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1、血沉和紅細(xì)胞脆性實驗講稿一、 相關(guān)理論知識滲透壓1、滲透現(xiàn)象(1)概念:指被半透膜隔開的兩種濃度不同的溶液,自行發(fā)生的水分子從低濃度溶液向高濃度溶液中擴(kuò)散的現(xiàn)象。(2)實驗:將蔗糖水灌入一個下端有半透膜作底的玻管中,然后把它浸放在盛有純水的玻璃杯中,過一會兒,我們便會看到玻璃管內(nèi)的液面逐漸上升,這說明玻璃管中的水通過半透膜進(jìn)入了玻璃管內(nèi),我們把這種水分子自動地透過半透膜從低濃度一側(cè)向高濃度一側(cè)擴(kuò)散的現(xiàn)象就稱為滲透現(xiàn)象。這是因為玻璃管中盛的是純水,而玻璃管內(nèi)裝的是蒸餾水,若從水分子的濃度上看,純水要大于蔗糖水(因為蔗糖水中除水分子外,還有蔗糖分子),無論是水分子或蔗糖分子都不是靜止的,而是不停地
2、向各個方向運動著,由于純水中水分子濃度大于蔗糖水的水分子的濃度,在起初一定的時間內(nèi),從純水方面穿過半透膜進(jìn)入蔗糖水的水分子個數(shù)比同時間內(nèi)從蔗糖水通過半透膜穿出來的水要多。因而,玻璃管中水蔗糖水液面逐漸上升。但隨著液面的上升,逐漸對半透膜的壓力加大,因此,蔗糖水中的呂分子穿出半透膜進(jìn)入純水的速度也就增大,當(dāng)蔗糖水液面達(dá)到某一高度量,就不再上升了。這是因為水分子進(jìn)出純水與蔗糖水的速度相等了。此時,管內(nèi)外液面高度差所產(chǎn)生的壓力,即為蔗糖水的滲透壓。2、滲透壓(1)概念:滲透壓是指溶液所具有的吸引和保留水分子的能力。或者說是指水分子通過半透膜產(chǎn)生的擴(kuò)散力。這是從不同的角度來表示的,前者是從高濃度一側(cè),
3、后者是從低濃度一側(cè)來闡述的。(2)影響因素:其大小與溶液的濃度有關(guān)(特別是溶液中的顆粒數(shù)目),而與其種類和大小無關(guān),顆粒數(shù)目越多,滲透壓就越高。(3)滲透壓的表示法:目前血漿滲透壓有兩種表示方法:壓力表示法:以KPa或mmHg來表示。滲透摩爾表示法:通常以1個摩爾濃度的非電解質(zhì)溶液所產(chǎn)生的滲透壓就稱為1個滲透摩爾(Osm),由于這個單位太大,故醫(yī)學(xué)上常用此單位的千分之一即毫滲透摩爾(mOsm)來表示。3、血漿滲透壓的組成(1)晶體滲透壓:指的是由血漿中的晶體物質(zhì)(特別是電解質(zhì))及小分子的有機(jī)物質(zhì)所形成的滲透壓,這部分滲透壓占了絕大部分。(2)膠體滲透壓:指的是由血漿中的膠體物質(zhì)(主要是蛋白質(zhì))
4、所形成的滲透壓,這部分僅占了很少的一部分。4、血漿滲透壓的正常值(1)血漿滲透壓:正常值為300mOsm/L,即5800mmHg、770KPa。(2)晶體滲透:正常值為298.5mOsm/L,即5775mmHg、766.7KPa。(3)膠體滲透壓:正常值為1.5mOsm/L,即25mmHg、3.33KPa。應(yīng)注意:血漿晶體滲透壓=組織液晶體滲透壓;血漿膠體滲透壓組織液膠體滲透壓。5、等滲液、低滲液和高滲液(1)等滲液:血漿滲透壓的數(shù)值相當(dāng)于0.9%NaCl或5%GS所形成的滲透壓。因此我們把這種和血漿滲透壓相等的溶液就稱之為等滲溶液。臨床上常用的等滲液為0.9%NaCl或5%GS。(2)高滲溶
