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文檔簡介
1、30.09.2020,2,實驗動物質(zhì)量監(jiān)測的意義,生物學(xué)實驗研究的四個基本條件 Animal,Equipment,Information,Reagent ,簡稱AEIR四要素 這4個要素在整個實驗研究中具有同等重要的地位,不能忽略或偏廢。事實上,實驗動物質(zhì)量往往成為制約性要素,影響整個實驗的質(zhì)量和水平 實驗動物質(zhì)量監(jiān)測是實驗動物科學(xué)的重要內(nèi)容,是確保實驗動物質(zhì)量的必要手段。,30.09.2020,3,1、實驗工作人員的健康和生命的保證,常見的人畜共患病:流行性出血熱、狂犬病、猴B病毒、淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等,30.09.2020,4,2、動物生產(chǎn)和繁殖的保證,動物一旦染上傳染病
2、,則種群難以凈化,一些烈性傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可致動物全軍覆沒,造成巨大經(jīng)濟損失。,30.09.2020,5,3、實驗結(jié)果準確性、規(guī)律性、重復(fù)性的保證,30.09.2020,6,實驗動物質(zhì)量監(jiān)測主要包括以下幾個方面: 遺傳質(zhì)量 微生物與寄生蟲質(zhì)量 飼料質(zhì)量 環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測。,30.09.2020,7,第一節(jié) 遺傳質(zhì)量監(jiān)測,實驗動物的遺傳背景與反應(yīng)特性,是影響實驗結(jié)果的重要因素。 不同遺傳背景與反應(yīng)特性的實驗動物,對同一刺激有時可引起不同質(zhì)和量的反應(yīng)。 為了保存實驗動物品種品系特性。使實驗動物使用者在動物實驗中能得到正確的、可重復(fù)的科學(xué)數(shù)據(jù),實驗動物生產(chǎn)者在嚴格遵守品系繁育技術(shù)路線的同時
3、,還必須努力做好實驗動物遺傳質(zhì)量的嚴格監(jiān)測,以防止實驗動物遺傳上的污染和變異。,30.09.2020,8,如: BALB/c對放射線比其他品系更為敏感。 C57BL/6腫瘤發(fā)生率低,A系高。 BALB/c和C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異 SHR為自發(fā)性高血壓大鼠,心血管疾病發(fā)生率高,30.09.2020,9,一、群體管理,管理上人為的粗心最易引起遺傳上的混雜,所以對育種群進行恰當?shù)墓芾硎潜WC遺傳質(zhì)量的最有效方法。 每一個實驗動物育種機構(gòu)都應(yīng)當認真執(zhí)行良好的育種制度,完善地保持育種記錄,基礎(chǔ)群應(yīng)有系譜記錄。要做到以上要求,最重要的因素就是要有訓(xùn)練有素、經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員。,30.
4、09.2020,10,二、免疫學(xué)標記監(jiān)測,(一)皮膚移植法 這是目前最常用和最靈敏的檢測亞系內(nèi)或亞系間組織相容性基因差異的方法。在小鼠和大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮膚移植法。皮膚移植法靈敏度高。易掌握,經(jīng)濟。不需昂貴設(shè)備,易對植皮成活情況進行觀察和判斷。能有效地測出新發(fā)生的、造成亞系變異的遺傳混雜和突變。,30.09.2020,11,(二)混合淋巴細胞反應(yīng) 混合淋巴細胞反應(yīng)的原理為:異源動物或遺傳上有差異個體的淋巴細胞混合培養(yǎng)一定時間后,這些細胞會增殖,甚至進一步裂解。此反應(yīng)結(jié)果可在79天獲得,定期地從群體中抽取足夠量的動物進行監(jiān)測能夠維護實驗動物的品質(zhì)。,30.09.2020,12,(三)
