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文檔簡介
調(diào)控性非編碼小RNA-siRNA知識點
主講人:張志霞干擾小RNA—siRNA?干擾小RNA(SmallinterferingRNA;siRNA)有時稱為短干擾RNA(shortinterferingRNA)或沉默RNA(silencingRNA)。(一)干擾小RNA—siRNA的結(jié)構(gòu)siRNA通常是一段長20-25個核苷酸的雙股RNA(dsRNA),其兩股分別在RNA的兩端超出另一端2個核苷酸,每一股各有一個5'磷酸基末端與一個3'羥基末端。圖示如下:(二)干擾小RNA-siRNA的作用機制與功能1.
長dsRNA(可來自發(fā)夾,互補RNA和RNA依賴性RNA聚合酶)被稱為Dicer的內(nèi)切核糖核酸酶切割。Dicer切割長dsRNA以形成短干擾RNA或siRNA;這使得分子能夠形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RISC)。2.
一旦siRNA進入細胞,它就會被整合到其他蛋白質(zhì)中以形成RISC。3.
如果siRNA成為RISC復(fù)合物的一部分,siRNA就展開以形成單鏈siRNA。4.
由于其在5'末端的堿基配對而在熱力學(xué)上較不穩(wěn)定的鏈被選擇作為RISC復(fù)合物的一部分。5.
作為RISC復(fù)合物一部分的單鏈siRNA現(xiàn)在可以掃描并找到互補的mRNA(二)干擾小RNA-siRNA的作用機制與功能6.
一旦單鏈siRNA(RISC復(fù)合物的一部分)與其靶mRNA結(jié)合,它就會誘導(dǎo)mRNA切割。7.
現(xiàn)在切割mRNA并被細胞識別為異常。這導(dǎo)致mRNA的降解,并且反過來不將mRNA翻譯成氨基酸然后轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)。從而沉默編碼該mRNA的基因。
siRNA也類似于miRNA,然而,miRNA來自較短的莖環(huán)RNA產(chǎn)物,通常通過抑制翻譯來沉默基因,并且具有更廣泛的作用特異性,而siRNA通常通過在翻譯前
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