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文檔簡介

實驗一 顯微鏡的使用保養(yǎng) 與中藥臨時制片技術(shù),一、顯微鏡的使用和保養(yǎng),顯微鏡的結(jié)構(gòu) 鏡座 鏡臂 鏡筒 載物臺 光路系統(tǒng):目鏡、物鏡、集光器、光源,物鏡 低倍鏡:4、10 用于觀察整體結(jié)構(gòu)、尋找特定特征。 高倍鏡:40 、100 (油鏡) 用于觀察特定細微結(jié)構(gòu)與組織特征, 油鏡較為少用。,使用注意與技巧 先低倍后高倍,即先整體后局部 之字形掃描式尋找需要觀察的特征 由低倍鏡轉(zhuǎn)成高倍鏡后,只能使用微調(diào) 高倍鏡觀察時,應(yīng)通過控制光源強度、 集光器高低、虹彩光闌的張合,并結(jié)合 微調(diào),使被觀察物清晰。,使用過程及使用后的保養(yǎng) 顯微制片必須將多余的裝置液清理干凈, 以免沾染鏡頭。 如目鏡與物鏡被沾染,則以鏡頭紙從中 央向四周以劃圓圈的方式擦拭。必要時 還要使用去污劑擦拭。,使用完畢后,移去玻片,按上述方法擦 拭,將最低倍物鏡轉(zhuǎn)入光路,載物臺復(fù)位。 關(guān)閉電源,拔下插座,蓋上防塵罩。 在相應(yīng)使用登記本上簽名。,二、粉末臨時制片,粉末臨時制片操作要領(lǐng) 粉末用量:米粒大小。 每次滴加裝置液23滴。 每次滴加裝置液后需要攪拌均勻。 控制攪拌范圍約為蓋玻片大小。 如加熱透化,則重復(fù)進行34次, 沸即離火,勿燒干、焦。,加蓋玻片時應(yīng)先一側(cè)接觸裝置液,緩緩 放下,最后抽出鑷子,以排除氣泡。 以吸水紙吸去溢出的裝置液。 稍放置待涼后,鏡檢。,水裝片或斯氏液裝片 適用于觀察淀粉粒。 裝置液:蒸餾水或斯氏液(甘油醋酸)。 不可加熱,否則淀粉粒糊化。,天花粉粉末淀粉粒,水合氯醛加熱透化裝片 適用于除淀粉粒、菊糖以外的大多數(shù)組織、細胞、細胞后含物的觀察。 裝置液:水合氯醛(水合三氯乙醛)、 稀甘油。 需要加熱。,天花粉粉末石細胞,天花粉粉末石細胞,天花粉粉末具緣紋孔導(dǎo)管,水合氯醛或乙醇裝片 適用于觀察菊糖。 裝置液:水合氯醛或乙醇。 不可加熱,否則菊糖溶解。,黨參菊糖(水合氯醛裝置),水合氯醛裝置液的作用 使細胞膨脹,便于觀組織、細胞及其 內(nèi)含物特征。 去除細胞表面或內(nèi)部雜質(zhì)。 增強透明度。,稀甘油裝置液的作用 增加透明度。 防止氣泡生成。 防止水合氯醛結(jié)晶析出。,三、整體透化裝片,整體透化裝片的目的與操作 目的:避免出現(xiàn)有些組織在粉末中破碎 或不完整而影響觀察。 材料:多為葉或花。,操作:切或剪取葉或花約4mm2 ,外表朝 上,透化后觀察。 裝置液:水合氯醛、稀甘油。 需要加熱。,金銀花兩種非腺毛,金銀花腺毛,金銀花花粉粒,四、葉表皮撕片,葉表皮撕片適用對象及操作 適用對象:觀察表皮細胞、氣孔、毛茸。 材料:通常為葉下表皮。,操作:以鑷子自下表面夾住少許葉片,往 一側(cè)撕取表皮。將撕下的表皮外表面朝上 置于滴有12滴水的載玻片上,使其自然展 開,蓋片觀察。,何首烏葉下表皮組織,五、徒手制片,徒手制片的目的及材料 目的:觀察組織構(gòu)造、細胞特征; 材料:新鮮、干燥或經(jīng)固定的材料,常用固定液FAA固定液: 70乙醇 90ml 福爾馬林(3740甲醛) 5ml 冰醋酸 5ml,取材 材料分割成適當(dāng)大小,直徑必須小于 蓋玻片。 材料軟化或沖洗 堅硬的干燥材料于稀甘油10醋酸液中 煮至表面無氣泡。 固定材料需在流水中沖洗12小時以上。,操作:取新鮮或已軟化的中藥材,用拇指及食指和中指夾住材料,下端用無名指托住,另外一只手持刀片,自左向右移動手腕,牽曳切片。 操作時材料的斷面與刀口須經(jīng)常用水濕潤。 以毛筆將切好的薄片移入在盛水培養(yǎng)皿 中浸泡。,裝片 將切片以鑷子夾出,置于滴加了甘油的載玻片上,加上蓋玻片;或滴加水合氯醛加熱透化,滴加稀甘油后加上蓋玻片。,徒手切片桑枝橫切面,作業(yè)與思考 1、實驗完成后應(yīng)做哪些善后工作? 2、由低倍鏡轉(zhuǎn)換成

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