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文檔簡介

1、微生物學實驗課程名稱:微生物學實驗課程編碼:014B005A學 時:32學 分:2適用專業(yè):生物工程、生物技術先修課程:生物化學、普通生物學執(zhí) 筆 人:王小梅審 定 人:熊元林、姚小飛、趙為、謝立蘭、范萌、曹曉玲、沈維鐸一、課程性質與任務 本課程為生物學各專業(yè)的專業(yè)基礎課(必修) 。 微生物學實驗是一門實踐性很強的學科, 本課程是與微生物學理論教學相配套的實驗教 學,目的是訓練學生掌握微生物學最基本的實驗操作技能, 包括經典的、常規(guī)的、 以及現代 的方法與技術, 使學生具有適應于從事相關學科的基礎理論研究與實際生產應用的微生物學 實驗技能; 與微生物學基礎理論課緊密結合, 使學生將理性知識與感

2、性認識有機地結合, 進 一步了解微生物學的基本知識, 加深理解課堂講授的微生物學理論知識; 同時, 通過實驗培 養(yǎng)學生觀察、思考、分析問題和解決問題的能力;實事求是,嚴肅認真的科學態(tài)度。為微生 物的實際應用打下堅實基礎。二、教學目標1. 知識目標一般知識點及其實現方式: 通過課堂學習, 使學生全面了解微生物學實驗的科學內容 和基本原理;熟知實驗的操作方法和實驗中所使用的儀器和藥品。核心知識點及其實現方式:通過老師講授、示范,學生操作、討論的方式,訓練學生 正確掌握進行微生物學實驗的操作方法和技能, 要熟練掌握顯微鏡的使用技術并熟悉顯微鏡 的使用技術并熟悉顯微鏡的構造及保養(yǎng)方法; 學會干熱滅菌箱

3、、 高壓蒸汽滅菌鍋、 恒溫培養(yǎng) 箱的使用; 具有選擇和制備培養(yǎng)基的能力; 掌握基本染色原理和方法以及制片技術; 熟悉細 菌、酵母菌、霉菌的基本形態(tài)結構、 生理生化特征和血清學特性, 具有菌種初步鑒定的基本 技能; 通過實驗,使學生學會無菌操作方法, 掌握微生物的分離、 篩選和育種的基本知識和 技能,了解菌種保藏的一般方法。學會進行綜合實驗的設計、準備、操作和結果分析。2. 能力目標 通用能力:動手操作能力、交流和溝通能力、獨立學習能力、公開演講能力、團隊協 作能力、領導能力等;實現方式:教師講解、學生討論、翻轉課堂等;核心能力: 培養(yǎng)學生對實驗原理、方法和結果進行正確理解, 仔細觀察,認真思考

4、的 科學素養(yǎng)和分析問題,解決問題的科學能力。實現方式:學生自己分組討論實驗結果,講解實驗設計思路;3. 素質目標通用素質:遵守課堂紀律、考試紀律,誠信,學會尊重,等; 實現方式:嚴格考勤,禁止遲到、早退,禁止上課期間玩手機,嚴格考查學生實驗課 上的動手率,加大過程考核力度(或比重)等;核心素質:學生在實驗過程中科學、嚴謹、實事求是等的素質;實現方式:教 -學- 做相結合等;三、主要的教學方法1. 任課教師講解實驗內容、實驗原理、實驗技術要領、操作關鍵要點;進行規(guī)范化操作示范;2. 學生按實驗教材要求, 進行獨立操作, 必要時以小組進行合作操作; 任課教師注意并 及時糾正學生操作中的錯誤動作;3

5、. 要求學生課前預習實驗內容, 實驗中具有嚴謹的科學態(tài)度、 實事求是的科學精神、 以 實驗的真實結果書寫實驗報告;鼓勵學生提出問題、分析問題、解決問題并樹立創(chuàng)新意識; 進行啟發(fā)式、討論式等多種形式的教學;4. 培養(yǎng)學生在實驗中互相配合、團結合作的團隊精神。四、教學內容的學時分配教學內容學時分配備注一油鏡使用和微生物形態(tài)觀察4驗證二革蘭氏染色法及芽孢莢膜染色法4驗證三環(huán)境中微生物的檢測4綜合四細菌平板菌落計數法4綜合五細菌鑒定中常用的生化反應實驗4綜合六化學因素對微生物生長的影響4驗證 +綜合七乳酸菌的檢測4設計 +綜合八從土壤中分離純化微生物4設計 +綜合五、主要教學內容實驗一 顯微鏡油鏡的使

6、用及微生物形態(tài)的觀察( 4 學時)1. 教學重點:顯微鏡油鏡的使用,真菌的形態(tài)特征,細菌涂片技術2. 教學難點:顯微鏡油鏡的使用,真菌的形態(tài)特征,細菌涂片技術3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 顯微鏡油鏡的使用及真菌形態(tài)的觀察( 3 學時)1. 顯微鏡的種類2. 顯微鏡的工作原理3. 顯微鏡的構造:光學系統和機械系統4. 油鏡的使用和注意事項 5. 真菌永久裝片的觀察1. 熟練掌握普通光學顯微鏡油鏡的使用和 保養(yǎng)方法;2. 掌握各種微生物的主要形態(tài)特征及微生 物繪圖的基本方法;3. 生物學形態(tài)觀察能力。第 2 節(jié) 細菌簡單染色法( 1 學時)1. 細菌涂片2. 細菌涂片單染技

