KAI1基因在人肺癌細胞株中表達水平及調(diào)控機制的研究＊PPT課件_第1頁
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文檔簡介

1、KAI1KAI1基因在人肺癌細胞株中表達水平基因在人肺癌細胞株中表達水平及調(diào)控機制的研究及調(diào)控機制的研究本研究受到國家自然科學(xué)基金重點項目（本研究受到國家自然科學(xué)基金重點項目（N0.30430300）和天津市科技）和天津市科技支撐計劃重點項目（支撐計劃重點項目（No. 06YFSZSF05300）資助資助尤嘉琮1 趙穎2 陳 軍1 馬 力1 朱大興1 周清華 1 1、天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院天津市肺癌研究所 2、四川大學(xué)華西醫(yī)院腫瘤中心 一、研究不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株和正常一、研究不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株和正常人肺成纖維細胞株人肺成纖維細胞株MRC-5中中KAI1的的mRNA表達表達水平及

2、其差異水平及其差異二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細胞肺癌細胞株中二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細胞肺癌細胞株中KAI1的的mRNA表達水平，探討表達水平，探討KAI1與與nm23-H1在在調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關(guān)系調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關(guān)系三、研究甲基化抑制劑三、研究甲基化抑制劑5-雜氮脫氧胞苷雜氮脫氧胞苷(5-Aza-CdR)對肺癌細胞株對肺癌細胞株L9981、GLC-82和和NCI-H460中中KAI1的的mRNA表達水平和體外增殖能力的影響表達水平和體外增殖能力的影響 主要材料與方法主要材料與方法主要實驗方法：主要實驗方法： 實時熒光定量實時熒光定量PCR MTT法繪制細胞生長曲線法繪制細胞生長曲線

3、甲基化抑制劑：甲基化抑制劑： 實 驗 結(jié) 果比較比較MRC-5與不同組織類型肺癌細胞株間與不同組織類型肺癌細胞株間KAI1基因基因mRNA表達水平表達水平1. MRC-5 , 正常人肺成纖維細胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌細胞株；9. NCI-H460，人大細胞肺癌細胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細胞肺癌細胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細

4、胞株;13. YTMLC-90，肺鱗癌細胞株； P=0.0000.002不同細胞株間不同細胞株間KAI1基因表達水平比較的基因表達水平比較的P值表值表CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000N

5、L99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000

6、.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. MRC-5 , 正常人肺成纖維細胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌細胞株；9. NCI-H460，人大細胞肺癌細胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細胞肺癌細胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細胞株; 13. YTMLC-90，肺鱗癌細胞株； 在在L9981細胞中轉(zhuǎn)染

7、細胞中轉(zhuǎn)染nm23-H1可顯著上調(diào)可顯著上調(diào)KAI1的的mRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.000

8、0.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -2

9、0.0121. L9981；2. NL9980；3. L9981-nm23-H1-pEGFP比較比較L9981細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1的的mRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.

10、0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H

11、4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121.L9981；2. A549；3. GLC-82；4. A2；5. SPCA-1；6. NCI-H460；7. SH-77；8. NCI-H446；9. LTEP-2；10. YTMLC-90 比較比較NL9980與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1的的mRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H4

12、60SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000

13、.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NL9980；2. L9981-nm23-H1-pEGFP；3. A549；4. GLC-82；5. A2；6. SPCA-1；7. NCI-H460；8. SH-77；9. NCI-H446；10.

14、 LTEP-2；11. YTMLC-90 比較比較A549A549細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510

15、.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000

16、.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121.A549；2. GLC-82；3. A2；4. SPCA-1；5. NCI-H460；6. SH-77；7. NCI-H446；8. LTEP-2；9. YTMLC-90 比較比較GLC-82GLC-82細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-7

17、7NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.

18、0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121.GLC-82；2. A2；3. SPCA-1；4. NCI-H460；5. SH-77；6. NCI-H446；7. LTEP-2；8. YTMLC-90 比較比較A2A2細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間細胞與

19、不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.00

20、00.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -

21、20.0121. A2；2. SPCA-1；3. NCI-H460；4. SH-77；5. NCI-H446；6. LTEP-2；7.YTMLC-90比較比較SPCA-1SPCA-1細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0

22、000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.

23、5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SPCA-1；2. NCI-H460；3. SH-77；4. NCI-H446；5. LTEP-2；6.YTMLC-90比較比較NCI-H460NCI-H460細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的表達水平的表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A

24、549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7

25、170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H460；2. SH-77；3. NCI-H446；4. LTEP-2；5.YTMLC-90比較比較SH-77SH-77細胞與不同組織學(xué)類型的人肺

26、癌細胞株間細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000

27、.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.03

28、7LTEP- -20.0121. SH-77；2. NCI-H446；3. LTEP-2；4.YTMLC-90比較比較NCI-H446、 LTEP- -2和和YTMLC-90細胞株間細胞株間KAI1的的mRNA表達水平表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0

29、000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443N

30、CI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H446；2. LTEP-2；3.YTMLC-905-Aza-CdR上調(diào)了上調(diào)了NCI-H460 和和L9981細胞中細胞中KAI1的的mRNA表達水平表達水平1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsNCI-H4605-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)NCI-H4600.0010.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.005NCI-H460NCI-H460和和L9981L9981細胞株對照組與實驗組間細胞株對照組與實驗組間KAI1KAI1基因表達水平比較的基因表達水平比較的P P值表值表1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsL99815-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)L99810.0000.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.016NCI-H460 ce

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