5、液:高于血漿滲透壓的溶液。如50%GS。(3)低滲溶液:低于血漿滲透壓的溶液。如0.45%NaCl。此種液體不能用于臨床上。因為會發(fā)生溶血現(xiàn)象(指的是RBC膨大、破裂、釋放出其中所含的Hb)。6、血漿滲透壓的作用(1)血漿晶體滲透壓(crystal osmotic pressure)作用:維持著組織細(xì)胞的正常形態(tài),調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的水分交換。低滲液的影響:會發(fā)生溶血。RBC在0.42%NaCl開始出現(xiàn);在0.35%NaCl完全溶血。高滲液的影響:產(chǎn)生脫水,RBC將會萎縮。臨床作用:絕不能用低滲液;高滲液(如50%GS、20%甘露醇)可用于防治腦水腫;清創(chuàng)一定要用等滲液。(2)血漿膠體滲透壓(col
6、loid osmotic pressure)作用:維持著血管內(nèi)外的水分交換以及血漿、組織液和細(xì)胞內(nèi)液的穩(wěn)定。故在某些營養(yǎng)性不良疾病、肝臟疾病、腎臟疾病時,由于蛋白質(zhì)減少,可出現(xiàn)水腫。影響因素:最主要的物質(zhì)是蛋白質(zhì),其中主要又是白蛋白。臨床應(yīng)用:可用右旋糖苷靜脈注射來擴(kuò)充血容量。紅細(xì)胞的生理特性1、懸浮穩(wěn)定性(suspension stability)(1)概念:將與抗凝劑混勻的血液置于一支小玻管(如分血計)中紅細(xì)胞由于比重較大,將因重力而下沉,但正常時下沉十分緩慢,紅細(xì)胞能夠比較穩(wěn)定地懸浮于血漿中,這與特性稱為懸浮穩(wěn)定性。(2)血沉:通常以紅細(xì)胞在第一小時內(nèi)下沉的距離來表示紅細(xì)胞沉降的速度,稱
7、為紅細(xì)胞沉降率,簡稱血沉,它可以表示懸浮穩(wěn)定性的大小,正常男性的血沉第1小時不超過3mm,女性不超過10mm。RBC下降緩慢,說明它有一定的懸浮穩(wěn)定性,血沉愈小,表示懸浮穩(wěn)定性愈大。在心肌梗塞、肺病、妊娠、進(jìn)行性結(jié)核、急性炎癥、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、貧血等情況下,血沉加快,表示懸浮穩(wěn)定性很差。通常用mm /h來表示。(3)影響因素:與血漿的成分有關(guān)(白蛋白可提高其懸浮穩(wěn)定性,球蛋白和纖維蛋白原可降低此特性),而與血細(xì)胞無關(guān)。2、滲透脆性(osmotic fragility)(1)概念:滲透脆性是指紅細(xì)胞膜對低滲溶液的抵抗力的大小。(2)實驗:我們配制一系列不同濃度的NaCl溶液(從0.9%一直到0.3
8、%,另外再加入2%NaCl溶液),再配制一份1.9%的尿素,再將一滴加了抗凝劑的血液,滴入試管內(nèi),充分混勻,在室溫下靜置3060min??梢姷剑篟BC在0.9%NaCl溶液中可保持正常形態(tài),而在0.60.4%的NaCl溶液中可見小管的液體下層為混濁紅色,而上層為透明紅色,說明只有部分紅細(xì)胞被破壞和溶解,稱不完全溶血,開始出現(xiàn)部分溶血的NaCl溶液濃度為0.45%(最大脆性);而在0.4%0.3%的NaCl溶液中可見小管內(nèi)液體完全變成透明紅色,管底無細(xì)胞,說明RBC完全溶解,稱為完全溶血,一般在0.30.35%的NaCl溶液中可出現(xiàn)這種現(xiàn)象(最小脆性)。衰老的紅細(xì)胞,其細(xì)胞膜脆性大,周圍滲透壓稍