5、淋巴組織移植 用供體的均質(zhì)淋巴器官,如骨髓、脾、淋巴結(jié)、胸腺或胚胎肝臟制備出單細胞懸液。然后將適量活細胞通過靜脈或腹腔注射到受體動物體內(nèi),組織相容性由受體中存活者及脾增大者來確定,也可以用放射學(xué)方法。根據(jù)移植細胞的存活數(shù)測定。,30.09.2020,13,三、生化標記監(jiān)測,通過多種形式的電泳和電聚集??蓹z定生化標記即同工酶或蛋白質(zhì),常用的電泳介質(zhì)有乙酸纖維素膜、淀粉凝膠、聚丙烯酰胺凝膠。每一種標記系統(tǒng)做特異性染色,最后將得到的帶型與公布的生化遺傳圖式進行比較。如中華人民共和國國家標準GB;T14923-2001公布9種常用近交系大鼠生化位點標記基因(表5-2)。,30.09.2020,14,表
6、5-2 常用近交系大鼠生化位點標記基因,30.09.2020,15,四、骨骼形態(tài)特征監(jiān)測,常采用“下頜骨分析法”來鑒別和檢測大小鼠的亞系變異。 將年齡、性別、體重相當?shù)拇笫蠡蛐∈筇幩篮?,分辨右下頜骨,加以標記,在直角坐標系上測量出多個形態(tài)特征參考點距離。 將所有測量的平均數(shù)作統(tǒng)計分析,利用判別函數(shù)確定下頜骨形狀。如果測量值集中,則表明被測亞系間無顯著的遺傳變異。,30.09.2020,16,五、染色體帶型監(jiān)測,可以利用染色體分帶技術(shù),鑒別C帶和Q帶作為染色體標記,用來區(qū)分大、小鼠的近交系,在多數(shù)大、小鼠的近交系中,所有中期染色體都存在C帶材料,同源染色體的C帶區(qū)域大小相同;不同的近交系,C帶材
7、料大小不同,是品系特異的,是一種很有價值的檢測亞系變異和混雜來源的方法。,30.09.2020,17,六、現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù),傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法來源于過去研究者對哺乳動物進行遺傳分析時采用的研究手段。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,分子生物學(xué)技術(shù)有可能取代傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法,其優(yōu)點是多態(tài)性高,位點豐富,實驗技術(shù)成熟,直接涉及生物的遺傳基礎(chǔ),DNA樣品容易保存和運輸?shù)鹊取?30.09.2020,18,1限制性片斷長度多態(tài)(RFLP)技術(shù) 當動物基因組DNA被限制性內(nèi)切酶消化時,酶能夠識別雙鏈DNA鏈上的特定核苷酸序列,并在每條DNA鏈上切割產(chǎn)生一個切口,使DNA裂解為片斷。這些片斷的長度在動物群體中存
8、在變異,造成多態(tài)現(xiàn)象。通過DNA電泳和DNA探針分子雜交技術(shù),即可觀察到不同帶型。,30.09.2020,19,例如:位于小鼠第2號染色體補體-5(complement-5)位點(He)的pC5探針,當用Hind消化小鼠DNA時,C3H品系將產(chǎn)生一條2.7kb的帶型,而AKP品系將產(chǎn)生6.0kb和4.6kb兩條帶型。從而可以在He位點上區(qū)別這兩個品系。目前所報道的RFLP位點已多達1098個,給遺傳學(xué)研究帶來許多便利條件。,30.09.2020,20,2簡單序列長度多態(tài)(SSLP)技術(shù) 簡單序列長度多態(tài)位點是動物基因內(nèi)廣泛存在的由l4個核苷酸組成的成串的重復(fù)序列,又稱為微衛(wèi)星(micro sa
