貴州省豬弓形蟲血清學(xué)調(diào)查.doc

貴州省豬弓形蟲血清學(xué)調(diào)查洪尼寧，錢德興，張登祥，華瑩，李濤，冉隆仲，田海蓉，劉霞，虞天德 （貴州省動物疫病預(yù)防控制中心，貴陽550008）摘要：為全面了解貴州省豬弓形蟲感染情況，對采自9個(gè)市（州、地）261個(gè)養(yǎng)豬場（戶）的2906份血清用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測豬弓形蟲抗體，總體陽性率為65.83，變化范圍為27.8885.42%。采集65份豬血清做ELISA和間接血凝試驗(yàn)（IHA）比較測定，兩種方法總體符合率為58.46%。用IHA方法補(bǔ)充檢測177份豬血清，弓形蟲抗體陽性率為27.68%。血清學(xué)調(diào)查表明豬弓形蟲抗體陽性率與國內(nèi)部分?。ㄊ校﹫?bào)道相符。關(guān)鍵詞：豬；弓形蟲；血清學(xué)調(diào)查；陽性率SEROLOGICAL SURVEY OF PORCINE TOXOPLASMA INFECTIONIN GUIZHOU PROVINCEHONG Ni-ning, QIAN De-xing, ZHANG Deng-xiang, HUA Ying, LI Tao, RAN Long-zhong, TIAN Hai-rong, LIU Xia, YU Tian-de(Guizhou Provincial Center for Animal Disease Prevention and Control, Guiyang 550008, China)Abstract: To monitor the present status of porcine Toxoplasma infection in Guizhou province, a serologic survey was conducted. In this survey, 2906 swine sera were collected from 261 farms in 9 regions and tested for Toxoplasma antibody by using ELISA kit. The result showed that 65.83 % of the sera were positive with a fluctuation of 27.8885.42%. 65 swine sera from a farm were examined comparatively by using ELISA and IHA (indirect hemagglutination assay) kits, which showed that the coincidence rate of the two methods was 58.46%. Additional 177 swine sera were tested with IHA and the positive rate was 27.68%. Analysis of the positive rate among several provinces or municipalities indicated that the seroprevalence of Toxoplasma antibody was coincident.Key words: swine; Toxoplasma; serologic survey; positive rate作者簡介：洪尼寧（1968-），男，湖南人，博士，微生物學(xué)專業(yè)。E-mail: ，電話傳真形蟲病(Toxoplasmosis)是由剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)引起的、包括人在內(nèi)的350多種脊椎動物易感的寄生蟲病1,1908年Nicolle和Manceaux在北非鼠體、Splendore在巴西兔體中分別獨(dú)立發(fā)現(xiàn)該寄生蟲2。T. gondii是目前世界范圍內(nèi)視網(wǎng)膜感染的主要原因3，歐洲孕婦血清學(xué)調(diào)查證實(shí)30%63%的弓形蟲感染和食用豬肉有關(guān)4。近二十年來世界各地陸續(xù)發(fā)現(xiàn)和報(bào)告了大量臨床及隱性感染的豬弓形蟲病5，國內(nèi)部分?。ㄊ校┴i弓形蟲抗體間接血凝試驗(yàn)（IHA）檢測陽性率為29.70-66.7%6-10，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測陽性率達(dá)60.42%11。為全面了解貴州省豬弓形蟲感染的情況，我們對省內(nèi)9個(gè)市（州、地）的養(yǎng)豬場（戶）的豬進(jìn)行了弓形蟲血清學(xué)調(diào)查，同時(shí)對部分養(yǎng)豬場周邊的牛、羊和雞也進(jìn)行了調(diào)查。1 材料與方法 1.1 血清及診斷試劑和儀器 按常規(guī)方法采血、分離血清，-20儲存。動物弓形蟲IgG抗體酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，海泰生物制藥有限公司生產(chǎn)，光吸收值（A）采用SUNRISE酶標(biāo)儀（奧地利TECAN）獲取。弓形蟲凍干致敏紅細(xì)胞抗原及陽性、陰性血清，購自蘭州獸醫(yī)研究所。1.2 檢測方法 按相應(yīng)試劑盒說明書進(jìn)行。1.3 結(jié)果判斷 ELISA檢測當(dāng)陽性對照A值平均值0.50，陰性對照A值平均值0.10，臨界對照A值平均值介于0.120.35時(shí)實(shí)驗(yàn)成立。樣品A值臨界對照A值平均值1.1判為陽性，樣品A值臨界對照A值平均值0.9則判為陰性。IHA檢測滴度1:64判為陽性。1.4 數(shù)據(jù)分析 2檢驗(yàn)使用下載（/soft/24016.html）軟件卡方檢驗(yàn)計(jì)算器的四格表格式，將發(fā)生數(shù)（陽性數(shù)）和未發(fā)生數(shù)（陰性數(shù)）輸入相應(yīng)位置，即可得2值及p范圍。