植物組織培養(yǎng)第十章.ppt

1、第10章 植物胚胎培養(yǎng),學(xué)習(xí)目的與要求 學(xué)習(xí)重點(diǎn)與難點(diǎn) 本章主要內(nèi)容 1 胚胎培養(yǎng)的意義和內(nèi)容 2 胚胎培養(yǎng)的一般方法,第10章 植物胚胎培養(yǎng),學(xué)習(xí)目的與要求 掌握植物胚胎培養(yǎng)的意義和內(nèi)容，了解植物胚胎培養(yǎng)的方法。,第10章 植物胚胎培養(yǎng),學(xué)習(xí)重點(diǎn)與難點(diǎn) 重點(diǎn)：植物胚胎培養(yǎng)的意義和內(nèi)容 ； 難點(diǎn)：植物胚胎培養(yǎng)的意義。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)1 植物胚胎培養(yǎng)的意義及內(nèi)容 1.1 意義,植物胚胎培養(yǎng)是指對(duì)植物的胚(種胚)及胚 器官(如子房、胚珠)進(jìn)行人工離體無菌培養(yǎng)， 使其發(fā)育成幼苗的技術(shù)。 胚胎培養(yǎng)是植物組織培養(yǎng)的一個(gè)主要領(lǐng) 域，作為一種育種手段在植物育種中得到應(yīng)用。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)1

2、植物胚胎培養(yǎng)的意義及內(nèi)容 1.1 意義,植 物 胚 胎 培 養(yǎng) 具 有 重 要 意 義,克服雜種胚的敗育，獲得稀有雜種,獲得單倍體和多倍體植株,打破種子休眠，促進(jìn)胚萌發(fā),快速繁殖良種，縮短育種周期,克服種子生活力低下和自然不育性，提高種子發(fā)芽率,提高后代抗性，改良品質(zhì),研究胚胎發(fā)育的過程和控制機(jī)制,種子活力的快速測(cè)定,種質(zhì)資源的搜集和保存,第10章 植物胚胎培養(yǎng)1 植物胚胎培養(yǎng)的意義及內(nèi)容 1.2 內(nèi)容,胚培養(yǎng)（成熟 或未成熟）,胚珠培養(yǎng)（受精 或未受精）,子房培養(yǎng)（授粉 或未授粉）,植物離體受精,胚乳培養(yǎng),植物胚 胎培養(yǎng),第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.1 離體胚培養(yǎng),（1

3、）培養(yǎng)方法,種子（帶種皮） 藥劑表面消毒,無菌操作 剝離出種胚,胚處理完整 種胚部分種胚 幼芽胚根,接種、培養(yǎng),植物胚培養(yǎng)的一般程序,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.1 離體胚培養(yǎng),（2） 離 體 胚 培 養(yǎng) 技 術(shù) 關(guān) 鍵,植物材料,胚的剝離,胚的處理,培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng),培養(yǎng)基滲透壓,生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì),培養(yǎng)基pH,培養(yǎng)環(huán)境,胚齡大的材料容易成功,剝離完整的種胚,胚的兩極性和完整結(jié)構(gòu),全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，尤其是幼胚培養(yǎng),盡可能提供與原胚相似的環(huán)境條件,影響愈傷化和發(fā)育途徑,pH值因種類或胚器官的不同而異,光照：弱光或黑暗；溫度：2530,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.2

4、胚珠培養(yǎng),（1）胚珠培養(yǎng)的意義 有利于合子和早期原胚的培養(yǎng)； 胚分化不全的種子的胚培養(yǎng)； 獲得雜種后代和優(yōu)良品種； 離體授粉的需要； 獲得無毒苗木。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.2 胚珠培養(yǎng),植 物 胚 珠 培 養(yǎng) 方 法,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.2 胚珠培養(yǎng),（3）胚珠離體培養(yǎng)的技術(shù)關(guān)鍵 胚珠剝離時(shí)期的選擇 雜種敗育的類型：珠被被增生抑制幼胚的發(fā)育；幼胚先于周圍組織退化；周圍組織先于幼胚退化。根據(jù)雜種敗育的類型選擇胚珠的剝離時(shí)期，在夭折發(fā)生之前剝離胚珠進(jìn)行培養(yǎng)。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.2 胚珠培養(yǎng),（3）胚珠離體培養(yǎng)

5、的技術(shù)關(guān)鍵 胎座的有無 在離體培養(yǎng)中胎座組織對(duì)胚珠的生長(zhǎng)和發(fā)育 有利。 培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件 培養(yǎng)基的成份、滲透壓對(duì)胚珠培養(yǎng)起著重要 作用。 多數(shù)培養(yǎng)物的溫度控制在25左右。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.3 子房培養(yǎng),（1）子房培養(yǎng)的意義,子 房 培 養(yǎng) 的 意 義,花被功能的研究,離體條件下形成果實(shí),離體授粉的需要,單倍體植株的培育,有效地挽救雜種胚的敗育,柱頭,花絲,子房壁,胎座,胚珠,右圖示意子房的結(jié)構(gòu),第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.3 子房培養(yǎng),（2）子房培養(yǎng)的方法 取未授粉或授粉后的子房，進(jìn)行消毒，在無 菌的條件下接種于培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)一