9、tellite)。估計這樣的DNA結(jié)構(gòu)在哺乳動物基因組內(nèi)的數(shù)目多達5萬10萬個。在每個特定的位點上,重復(fù)序列的長度在不同品系中存在著差異。采用夾在這些序列兩端的引物,通過聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)和電泳,就能觀察到這些位點的差異,從而區(qū)分不同的品系。,30.09.2020,21,例如:小鼠第16條染色體的D16Mit4位點,其PCR產(chǎn)物的大?。╞p)在常用近交系中分別如下:C57BL/6-132,DBA/2-123,A/J-147,C3H-123,BALB/c-149,AKR-126,CBA-132。SSLP測試技術(shù)比RFLP技術(shù)簡便,多態(tài)性高,需要的DNA樣品較少,引物容易獲得,推廣應(yīng)用前景可
10、觀。,30.09.2020,22,3DNA指紋(finger printing)技術(shù) 上述兩種DNA技術(shù)是針對單個DNA位點進行的測試。DNA指紋技術(shù)一次可同時測試多個位點,所以有一定的優(yōu)勢。DNA指紋技術(shù)經(jīng)過電泳后可獲得十幾到幾十條帶,而這些帶型在個體之間或品系之間有差異,如同人類的指紋在每個人都不同一樣,因此而得名。通常有兩種方法獲得DNA指紋圖。一是用限制性內(nèi)切酶和小衛(wèi)星探針技術(shù)獲得的DNA指紋。二是用較短的隨機擴增引物或小衛(wèi)星引物,通過PCR而獲得的DNA指紋。,30.09.2020,23,DNA指紋圖譜有時在亞系或亞群之間有區(qū)別,所以對亞系的監(jiān)測十分有用。但是DNA指紋的結(jié)果因為電泳
11、帶太多而不好辨認和比較。因此,也影響其在遺傳監(jiān)測和其他研究中的應(yīng)用。目前所做的DNA指紋比上述兩種DNA技術(shù)少,但隨著研究的深入和方法的改進,將來一定會有所突破。,30.09.2020,24,4隨機擴增多態(tài)(RAPD)技術(shù) RAPD技術(shù)是20世紀90年代發(fā)展起來的一種簡便、快捷的檢測基因組DNA多態(tài)性的遺傳標記技術(shù)。該項技術(shù)首先將動物目的基因組DNA提純、酶切,用含10個堿基的隨機引物,對DNA進行PCR擴增,經(jīng)電泳,便可在多個位點上得到擴增產(chǎn)物。各種DNA多態(tài)分析方法,,30.09.2020,25,如:DNA指紋、限制性片段長度多態(tài)(RFLP)等,雖然可直接檢測基因組的遺傳變異,但都不同程度
12、地存在操作復(fù)雜、需要特異性操作、需要事先知道動物基因組DNA序列等不足。而RAPD技術(shù),由于引物可任意改變,有可能找到任何一個個體特異的RAPD標記,從而為實驗動物的遺傳檢測和分析提供一個十分有效的工具。,30.09.2020,26,七、遺傳性狀監(jiān)測結(jié)果的分析,當被檢查的遺傳性狀與每個品系的遺傳概貌圖一致時,同時遺傳管理資料清晰、可信,可以認為有關(guān)品系的繁育生產(chǎn)正在正確地進行,該品系的動物遺傳質(zhì)量合格;若與遺傳概貌圖不一致時,可以考慮以下原因:,30.09.2020,27,1遺傳污染(genetic contamination) 這是最常見的遺傳變異,往往是由于遺傳學(xué)管理不善所致。這種情況如發(fā)
13、現(xiàn)得早,在被檢查的性狀中至少可以觀察到一個以上基因標記發(fā)生改變,出現(xiàn)雜合型,或與遺傳概貌不符的其他表型;如果發(fā)現(xiàn)得較遲,一些雜合基因可隨機地固定為單一的純合型,但與原品系的遺傳概貌不一致。出現(xiàn)上述情況均應(yīng)淘汰原品系,更換來源清楚、質(zhì)量合格的動物作為新種,重新進行品系的繁育。,30.09.2020,28,2. 遺傳漂變(genetic drift) 遺傳漂變是指一個品種或品系動物基因型在飼養(yǎng)的過程中可能發(fā)生隨機的改變。這種改變多由于近交系動物部分雜合基因尚未純合時即進行了分系,造成了亞系和支系的形成。監(jiān)測時可以看到一個品系所有的動物在12個基因標記上與原品系的遺傳概貌不符,但表型一致又均為純合型
