微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制準(zhǔn)則.ppt

微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指南，質(zhì)量管理相關(guān)定義，質(zhì)量管理：符合質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動。質(zhì)量保證：制定相應(yīng)的計(jì)劃以滿足實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求，由證明(記錄)執(zhí)行的一系列系統(tǒng)活動外部質(zhì)量管理：通過交叉校準(zhǔn)和/或檢查對實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行和結(jié)果進(jìn)行管理內(nèi)部質(zhì)量管理：為比較分析、跟蹤和相關(guān)方法在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部采取的活動連續(xù)管理計(jì)劃。質(zhì)量手冊：描述質(zhì)量系統(tǒng)元素的文件或文件的集合。實(shí)驗(yàn)室要求，組織：按國家實(shí)驗(yàn)室識別的概念是指可能承擔(dān)法律責(zé)任的實(shí)體。這里說的是在實(shí)驗(yàn)室(微檢查室)內(nèi)建立的質(zhì)量管理的保證系統(tǒng)。人員住房滿足檢查工作要求。設(shè)備、人員要求、實(shí)驗(yàn)室人員分類：經(jīng)理、技術(shù)人員、技術(shù)支持人員等。該職位的人員必須具備相應(yīng)的技術(shù)能力、相應(yīng)的技術(shù)能力證明(證書和文件)。因?yàn)槲⑸餀z查室由具有相應(yīng)技術(shù)能力的人負(fù)責(zé)室內(nèi)技術(shù)工作。設(shè)立質(zhì)量監(jiān)督院。住房條件要求，住房要求：充足，足夠?qū)挸?，通風(fēng)良好的照明。房子的內(nèi)壁和地面等要使用容易清潔的材料保持房間清潔。分為客房安裝，執(zhí)行工作內(nèi)容，設(shè)置專用房間。房間的大小要根據(jù)實(shí)驗(yàn)者的進(jìn)入數(shù)量來考慮。環(huán)境設(shè)施要求，專用房間的溫度和濕度控制和記錄(樣品貯藏室)特殊環(huán)境的微生物指標(biāo)控制和記錄(無菌室等)專用工作室的標(biāo)準(zhǔn)操作程序和定期測試校準(zhǔn)程序。(潔凈室等)特殊環(huán)境的專用設(shè)施質(zhì)量管理必須按相關(guān)要求(凈化工作臺)、環(huán)境設(shè)施相關(guān)技術(shù)指標(biāo)、凈化室、凈化工作區(qū)、清潔環(huán)境國家和部門進(jìn)行測試。空氣潔凈度指數(shù)：檢測頻率和檢測方法。一次/一個月；空氣細(xì)菌檢測(沉淀法)。設(shè)備/儀器要求一般，符合執(zhí)行相關(guān)測試項(xiàng)目的要求。制定相關(guān)設(shè)備/機(jī)構(gòu)的工作指南。設(shè)備/儀器驗(yàn)證和校準(zhǔn)，特別室新購買設(shè)備驗(yàn)證。設(shè)備/設(shè)備分別表示通過檢查、送校、自檢、自檢等驗(yàn)證的狀態(tài)。即可從workspace頁面中移除物件。設(shè)備/設(shè)備運(yùn)行檢查計(jì)劃。設(shè)備/設(shè)備的狀態(tài)和適用記錄將記錄服務(wù)后設(shè)備/設(shè)備的重新校準(zhǔn)或檢查，并具有完整的檢查記錄。設(shè)備控制和程序、微生物檢查一般需要監(jiān)測的設(shè)備和儀器1培養(yǎng)箱(生化培養(yǎng)箱或CO2培養(yǎng)箱等)、干燥、高壓滅菌鍋、凈化工作臺、pH米、冰箱、(低溫冰箱或冷凍室)溫度計(jì)、紫外線燈、顯微鏡、離心機(jī)、平衡2小型度量衡容器3微生物測量儀器、微生物驗(yàn)證儀器、空氣取樣器、微型平板閱讀器專用等。