2025年滬教新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬教新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷849考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下圖①~④表示采用不同方法分離和純化大腸桿菌的部分操作。下列敘述錯誤的是（）

A.①屬于倒平板操作，蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋后應(yīng)立即將平板倒置B.②中在火焰上效燒過的接種環(huán)需冷卻后才能伸入菌液中蘸取菌液C.③屬于涂布平板操作，涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使菌液分布均勻D.④屬于平板劃線操作，注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連2、下列有關(guān)精卵形成及受精作用的說法正確的是（）A.卵子成熟和受精部位分別是輸卵管和子宮B.動物體型大的產(chǎn)生精子多且大C.家畜每次射精排出的精子數(shù)以億計，但通常只有一個精子與卵子結(jié)合，這是動物體的一種浪費D.在卵黃膜和透明帶的間隙是否可觀察到兩個極體，是判斷卵子是否受精的標(biāo)志3、動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時；通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。從該圖提供的信息不能獲得的結(jié)論是。

A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同C.培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大4、科學(xué)家從紅豆杉樹皮中分離出具有高抗癌活性的紫杉醇，為避免紅豆杉遭受掠奪式砍伐，同時獲得紫杉醇，某科研小組設(shè)計了如下圖所示的實驗流程，并發(fā)現(xiàn)另有植物甲產(chǎn)生的物質(zhì)X可提高紫杉醇抗癌效果。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖紅豆杉植株可以保持其優(yōu)良的遺傳特性B.以紅豆杉莖尖分生組織為材料通過組織培養(yǎng)獲得的脫毒苗具有抗病毒的特點C.紫杉醇的工廠化生產(chǎn)主要是利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使細(xì)胞增殖以獲得更多的紫杉醇D.欲獲得既能產(chǎn)生紫杉醇又能產(chǎn)生物質(zhì)X的植株，可利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“紅豆杉—植物甲”雜種植株5、如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（）

A.雙抗可同時與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原D.同時注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞6、醬的釀造最早在西漢。西漢元帝時代的史游在《急就篇》中就記載有：“蕪荑鹽豉醯酢醬”。唐·顏氏注：“醬，以豆合面而為之也，以肉曰醢，以骨為肉，醬之為言將也，食之有醬”。其中以黃豆、蠶豆等為原料，通過米曲霉菌發(fā)酵制成的稱豆瓣醬。下列相關(guān)說法錯誤的是（）A.蠶豆瓣可提供米曲霉菌生長繁殖所需的碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)B.溫度、濕度和鹽度等都會影響米曲霉菌的生長繁殖C.黃豆、蠶豆中蛋白質(zhì)經(jīng)米曲霉菌分解產(chǎn)生氨基酸和多肽D.制作豆瓣醬起發(fā)酵作用的微生物只有單一的米曲霉菌7、下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵的敘述，錯誤的是（）A.變酸的酒表面的菌膜可能是醋酸菌大量繁殖形成的B.加鹽腌制的過程會使豆腐塊變硬并且能抑制雜菌生長C.泡菜壇蓋邊沿的水槽注滿水可抑制乳酸菌的有氧呼吸D.鹵湯中過量加入料酒，可能導(dǎo)致腐乳的成熟時間延長評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來做基因工程中的載體，這與它的哪項優(yōu)點有關(guān)()A.具有黏性末端B.分子呈環(huán)狀，便于限制酶切割C.對宿主細(xì)胞的生存沒有決定性作用D.分子小，能自主復(fù)制，有標(biāo)記基因9、如圖為體細(xì)胞核移植過程流程圖；下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自有利用價值的動物提供的細(xì)胞核B.核移植的供體細(xì)胞一般都選傳代10~50代左右的細(xì)胞C.動物細(xì)胞核移植技術(shù)中使用的去核方法只有顯微操作法D.上述過程能夠體現(xiàn)動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性10、有一個嬰兒在出生后保留了臍帶血，在以后他生長發(fā)育過程中如果出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過血液中的干細(xì)胞來為其治病。關(guān)于這個實例說法不正確的是（）A.用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來移植治病，需要激發(fā)細(xì)胞的所有全能性B.用臍帶血中的干細(xì)胞能夠治療這個孩子所有的疾病C.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)該長期給他使用免疫抑制藥物11、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述正確的是（）

A.圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基B.A操作的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C.B的正確操作是用涂布器蘸取菌液后均勻地涂布在②表面D.經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進行純化培養(yǎng)12、聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無污染的“綠色塑料”。科學(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列敘述錯誤的是（）