14、。這種情況在經(jīng)同系異體移植試驗排除了遺傳污染后需按照亞系和支系重新命名。,30.09.2020,29,3遺傳突變(mutation) 遺傳突變在哺乳類動物中的頻率為10-5。在分析監(jiān)測結(jié)果時,如果僅看到一只動物單個基因標記出現(xiàn)雜合型,應(yīng)考慮有否發(fā)生遺傳突變。為了證實此點,往往需要根據(jù)動物編號查詢該只動物同窩兄妹或雙親的基因標記表型。如遺傳突變發(fā)生在親代,則同窩兄妹均應(yīng)為雜合型或分離產(chǎn)生不同的表型。,30.09.2020,30,如果在同窩兄妹或雙親中該基因標記的表型與遺傳概貌圖一致,應(yīng)考慮被測個體發(fā)生了遺傳突變。在檢查時如同時發(fā)現(xiàn)其他基因標記的表型與遺傳概貌圖不符,無論是雜合型還是純合型均應(yīng)考慮
15、發(fā)生了遺傳污染,應(yīng)立即淘汰換種。遺傳突變?nèi)鐭o特殊保留價值,在剔除突變的個體后,整個品系可以繼續(xù)保存;如有保存價值,可將突變個體單獨培育成同源突變近交系。,30.09.2020,31,第二節(jié) 微生物學(xué)與寄生蟲學(xué)監(jiān)測,如何控制微生物和寄生蟲,是實驗動物標準化的主要內(nèi)容之一。一般而言,科研中使用的實驗動物,其微生物和寄生蟲的控制級別越高,其結(jié)果就越精確、越可靠。,30.09.2020,32,一、監(jiān)測意義,1對實驗動物進行微生物、病毒與寄生蟲的監(jiān)控,對保證實驗研究的順利進行和工作人員的身體健康具有十分重要的意義。 實驗動物被集中飼養(yǎng),極易導(dǎo)致疾病的爆發(fā)與流行。實驗動物疾病的爆發(fā),除造成動物死亡外,還會
16、干擾實驗的順利進行,引起生物制品的污染,對人類健康產(chǎn)生危害。,30.09.2020,33,2對實驗動物飼養(yǎng)設(shè)施的監(jiān)測,為確保這些設(shè)施能否控制微生物污染提供依據(jù)。 3對引進的實驗動物進行檢疫,避免病原體入侵原有的動物群。 4如動物群發(fā)生疾病,為了確證病原,對患病動物進行病原學(xué)診斷,積累對疾病的認識,收集菌株和毒株,進一步研究病原,為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株。,30.09.2020,34,二、監(jiān)測方法,(一)實驗動物病毒學(xué)檢測方法 1血清學(xué)檢測 適用于各級各類實驗動物的經(jīng)常性檢測和疫情普查。常用方法有:酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、免疫熒光試驗(IFA)、免疫酶染色試驗(IEA)、血凝
17、試驗(HA)、血凝抑制試驗(HI)、病毒中和試驗、補體結(jié)合試驗、瓊脂擴散試驗。,30.09.2020,35,2病原學(xué)檢測 適用于動物群中有疾病流行,需要檢出病毒或確認病毒存在的情況。檢測方法有:病毒分離與鑒定,病毒顆粒、抗原或核酸的檢出,潛在病毒的激活,抗體產(chǎn)生試驗等。例如:采用HA或HI方法檢查患病動物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原;采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢查病毒基因組;采用核酸分子雜交技術(shù)或聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸。,30.09.2020,36,(二)實驗動物細菌學(xué)檢測方法 最常用的方法是病原菌的分離與培養(yǎng)或進行動物接種。部分病原菌,如:鼠傷寒沙門菌、
