細(xì)胞因子使用方法詳解

細(xì)胞因子使用方法詳解關(guān)鍵詞：重組蛋白，細(xì)胞因子，復(fù)溶方法、儲(chǔ)存條件Abbkine細(xì)胞因子均由重組蛋白凍干粉及配套復(fù)溶buffer組成。注意：不同產(chǎn)品復(fù)溶buffer成分有所差異，不建議混合使用圖1.Abbkine細(xì)胞因子產(chǎn)品組成首先使用前檢查產(chǎn)品狀態(tài)（凍干粉狀）第一步：開(kāi)蓋前離心開(kāi)蓋前務(wù)必離心，將管壁的凍干粉離心至管底，離心條件10000rpm離心30-60s或4000rpm離心5min圖2.開(kāi)蓋前離心第二步：復(fù)溶獲得儲(chǔ)存液細(xì)胞因子凍干粉為無(wú)菌生產(chǎn)，復(fù)溶時(shí)超凈工作臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作。推薦使用配套復(fù)溶buffer對(duì)離心后的凍干粉進(jìn)行復(fù)溶。復(fù)溶過(guò)程中，用槍吹打混勻即可，避免劇烈渦旋震蕩，否則有可能影響細(xì)胞因子的活性，儲(chǔ)存液濃度參考說(shuō)明書(shū)推薦控制在0.1-1mg/ml，可根據(jù)產(chǎn)品規(guī)格對(duì)復(fù)溶buffer用量進(jìn)行計(jì)算。舉例：如訂購(gòu)5ug規(guī)格凍干粉，復(fù)溶時(shí)添加50ul復(fù)溶buffer獲得0.1mg/ml儲(chǔ)存液。注意：禁止略過(guò)復(fù)溶步驟直接將凍干粉稀釋為低濃度工作液，否則可能導(dǎo)致無(wú)法完全溶解，造成損失。第三步：稀釋為工作液使用稀釋液（如：培養(yǎng)基或1×PBS）將儲(chǔ)存液進(jìn)一步稀釋為工作液，也可取適量復(fù)溶后的儲(chǔ)存液直接添加至培養(yǎng)基中用于細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞因子的工作濃度應(yīng)結(jié)合具體實(shí)驗(yàn)需求而定，首次實(shí)驗(yàn)可查閱參考文獻(xiàn)。圖3.稀釋為工作液第四步：添加載體蛋白溶液長(zhǎng)期儲(chǔ)存向儲(chǔ)存液中添加終濃度為10%FBS載體蛋白溶液。已溶解的細(xì)胞因子在4℃可保存1周，添加載體蛋白后可分裝于-20℃或-80℃長(zhǎng)期保存。注意：分裝凍存時(shí)，需保證蛋白濃度不低于10μg/ml，而且每管中的溶液體積不小于10μl!常見(jiàn)的含載體蛋白溶液：0.1%BSA（牛血清白蛋白）10%FBS（胎牛血清）5%HSA（人血清白蛋白）圖4.添加終濃度為10%FBS載體蛋白溶液產(chǎn)品推薦產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱(chēng)規(guī)格PRP3001Ulp1(SUMOProtease/Ulp1peptidase)500U/1000U/5000UPRP3002TerminalDeoxynucleotidylTransferase(TdT)40μg/100μgPRP3003HumanAnnexinV/ANXA5protein100μg/1mg/10mgPRP3004Luciferasefirefly5mg/25mgPRP1137MouseIL-4protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1048HumanTGF-βprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1151RecombinantGM-CSF，Mouse，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP1068HumanFGF-2（154aa）protein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1138MouseIFN-γ20μg/100μg/500μg/1mgPRP1085HumanIL-4Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1049HumanEGFprotein100μg/500μg/1mg/10mgPRP1158MouseIL-1betaProtein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1114MouseRANKLprotein2μg/10μg/100μg/1mgPRP1171Mouse/RatTGFbeta1,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1113MouseTNF-αprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1087HumanIL-6Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1050HumanIFN-γprotein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1060RecombinantIL-1beta，Human，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP1051HumanIL-13protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1136MouseM-CSFprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1055HumanIL-10protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1056HuamnRANKLprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1054HumanVEGF165protein5μg/20μg/100μg/1mg歡迎廣大“蝌蚪”們多多關(guān)注Abbkine公眾號(hào)，還會(huì)有更多科研驚喜等著大家喲。同時(shí)，Abbkine的技術(shù)專(zhuān)家為了給廣大讀者提供學(xué)習(xí)生物知識(shí)的平臺(tái)，經(jīng)過(guò)不懈努力，將多種高端生物實(shí)驗(yàn)的干貨整理出來(lái)，后期陸續(xù)在微信公眾號(hào)中