A.步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B.步驟③所用的培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對嗜鹽細(xì)菌的生長越有利C.步驟④所用到的培養(yǎng)基應(yīng)加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D.挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量13、為對某樣品中噬菌體計數(shù)，工作人員將0.1mL稀釋倍的噬菌體樣品與敏感細(xì)菌混合后平鋪在平板上培養(yǎng)一段時間，長滿細(xì)菌的平板因部分細(xì)菌被噬菌體裂解而形成圓形透明斑，即噬菌斑（1個噬菌斑為1個pfu），噬菌體效價可用每毫升樣品中含有的pfu數(shù)表示。下列敘述正確的是（）

A.透明的平板培養(yǎng)一段時間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，是由細(xì)菌大量繁殖造成的B.噬菌體樣品應(yīng)有足夠的稀釋度，以保證初期一個細(xì)菌最多被一個噬菌體吸附C.若平均每個平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價為1.5×108pfu/mLD.若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細(xì)菌，噬菌斑計數(shù)結(jié)果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低14、常見的輔助生殖技術(shù)有兩種：一種叫做人工授精，即通過人工的方法，把精液或者精子送到雌性的生殖道，達到增加懷孕幾率的目的；第二種輔助生殖技術(shù)就是試管動物，主要涉及體外受精、胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。下列敘述正確的是（）A.人工授精后形成的早期胚胎立即與母體子宮建立聯(lián)系B.輔助生殖技術(shù)不一定會用到胚胎移植C.與克隆動物不同，試管動物的培育屬于有性生殖D.人工授精和試管動物技術(shù)都要注意受體的生殖周期15、新冠肺炎的發(fā)生使我們對病毒的威力有了深刻體會，所以更要禁止生物武器，面對一切可能的生物武器的威脅，我們絕不能掉以輕心！下列關(guān)于禁止生物武器的敘述，正確的是（）A.第二次世界大戰(zhàn)中，侵華日軍在我國多個地區(qū)使用過細(xì)菌武器，給我國人民帶來很大苦難B.生物武器相對容易獲得，也便于攜帶和釋放，一旦被恐怖組織利用，將產(chǎn)生極大的危害C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以制造各種新型致病菌，這些致病菌可以讓大批感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)D.1975年3月《禁止生物武器公約》生效，清除生物武器威脅，防止生物武器擴散是生物安全防控的重要方面16、胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)時，要最大程度地抑制其分化、維持全能性，細(xì)胞為圓形或扁圓形，結(jié)構(gòu)相對簡單；細(xì)胞核大，細(xì)胞質(zhì)少，核質(zhì)比高。輸卵管上皮細(xì)胞能合成、分泌細(xì)胞生長因子和細(xì)胞分化抑制因子?？茖W(xué)家通過病毒介導(dǎo)或者其他的方式，將四種與多能性相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入宿主細(xì)胞，使其重新編程為iPS細(xì)胞，iPS細(xì)胞特性與胚胎干細(xì)胞極為相似。下列敘述正確的是（）A.培養(yǎng)iPS細(xì)胞時可加入輸卵管上皮細(xì)胞，以維持iPS細(xì)胞的未分化狀態(tài)和全能性B.介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入皮膚細(xì)胞時，應(yīng)用滅活的病毒，以防止皮膚細(xì)胞被感染C.重編程為iPS細(xì)胞時，關(guān)閉了體細(xì)胞特異性表達的基因，開啟了使細(xì)胞全能性分化的基因D.可以通過觀察細(xì)胞形態(tài)，初步鑒定iPS細(xì)胞是否誘導(dǎo)成功評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)17、酵母菌是______________微生物。酵母菌進行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進行無氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。18、動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。19、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。20、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。21、我國政府同樣禁止進行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()評卷人得分四、判斷題(共3題，共12分)22、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。()A.正確B.錯誤23、中國政府積極支持制定《禁止生殖性克隆人國際公約》，堅決反對克隆人，不允許進行任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤24、轉(zhuǎn)入油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳入環(huán)境中。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共4分)25、丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化；部分患者可能發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。為研制丙肝病毒的單克隆抗體，某研究者以小鼠為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為使單細(xì)胞懸液中的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體中一定含有能與丙肝病毒結(jié)合的抗體，需要進行的操作是______。融合之前的兩種細(xì)胞中，能通過動物細(xì)胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是____

(2)誘導(dǎo)細(xì)跑融合時利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能夠與細(xì)胞膜上的______（填化學(xué)本質(zhì)）發(fā)生作用，使得細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的______重新排布，細(xì)胞發(fā)生融合。篩選1利用______進行篩選，而篩選2通過多次的_______來完成。

(3)得到大量丙肝病毒單克隆抗體的方法之一是將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，接入培養(yǎng)液中雜交瘤細(xì)胞的量是單克隆抗體產(chǎn)量的重要影響因素之一，為探究一定培養(yǎng)液中接種雜交瘤細(xì)胞的最佳數(shù)量，實驗思路為_______。26、《傷寒論》中記載的芍藥甘草湯是由芍藥和甘草兩味藥物制成，具有調(diào)和肝脾，緩急止痛的作用，芍藥和甘草的主要活性成分分別為芍藥苷和甘草酸。科研團隊通過制備抗芍藥苷的單克隆抗體，將其純化后結(jié)合在固相載體上，讓芍藥甘草湯流過，去除湯中芍藥苷，用于探究芍藥苷與芍藥甘草湯對小鼠鎮(zhèn)痛作用的相關(guān)性?；卮鹣铝袉栴}。

