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1、.1. 丙二醛(MDA )是衡量氧化脅迫程度的常用指標(biāo)之一,能反映植物膜脂過(guò)氧化的程度。生物體內(nèi),自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng), 氧化終產(chǎn)物為丙二醛,會(huì)引起蛋白質(zhì)、 核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合, 且具有細(xì)胞毒性。 脂質(zhì)氧化終產(chǎn)物丙二醛(MDA )在體外影響線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物及線(xiàn)粒體內(nèi)關(guān)鍵酶活性。 MDA 是膜脂過(guò)氧化最重要的產(chǎn)物之一, 它的產(chǎn)生還能加劇膜的損傷。 因此在植物衰老生理和抗性生理研究中 MDA 含量是一個(gè)常用指標(biāo),可通過(guò) MDA 了解膜脂過(guò)氧化的程度,以間接測(cè)定膜系統(tǒng)受損程度以及植物的抗逆性。2. 還原糖是指具有還原性的糖類(lèi)。在糖類(lèi)中,分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基
2、的二糖都具有還原性。還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等??扇苄蕴鞘侵参矬w內(nèi)一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),水分脅迫、鹽脅迫、冷脅迫等不良環(huán)境都會(huì)使植物體內(nèi)的可溶性糖含量發(fā)生顯著變化。3. 葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素,是一類(lèi)含脂的色素家族,位于類(lèi)囊體膜。葉綠素吸收大部分的紅光和紫光但反射綠光, 所以葉綠素呈現(xiàn)綠色, 它在光合作用的光吸收中起核心作用。 葉綠素含量的高低直接影響著植物葉片的光合能力,葉片失綠是植物受到重金屬毒害后出現(xiàn)的普遍現(xiàn)象。 Hg 會(huì)對(duì)植物進(jìn)行光合作用的場(chǎng)所 -葉綠體造成破壞。4. 谷胱甘肽 (GSH)是一種含 -酰胺鍵和巰基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸組成
3、。谷胱甘肽能幫助保持正常的免疫系統(tǒng)的功能, 并具有抗氧化作用和整合解毒作用,半胱氨酸上的巰基為其活性基團(tuán)(故常簡(jiǎn)寫(xiě)為 G-SH),易與某些藥物(如撲熱息痛)、毒素(如自由基、碘乙酸、芥子氣,鉛、汞、砷等重金屬)等結(jié)合,而具有整合解毒作用。5. 過(guò)氧化物酶是由微生物或植物所產(chǎn)生的一類(lèi)氧化還原酶,它們能催化很多反應(yīng)。過(guò)氧化物酶是以過(guò)氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶。 主要存在于細(xì)胞的過(guò)氧化物酶體中, 以鐵卟啉為輔基, 可催化過(guò)氧化氫氧化酚類(lèi)和胺類(lèi)化合物, 具有消除過(guò)氧化氫和酚類(lèi)、胺類(lèi)毒性的雙重作用。.6. 超氧化物歧化酶 (Superoxide Dismutase, SOD),別名肝蛋白。 SOD
4、 是一種源于生命體的活性物質(zhì), 是一種含有金屬元素的活性蛋白酶, 能消除生物體在新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)。 SOD 具有特殊的生理活性,是生物體內(nèi)清除自由基的首要物質(zhì)。 SOD 在生物體內(nèi)的水平高低意味著衰老與死亡的直觀(guān)指標(biāo)。7. 過(guò)氧化氫酶,是催化過(guò)氧化氫分解成氧和水的酶, 使得 H2O2 不至于與 O2 在鐵螯合物作用下反應(yīng)生成非常有害的 -OH,存在于細(xì)胞的過(guò)氧化物體內(nèi)。8. 可溶性蛋白:指可以以小分子狀態(tài)溶于水或其他溶劑的蛋白。 通常在植物生理、微生物、食品加工等實(shí)驗(yàn)中作為重要指標(biāo)。 如可溶性蛋白是植物抗寒性的重要指標(biāo)之一。可溶性蛋白是重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), 他們的增加和積
5、累能提高細(xì)胞的保水能力, 對(duì)細(xì)胞的生命物質(zhì)及生物膜起到保護(hù)作用, 因此經(jīng)常用作篩選抗性的指標(biāo)之一。9. 非蛋白巰基( NPT)含量:非蛋白巰基( non-protein thiol ,NPT)是植物重金屬解毒機(jī)制中的主要物質(zhì)之一, 它主要由富含巰基的物質(zhì)組成, 包括植物螯合肽( PCs)、谷胱甘肽(GSH)、-谷氨酰半胱氨酸 ( -EC)、半胱氨酸( cysteine)等。巰基能結(jié)合 Hg 離子,減少細(xì)胞內(nèi)自由態(tài) Hg,達(dá)到解毒的目的。因此,桐花樹(shù)不同部位的 NPT 含量可以反映桐花樹(shù)對(duì) Hg 的耐受能力。10. 凝膠層析法 (gel chromatography)也稱(chēng)分子篩層析法,是指混合物
6、隨流動(dòng)相經(jīng)過(guò)凝膠層析柱時(shí), 其中各組分按其分子大小不同而被分離的技術(shù)。 凝膠層析法已廣泛用于酶、蛋白質(zhì)、氨基酸、多糖、激素、生物堿等物質(zhì)的分離提純。11. 電泳:帶電顆粒在電場(chǎng)作用下,向著與其電性相反的電極移動(dòng),稱(chēng)為電泳(electrophoresis,EP)。利用帶電粒子在電場(chǎng)中移動(dòng)速度不同而達(dá)到分離的技術(shù)稱(chēng)為電泳技術(shù)。12. 雙向電泳( two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電泳和SDS-PAGE 的組合,即先進(jìn)行等電聚焦電泳(按照pI 分離),然后再進(jìn)行SDS-PAGE(按照分子大?。?,經(jīng)染色得到的電泳圖是個(gè)二維分布的蛋白質(zhì)圖。利用電泳技術(shù)分離和純化桐花幼苗中與汞脅迫相關(guān)的蛋白,進(jìn)一步研究分析這些蛋白的作用和性質(zhì)。.13.
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