溫度計(jì)，實(shí)驗(yàn)室必須有工作溫度計(jì)和參考溫度計(jì)。工作溫度計(jì)：用于每日溫度檢查。基準(zhǔn)溫度計(jì)：校準(zhǔn)工作中使用的溫度計(jì)。溫度計(jì)操作檢查：一般可使用1/6年操作檢查。日常檢查、校對檢查、執(zhí)行檢查等都要做好相應(yīng)的技術(shù)記錄。根據(jù)培養(yǎng)箱、水浴箱和冰箱的溫度調(diào)節(jié)、培養(yǎng)物的特性和溫度要求，培養(yǎng)箱應(yīng)分別設(shè)定培養(yǎng)箱的溫差要求(分為用途和溫度)，一般顯示的值與測量值不超過1 ，箱子的各點(diǎn)溫差(內(nèi)部溫度平衡)和溫度波動也不超過1 。溫度監(jiān)控方法：將工作溫度計(jì)放在甘油中，放在測試對象箱中，可以觀察工作溫度計(jì)的溫度。1-2次/日監(jiān)測記錄，高壓滅菌鍋的溫度控制(a)，高壓滅菌鍋；檢查生物指示菌法(常時)、化學(xué)變色紙、高壓滅菌鍋溫度計(jì)等。生物指示菌法是高壓滅菌鍋的效果顯示方法。高壓滅菌鍋由專人按工作指示操作，并做好了每一份工作記錄。使用高壓滅菌鍋時，內(nèi)臟材料不能太多，單位體積內(nèi)的內(nèi)容物(每瓶內(nèi)的培養(yǎng)基)不能太多。還要注意內(nèi)容物的其他耐溫?？偲毓鈺r間最好不要超過45min。高壓滅菌鍋的溫度控制(2)，高壓滅菌鍋的日常工作記錄應(yīng)包括高壓滅菌材料、開始時間、壓力/溫度、去除時間、高壓滅菌帶的顏色變化(代替日常無菌培養(yǎng))高壓滅菌鍋溫度變化范圍：110、115和1212 高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般為6個月。干燥滅菌箱溫度控制、干燥滅菌箱日常工作記錄應(yīng)包括開始時間、滅菌溫度到達(dá)時間、去除時間(或結(jié)束時間)等信息。干燥滅菌箱溫度校準(zhǔn)；用基準(zhǔn)溫度計(jì)測試溫度。干燥滅菌箱溫度要求和準(zhǔn)確度：1605 或1805。前者為滅菌2小時，后者為30min分鐘。干燥滅菌箱校準(zhǔn)時間一般為一年。準(zhǔn)備用于調(diào)節(jié)蒸餾水的培養(yǎng)基，以蒸餾水為例，根據(jù)設(shè)備說明定期清潔離子交換器，更換離子交換材料。試驗(yàn)要求：西歐標(biāo)準(zhǔn)為微生物檢驗(yàn)用蒸餾水的特定電導(dǎo)率0.5 ms/m；細(xì)菌數(shù)50 cfu/ml。我們?nèi)粘Ｊ褂玫臉?biāo)準(zhǔn)是10ms/m，沒有細(xì)菌指標(biāo)。測試頻率：1次/月。做好蒸餾水定點(diǎn)供應(yīng)，并做好相應(yīng)的質(zhì)量控制，記錄檢查結(jié)果。平衡管理、平衡布置要求：無振動、無氣流影響和水平計(jì)數(shù)器。天平必須有使用和操作檢查記錄。天平是計(jì)量器具，包括在國家強(qiáng)制驗(yàn)證中的范圍，通常進(jìn)行一次/年驗(yàn)證。執(zhí)行檢查頻率與執(zhí)行計(jì)劃或產(chǎn)品(秤生產(chǎn)企業(yè))的標(biāo)準(zhǔn)重量單位相比較。通過一定的控制方法，確保高壓滅菌后稀釋劑滿足標(biāo)準(zhǔn)使用量的體積控制(a)。用重法測定蒸發(fā)量，100毫升的稀釋劑重量為101克。高壓充分體積偏差不得超過1%。判刑后定量裝扮可以避免高壓引起的體積誤差。保存的定量液體使用時要注意補(bǔ)充體積。音量控制(2)，吸管控制：通過小測量容器校準(zhǔn)，使用后。少量容器吸管、容量瓶、量筒等玻璃器皿，補(bǔ)償周期一般為1-2次/1年。小型測量容器的日常使用檢查可以每周進(jìn)行一次，包括容器的完整性。然后做適當(dāng)?shù)挠涗?。pH米，pH米在用于校準(zhǔn)之前使用標(biāo)準(zhǔn)溶液。