(1)制備單克隆抗體依賴的生物技術(shù)有______________、_________________等。將芍藥苷與蛋白質(zhì)結(jié)合作為抗原，定期間隔免疫小鼠，取免疫后的小鼠脾臟，剪碎并用_____________酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞。

(2)圖中誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合的試劑X是____________，經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細(xì)胞Y具有________________________特點。用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞Y并收集上清液，利用___________________技術(shù)對上清液進行抗體陽性檢測。

(3)研究人員將生理狀態(tài)相同的小鼠隨機分為對照組、造模組進行如下處理，造模組前期已完成冰醋酸致痛處理（冰醋酸能引起深部的、大面積且較持久的疼痛刺激，此時小鼠會出現(xiàn)扭體反應(yīng)）。請完善實驗方案。。組別前期處理后期處理對照組腹腔注射生理鹽水I造模組腹腔注射冰醋酸模型組：口服生理鹽水陽性藥組：口服芍藥甘草湯陽性藥組：口服芍藥甘草湯實驗組：Ⅱ?qū)嶒灲M：Ⅱ

①表中I的處理是_____________、Ⅱ的處理_______________。

②結(jié)果與分析：

若前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著__________對照組，表明致痛處理成功。后期處理結(jié)束后測定各組小鼠扭體次數(shù)，若結(jié)果為______________________，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一。評卷人得分六、綜合題(共2題，共12分)27、特異性重組的Cre/loxP敲除系統(tǒng)是首先利用同源重組將基因組上的靶基因替換為兩端帶有重組位點loxP的karR基因，然后由重組酶Cre識別loxP位點并發(fā)生重組反應(yīng)，去除基因組上的karR基因，進一步利用質(zhì)粒的溫敏特性將其消除，從而實現(xiàn)靶基因的敲除。下圖是研究人員利用Cre/loxP敲除系統(tǒng)敲除谷氨酸棒狀桿菌argR基因（精氨酸代謝的調(diào)控因子），獲得高產(chǎn)精氨酸菌株的過程，其中kanR是卡那霉素抗性基因；cat是氯霉素抗性基因，HindⅢ；BanHⅠ是限制酶。請據(jù)圖回答下列問題：

(1)①過程的原料是_____，所需的酶是_____。

(2)下列引物1、引物2用于擴增argR基因上游序列，引物3、引物4用于擴增argR基因下游序列，下劃線序列是相關(guān)限制酶識別序列，則HindⅢ、BamHⅠ的識別序列分別是_____、_____。

引物1：5'-GTCGACGGTATCGAT____AGGACTCAAACTTATGACTTCACAACCA-3'

引物2：5-CGCCCTATAGTGAGTCGTATTGGGATTTAAGTTTTCCGGTGTTGACG-3'

引物3：5'-CTTTAGTGAGGGTTAATTGCGCGTTAATCGCTTGTTAATGCAGGCA-3'

引物4：5'-CGCTCTAGAACTAGT____CAAAGCCTCGTGAGCCTTAATC-3'

(3)②過程（融合PCR）是采用具有互補末端引物，形成具有重疊鏈的PCR引物，通過PCR引物重疊鏈的延伸，從而將不同來源的DNA片段連接起來。下列引物5、引物6用于擴增兩端含loxP的karR片段，引物5、引物6可分別與_____、_____（引物1；引物2、引物3、引物4）重疊從而實現(xiàn)不同DNA片段的連接。

引物5：5'-CGTCAACACCGGAAAACTTAAATCCCAATACGACTCACTATAGGGCG-3'

引物6：5-TGCCTGCATTAACAAGCGATTAACGCGCAATTAACCCTCACTAAAG-3'

(4)④過程將質(zhì)粒3導(dǎo)入_____態(tài)谷氨酸棒狀桿菌，⑤過程在同源重組的作用下谷氨酸棒狀桿菌株的argR基因被替換為_____片段。

(5)⑥過程導(dǎo)入質(zhì)粒4的目的是_____。

(6)由于質(zhì)粒4的溫敏特性，⑦過程先在37℃條件下培養(yǎng)消除質(zhì)粒4，然后用影印接種（A、B、C三個培養(yǎng)基中接種菌種的位置相同）培養(yǎng)驗證其抗性，其結(jié)果如下圖，則_____是目的基因被敲除的目的菌株。