7、術3. 鏡檢觀察細菌形態(tài)1. 無菌操作技術;2. 微生物涂片及簡單染色技術的能力。備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式本實驗項目重在幫學生認識并親眼看到微生物,使學生掌握微生物觀察最基本的工具 油鏡的使用方法, 建立無菌操作意識, 并學會制作微生物的涂片和單染技術, 激起學生探索 未知的欲望以及學習微生物學的興趣。通過老師講解、示范后,要求學生獨立操作演練,并 觀察自制涂片,進行對核心知識點和和核心能力的考查。實驗二 細菌革蘭氏染色及芽孢、莢膜染色法(4 學時)1. 教學重點:革蘭氏染色法、細菌莢膜染色和芽孢染色的方法2. 教學難點:革蘭氏染色法

8、3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 細菌革蘭氏染色( 2 學時)1. 革蘭氏染色的基本原理2. 細菌涂片3. 染色(初染、媒染、脫色、復染)4. 鏡檢觀察并繪圖1. 掌握革蘭氏染色制片及染色的方法;2. 利用革蘭氏染色進行微生物初步鑒定的 能力。第 2 節(jié) 細菌莢膜染色( 1 學時)1. 莢膜染色的基本原理2. 制片3. 染色(襯托染色法)4. 鏡檢觀察莢膜并繪圖1. 掌握襯托染色法進行細菌莢膜染色。第 3 節(jié) 細菌芽孢染色( 1 學時)1. 莢膜染色的基本原理2. 細菌涂片3. 染色(初染、脫色、復染)4. 鏡檢觀察芽孢并繪圖1. 掌握芽孢染色的操作技術;2. 分析特殊染色

9、在研究微生物形態(tài)分類應 用的能力。備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式 本實驗項目重點要求學生掌握細菌的革蘭氏染色法和特殊構造(莢膜、芽孢)的染色, 鞏固無菌操作意識, 熟練制作微生物的涂片和常用染色技術, 并能利用不同染色法輔助微生 物的分類鑒定。通過老師講解、示范后,要求學生獨立操作演練,并鏡檢觀察自制涂片,尤 其是判斷革蘭氏染色的結果正確性,進行對核心知識點和和核心能力的考查。實驗三 環(huán)境中微生物的檢測 (4 學時)1. 教學重點:培養(yǎng)基制作、高壓蒸汽滅菌法、無菌操作倒平板培養(yǎng)基的方法、環(huán)境中不同 樣本的接種方法2. 教學難點:識別不同種類

10、微生物的菌落3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 培養(yǎng)基制作與高壓滅菌技術( 2 學時)1. 培養(yǎng)基的概念和種類2. 培養(yǎng)基的配制原則、方法和注意 事項3. 高壓蒸汽滅菌的原理、操作步驟和注意事項4. 培養(yǎng)基的滅菌1. 掌握培養(yǎng)基的配制方法;2. 掌握高壓蒸汽滅菌鍋加壓蒸汽滅菌的操 作方法;第 2 節(jié) 環(huán)境和人體表面微生物的檢測( 2 學時)1. 平板培養(yǎng)基的制備;2. 環(huán)境中不同樣本的采集與處理;3. 樣本的接種;4. 培養(yǎng): 37 24h ;5. 結果觀察: 微生物的生長情況、 菌落識別與描述。1. 無菌操作倒平板培養(yǎng)基的方法;2. 環(huán)境中不同樣本的接種方法;3. 識別不同

11、種類微生物的菌落的能力。備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式 本實驗項目證明環(huán)境與人體的微生物, 比較來自不同場所與不同條件下細菌的數量和類 型。重點要求學生掌握培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的配制原理及配制方法; 熟練掌握高壓蒸汽滅菌的原 理及應用范圍; 掌握環(huán)境樣本采集、 不同樣本的接種方法以及菌落識別技能的方法; 掌握無 菌操作倒平板培養(yǎng)基的方法。 通過老師講解、 示范后, 要求學生獨立操作演練以及進行小組 合作,考查學生掌握微生物菌落特征的掌握程度,進行對核心知識點和和核心能力的考查。實驗四 平板菌落計數法 ( 4學時)1. 教學重點:平板菌落計數的基本

12、原理和方法2. 教學難點:平板菌落計數的方法3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 平板菌落計數法( 4 學時)1. 平板菌落計數的原理2. 細菌計數的方法比較3. 梯度稀釋4. 倒平板5. 涂布平板法接種6. 培養(yǎng)7. 觀察計數進行計數1. 掌握平板菌落計數法的原理;2. 掌握梯度稀釋技術以及涂布平板法進行 微生物接種;備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式 本實驗項目學習的是目前常用的細菌計數技術平板菌落計數。 要求學生掌握平板菌 落計數法的原理和操作方法,比較其與細胞(血球) 計數板直接計數法的區(qū)別。通過老師講 解、示范后,要求

