神經(jīng)干動(dòng)作電位、興奮傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期測定實(shí)驗(yàn)報(bào)告.doc

| 機(jī)能實(shí)驗(yàn)報(bào)告神經(jīng)干動(dòng)作電位、興奮傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期測定實(shí)驗(yàn)報(bào)告 課程:機(jī)能實(shí)驗(yàn) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院系 臨床 班 姓名 學(xué)號(hào) 組員： 【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?. 了解電生理儀器的使用。2. 觀察蟾蜍坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位的基本波形；學(xué)習(xí)神經(jīng)干動(dòng)作電位的記錄方法以及潛伏期、幅值、時(shí)程的測量； 3. 學(xué)習(xí)神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測定方法。 加深理解神經(jīng)興奮傳導(dǎo)的概念及意義。4. 了解神經(jīng)干興奮后興奮性的改變。 學(xué)習(xí)測定不應(yīng)期的方法。 【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】牛蛙【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】圖一 神經(jīng)干動(dòng)作電位觀察到一個(gè)先升后降的雙相動(dòng)作電位波形（有刺激偽跡）。時(shí)程為4ms，潛伏期為0.6ms，最大幅度為5.5V，（當(dāng)刺激強(qiáng)度為1.0V時(shí)）。圖二 神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)速度測定每個(gè)電極間距25mm，時(shí)間約為 1.37ms，速度測定為18.2m/s圖三 神經(jīng)的不應(yīng)期測定（按時(shí)間順序，從上到下、從左到右排列）【實(shí)驗(yàn)討論】神經(jīng)動(dòng)作電位的觀察神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生興奮的客觀標(biāo)志是神經(jīng)細(xì)胞的動(dòng)作電位。當(dāng)神經(jīng)纖維未受刺激時(shí)，膜外與電極所接觸的兩點(diǎn)之間沒有電位差，所以兩電極之間也無電位差存在，掃描線為一水平基線。處于興奮部位的膜外電位低于靜息部位，當(dāng)動(dòng)作電位通過后，興奮部位的膜外電位又恢復(fù)到靜息水平，用電生理學(xué)方法可以引導(dǎo)并記錄到此電位變化過程。將一對(duì)引導(dǎo)電極置于神經(jīng)干表面，當(dāng)神經(jīng)沖動(dòng)通過時(shí)，兩電極之間將產(chǎn)生一短暫的電位變化過程，即為神經(jīng)干動(dòng)作電位。神經(jīng)干動(dòng)作電位是復(fù)合動(dòng)作電位，可沿細(xì)胞膜做不衰減的傳導(dǎo)，它的幅度在一定范圍內(nèi)與刺激強(qiáng)度成正比。由于引導(dǎo)方式不同，記錄到的神經(jīng)干動(dòng)作電位有雙相和單相之分，假如在引導(dǎo)的兩個(gè)電極之間將神經(jīng)干麻醉或損壞，阻斷其興奮傳導(dǎo)能力，此時(shí)可以記錄到單相動(dòng)作電位。在神經(jīng)干左端給與電刺激后，則產(chǎn)生一個(gè)向右傳導(dǎo)的沖動(dòng)（負(fù)電位），當(dāng)沖動(dòng)傳導(dǎo)1電極（負(fù)電極）下方時(shí)，此處電位較2處低，產(chǎn)生了電位差，掃描線向上偏轉(zhuǎn)，記錄出一個(gè)向上的波形（在電生理實(shí)驗(yàn)中，規(guī)定負(fù)波向上）。隨后，沖動(dòng)繼續(xù)向右側(cè)傳導(dǎo)，離開1電極傳向2電極處。隨后，沖動(dòng)繼續(xù)向右側(cè)傳導(dǎo)，離開1電極傳向2電極處。當(dāng)它到達(dá)2電極（正電極）下方時(shí)，因1電極處神經(jīng)差不多已恢復(fù)到原來的狀態(tài)，記錄出一個(gè)向下的波形。這樣，在神經(jīng)沖動(dòng)向右傳導(dǎo)的過程中，就幾率出了一個(gè)先升后降的雙相動(dòng)作電位。我們觀察到了一個(gè)先升后降的雙相動(dòng)作電位波形（有刺激偽跡），動(dòng)作電位時(shí)程為0.4ms，最大幅度為5.5V（當(dāng)刺激強(qiáng)度為1.0V時(shí)）。