緩沖液使用有效期：PH4.00約1年P(guān)H7.00約6個月PH9.00約6個月pH表維護(hù)：定期清潔電極外觀；電極靈敏度檢測及極性恢復(fù)。控制凈化工作臺，水平流量凈化工作臺工作區(qū)，要求清潔度100級。空氣沉淀30分鐘，細(xì)菌數(shù)1/碟。垂直流動凈化工作臺，細(xì)菌數(shù)0.49/碟形。凈化工作臺運(yùn)行檢查頻率：1次/月主要進(jìn)行細(xì)菌沉淀檢查。凈化工作臺高效濾膜一般一年更換一次，同時進(jìn)行顆粒和細(xì)菌沉降檢查。紫外線燈控制，檢測方法：儀器和生物測試方法。電子是通過專用儀器檢測紫外線燈發(fā)出的紫外線強(qiáng)度。國家消毒技術(shù)規(guī)格表示，距離在1米以內(nèi)要求強(qiáng)度為90。生物測試方法：按一定比例稀釋，控制細(xì)菌量200-250/0.5ml，在紫外線照射下設(shè)置涂層板，2分鐘，設(shè)定普通光源的對照組，3748h后，計(jì)算其殺菌率。要求殺人率達(dá)到99%。顯微鏡控制、顯微鏡應(yīng)制定工作指示、日常維護(hù)記錄和自己的學(xué)校記錄。顯微鏡應(yīng)該放在沒有震動、需要防塵、防潮等的環(huán)境中。其他微生物檢查專用儀器控制，細(xì)菌鑒定器，zymogram等設(shè)備，操作中一般作為陽性對照檢測其功能的正常性。設(shè)備驗(yàn)證將根據(jù)相應(yīng)部門或自己的學(xué)校運(yùn)營說明進(jìn)行。保管著儀器的使用登記、校準(zhǔn)計(jì)劃、校準(zhǔn)記錄等文件。使用儀器專業(yè)人員，操作人員必須取得相應(yīng)的職業(yè)培訓(xùn)資格，取得認(rèn)證。，建立完整的檢查數(shù)據(jù)作為徽章質(zhì)量管理、正確的徽章質(zhì)量管理和重復(fù)工作，是實(shí)驗(yàn)室今后要通過相應(yīng)水平的認(rèn)證，在整個檢查質(zhì)量管理系統(tǒng)中必須具備的文件數(shù)據(jù)。現(xiàn)有依據(jù)：衛(wèi)生部1993年公布的食品檢驗(yàn)用干培養(yǎng)基生產(chǎn)質(zhì)量管理。但是這個標(biāo)準(zhǔn)并不完美。根據(jù)天然培養(yǎng)基及合成培養(yǎng)基的組成進(jìn)行培養(yǎng)基分類。按用途分類：基本培養(yǎng)基、濃縮培養(yǎng)基、可選培養(yǎng)基、識別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固態(tài)培養(yǎng)基及固體培養(yǎng)基的形態(tài)分類。根據(jù)培養(yǎng)基配方分類：新鮮準(zhǔn)備培養(yǎng)基和干燥培養(yǎng)基。檢查中常用的培養(yǎng)基，水質(zhì)檢查用培養(yǎng)基：7種化妝品檢查用培養(yǎng)基：8種食品檢查用培養(yǎng)基：一般包括37種，110種在GB4789中，其中生化檢查用培養(yǎng)基為23種，一般及特殊培養(yǎng)基為89種。根據(jù)用于食品、化妝品、涉禽產(chǎn)品等產(chǎn)品微生物檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目的增量培養(yǎng)基，用于識別菌株的培養(yǎng)基種類大體相同。常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制(a)，檢驗(yàn)項(xiàng)目和方法：識別新批號的干培養(yǎng)基的物理、化學(xué)和生物指標(biāo)a:感官(外觀)研究精細(xì)和顏色(溶解前后)、透明度、雜質(zhì)等；B: PH測定，各種培養(yǎng)基要求的PH0.2，蒸餾水的PH值必須在6.4-7.0之間。c:生物指標(biāo)驗(yàn)證，檢驗(yàn)培養(yǎng)基相應(yīng)的細(xì)菌增長率測試；殖民地大小和特性檢測。