28、學(xué)習(xí)以下材料；回答（1）~（5）題。

基因治療在探索中前進。20世紀(jì)60年代；科學(xué)家首次提出基因治療的概念，為基因治療的發(fā)展奠定基礎(chǔ)。1990年，研究者用逆轉(zhuǎn)錄病毒將正確編碼腺苷脫氨酶的基因?qū)腚x體培養(yǎng)的患者淋巴細(xì)胞，再將細(xì)胞輸回患者體內(nèi)，恢復(fù)了患者體內(nèi)腺苷脫氨酶的合成。此次成功是基因治療史上的重要里程碑。此后，科學(xué)家開展了大量的基因治療試驗，一些基因治療產(chǎn)品陸續(xù)獲得批準(zhǔn)上市。近年來，以CRISPR/Cas9為代表的基因編輯技術(shù)的興起讓基因治療步入了全新的起點。利用基因編輯技術(shù)，可在體內(nèi)或體外對靶基因進行精準(zhǔn)編輯，比如將目的基因插入到指定位點，或敲除特定基因；通過單堿基編輯技術(shù)，可對靶位點進行精準(zhǔn)的堿基編輯，從而糾正原來的基因突變。目前，基于基因編輯技術(shù)的臨床試驗顯示了良好的治療效果?；蛑委熢谌〉梅e極進展的同時，也面臨著諸多問題，如安全性；倫理問題等。目前基因治療常用的載體是病毒載體，包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺相關(guān)病毒（AAV）等。逆轉(zhuǎn)錄病毒可整合外源基因到宿主基因組而使產(chǎn)物長期穩(wěn)定表達，但這種隨機整合的特性會帶來潛在的安全隱患。病毒有一定的免疫原性，可激活機體的特異性免疫應(yīng)答，導(dǎo)致基因治療失敗，甚至危及生命。2017年，首例利用AAV載體攜帶凝血因子基因?qū)ρ巡〉呐R床治療以失敗告終，就與載體輸注后AAV病毒衣殼引起的免疫應(yīng)答有關(guān)?；蚓庉嫷拿摪行?yīng)也不容忽視，一旦脫靶效應(yīng)發(fā)生在重要功能基因上會造成不必要的安全風(fēng)險。

經(jīng)過幾十年的螺旋式發(fā)展,基因治療在遺傳病和獲得性疾病（如惡性腫瘤；心血管疾病和感染性疾病等）的治療上均取得了令人興奮的臨床試驗進展?；蛑委煹倪M步為許多疾病的治療提供了新的思路,也讓無數(shù)患者看到了希望。不久的將來；基因治療或?qū)⒊蔀槿祟惣膊≈委煵豢苫蛉钡囊徊糠帧?/p>

(1)基因治療是在________水平進行操作；以實現(xiàn)緩解或治愈疾病的一種治療手段。

(2)將AAV載體輸注自身存在抗AAV抗體的患者，抗體會________而降低載體的遞送效果，AAV病毒衣殼會引起機體細(xì)胞免疫應(yīng)答進而使________被破壞而失效。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可將外源基因整合到宿主基因組，這種隨機整合會帶來潛在的安全隱患，原因是________。

(4)CCR5是HIV感染人體細(xì)胞不可缺少的關(guān)鍵受體?？蒲腥藛T以CCR5為靶基因，利用基因治療手段治療艾滋病，取得積極效果，該治療的思路是________。

(5)對基因治療的認(rèn)識或態(tài)度，正確的是（）。A．所有的基因治療策略都是用正?；蛉ヌ鎿Q突變基因B．遺傳病是由于遺傳物質(zhì)改變所致，基因治療只適用于治療遺傳病C．對于體外無法培養(yǎng)的細(xì)胞，可通過載體直接將基因?qū)牖颊唧w內(nèi)細(xì)胞進行治療D．基因治療具有難以預(yù)料的潛在安全隱患，不應(yīng)該繼續(xù)研究和發(fā)展參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

微生物的研究通常包含微生物的獲得；分離純化、培養(yǎng)以及保存等。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法；常用于分離獲得單菌落。劃線分離法是用接種環(huán)以無菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來。稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細(xì)胞。

【詳解】

A；①屬于倒平板操作；蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋后需冷卻凝固后才能將平板倒置，A錯誤；

B；②中在火焰上效燒過的接種環(huán)需冷卻后才能伸入菌液中蘸取菌液；以免殺死菌種，B正確；

C；③屬于涂布平板操作；涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使菌液分布均勻，C正確；

D；④屬于平板劃線操作；操作時注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連，D正確。

故選A。2、D【分析】【分析】

受精作用是精子和卵細(xì)胞相互識別；融合成為受精卵的過程；精子的頭部進入卵細(xì)胞；尾部留在外面，不久精子的細(xì)胞核就和卵細(xì)胞的細(xì)胞核融合，使受精卵中染色體的數(shù)目又恢復(fù)到體細(xì)胞的數(shù)目，其中有一半來自精子有一半來自卵細(xì)胞。

