zhuǎn)錄起始毫無影響；同樣地，+84以后序列的缺失對轉(zhuǎn)錄起始也沒有影響。因此，+50到+84間的序列(3)與DNA相互識別的原理②鋅指結(jié)構(gòu)：長約30個氨基酸，其中4個氨基酸(2個Cys,2個His)與一個鋅離子相結(jié)合。端的CpG序列(又稱CpG島)。甲基化范圍與基因表達程度呈反比。2.舉例說明DNA結(jié)合蛋白對基因轉(zhuǎn)錄的影響，另簡述鑒別DNA結(jié)合蛋白在DNA分子上結(jié)合位點它們是起始某個(類)基因轉(zhuǎn)錄所必需的。a.特異序列的DNA短片段(用DNA克隆或化學合成方法產(chǎn)生單一片段)先用同位素標記，然后與第9章疾病與人類健康1.我國批準的第一個腫瘤基因治療藥物是針對下列哪一種基因的?()2.人類某些神經(jīng)系統(tǒng)疾病主要與下列哪種核苷酸C.CpG序列3.癌癥往往涉及哪兩類基因的相互作用?()C.病毒癌基因和原癌基因【解析】癌基因(oncogene)可分為兩大類：一類是病毒癌基因(viraloncogene,v-onc),編碼病毒4.(多選)下列敘述正確的是()。5.下列哪些關(guān)于ras說法是正確的?()E.不能介導信號通路1.癌基因2.朊粒3.抑癌基因4.順式激活6.p538.基因治療9.無義突變(nonsensemutation)四、簡答題1.簡述基因治療的策略。答：基因治療指將人的正?；蚧蛴兄委熥饔玫幕蛲ㄟ^一定方式導入人體靶細胞以糾正基因的缺陷或者發(fā)揮治療作用，從而達到治療疾病目的的生物醫(yī)學新技術(shù)。基因治療的策略如下：exvivo途徑是指將含外源基因的載體在體外導入人體自身或異體(異種)細胞(基因工程化的細胞),經(jīng)體外細胞擴增后輸回人體的方法。exvivo途徑易于操作、安全性好但不易形成規(guī)模，且必須有固定的臨invivo途徑是指將外源基因裝配于特定的真核細胞表達載體上，直接導入人體內(nèi)的方法。這種載體可以是病毒型或非病毒型，甚至是裸DNA。invivo途徑有利于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，但在技術(shù)上要求很高。2.某人在工作中意外受到一次有致癌可能性的放射性輻射，但并非由于本人操作不當所致。事后三個月被發(fā)現(xiàn)患有腸癌且已發(fā)展為晚期，為此他提出訴訟，要求單位賠償。從細胞生物學角度你認為他會勝訴嗎?為什么?答：從細胞生物學角度來說，我認為應(yīng)該不會勝訴。原因如下：(1)腫瘤的發(fā)生是基因突變逐漸積累的結(jié)果。癌癥的發(fā)生一般不是單一基因的突變，而至少在一個細胞中發(fā)生5或6個基因的突變，才能賦予癌細胞所有的特征。即增殖速度快，子代細胞逃脫細胞衰老的命運。(2)癌癥發(fā)生的核心問題是基因突變，涉及三類基因的參與：①調(diào)節(jié)細胞增殖的原癌基因活化或者抑癌基因失活；②調(diào)節(jié)細胞凋亡的促凋亡基因失活或抑制凋亡基因功能增強；③DNA修復基因失活，使突變在細胞內(nèi)積累，并且累積到調(diào)節(jié)細胞增生及細胞凋亡的基因時，就有可能使細胞凋亡及增生失去平衡，導致癌癥的發(fā)生。因此，從細胞生物學看，三個月的時間一般不足以完成癌癥從發(fā)生到發(fā)展至晚期的全過程，導致他腸癌的決定因素應(yīng)該不是工作中意外受到一次有致癌可能性的放射性輻射。3.簡述基因治療中轉(zhuǎn)移外源基因至體內(nèi)的非病毒和病毒途徑的主要原理。答：(1)采用病毒途徑進行基因治療的主要原理①所用到的病毒載體應(yīng)該具有三方面的基本特點包括：a.攜帶外源基因并能組裝成病毒顆粒；b.