13、學生獨立操作演練以及進行小組合作, 要考查學生對于梯度稀釋、涂布平 板法的掌握,通過思考題的解答進行對核心知識點的考查。實驗五 細菌鑒定中常用的生化反應試驗( 4學時)1. 教學重點:細菌鑒定中糖發(fā)酵試驗、淀粉水解實驗、吲哚實驗及伏-譜試驗的原理2. 教學難點:細菌生理生化試驗結果的分析3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 細菌鑒定中常用的生化反應試驗( 4 學時)1. 糖發(fā)酵試驗、淀粉水解實驗、吲哚實驗及伏 - 譜試 驗的原理2. 四種培養(yǎng)基的配制3. 接種4. 培養(yǎng)5. 觀察、結果分析1. 掌握糖發(fā)酵試驗、淀粉水解實驗、吲哚 實驗及伏 - 譜試驗的原理;2. 分析細菌鑒定中

14、常見生理生化實驗應用 的能力。備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式 本實驗項目學習細菌鑒定中常用的生化反應及其原理, 有助于人們對細菌及其代謝類型 多樣性的認識, 對腸道細菌的鑒定具有重要意義。 要求學生掌握細菌生化反應實驗的基本技 術,并準確分析實驗結果。通過老師講解、示范后, 要求學生獨立操作演練以及進行小組合 作,要鞏固學生的培養(yǎng)基配制、 不同接種法等技術,更重要是具備分析實驗結果的能力,此 外可通過思考題的解答以及對小組實驗結果的講解進行對核心知識點的考查。實驗六 化學因素對微生物生長的影響( 4 學時)1. 教學重點:檢測常用化學消毒劑

15、對微生物的作用2. 教學難點:測定石炭酸系數的方法3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 化學因素對微生物生長的影響( 4 學時)1. 化學消毒劑對微生物作用的原理2. 濾紙片法測定化學消毒劑的殺(抑)菌作用3. 石炭酸系數的測定1. 結合生活實際理解化學因素對微生物的 影響;2. 分析濾紙片法和石碳酸系數的不同原理 和指示意義的能力。備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式 本實驗項目要求了解常用化學消毒劑對微生物的作用, 學習測定石炭酸系數的方法。 要 求學生掌握濾紙片法測定抑菌圈的基本技術, 并準確分析化學因素對微生物的影響。 通

16、過老 師講解、示范后,要求學生獨立操作演練以及進行小組合作, 加深對無菌操作的認識, 要考 查學生化學因素對微生物影響的理解, 此外可通過思考題的解答以及對小組實驗結果的講解 進行對核心知識點的考查。實驗七 乳酸菌的檢測(4 學時)1. 教學重點:掌握乳酸菌菌數的檢測方法2. 教學難點:接種過程中的無菌操作,實驗結果的觀察3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 乳酸菌的檢測( 4 學時)1. 乳酸菌的生理特性及檢測原理2.MRS-CaCO3培養(yǎng)基的配制濾紙片法測3. 梯度稀釋4. 混勻法接種5. 培養(yǎng) 40、 48h5. 觀察、計數1. 掌握乳酸菌菌數的檢測方法;2. 掌握不同的

17、接種方法和培養(yǎng)技術;3. 利用所學知識獨立制作酸奶,并進行酸 奶品質分析的能力。備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式 本實驗項目要求學生利用所學知識自制酸奶, 并利用乳酸菌數量的檢測, 理解實驗的實 用性。要求學生掌握乳酸菌菌數的檢測方法以及不同的接種方法和培養(yǎng)技術。 通過老師講解、 示范后, 要求學生課前準備、 課堂上獨立操作演練以及進行小組合作, 加深對乳酸菌的概念 的理解, 鞏固無菌操作的認識, 熟練多種接種和培養(yǎng)技術, 此外可通過思考題的解答以及對 小組實驗結果的講解對核心知識點進行考查。實驗八 從土壤中分離純化微生物( 4 學時)1.

18、教學重點:劃線法分離純化微生物的方法2. 教學難點:接種過程中的無菌操作,劃線法分離純化微生物的方法3. 知識與能力:教學內容企業(yè)標準知識能力第 1 節(jié) 從土壤中分離純化微生物( 4 學時)1. 微生物的分離純化2. 平板分離法3. 土壤采樣4. 土壤中霉菌的分離5. 土壤中固氮菌的分離5. 觀察、分析結果1. 掌握劃線法分離純化微生物的方法;2. 利用不同微生物的特性,采用平板分離 法分離純化微生物的能力。備注: 核心知識點,核心能力(下同)4. 核心知識和核心能力的實現方式及過程考核方式 本實驗項目以設計性實驗方式開設, 讓學生學會如何將自然界中混雜的微生物分離成純 種,要求學生掌握統計分析樣品中微生物的種類和數量的方法; 掌握根據菌落及培養(yǎng)特征區(qū) 分細菌、放線菌和霉菌; 掌握微生物平板及斜面培養(yǎng)的

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