【詳解】

A；卵子成熟和受精部位均為輸卵管；A錯誤；

B；動物產(chǎn)生精子的形態(tài)相似；大小略有不同，但與動物體型大小無關(guān)，B錯誤；

C；家畜每次射精排出的精子數(shù)以億計；但通常只有一個精子與卵子結(jié)合，這是動物繁衍后代的一種保障機制，并不是一種浪費，C錯誤；

D；當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體時；說明卵子已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵子是否受精的重要標(biāo)志，D正確。

故選D。

【點睛】3、A【分析】【分析】

分析曲線圖：正常細(xì)胞在有血清和無血清培養(yǎng)時；同一培養(yǎng)時間下細(xì)胞數(shù)目不同；癌細(xì)胞在有血清和無血清培養(yǎng)時，同一培養(yǎng)時間下細(xì)胞數(shù)目變化趨勢一致；正常細(xì)胞與癌細(xì)胞在有血清（或無血清）的條件下培養(yǎng)，同一培養(yǎng)時間下細(xì)胞數(shù)目不同。

【詳解】

A；正常細(xì)胞與癌細(xì)胞在有血清和無血清時曲線均不重疊；說明正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率不同，A錯誤；

B；正常細(xì)胞在有血清和無血清培養(yǎng)時；同一培養(yǎng)時間下細(xì)胞數(shù)目不同，說明有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同，B正確；

C；正常細(xì)胞與癌細(xì)胞在有血清的條件下培養(yǎng)；同一培養(yǎng)時間下細(xì)胞數(shù)目均比無血清時多，說明培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)，C正確；

D；癌細(xì)胞在有血清和無血清培養(yǎng)時；同一培養(yǎng)時間下細(xì)胞數(shù)目變化趨勢一致，說明培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大，D正確。

故選A。4、B【分析】【分析】

由圖分析可知；紅豆杉莖尖分生組織通過脫分化過程形成愈傷組織，一方面愈傷組織通過再分化形成胚狀體，進而培養(yǎng)成紅豆杉植株；另一方面，愈傷組織培養(yǎng)增殖產(chǎn)生更多的愈傷組織細(xì)胞，從愈傷組織細(xì)胞中提取紫杉醇。

【詳解】

A；利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖紅豆杉植株屬于無性生殖；因此可保持其優(yōu)良的遺傳特性，A正確；

B；常用莖尖分生組織進行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗是因為莖尖含毒很少；可能不含病毒，但獲得的脫毒苗不一定具有抗病毒的特點，B錯誤；

C；圖中獲得紫杉醇的過程只要培養(yǎng)到愈傷組織；不需要形成完整植株，利用了細(xì)胞增殖的原理，即紫杉醇的工廠化生產(chǎn)主要是利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使細(xì)胞增殖以獲得更多的紫杉醇，C正確；

D；植物甲和紅豆杉是不同的物種；自然狀態(tài)下存在生殖隔離，欲獲得既能產(chǎn)生紫杉醇又能產(chǎn)生物質(zhì)X的植株，可利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“紅豆杉一植物甲”雜種植株，D正確。

故選B。5、D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測；雙抗可同時與2種抗原結(jié)合，A正確；

B；根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性；利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，B正確；

C；由于雙抗是在兩種不同的抗原刺激下；B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細(xì)胞分泌形成的，因此，篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進行抗原-抗體檢測，從而實現(xiàn)對雙抗的篩選，C正確；

D；同時注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞；而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞，D錯誤。

故選D。6、D【分析】【分析】

利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品；歷史悠久，稱作傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)，比如果酒；果醋、腐乳、泡菜的制作。例如腐乳制作的原理：多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如毛霉、曲霉、根霉、酵母菌等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。在多種微生物的協(xié)同作用下，普通的豆腐轉(zhuǎn)變成風(fēng)味獨特的腐乳。

【詳解】

A；以黃豆、蠶豆等為原料；通過米曲霉菌發(fā)酵制成豆瓣醬，蠶豆瓣類似于微生物培養(yǎng)基，能提供碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)，A正確；

B；溫度、濕度和鹽度等都會影響細(xì)胞內(nèi)的酶的活性；進而影響米曲霉菌的生長繁殖，B正確；

C；黃豆、蠶豆中蛋白質(zhì)經(jīng)米曲霉菌利用；類似于毛霉利用豆腐中蛋白質(zhì)，產(chǎn)生蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成氨基酸和多肽，C正確；