常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制(2)，增長率測試：液體和固體培養(yǎng)基：細(xì)菌培養(yǎng)液，用鹽水稀釋兩倍，使用適當(dāng)?shù)南♂尪冉臃N培養(yǎng)基計(jì)數(shù)或試驗(yàn)培養(yǎng)基試管，根據(jù)相關(guān)培養(yǎng)基國家標(biāo)準(zhǔn)公式與新制造的培養(yǎng)基進(jìn)行比較。不低也不到10%。常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制(3)，菌落大小測試：交叉分離測試細(xì)菌，10個菌落測量直徑大小，直徑平均和新準(zhǔn)備的培養(yǎng)基統(tǒng)計(jì)沒有區(qū)別。一般使用標(biāo)準(zhǔn)菌株鑒定培養(yǎng)基，沙門氏菌pa 50002沙門菌tip 50096 b沙門氏菌paratyphi鴨50083沙門氏菌tip痢疾桿菌1型5157 o poshigella 2大腸桿菌25922滅菌后培養(yǎng)基ph: 7.22 大部分；弧菌個別試驗(yàn)培養(yǎng)基的pH值為8.02生物指標(biāo)：菌落特性和菌落大小?；照卤４姝h(huán)境，制作的徽章用4冰箱保存。如果是用盤子做的，就用塑料袋包裝裝置保管冰箱。干培養(yǎng)基干粉中含有活性物質(zhì)，受熱后容易分解的物質(zhì)應(yīng)仔細(xì)檢查保管條件，大部分應(yīng)存放在2 8。有些培養(yǎng)基容易保存在10-15 。含有高濃度膽鹽的培養(yǎng)基。養(yǎng)吉準(zhǔn)備控制程序、用于準(zhǔn)備徽章的設(shè)備準(zhǔn)備設(shè)備和設(shè)備需要適當(dāng)確認(rèn)。準(zhǔn)備培養(yǎng)基中使用的器械和容器準(zhǔn)備培養(yǎng)基中使用的器具和容器包括清潔或滅菌，不容易特殊清洗的玻璃器皿，必要時用重鉻酸鉀硫酸清洗浸泡后，浸泡5%氫氧化鈉溶液幾分鐘，用3%鹽酸溶液中和，用水沖洗，干燥后備用干燥。培養(yǎng)基的原料、試劑質(zhì)量控制、培養(yǎng)基的制造程序(a)、各培養(yǎng)基的制造程序不同，但一般培養(yǎng)基的制備過程主要有以下7個階段：調(diào)配、熔化、pH校準(zhǔn)、凈化過濾、化妝、滅菌和識別。注意：準(zhǔn)備時要注意使用各種組件。PH測量干燥培養(yǎng)基在工廠制造時對培養(yǎng)基PH進(jìn)行了一些調(diào)試。實(shí)際操作中，根據(jù)制造環(huán)境、制造用溶劑(蒸餾水)PH等條件，影響使用的培養(yǎng)基的PH值。因此，干燥培養(yǎng)基的制造也需要PH測試。準(zhǔn)備過程(2)，準(zhǔn)備徽章，特別是糖發(fā)酵管不能放太久。因?yàn)榕囵B(yǎng)基吸收空氣中的二氧化碳，使培養(yǎng)基酸性，影響細(xì)菌的生長。徽章的抑制劑和指示劑要準(zhǔn)確稱重，抑制劑要注意合理的相容性。培養(yǎng)基主要原料的質(zhì)量控制，制備培養(yǎng)基的主要原料是蛋白胨，牛肉提取物，酵母提取物，膽鹽，無機(jī)鹽，瓊脂等。這些主要原料低劣，直接影響培養(yǎng)基質(zhì)量，也影響檢驗(yàn)質(zhì)量。指標(biāo)包括感覺、物理、物理和生物學(xué)。培養(yǎng)基相關(guān)試劑的質(zhì)量控制，培養(yǎng)基相關(guān)試劑的質(zhì)量控制和陰陽性對照試驗(yàn)。對進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng)的各種試劑，配方后要進(jìn)行各種必要的驗(yàn)證。使用已知的陰陽兩性菌株進(jìn)行對照試驗(yàn)。其他東西，如氧化酶、接觸酶、染發(fā)劑等，也要經(jīng)過驗(yàn)證，用于測試。