介導外源基因的轉(zhuǎn)移和表達；c.對機體沒有致病能力。一般病毒載體必須經(jīng)過改造才可以用于基因治療。②改造病毒載體需要首先了解載體病毒的基因組結(jié)構(gòu)和功能(編碼區(qū)/非編碼區(qū)、結(jié)構(gòu)蛋白/非結(jié)構(gòu)蛋白、必需基因/非必需基因、包裝容量等),然后刪除致病基因區(qū)域和非必需基因，僅保留必需基因。最后再利用改造的病毒載體包裝目的基因，轉(zhuǎn)入機體達到基因治療的目的。(2)采用非病毒途徑進行基因治療的主要原理①裸DNA法可以采取直接注射、電穿孔法或基因槍轟擊將目的基因?qū)胧荏w細胞，DNA片段整合到基因組中表達，從而起到治療效果。②脂質(zhì)體/DNA復合物法是利用可以高效包裝DNA的人造膜，制成脂質(zhì)雙層包圍DNA水溶液的脂質(zhì)微球，與細胞融合后被細胞內(nèi)吞，DNA進入細胞體內(nèi)表達。③多聚物/DNA復合物法主要利用了DNA帶負電，而細胞表面也帶負電的特點，所以借助陽離子多聚體把二者聚合到一起，使外源DNA有機會進入細胞，實現(xiàn)基因治療。4.癌基因和抑癌基因的特點是一旦發(fā)生突變，所在的細胞都能被轉(zhuǎn)化為癌細胞。為什么一個叫癌基因，一個叫抑癌基因?答：(1)兩者概念不同：①癌基因(oncogene)是細胞內(nèi)控制細胞生長的基因，具有潛在的誘導細胞惡性轉(zhuǎn)化的特性。在癌基自己的RNA,合成自己的蛋白質(zhì)等成分。SARS成受病毒RNA的遺傳信息控制。然后在新合成的RNA聚合酶的作用下，由+RNA復制成中特定染色體上某種DNA多態(tài)性標志(如RFLP,STR或SSCP等)的等位基因片段在同一患者中由正常組織基因組中的兩種變?yōu)橐环N，即等位基因型由雜合子變?yōu)榧兒献印Ｋ砸职?1)細胞內(nèi)免疫即通過基因操作，使基因修飾過的細胞產(chǎn)生各種不同的蛋白質(zhì)，干擾或阻止HIV在細胞內(nèi)的復制和細胞間的傳播。例如，通過反轉(zhuǎn)錄病毒介導，已成功地將HIV表面蛋白Gp120的受體分子及CD4基因、病毒蛋白的突變基因以及過量的HIV順式順序?qū)際IV感染的細胞中，不同程度抑制了(2)藥敏自殺基因通過特異的藥物，殺死HIV感染的細胞從而達到治療疾病的目的。HSV-tk基因是基因治療中的藥敏自殺基因。具體而言構(gòu)建了HSV病毒胸苷激酶基因表達系統(tǒng)，將HSV-tk基因構(gòu)建于HIV病毒基因LTR啟動子下游，由HIV-LTR以及反式激活反應(yīng)因子共同控制轉(zhuǎn)錄，只有在HIV病毒tatGcv),對藥物敏感的轉(zhuǎn)HSVtk基因的HIV感染細胞就會被殺死，而未感染的細胞不受影響。除HSV-k基因外，白喉毒素及絲氨酸、胱氨酸基因也可用作自殺基因，這類基因產(chǎn)物本身對細胞有毒害作用，不需另(3)免疫標記治療在細胞中表達HIV的病毒蛋白模擬病毒感染可誘發(fā)CTL細胞的免疫應(yīng)答，從而預防和治療HIV的感染。如將轉(zhuǎn)有HIV-III6gpl20基因的皮膚成纖維細胞免疫機體，使其產(chǎn)生HIV外膜蛋白特異的CTL應(yīng)答。將gp160的DNA質(zhì)粒直接注射小鼠，使小鼠產(chǎn)生了特異性抗體和CTL應(yīng)答，這方面(4)反義技術(shù)及核酸的應(yīng)用如用反轉(zhuǎn)錄病毒載體或腺病毒載體將HIV病毒基因的反義RNA轉(zhuǎn)移到靶細胞中，以達到治療的目的，運用腺病毒I型AV基因，將HIV病毒tat/rev基因的反義模板插入其中，由RNA聚合酶Ⅲ控制轉(zhuǎn)錄，再將該腺病毒載體轉(zhuǎn)染T