18、鼠棒狀桿菌、布氏桿菌、沙門菌、氣管敗血波氏桿菌等,可采取血清學(xué)方法,但仍需結(jié)合分離培養(yǎng)結(jié)果最后做出診斷。對于泰澤菌,由于不能在人工培養(yǎng)基上生長,因此宜采用組織壓片、鏡檢的方法進行檢查,并結(jié)合病理檢查結(jié)果最后做出診斷。,30.09.2020,37,(三)實驗動物真菌學(xué)檢測方法 目前主要采用沙氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。皮膚真菌一般在25培養(yǎng),深部真菌在37培養(yǎng)。不同的真菌具有一定的菌落特點,鏡下染色檢查可進行種屬鑒定,有時,還需借助于生物化學(xué)反應(yīng)結(jié)果和免疫學(xué)方法進行最后診斷。,30.09.2020,38,(四)實驗動物寄生蟲學(xué)檢測方法 1體外寄生蟲 肉眼觀察法、透明膠紙粘取法、拔毛取樣法、皮屑刮取法、黑背
19、景檢查法、解剖鏡下通體檢查法等,主要檢查蚤、虱、螨等節(jié)肢動物。,30.09.2020,39,2體內(nèi)寄生蟲 主要檢查蠕蟲和原蟲,可用直接涂片法(糞便、血液、臟器、腸內(nèi)容物)、飽和鹽水漂浮法或沉淀法、透明膠紙肛門周圍粘取法、組織或器官剖面壓印法、病變組織切片或壓片法、尿液的離心法(如查鼠膀胱線蟲)等。 實驗動物的微生物、寄生蟲檢測具體操作方法詳見國家標準實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)的檢測方法(嚙齒類和兔類)(GB/T14926.1-14926.41-200 1)。,30.09.2020,40,三、監(jiān)測要求,1選定監(jiān)測項目 任何一種實驗動物都有許多致病性微生物、寄生蟲,結(jié)合具體情況選擇合適的檢測項目,
20、既達到保證動物質(zhì)量的目的,又可節(jié)省人力物力。我國經(jīng)過十多年來對各地實驗動物感染病原微生物、寄生蟲情況的調(diào)查,結(jié)合其他國家的規(guī)定和經(jīng)驗,制定了我國嚙齒類和兔類微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)等級標準,貓、犬、猴等中型實驗動物,衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)實驗動物管理委員會亦有初步規(guī)定。,30.09.2020,41,2采樣數(shù)量和頻度 檢測結(jié)果的準確性,要采取合適的動物數(shù)量。采樣動物數(shù)可根據(jù)動物群體的污染程度而有所不同。 按照國家標準規(guī)定,動物數(shù)量超過100只的生產(chǎn)繁殖單元取樣如下:普通級動物不能少于10只;清潔級動物檢測510只;飼養(yǎng)于小隔離罩內(nèi)的無菌動物和無特定病原體動物隨機抽檢2只;飼養(yǎng)于生產(chǎn)繁殖單元的抽檢510只。,30.
21、09.2020,42,除了采樣的數(shù)量,還必須考慮到檢測的間隔時間。一般來說,一旦病原體侵入動物群體引起感染,初期分離病原體較容易,抗體的檢出率上升。23個月后可因某些個體抗體水平的降低以及新出生的非感染個體的增加等原因,抗體檢出率下降,據(jù)此,檢測間隔時間以3個月一次為宜。至少每年檢查2次,選在春、秋季疾病多發(fā)季節(jié)為宜。,30.09.2020,43,采樣時,宜在動物群中不同方位隨機采取育成動物,選擇至少4個不同的位置采集樣品或采用前哨動物放人群內(nèi),不時調(diào)換位置,飼養(yǎng)一定時間后解剖檢查抗體或病原。 運輸途中保證動物的安全和避免污染。引種的動物則需有檢疫隔離期,小鼠、大鼠和豚鼠l7天,兔21天,犬、