不合格培養(yǎng)基的可能原因(a)，干培養(yǎng)基凝集l培養(yǎng)基太舊，l培養(yǎng)基在潮濕的環(huán)境下生產(chǎn)時水分太高，PH值在規(guī)定值l培養(yǎng)基中太舊，l制劑中使用的蒸餾水非中性l培養(yǎng)基的過度滅菌，不合格培養(yǎng)基的可能原因(2)， 不良水l培養(yǎng)基PH值不使用l其他容器準(zhǔn)備l生產(chǎn)原料準(zhǔn)確度不足l培養(yǎng)基過度殺菌凝固溫度l培養(yǎng)基干燥粉過多l(xiāng)瓊脂質(zhì)量變化失敗培養(yǎng)基可能的原因(3)， 凝膠強(qiáng)度過低l培養(yǎng)基干燥粉末中使用的l培養(yǎng)基太少l培養(yǎng)基不能完全溶解l培養(yǎng)基在培養(yǎng)基過度滅菌之前沒有振動的培養(yǎng)基瓶l瓊脂粉末凝固強(qiáng)度低的顏色不正確lPH不正確(帶指示劑的培養(yǎng)基)l培養(yǎng)基過度滅菌l培養(yǎng)基使用不干凈的容器制造l不合格培養(yǎng)基的可能原因(4)，污染l培養(yǎng)基滅菌不完全l滅菌后儲存不當(dāng)污染l實(shí)驗(yàn)中使用的容器的生長不良l是制造容器設(shè)備在水或樣品中，可帶入抑制劑l樣品中含有致命損傷的微生物lPH不準(zhǔn)確l添加劑(抑制劑)等濃度不足l培養(yǎng)基的過度滅菌l試驗(yàn)中，培養(yǎng)基或樣品溶解時溫度過高或不合格培養(yǎng)基的原因(5)，過度生長l培養(yǎng)基的過度滅菌， 選擇性物質(zhì)損傷l添加劑濃度不充分的集落擴(kuò)散l瓊脂表面超濕l使用過量接種體積l培養(yǎng)基不充分的準(zhǔn)備l培養(yǎng)基不充分的準(zhǔn)備l干燥培養(yǎng)基儲存舊l制劑培養(yǎng)基儲存長生長條件l不充分的生長條件(溫度、時間、氣體)，測試質(zhì)量保證，認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和第二標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))的定期使用內(nèi)部質(zhì)量管理。 實(shí)驗(yàn)室之間的匹配或能力驗(yàn)證正在通過相同或不同的方法執(zhí)行重復(fù)測試來測試保留的樣品。微生物檢查質(zhì)量控制方法(a)，殖民地計(jì)數(shù)精度控制直接選擇計(jì)數(shù)相同的樣本，要求檢查員集落計(jì)數(shù)。使用大腸桿菌(25922)或試驗(yàn)精制的細(xì)菌片劑作為適當(dāng)?shù)奶荻认♂尫?，選擇適合于菌落數(shù)實(shí)驗(yàn)的稀釋度。為殖民地?cái)?shù)量培養(yǎng)361 24小時。選擇微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制方法(2)、菌落計(jì)算精確控制迭代計(jì)算方法各有相應(yīng)菌落數(shù)(100以內(nèi))的10個板塊。對數(shù)位板進(jìn)行編號，以使實(shí)驗(yàn)者計(jì)算并記錄結(jié)果。去掉平板號碼，保管冰箱一整夜，第二天拿出來重新編號，實(shí)驗(yàn)者重新計(jì)數(shù)，記錄。計(jì)算每個實(shí)驗(yàn)對象的每對結(jié)果的平均數(shù)量(x)。x=(a b)/2；計(jì)算相對誤差(rd):rd=| a b |/X100 %。計(jì)算不同實(shí)驗(yàn)者之間的相對誤差范圍：首先計(jì)算所有實(shí)驗(yàn)者的平均殖民地?cái)?shù)x= x/n，并且每個結(jié)果必須在X18.2%的范圍內(nèi)。，重復(fù)計(jì)算要求，實(shí)驗(yàn)者之間相同的盤子重復(fù)計(jì)算誤差小于7.7%，實(shí)驗(yàn)者之間相同的梯度并行加模板之間的相對誤差小于7.7%，實(shí)驗(yàn)者之間相同的梯度數(shù)誤差小于7.7%，X18.2%范圍不同梯度間菌落數(shù)最