D；制作豆瓣醬時；豆瓣上、環(huán)境中的多種微生物都參與發(fā)酵作用，類似于制作腐乳中多種微生物的協(xié)同作用，D錯誤。

故選D。7、C【分析】【分析】

1.酵母菌在有氧和無氧的條件下都能生活：在有氧時；酵母菌大量繁殖，但是不起到發(fā)酵效果；在無氧時，繁殖速度減慢，但是此時可以進行發(fā)酵。

2.醋酸菌好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。

3.乳酸菌是厭氧菌；能將葡萄糖變成乳酸。

【詳解】

A；變酸的酒表面的菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的；A正確；

B；制作腐乳時；加鹽腌制可使豆腐塊析出水分而變硬且能抑制雜菌生長，B正確；

C；泡菜壇蓋邊沿的水槽注滿水可為乳酸菌的無氧呼吸制造無氧環(huán)境；進而促進乳酸菌的無氧呼吸，C錯誤；

D；鹵湯中過量加入料酒；會抑制發(fā)酵過程，可能導(dǎo)致腐乳的成熟時間延長，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)8、C:D【分析】【分析】

1；作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因）；以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來；

2；大腸桿菌的質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

【詳解】

A；質(zhì)粒是一種獨立于細(xì)菌擬核外的環(huán)狀DNA分子；沒有切割時不含具有黏性末端，A錯誤；

B；基因工程的運載體必須要有一個或多個限制酶切點；便于與目的基因連接形成重組DNA分子，B錯誤；

C；質(zhì)粒對宿主細(xì)胞的生存沒有決定性作用；C正確；

D；作為載體的質(zhì)粒分子??；能自主復(fù)制，且常含有抗生素抗性基因，可以作為標(biāo)記基因，對重組后重組子進行篩選，D正確。

故選CD。

【點睛】9、B:C【分析】【分析】

分析題圖：該圖為動物體細(xì)胞核移植過程和胚胎移植過程。動物核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。

【詳解】

A；生物的性狀主要受核基因控制；去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自有利用價值的動物提供的細(xì)胞核，A正確；

B；核移植時做供核一方的一般是傳代10代以內(nèi)細(xì)胞；原因是細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變，B錯誤；

C；動物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法；也可采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法，C錯誤；

D；核移植技術(shù)得到克隆動物能夠體現(xiàn)動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；D正確。

故選BC。10、A:B:D【分析】【分析】

臍帶血中的干細(xì)胞分化程度低；全能性較高，能分裂分化形成多種組織，因此可以用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來移植治病，如果是自體器官移植不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，所以自體移植后不需要用免疫抑制藥物，但用臍帶血中的干細(xì)胞不能治療所有疾病。

【詳解】

A；用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來移植治??；不需要激發(fā)細(xì)胞的所有全能性，因為培養(yǎng)的目標(biāo)是特定的器官，A錯誤；

B；用臍帶血中的干細(xì)胞不能治療這個孩子所有的疾??；如傳染性疾病等，B錯誤；

C；如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官；需要用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，然后發(fā)育成器官用于移植，C正確；

D；自體器官移植不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此，如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，不需要給他使用免疫抑制藥物，D錯誤。

故選ABD。

【點睛】11、A:D【分析】【分析】

由題圖信息分析可知；圖中首先利用培養(yǎng)基擴增菌體，然后在涂布在平板上，再通過影印法將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中，分別是基本培養(yǎng)基；完全培養(yǎng)基；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，而氨基酸營養(yǎng)缺陷型菌株由于發(fā)生基因突變無法合成某種氨基酸只能在完全培養(yǎng)基上生長，據(jù)此利用培養(yǎng)基的種類便可以選擇出氨基酸突變株。

【詳解】

A；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長；氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④中含有菌落，①②④為完全培養(yǎng)基，③中影印處無菌落，③為基本培養(yǎng)基，A正確；

B；紫外線可以提高突變的頻率；而A操作即培養(yǎng)的目的是提高已經(jīng)突變菌株的濃度（A操作不能提高突變率），即增加突變株的數(shù)量，B錯誤；

C；B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面；再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C錯誤；

D；從圖中可看出；D在③基本培養(yǎng)基中無法生長，在完全培養(yǎng)基中可生長，說明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進行純化培養(yǎng)，D正確。

故選AD。12、A:B:C【分析】【分析】

聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種，首先要進行目的菌株的篩選，可將咸湖水接種在含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，篩選培養(yǎng)得到嗜鹽細(xì)菌；然后，從選擇培養(yǎng)基上挑選多個單菌落分別進行擴大培養(yǎng)，擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基；最后檢測嗜鹽細(xì)菌的數(shù)目和PHA的產(chǎn)量，選擇PHA產(chǎn)量最高的嗜鹽細(xì)菌作為目的菌株。

【詳解】

A；PHA是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要篩選嗜鹽細(xì)菌，步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，A錯誤；

B；步驟③培養(yǎng)基濃度過高；會導(dǎo)致菌體失水死亡，不利于嗜鹽細(xì)菌的生長，B錯誤；

C；步驟④擴大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)基中無需加入瓊脂，C錯誤；

D；要挑選高產(chǎn)聚羥基脂肪酸酯（PHA）的嗜鹽菌；挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量，進行比較，D正確。