9、降低,RBC就破裂,幼稚紅細(xì)胞,其細(xì)胞膜彈性大,脆性小,可耐受較低的滲透壓。1.9%的尿素是等滲的,但把紅細(xì)胞放入其中,RBC會破裂溶血,原因是尿素能自由通過紅細(xì)胞膜,引起細(xì)胞內(nèi)液滲透壓升高,故而使RBC溶血。因此我們說1.9%的尿素是等滲的,但不是等張的。(3)等滲液:指與血漿滲透壓相等的溶液,如0.9%NaCl(又稱生理鹽水)或5%葡萄糖溶液。(4)等張液:指能夠保持紅細(xì)胞正常形態(tài)和大小的溶液。3、可塑變形性正常紅細(xì)胞具有可塑變形性,能經(jīng)過卷曲變形,通過比它直徑小得多的毛細(xì)血管和血竇孔隙,而后還可恢復(fù)其正常形態(tài)。實驗一 紅細(xì)胞沉降率一、實驗?zāi)康模簻y定正常人的紅細(xì)胞沉降率。將加有抗凝劑的血液
10、置于一垂直管中,紅細(xì)胞由于重力關(guān)系將漸漸向下沉降,通常將一小時末紅細(xì)胞下降的距離,作為沉降率的指標(biāo),在臨床上某些疾病顯著地引起患者紅細(xì)胞沉降率加速,具有臨床診斷意義。目前常用惠氏法測定。二、實驗準(zhǔn)備:1、實驗器材:惠氏沉降管、 固定架、 5毫升注射器、 針頭 、青霉素瓶、棉簽2、實驗藥品:3.8%枸櫞酸鈉、碘酒、酒精3、實驗對象:人三、實驗步驟:1、采血:用消毒的干燥注射器和針頭由肘窩正中靜脈抽血1.6毫升,立即將血液沿壁管緩緩放入已盛有3.8%檸檬酸鈉0.4毫升的青霉素瓶中,在桌面順時針旋轉(zhuǎn)3次,使之充分混勻,但需避免劇烈振蕩,以免紅細(xì)胞破壞。2、固定:取干燥的惠氏沉降管一只,從小瓶內(nèi)吸血至
11、刻度”0”點為止,拭去下端管口外面的血液,垂直地豎立在固定架的橡皮墊上,管的上端由一彈簧鐵片固定起來。勿使血液從管下端漏出.注意管不能稍有歪斜,管內(nèi)不應(yīng)該有凝血塊和氣泡。待1小時末,讀取紅細(xì)胞下沉的距離,即為紅細(xì)胞沉降率(毫米/小時)。(在室溫中進(jìn)行,若紅細(xì)胞上端成斜坡形或尖峰形時,應(yīng)選擇斜坡部分的中間地位計算)。注明受試者姓名、性別、年齡、紅細(xì)胞沉降率。3、實驗結(jié)果:4、實驗討論:實驗二 紅細(xì)胞滲透脆性一、 實驗?zāi)康模和ㄟ^觀察紅細(xì)胞對不同濃度的低滲鹽溶液的抵抗力,加深理解紅細(xì)胞的滲透脆性和血漿滲透壓相對穩(wěn)定的生理意義,學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞滲透脆性的方法。紅細(xì)胞對低滲鹽溶液具有一定的抵抗力,這種抵抗
12、力的大小,可以表示紅細(xì)胞膜的脆性大小,抵抗力大,表示脆性小,反之,抵抗力小,則脆性大。因此將血液滴入不同濃度的低滲鹽溶液中,可以觀察到開始發(fā)生溶血和完全溶血的界限。二、 實驗準(zhǔn)備:實驗器材:小試管、 試管架、 滴管 、吸管 、小燒杯、注射器、針頭、棉簽實驗藥品:1%Nacl、 2%Nacl 、1.9%尿素、碘酒、酒精、5%枸櫞酸鈉、蒸餾水實驗對象:人三、實驗步驟:1、制備:0.3%0.8%低滲鹽溶液和0.9%等滲鹽溶液,取小試管9只依次標(biāo)號排列于試管架上。(其中10和11號分別為已加好的2%Nacl和1.9%尿素各1毫升)試液 管號12345678910111%Nacl(ml)0.90.80.70.60.50.450.40.350.32%1.9%蒸餾水(ml)0.10.20.30.40.50.550.60.650.7Nacl尿素Nacl濃度%0.90.80.70.60.50.450.40.350.31毫升1毫升2、采血:用需消毒的干燥注射器和針頭由肘
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