4食品添加劑喹啉黃

1、4食品添加劑喹啉黃范疇本標(biāo)準(zhǔn)適用于由2- （2-喹啉基）-1, 3-茚二酮或三分之二 2- （2-喹啉 基）-1，3-茚二酮和三分之一 2-（ 6-甲基喹啉基）1，3-茚二酮的混合物磺 化而制得的食品添加劑 喹啉黃。食品添加劑 喹啉黃為黃色粉末或顆粒。分子式和相對分子質(zhì)量分子式C18H9NNa2O8S2相對分子質(zhì)量477.38技術(shù)要求2-（2-喹啉基）-1,3-茚二酮磺化而制得的食品添加劑喹啉黃應(yīng)符合表1的規(guī)定。技術(shù)要求項目指標(biāo)檢驗方法2-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮二磺酸二鈉鹽，w/%>80.0附錄 A中A.2.1或.A.2.22-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮單磺酸鈉鹽

2、，w/%<15附錄A中A.2.22-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮三磺酸三鈉鹽，w/%<7.0附錄A中A.2.2干燥減量、氯化物（以NaCI計）及硫酸鹽（以NqSC4計）總量，w/%<30.0附錄A中A.3非色素有機物（2-甲基喹啉、2-甲基喹啉基磺酸、鄰苯二甲酸合計），w/%<0.5附錄A中A.4水不溶物，w/%<0.20附錄A中A.5未磺化芳族伯胺（以苯胺計），w/%<0.01附錄A中A.6副染料/ ( mg/kg)<4.0附錄A中A.7砷(以 As 計)/( mg/kg)<1.0附錄A中A.8鉛(Pb) / (mg/kg)<2.

3、0附錄A中A.9鋅(Zn) / (mg/kg)<50.0附錄A中A.10三分之二2- （2-喹啉基）-1, 3-茚二酮和三分之一 2-（ 6-甲基喹啉基）1, 3-茚二酮的混合物磺化而制得的食品添加劑喹啉黃應(yīng)符合表2的規(guī)定。技術(shù)要求項目指標(biāo)檢驗方法2-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮二磺酸二鈉鹽，w/%>70.0附錄 A中A.2.1或.A.2.2干燥減量、氯化物（以NaCI計）及硫酸鹽（以NaSQ計）總量，w/%<30.0附錄A中A.3非色素有機物（2-甲基喹啉、2-甲基喹啉基磺酸、鄰苯二甲酸、 2,6- 二甲基喹啉、2, 6-二甲基喹啉磺酸）總量，w/%<0.5附

4、錄A中A.4水不溶物，w/%<0.2附錄A中A.5未磺化芳族伯胺（以苯胺計），w/%<0.01附錄A中A.6副染料/ (mg/kg)<4.0附錄A中A.7砷(以 As 計)/ (mg/kg )<1.0附錄A中A.8鉛(Pb) / (mg/kg)<2.0附錄A中A.9鋅(Zn) / ( mg/kg)<50.0附錄A中A.10檢驗方法一樣規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T 6682 2008規(guī)定的三級水。試驗中所需標(biāo)準(zhǔn)溶液、雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑 及制品在沒有注明其他規(guī)定時，均按 GB/T 601、GB/T 602、GB/T 60

5、3規(guī) 定配制和標(biāo)定。喹啉黃含量的測定分光光度比色法方法提要將喹啉黃試樣用磷酸鹽緩沖溶液（pH=7）溶解，稀釋定容后，在最大 吸取波長處，測其吸光度值運算其含量。試劑和材料磷酸鹽緩沖溶液：pH=7。儀器和設(shè)備分光光度計比色皿：10mm。喹啉黃試樣溶液的配制稱取喹啉黃試樣約0.25g （精確到0.0001g），溶于適量磷酸鹽緩沖溶液 中，移入1000mL容量瓶中，加磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度，搖勻。吸取10mL，移入250mL容量瓶中，用磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度，搖勻，備用。分析步驟將喹啉黃試樣溶液置于10mm比色皿中，冋在最大吸取波長處用分光光度計測定其吸光度值，用磷酸鹽緩沖溶液作參比液。 結(jié)果運

6、算喹啉黃含量以w1計,數(shù)值用表示，按公式（A.1）運算:Aw11000100%1)式中：A 喹啉黃試樣溶液的吸光度值；f喹啉黃試樣溶液的稀釋因子；a喹啉黃的吸光系數(shù)，86.5;m試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。運算結(jié)果表示到小數(shù)點后兩位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于 1.0，取其算術(shù)平均值作為測定結(jié)果。 高效液相色譜法方法提要本方法用于由 2-（2-喹啉基） -1,3-茚二酮磺化而制得的喹啉黃，用峰面積歸一化法測定 2-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮二磺酸二鈉鹽、 2-（2-喹啉基 ）- 茚滿基-1,3-二酮單磺酸鈉鹽和 2-（2-喹啉基）-茚滿基 -1,3-二酮三磺酸三鈉鹽 的含量。試

7、劑和材料甲醇。氫氧化鈉溶液： 1mol/L 。乙酸溶液： 1mol/L 。乙酸鈉緩沖溶液： pH=4.6；配制方法： 氫氧化鈉溶液、乙酸溶液與水的體積比 =5:10:35。水：經(jīng)0.45卩m膜過濾。儀器和設(shè)備高效液相色譜儀：輸液泵-流量范疇0.1 mL/min5.0mL/min ;在此范疇內(nèi)其流量穩(wěn)固性為± 1% ；配有梯度洗脫功能。檢測器：吸取波長為254nm的紫外檢測器。色譜柱：長為250cm,內(nèi)徑為4.6nm的不銹鋼色譜柱，固定相為 C18, 粒徑5 m。色譜工作站或積分儀。色譜分析條件檢測波長： 254nm。流淌相：A :乙酸鈉緩沖溶液與水體積比=1:10;B:甲醇與流淌相A