22、貓2128天,猴l9周。,30.09.2020,44,第三節(jié) 飼料質(zhì)量監(jiān)控,實驗動物作為生物體離不開營養(yǎng),飼料是實驗動物攝人營養(yǎng)素的主要來源。只有良好的營養(yǎng)才能使實驗動物保持良好的健康狀態(tài),而健康的實驗動物才能確保實驗結(jié)果的可靠。因此,加強飼料質(zhì)量標準化管理,是實現(xiàn)實驗動物標準化的重要環(huán)節(jié)。,30.09.2020,45,一、實驗動物飼料 生產(chǎn)加工、儲存與管理,實驗動物飼料是以實驗動物飼養(yǎng)標準為依據(jù),經(jīng)過嚴密設(shè)計、科學(xué)配方、精心加工、生產(chǎn)制造而形成的標準化產(chǎn)品。因此,進行實驗動物飼料生產(chǎn)必須了解有關(guān)實驗動物飼養(yǎng)管理法規(guī)條例,全面掌握飼料的生產(chǎn)過程。,30.09.2020,46,1實驗動物配合飼料
23、的生產(chǎn)加工 應(yīng)根據(jù)各種實驗動物的特性和不同的實驗?zāi)康模捎貌煌娘暳霞庸し椒?。常用實驗動物如大鼠、小鼠、豚鼠及兔等實驗動物的飼料?yīng)制成具有一定硬度的顆粒飼料較為適合其攝食習(xí)性;狗、貓則以膨化飼料為好;而有的實驗動物根據(jù)實驗?zāi)康牟煌?,常要求制作糊狀、粉狀或液體飼料以滿足研究需要。但是無論其形狀如何,在實驗動物飼料加工生產(chǎn)過程中都應(yīng)注意生產(chǎn)規(guī)格及其產(chǎn)品標準。,30.09.2020,47,2實驗動物飼料的儲存 包括原料儲存和成品儲存兩部分內(nèi)容。 原料儲存:應(yīng)按原料種類、生產(chǎn)廠家、進貨日期等分開保管。保管中要注意溫度、濕度變化,防止鳥類、鼠類和昆蟲的污染。盡量做到先進先出。 成品儲存:要定期清掃存儲罐
24、,產(chǎn)品變更時徹底清掃存儲罐,成品庫內(nèi)嚴格執(zhí)行先進先出原則。注意存儲罐的溫、濕度,防止成品飼料霉變,防止野鼠、昆蟲及有毒物質(zhì)自引污染。分類堆放,標志清楚,嚴防與原料混貯,保證標準貨物出庫登記。,30.09.2020,48,3實驗動物的飼料管理 實驗動物飼料管理是指從飼料原料選擇、生產(chǎn)加工到成品以及生產(chǎn)過程中的蟲害、安全及衛(wèi)生管理的全過程。,30.09.2020,49,二、實驗動物飼料的消毒,實驗動物的飼料在收獲、加工、儲存及運輸過程中都有污染病菌的可能,為確保實驗動物質(zhì)量和動物實驗的準確性,我們要通過適當?shù)南痉椒ㄊ蛊溥_到滅菌的目的。常用飼料消毒方法有干熱、濕熱、輻照及藥物熏蒸等多種,應(yīng)按飼養(yǎng)動
25、物的不同要求和飼料種類以及所具備的條件來選擇。,30.09.2020,50,1干熱滅菌法 將飼料在80100的條件下烘烤。此法設(shè)備比較簡單,但溫度不好掌握,滅菌不夠徹底,而且營養(yǎng)損失較大。,30.09.2020,51,2高溫高壓滅菌法 高溫高壓滅菌法是指將飼料在121,1.0kg/cm3的高溫高壓蒸鍋內(nèi)加熱15min以上,將細菌全部殺死。一般11530min、12l20min、12515min。絕大多數(shù)維生素。尤其是維生素C、維生素B1、維生素B6和維生素A等,過熱會受到破壞,而純化學(xué)性飼料比天然飼料更不穩(wěn)定。,30.09.2020,52,3藥物熏蒸滅菌法 熏蒸是利用化學(xué)藥品的氣霧劑對飼料進行
