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遺傳病的分析遺傳病的分析3培育細胞的染色體制備培育細胞的染色體制備定定 義義n在細胞的生長周期中,中期染色體的長短、大小、恒定性正適宜我們對其進展分析、研討。n因此利用人工的方法,使大部分分裂細胞處于中期而不向后期轉(zhuǎn)化,并獲得之,經(jīng)處置,制片后察看分析。器器 材材n細胞株n普通光學(xué)顯微鏡n冰載玻片n酒精燈試試 劑劑n0.25%胰旦白酶液n0.075M KCLn秋水仙素n固定液冰醋酸/甲醇 1:3nGiemsa染液操操 作作1. 搜集細胞前6h,培育細胞中加5ug/ml秋水仙素2滴,混勻后繼續(xù)培育2. 0.25%胰旦白酶液消化細胞,并搜集細胞于離心管中3. 離心1800轉(zhuǎn)/min10min,棄上清,取沉淀4. 加0.075M KCL低滲液4ml,充分打勻細胞,室溫靜置20min5. 再參與固定液1ml,并與原有的低滲液充分混勻,室溫靜置5min6. 離心,棄上清,取沉淀操操 作作7. 加固定液5ml,悄然打勻,室溫靜置30min8. 離心,棄上清,取沉淀9. 加少量固定液,制成染色體懸液10. 取1-2滴染色體懸液,滴加在冰玻片上,迅速吹片,酒精燈下烤干玻片11. Giemsa染色5min,自來水沖洗,待干 后,顯微鏡下察看光鏡100倍下人染色體G帶照片注注 意意n濃度與時間 秋水仙素、低
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