故選ABC。13、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一種個體微小結(jié)構(gòu)簡單；只含一種核酸(DNA或RNA)和蛋白質(zhì)組成的，必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞結(jié)構(gòu)生物。

【詳解】

A；噬菌體在細(xì)菌細(xì)胞中；沒有裂解細(xì)菌，細(xì)菌繁殖導(dǎo)致透明的平板培養(yǎng)一段時間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，A正確；

B；噬菌體樣品應(yīng)有足夠的稀釋度；以保證初期一個細(xì)菌最多被一個噬菌體吸附，如果稀釋度不夠，會出現(xiàn)兩個或多個噬菌體吸附同一個細(xì)菌，從而導(dǎo)致噬菌斑數(shù)量減少，噬菌斑計數(shù)結(jié)果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低，B正確；

C、若平均每個平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價為：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C錯誤；

D；若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細(xì)菌；會導(dǎo)致形成噬菌斑數(shù)量減少，從而導(dǎo)致噬菌斑計數(shù)結(jié)果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低，D正確。

故選ABD。14、B:C:D【分析】【分析】

胚胎工程技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富；目前在醫(yī)學(xué)和生產(chǎn)上應(yīng)用較多的是體外受精；胚胎移植和胚胎分割等，借助這些技術(shù)，可以進一步挖掘動物的繁殖潛力。哺乳動物的體外受精技術(shù)主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精等步驟。采集到的卵母細(xì)胞和精子，要分別在體外進行成熟培養(yǎng)和獲能處理，然后才能用于體外受精。

【詳解】

A；人工授精后形成的早期胚胎在一定時間內(nèi)并未與母體子宮建立組織上的聯(lián)系；A錯誤；

B；如果是人工授精的方式進行輔助生殖技術(shù)；就不需要胚胎移植，B正確；

C；克隆技術(shù)屬于無性繁殖；試管動物的培育涉及精卵結(jié)合，屬于有性生殖，C正確；

D；受體的生殖周期將影響人工授精和試管動物技術(shù)的成功率；故人工授精和試管動物技術(shù)都要注意受體的生殖周期，D正確。

故選BCD。15、A:B:C:D【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人。

3；生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

AB；生物武器致病能力強、攻擊范圍廣；第二次世界大戰(zhàn)中，侵華日軍在我國多個地區(qū)使用過細(xì)菌武器，給我國人民帶來很大苦難，他們的種種暴行遭到國際輿論的一致譴責(zé)。一些恐怖組織或個人在試圖尋找各種大規(guī)模殺傷性武器，而生物武器相對容易獲得，也便于攜帶和釋放，一旦被他們利用，將產(chǎn)生極大的危害，AB正確；

C；利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以制造各種新型致病菌；這些人類沒有接觸過的致病菌可以讓大批感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)，C正確；

D；1975年3月《禁止生物武器公約》生效；清除生物武器威脅，防止生物武器擴散是生物安全防控的重要方面，徹底銷毀生物武器是全世界愛好和平的人民的共同期望，D正確。

故選ABCD。16、A:C:D【分析】【分析】

科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞；獲得了類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，將它稱之為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，簡稱iPS細(xì)胞。因為誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，因此iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。

【詳解】

A；由題干可知；輸卵管上皮細(xì)胞能合成、分泌細(xì)胞分化抑制因子，為了維持iPS細(xì)胞的未分化狀態(tài)和全能性，培養(yǎng)iPS細(xì)胞時可加入輸卵管上皮細(xì)胞，A正確；

B；通過病毒介導(dǎo)或者其他的方式將轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入皮膚細(xì)胞；應(yīng)用有活性的病毒，滅活病毒不能將外源DNA片段帶入宿主細(xì)胞，B錯誤；

C；體細(xì)胞重編程為iPS細(xì)胞時；關(guān)閉了體細(xì)胞特異性的表達的基因，同時開啟了使細(xì)胞全能性分化的基因，可以維持iPS細(xì)胞的未分化狀態(tài)和全能性，C正確；

D；由題干可知；iPS細(xì)胞特性與胚胎干細(xì)胞極為相似，胚胎干細(xì)胞為圓形或扁圓形，因此可以通過觀察細(xì)胞形態(tài)，初步鑒定iPS細(xì)胞是否誘導(dǎo)成功，D正確。

故選ACD。三、填空題(共5題，共10分)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO218、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）20、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。21、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤?！窘馕觥垮e誤四、判斷題(共3題，共12分)22、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實；說明并未開始實際應(yīng)用。