26、消毒。如用環(huán)氧乙烷進行滅菌,熏蒸后必須在不低于20的自然空氣中將殘余氣體揮發(fā)。實驗證明,即使這樣處理,在飼料中仍然殘存一些對動物代謝有損害的化合物。,30.09.2020,53,4. 放射線照射滅菌法 通常在對谷物類飼料消毒時,采用5Mrad劑量的60Co照射對營養(yǎng)成分損失甚小。射線對維生素B1和維生素B6僅有微小破壞,通常采用的劑量為35Mrad。此法在滅菌效果和對營養(yǎng)素的破壞程度方面都優(yōu)于其他方法。但受條件所限,不便推廣。,30.09.2020,54,三、實驗動物飼料的檢測,飼料檢測是實驗動物飼料質(zhì)量管理必不可少的重要手段。飼料質(zhì)量變化不僅直接影響著實驗動物質(zhì)量,而且也間接影響實驗結(jié)果的可
27、靠性。我國實驗動物飼料質(zhì)量應(yīng)符合國家標準GBl4924-2001規(guī)定的根據(jù)實驗動物的不同種類、性別、年齡、體重和生理階段制定的飼養(yǎng)標準。,30.09.2020,55,1感觀性狀的檢驗 用手、眼、鼻等器官直接通過色澤、氣味、手感、雜質(zhì)情況等項指標對飼料的新鮮程度、均勻度、含水量等進行直觀判斷。 2營養(yǎng)成分的測定 按照國家實驗動物飼料營養(yǎng)標準所規(guī)定的養(yǎng)分含量及分析方法,對產(chǎn)品的營養(yǎng)成分和混合均勻度等進行檢測。,52,30.09.2020,56,第四節(jié) 環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測,嚴格監(jiān)控實驗動物生產(chǎn)環(huán)境和動物實驗環(huán)境,可保證實驗動物健康和質(zhì)量標準化,可保障實驗研究獲得正確的結(jié)果。合乎標準的環(huán)境,不僅為實驗動物及
28、動物實驗工作者提供適宜的條件,維持實驗動物等級標準,而且是保障工作人員身體健康,使他們不受危害因素傷害的需要。,30.09.2020,57,一、噪聲測定,1儀器 普通噪聲計、積分型噪聲計。 2測定方法 分靜態(tài)和動態(tài):靜態(tài)為在動物飼養(yǎng)前,所有系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)時檢測;動態(tài)為飼養(yǎng)動物后,在正常飼養(yǎng)條件下檢測。 通常在潔凈室無人、無動物,空調(diào)凈化系統(tǒng)正常運行的情況下測定潔凈室的噪聲,測定點選擇在被測環(huán)境的中央,如房間大于15m2,可選擇兩個或兩個以上的測定點,距地面1m。,30.09.2020,58,二、照度測定,1儀器 便攜式照度計。 2測定方法 測定者需穿著黑色衣服,避免反射光影響測定結(jié)果。測定前開啟
29、所有的照明設(shè)備,測定時以距墻壁1m以上、離地面85cm處的平面照明度為準。每隔1.02.0m選擇一個測量點,每點測3次,取平均值,單位為lx。,30.09.2020,59,三、空氣落下細菌測定,空氣落下菌數(shù)測定應(yīng)在實驗動物設(shè)施經(jīng)消毒滅菌,空調(diào)凈化系統(tǒng)正常運行48h后進行。1試劑 直徑9cm的血液瓊脂培養(yǎng)基。 2測定方法 在無動物的狀態(tài)下,每510m2放置一個直徑9cm的血液瓊脂培養(yǎng)基,敞開皿蓋暴露30min,蓋上皿蓋,置于37培養(yǎng)4872h后,計算培養(yǎng)皿內(nèi)菌落數(shù)。,30.09.2020,60,四、空氣潔凈度測定,在動物飼養(yǎng)前,空調(diào)凈化系統(tǒng)運行48h后進行。 1、檢測儀器 塵埃粒子計數(shù)器。 2、方法 亂流潔凈室面積不大于50m2的布置5個測點,每增加2050m2應(yīng)增加35個測點。每個測定點連續(xù)測定3次。測定時100級凈化室的采樣量每分鐘不少于1L,1000級以上的凈化室的采樣量每分鐘不小于0.3L。層流潔凈室取各測定點最大值;亂流潔凈室取潔凈室各測點的平均值作為實測結(jié)果。,30.09.2020,61,五、相鄰潔凈區(qū)靜壓差測定,1儀器 微
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