2 結(jié) 果2.1 不同地區(qū)豬血清抗體ELISA檢測結(jié)果 9個(gè)市（州、地）共采集血清2906份，ELISA檢測豬弓形蟲抗體陽性血清1913份，總體抗體陽性率為65.83%。銅仁地區(qū)、黔南州、遵義市和畢節(jié)地區(qū)高于全省總體水平（2值分別為63.95、44.73、 33.65和14.00，p值均小于0.01），貴陽市、黔西南州低于全省總體水平（2值分別為7.76、249.75，p值都小于0.01），安順市、六盤水市、黔東南州與全省總體水平一致（2值分別為0.13、0.01、0.76，p值都大于0.05）（表1）。表1貴州省9個(gè)市（州、地）豬血清弓形蟲抗體ELISA檢測結(jié)果Table 1 Test of swine sera from 9 regions in Guizhou for Toxoplasma antibody with ELISA 場（戶）數(shù)樣本數(shù)陽性數(shù)（百分率）疑似數(shù)（百分率）陰性數(shù)（百分率）貴陽市30300168（56.00）22（7.33）110（36.67）遵義市42420341（81.19）6（1.43）73（17.38）安順市18180112（62.22）13（7.22）55（30.56）六盤水市1212483（66.94）2（1.61）39（31.45）黔東南州51490320（65.31）8（1.63）162（33.06）黔南州33343293（85.42）2（0.58）48（13.99）黔西南州24495138（27.88）35（7.07）322（65.05）銅仁地區(qū)30314266（84.71）21（6.69）27（8.60）畢節(jié)地區(qū)24240192（80.00）0（0.00）48（20.00）合計(jì)26129061913（65.83）109（3.75）884（30.42）2.2 豬弓形蟲抗體ELISA和IHA比較測定 選取某發(fā)生過不明原因流產(chǎn)的豬場，按豬群結(jié)構(gòu)采集血清做ELISA和IHA比較測定 （表2），豬弓形蟲抗體陽性率分別為83.07%（54/65）和44.62%（29/65）（2=20.83， p0.01），兩種方法總體符合率為58.46%（28+10/65）。表2 豬血清樣品弓形蟲抗體ELISA和IHA比較測定Table 2 A comparative examination of swine sera for antibodyto Toxoplasma with ELISA and IHA 豬樣本數(shù)ELISAIHA陽性數(shù)陰性數(shù)陽性數(shù)陰性數(shù)種公豬1616097種母豬25250151030日齡以下仔豬6422430-90日齡仔豬102801090日齡以上仔豬87135合計(jì)6554112936符合數(shù)28102810非符合數(shù)2611262.3 畜禽弓形蟲抗體IHA檢測 IHA補(bǔ)充檢測部分畜禽血清表明：豬弓形蟲抗體陽性率為27.68%，牛、羊弓形蟲抗體陽性率分別為15.38%和18.78%，雞抗體陽性率為2.17%（表3）。表3畜禽弓形蟲抗體水平IHA檢測Table 3 Detection of animal sera for Toxoplasma antibody with IHA 畜禽樣本數(shù)IHA陽性數(shù)（百分率）陰性數(shù)（百分率）豬17749（27.68）128（72.32）牛13020（15.38）110（84.62）羊16531（18.78）134（81.22）雞2305（2.17）225（97.83） 3 討論3.1 省內(nèi)豬弓形蟲抗體陽性率與部分國內(nèi)報(bào)道相符 本次豬弓形蟲血清學(xué)調(diào)查是在全省所有縣（市）進(jìn)行的，豬群整體弓形蟲抗體ELISA檢測陽性率為65.83%，與重慶17個(gè)區(qū)縣總體陽性率60. 42 %11相比差異不顯著（2=0.19， p0.05）?？紤]到國內(nèi)很多?。ㄊ校┴i弓形蟲血清學(xué)調(diào)查采用IHA方法，我們做了ELISA和IHA的比較測定，初步試驗(yàn)表明兩種方法的符合率較低，不便于比較各地陽性率異同。采用IHA補(bǔ)充檢測部分畜禽血清，豬弓形蟲抗體陽性率為27.68%（49/177），與1984年28.08%（469/1670）12、1995年30.94%（845/2731）13的調(diào)查結(jié)果吻合，也與部分?。ㄊ校┑膱?bào)道相符6-10。3.2 不同日齡階段豬弓形蟲抗體情況不同 對一個(gè)豬場采樣檢測顯示：種豬陽性率較高（ELISA，100%；IHA，58.54%），30日齡以下仔豬部分保有母源抗體（6頭仔豬ELISA檢出4頭，IHA檢出2頭），30至90日齡仔豬抗體檢出減少（10頭仔豬ELISA檢出兩份，IHA未檢出），90日齡以上仔豬檢出增高（8頭仔豬ELISA檢出7份，IHA檢出3份）（表2）?？紤]到不同豬場種豬來源、飼養(yǎng)管理等都不相同，需要進(jìn)一步調(diào)查才能摸清弓形蟲抗體的變化規(guī)律。3.3 弓形蟲病防控 省內(nèi)豬弓形蟲抗體陽性率較高，牛、羊存在一定程度的抗體陽性率，雞抗體陽性率較低（表3），這些可能與自然生態(tài)環(huán)境和飼養(yǎng)方式有關(guān)：一方面，我省冬無嚴(yán)寒、夏無酷暑的氣候條件總體上適宜于弓形蟲生長、發(fā)育；另一方面，不同畜禽養(yǎng)殖場（戶）在場地選擇、人力物力投入、圈舍衛(wèi)生、安全隔離、飼料儲備及加工等方面的條件各不相同。荷蘭Kijlstra A研究組報(bào)道室內(nèi)水泥地圈養(yǎng)及改善衛(wèi)生條件能顯著降低感染，而室外活動及室內(nèi)草墊圈養(yǎng)的動物友好式飼養(yǎng)模式存在弓形蟲感染增多的風(fēng)險(xiǎn)14。因此，控制畜禽弓形蟲病流行除了需要治療或淘汰陽性及發(fā)病畜禽外，還需從改善飼養(yǎng)條件、隔離不同畜禽圈舍等多方面采取綜合預(yù)防措施。致謝 9個(gè)市（州、地）動物疫病預(yù)防控制中心及部分豬場參與采樣或檢測，在此深表謝忱！參考文獻(xiàn)1 Dubey, JP, Beattie, CP. 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