神經(jīng)興奮傳導(dǎo)速度的測定一條神經(jīng)干中包含的神經(jīng)纖維其閾值和傳導(dǎo)速度各不相同，影響傳導(dǎo)速度最重要的因素是神經(jīng)纖維的直徑以及有無髓鞘。測定神經(jīng)干動(dòng)作電位經(jīng)過的距離和耗費(fèi)的時(shí)間，即可計(jì)算出神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度。當(dāng)觀察到動(dòng)作電位波形比較理想時(shí)，將通道1、2的圖形比較顯示，測量出第一個(gè)向上波波尖至第二個(gè)向上波波尖的時(shí)間t（動(dòng)作電位從第一引導(dǎo)電極R1，傳到第三引導(dǎo)電極R3所需時(shí)間），測量第一、三引導(dǎo)電極的實(shí)際距離，根據(jù)公式：傳導(dǎo)速度=距離/時(shí)間，即可算出神經(jīng)傳導(dǎo)速度。由圖和離體神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒的數(shù)據(jù)可見，根據(jù)潛峰法，每個(gè)電極間距25mm，時(shí)間約為1.4ms，速度測定為18.2m/s。 在實(shí)驗(yàn)中，由于第一次測定時(shí)，神經(jīng)上殘留的任氏液較多，導(dǎo)致神經(jīng)的末端粘成一團(tuán)，在電極上繞了一個(gè)圈，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，未得到一前一后的動(dòng)作電位圖像，無法測量速度。之后我們用濾紙吸干任氏液，將粘成一團(tuán)的神經(jīng)捋直，就得到了正常的圖像和數(shù)據(jù)，測量到了速度。神經(jīng)不應(yīng)期的測定神經(jīng)在一次興奮過程中，其興奮性將發(fā)生一個(gè)周期性的變化，最終恢復(fù)正常。興奮的周期性變化，依次包括絕對(duì)不應(yīng)期、相對(duì)不應(yīng)期等等。絕對(duì)不應(yīng)期內(nèi)，無論多么強(qiáng)大的刺激都不能引起神經(jīng)再次興奮；相對(duì)不應(yīng)期內(nèi)，神經(jīng)興奮性較低，較大的刺激能夠引起興奮。絕對(duì)不應(yīng)期決定了神經(jīng)發(fā)放沖動(dòng)（動(dòng)作電位）的最高頻率，保證了動(dòng)作電位不能疊加（區(qū)別于局部電位），以及單向傳導(dǎo)（只能由受刺激部位向遠(yuǎn)端傳導(dǎo)，不能返回）的特性。不應(yīng)期的產(chǎn)生依賴于細(xì)胞膜上特定離子通道的特點(diǎn)，如鈉、鉀離子通道。采用雙刺激，通過調(diào)節(jié)兩次脈沖間隔，使后一個(gè)刺激不能引起動(dòng)作電位，即可測得神經(jīng)的絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期。第一個(gè)動(dòng)作電位開始至第二個(gè)動(dòng)作電位消失為絕對(duì)不應(yīng)期，第二個(gè)動(dòng)作電位消失至第二個(gè)動(dòng)作電位剛好變小大致為相對(duì)不應(yīng)期（復(fù)合動(dòng)作電位的超常期判斷誤差大）。首間隔8ms（逐次遞減），刺激時(shí)間間隔2s，波間隔減量0.5ms，幅度1V，延時(shí)2.5ms，儀器靈敏度2ms。 由圖可知，絕對(duì)不應(yīng)期為1.024s，相對(duì)不應(yīng)期為1.23ms。注意事項(xiàng)：1. 仔細(xì)分離神經(jīng)，將神經(jīng)周圍的結(jié)締組織去干凈，盡量避免神經(jīng)與金屬接觸，不要拉扯過度，減輕神經(jīng)損傷，以保證其興奮性。2. 要用任氏液保持神經(jīng)標(biāo)本濕潤。在神經(jīng)上滴任氏液后用棉花吸掉多余的水珠，以防神經(jīng)粘團(tuán)，電極間短路。3. 注意檢查刺激電極與引導(dǎo)電極之間的距離，若在引導(dǎo)電極前接地有利于減少刺激偽跡。4. 神經(jīng)標(biāo)本盒應(yīng)良好屏蔽接地，以避免其他交流的干擾。5. 可將兩只蛙腿都用任氏液浸潤，以防實(shí)驗(yàn)失敗。（我們組第一次實(shí)驗(yàn)就因?yàn)槔渡窠?jīng)過度損壞了神經(jīng)，最終用的是第二條腿的神經(jīng)做的實(shí)驗(yàn)）【實(shí)驗(yàn)結(jié)論】1. 觀察蟾蜍坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位的基本波形；神經(jīng)干動(dòng)作電位的記錄方法以及潛伏期0.6ms、幅值1.0V、時(shí)程4ms； 1. 學(xué)習(xí)神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度為18.2m/s。