故錯誤。23、A【分析】【詳解】

中國政府對于“克隆人”的態(tài)度是禁止生殖性克隆人，積極支持制定《禁止生殖性克隆人國際公約》，堅決反對克隆人，不允許進行任何生殖性克隆人實驗。故該說法正確。24、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，則可能通過減數(shù)分裂進入到花粉細(xì)胞中，進而傳入環(huán)境中的其他生物體內(nèi)。本說法正確。五、實驗題(共2題，共4分)25、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

（1）用丙肝病毒對小鼠進行免疫后；小鼠的B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗丙肝病毒的抗體，從該小鼠的脾細(xì)胞中能獲得產(chǎn)生該抗體的B淋巴細(xì)胞。B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能無限增殖，而骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖，故融合之前的兩種細(xì)胞中，能通過動物細(xì)胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是骨髓瘤細(xì)胞。

（2）誘導(dǎo)細(xì)胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶；能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使得細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜具有一定的流動性，在滅活病毒的誘導(dǎo)下，其上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜會發(fā)生融合。細(xì)胞融合后產(chǎn)生的融合細(xì)胞有B細(xì)胞間的融合；骨髓瘤細(xì)胞間的融合及B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，會產(chǎn)生三類細(xì)胞。篩選1是指利用選擇培養(yǎng)基進行篩選得到雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體除了抗丙肝病毒的抗體外，還可能有其他類型，故篩選2是指進行多次的克隆化培養(yǎng)和專一性抗體檢測，以得到能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）實驗的自變量是培養(yǎng)液中接種雜交瘤細(xì)胞的數(shù)量，因變量為一定時間內(nèi)抗丙肝病毒抗體的數(shù)量，除自變量外，其他條件要相同且適宜。所以實驗思路為：將適宜的動物細(xì)胞培養(yǎng)液分為體積相同的幾組（可自設(shè)組數(shù)）。在不同組別中接種不同量的能產(chǎn)生丙肝病毒的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，一定時間后測定培養(yǎng)液中的抗體含量?！窘馕觥?1)給小鼠注射丙肝病毒使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)骨髓瘤細(xì)胞。

(2)糖蛋白蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子選擇培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

(3)將適宜的動物細(xì)胞培養(yǎng)液分為體積相同的幾組（可自設(shè)組數(shù)）。在不同組別中接種不同量的能產(chǎn)生丙肝病毒的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，一定時間后測定培養(yǎng)液中的抗體含量26、略

【分析】【分析】

1；單克隆抗體：由單個B淋巴細(xì)胞進行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。具有特異性強、靈敏度高；并可能大量制備的特點。

2；單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞(A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞)，不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）單克隆抗體制備的基本步驟：對小鼠進行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過篩選；克隆化培養(yǎng)和擴大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體；此過程依賴的生物技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合等。剪碎后的組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

（2）誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的試劑是聚乙二醇（PEG）；因此試劑X是聚乙二醇（PEG）。用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，只有雜交瘤細(xì)胞才能成活，因此經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細(xì)胞Y具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體的特點。上清液中含有雜交瘤細(xì)胞，由于雜交瘤細(xì)胞能分泌抗體，故利用抗原-抗體雜交技術(shù)對上清液進行抗體陽性檢測，以便篩選出能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞，選擇陽性孔中的細(xì)胞（即能產(chǎn)生芍藥苷抗體的細(xì)胞）繼續(xù)植入小鼠腹腔內(nèi)進行體內(nèi)培養(yǎng)，從小鼠腹水中可提取到抗芍藥苷的單克隆抗體，也可以將陽性孔中的細(xì)胞在體外進行擴大培養(yǎng)。

（3）①正常對照組：前期處理為腹腔注射生理鹽水(空白對照)；后期處理為a腹腔注射生理鹽水(空白對照)；造模組：模型組為口服生理鹽水(產(chǎn)生模型小鼠)，陽性藥組為口服芍藥甘草湯(藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛作用)，實驗組為c口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯(檢驗去除芍藥苷的芍藥甘草湯是否具有鎮(zhèn)痛作用)。

②因為造模組注射了冰醋酸，結(jié)合題意可知，冰醋酸能引起小鼠的扭體反應(yīng)，因此前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著高于正常對照組，表明致痛處理成功。如果芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一，則陽性藥組小鼠的扭體次數(shù)最低，實驗組小鼠雖然口服的是去除了芍藥苷的芍藥甘草湯，但芍藥甘草湯中除了芍藥苷還有其他成分能夠起到鎮(zhèn)痛作用，則實驗組小鼠扭體次數(shù)低于模型組，因此若結(jié)果為實驗組小鼠扭體次數(shù)高于陽性藥組低于模型組，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一?！窘馕觥?1)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合胰蛋白（膠原蛋白）

(2)聚乙二醇（PEG）既能大量增殖，又能產(chǎn)生抗體抗原—抗體雜交

(3)腹腔注射生理鹽水口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯高于實驗組小鼠扭體次數(shù)高于陽性藥組低于模型組六、綜合題(共2題，共12分)27、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取