6、段時(shí)間后，在無菌條件下將膨大的子房剖開， 從子房中剖出胚，轉(zhuǎn)入適合胚培養(yǎng)的培養(yǎng)基中 直到長(zhǎng)成正常苗。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.3 子房培養(yǎng),（3）技術(shù)關(guān)鍵 培養(yǎng)材料的選擇 根據(jù)需要進(jìn)行選擇，如：培養(yǎng)單倍體植株需 要采用未授粉的離體子房。 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件 營(yíng)養(yǎng)成分和激素組成 對(duì)子房培養(yǎng)有影響。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.4 胚乳培養(yǎng),（1）胚乳培養(yǎng)的意義 創(chuàng)造新品種 ：誘導(dǎo)產(chǎn)生三倍體 ；產(chǎn)生多 倍體、單倍體及非整倍體 ； 挽救雜種敗育； 研究貯藏物的代謝。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.3 胚乳培養(yǎng),（2）胚乳培養(yǎng)的方法 取

7、胚乳已發(fā)育到細(xì)胞期的果實(shí)或種子，進(jìn)行 表面滅菌，然后在無菌條件下剝離胚乳接種培 養(yǎng)。胚乳培養(yǎng)有帶胚培養(yǎng)和不帶胚培養(yǎng)2種方 式。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.3 胚乳培養(yǎng),（3）技術(shù)關(guān)鍵 胚乳發(fā)育時(shí)期的影響 接種時(shí)胚乳的發(fā)育時(shí)期與愈傷組織的發(fā)生及 其頻率密切相關(guān)。 處于發(fā)育早期的胚乳，愈傷組織的誘導(dǎo)頻率很低 ； 處于游離核期或剛轉(zhuǎn)入細(xì)胞期的核型胚乳，很難得到 愈傷組織 ；處于旺盛生長(zhǎng)期的胚乳，在離體條件下最 容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.3 胚乳培養(yǎng),（3）技術(shù)關(guān)鍵 胚在胚乳培養(yǎng)中的作用 在胚乳培養(yǎng)中，是否需原位胚的參與，主要和接

8、 種時(shí)胚乳的生理狀態(tài)(或胚乳的發(fā)育期)有關(guān)。未成熟 胚乳，尤其是處于旺盛生長(zhǎng)期的未成熟胚乳，在誘導(dǎo) 培養(yǎng)基上無須原位胚的參與就能形成愈傷組織。在成 熟的胚乳，特別是干癟種子中的胚乳，生理活動(dòng)非常 微弱，在誘導(dǎo)其脫分化形成愈傷組織之前，必須借助 原位胚的萌發(fā)使其活化。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.3 胚乳培養(yǎng),（3）技術(shù)關(guān)鍵 培養(yǎng)基和激素的影響 基本培養(yǎng)基一般選用MS；在培養(yǎng)基中添加 一定濃度的有機(jī)物如水解酪蛋白(CH)、酵母 提取物(YE)等是必要的。 植物在經(jīng)胚乳愈傷組織再生植株時(shí)對(duì)激素的 種類和濃表現(xiàn)出嚴(yán)格的選擇性。 其它因素 蔗糖濃度；最適溫度；光照條件；pH值等。

9、,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.4 植物離體受精,（1）概念及意義 離體受精指在離體條件下通過在裸露的胚珠 上授粉而結(jié)實(shí)的方法。從花粉萌發(fā)到受精形成 種子，從種子萌發(fā)到幼苗的形成的整個(gè)過程均 在離體條件下進(jìn)行。 離體受精技術(shù)在克服受精前障礙以及克服受 精后障礙有著極其重要的意義。,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.4 植物離體受精,花藥,試管內(nèi)授粉,胚珠,10d,胚珠培養(yǎng),3周后,（2）植物離體受精（圖解）,第10章 植物胚胎培養(yǎng)2 胚胎培養(yǎng)的一般方法 2.4 植物離體受精,（3）離體受精成功的技術(shù)關(guān)鍵 花粉的采集和滅菌 外植體的選擇 適合的培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件,第10章 植物胚胎培養(yǎng) 本章小結(jié),本章首先介紹了植物胚胎培養(yǎng)的概念、內(nèi) 容和意義，詳細(xì)介紹了植物胚培養(yǎng)的方法，簡(jiǎn) 要介紹了胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)、胚乳