磁珠法-核酸提取新篇章ppt課件

1、磁珠法核酸提取的新篇章,洛陽(yáng)惠爾納米科技 狄光輝Q:625006192,核酸提取方法進(jìn)展,核酸抽提是下游核酸檢測(cè)、研究或產(chǎn)品開(kāi)發(fā)的起點(diǎn)，所分離的核酸的質(zhì)量和完整性直接影響研究或診斷結(jié)果，因此核酸抽提是分子生物學(xué)最關(guān)鍵的方法之一。 成功的核酸分離純化需要四個(gè)重要步驟：組織或細(xì)胞的破碎和裂解，核蛋白復(fù)合體的變性，核酸酶的滅活以及污染物的去除,傳統(tǒng)核酸提取方法,酚-氯仿抽提法,堿抽提法,CTAB抽提法,纖維素膜層析法,核酸固相抽提法,市場(chǎng)上大多數(shù)商業(yè)核酸抽提試劑盒采用固相抽提法。相對(duì)于傳統(tǒng)方法，固相抽提更快速和高效。它解決了許多液-液抽提存在的諸多問(wèn)題，如分離不完全等,固相

2、抽提方法的支持物主要有硅膠、玻璃顆粒、陰離子交換樹(shù)脂、磁性顆粒。固相抽提包括細(xì)胞裂解、核酸吸附、漂洗和洗脫四個(gè)關(guān)鍵性的步驟,提取原理,首先，基于堿裂解法使細(xì)胞膜破裂，以及組蛋白變性，釋放核酸,然后，將經(jīng)裂解液處理的樣本轉(zhuǎn)移到固相支持物上，在結(jié)合液 的幫助下靶核酸被吸附到支持物上,蛋白質(zhì)等其他化合物也可與支持物表面發(fā)生結(jié)合，但通過(guò)目的性 洗滌過(guò)程可以被除掉,最后，以TE緩沖液或蒸餾水將純凈的靶核酸從支持物上釋放下來(lái),離心柱法提取DNA,磁珠法提取DNA,裂解 使核酸游離出來(lái),結(jié)合 加入磁珠，使核酸與其結(jié)合,洗滌 洗去殘留雜質(zhì),洗脫 將核酸從磁珠中分離出到溶液,純化 分離磁珠，得到高純度核酸溶液,

3、比較（以全血為例,離心柱法產(chǎn)品效果圖,磁珠法產(chǎn)品效果圖,核酸自動(dòng)化抽提系統(tǒng),自動(dòng)化抽提系統(tǒng)是可高通量地處理樣品、有助于簡(jiǎn)化分離步驟的一種大型、復(fù)雜的儀器操作系統(tǒng)。 自動(dòng)化提取的優(yōu)點(diǎn)有：減少人為工作時(shí)間，降低人力成本、增加工作者的安全性以及提高結(jié)果的可重復(fù)性和質(zhì)量,核酸自動(dòng)提取儀,磁棒,深孔板,磁珠法核酸提取的核心是生物磁珠，是一種新型的功能化固體載體，其表面包被有活性基團(tuán)，可與多種生物活性物質(zhì)發(fā)生偶聯(lián)，兼具有液體的流動(dòng)性和固體磁性材料等特點(diǎn),生物磁珠的介紹,生物磁珠按功能集團(tuán)分類及應(yīng)用領(lǐng)域,Fe3O4磁性微球,硅基（硅羥基,氨基/羧基,生物磁珠的制備方法,植物、動(dòng)物基因組DNA及細(xì)菌質(zhì)粒提取試

4、劑盒,磁珠法DNA提取試劑盒的介紹,應(yīng)用,和中科院植物研究所合作，提取百年以上植物的DNA， 用于后續(xù)的分型及特定位點(diǎn)的分析,可用于海關(guān)、畜牧檢驗(yàn)，檢測(cè)進(jìn)出口肉制品或者家禽 是否攜帶病毒,提取質(zhì)粒，用作基因工程的常用載體,臨床疾病診斷：人類的很多疾病和基因密切相關(guān)，白血病、地中海貧血、腎衰竭等都能用基因技術(shù)進(jìn)行分型檢測(cè)，再尋找合適的供體進(jìn)行移植治療；葉酸代謝能力基因檢測(cè)；DNA親子鑒定；胎兒性別檢測(cè) 動(dòng)物疾病檢測(cè)：布魯菌?。╞rucellosis，布病），也稱波狀熱，是布魯菌引起的急性或慢性傳染病，人畜共患病。 科學(xué)研究：醫(yī)學(xué)、農(nóng)牧、生物相關(guān)分子生物學(xué)定量研究。 應(yīng)用行業(yè)： 各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)、疾病預(yù)防控制中心、血站、大學(xué)及研究所、獸醫(yī)站等,全血試劑盒,病毒試劑盒,能夠從血清、血漿等多種病毒樣品中（如HBV、HPV、HCV ），高效提取和分離病毒總DNA或RNA，也可適用于組織細(xì)胞或分泌物樣本中的病毒總核酸，提取產(chǎn)物可以直接用于下游應(yīng)用，如熒光定量PCR或定量逆轉(zhuǎn)錄PCR等,1. 生物磁珠具有小尺寸效應(yīng)和表面效應(yīng)，可高效核酸提取，滿足微量生物樣本核酸提取的要求。 2.不使用酚、氯仿、異戊醇等有毒試劑，安全無(wú)毒，綠色環(huán)保。 3.生物磁珠能夠通過(guò)儀器進(jìn)行自動(dòng)化操作，滿足數(shù)據(jù)庫(kù)建設(shè)對(duì)大批量樣本提取的需要