8、的體積比=80: 20。流量：1.0mL/min。進(jìn)樣量：20卩L。梯度洗脫表A.1梯度洗脫時刻/minAB01000156535205050250100360100421000樣品溶液配制稱取約0.5g喹啉黃（精確到0.0001g）,加流淌相A溶液溶解并定容1 00mL容量瓶中，搖勻備用。分析步驟開啟色譜儀。待儀器各項操作條件穩(wěn)固后，用微量注射器吸取樣品溶 液注入進(jìn)樣閥，待最后一個組分流出完畢，用色譜工作站或積分儀進(jìn)行結(jié) 果處理。結(jié)果運算2-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮二磺酸二鈉鹽、2-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮單磺酸鈉鹽和2-（2-喹啉基）-茚滿基-1,3-二酮三磺酸三鈉

9、鹽的含量以 wi 計，數(shù)值以表示，按式（A.2）運算：W100 （A.2）Ai式中：Ai 試樣中各組分i的峰面積；藝Ai 試樣中各組分i的峰面積之和運算結(jié)果表示到小數(shù)點后兩位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于1.0%,取其算術(shù)平均值作為測定結(jié)果干燥減量、氯化物（以NaCI計）及硫酸鹽（以Na2S04計）總量的測定干燥減量的測定分析步驟稱取約2g試樣（精確至O.OOIg）,置于已在135C 士 2C恒溫干燥箱恒 量的稱量瓶中，在135C 士 2C恒溫干燥箱中烘至恒量。結(jié)果運算干燥減量的含量以 w計，數(shù)值用表示，按公式（A.3）運算：W2 宜旦 100% （ A.3）m2式中：m2試樣干燥前質(zhì)量的數(shù)值

10、，單位為克（g）;m3試樣干燥至恒量質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。運算結(jié)果表示到小數(shù)點后1位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于 0.2%,取其算術(shù)平均值作為測定結(jié)果。氯化物（以NaCI計）的測定試劑和材料硝基苯。活性炭：767針型。硝酸溶液：1 + 1。硝酸銀溶液：c（AgNO3）=0.1moI/L。硫酸鐵銨溶液配制方法：稱取約14g硫酸鐵銨，溶于100mL水中，過濾，加10mL 硝酸，貯存于棕色瓶中。硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c（NH4CNS）=0.1mol/L。試樣溶液的配制稱取約2g試樣（精確至0.001g）,溶于150mL水中，加約15g活性炭， 溫順煮沸2 min3min,加入1mL硝酸溶液，

11、持續(xù)搖動平均，放置30min（其 間不時搖動）。用干燥濾紙過濾。如濾液有色，則再加 5g活性炭，不時搖動 下放置1h,再用干燥濾紙過濾（如仍有色則更換活性炭重復(fù)操作至濾液無 色）。每次以10mL水洗活性炭三次，濾液合并移至 200mL容量瓶中，加水 至刻度，搖勻。用于氯化物和硫酸鹽含量的測定。分析步驟移取50mL試樣溶液，置于500mL錐形瓶中，加2mL硝酸溶液和10 mL硝酸銀溶液（氯化物含量多時要多加些）及5mL硝基苯，劇烈搖動至氯 化銀凝聚，加入1mL硫酸鐵銨溶液，用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定過量的 硝酸銀到終點并保持1mi n,同時以同樣方法做一空白試驗。結(jié)果運算氯化物（以NaCI計）以

12、w計，數(shù)值用表示，按公式（A.4）運算：G（Vi SIOOOM !00%（ A.4）mu（50/200）式中：cl 硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（moI/L）V 1 滴定空白溶液耗用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值， 單位為毫升（mL）;V0 滴定試樣溶液耗用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）;M1 氯化鈉的摩爾質(zhì)量數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol） M1 （NaCl） =58.4;m4試樣的質(zhì)量數(shù)值，單位為克（g）。運算結(jié)果表示到小數(shù)點后1位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于0.3%,取其算術(shù)平均值作為測定結(jié)果。硫酸鹽（以 Na2S04計）的測定試劑和

13、材料氫氧化鈉溶液：2g/L。鹽酸溶液：1+1999。氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c（1/2BaCI2）=0mol/L （配制方法見附錄B）。 酚酞指示液：10g/L。玫瑰紅酸鈉指示液：稱取0g玫瑰紅酸鈉，溶于10mL水中（現(xiàn)用現(xiàn)配）分析步驟吸取25mL試樣溶液A.3.2.2，置于250mL錐形瓶中，加1滴酚酞指示 液，滴加氫氧化鈉溶液呈粉紅色，然后滴加鹽酸溶液至粉紅色消逝，搖勻， 溶解后在持續(xù)搖動下用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，以玫瑰紅酸鈉指示液作 外指示液，反應(yīng)液與指示液在濾紙上交匯處出現(xiàn)玫瑰紅色斑點并保持2min不褪色為終點。同時以相同方法做空白試驗。結(jié)果運算硫酸鹽（以Na2SO4計）以W4計，數(shù)值用

14、表示，按公式（A.5）運算：W MW V3）/1000（M2/2）血 （ A.5 ）mu（25/200）式中：c2 氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（mol /L ）；V2 滴定試樣溶液耗用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）;V3 滴定空白溶液耗用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）;M2硫酸鈉的摩爾質(zhì)量的數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol） M2 （Na2SO4） =142.04;m4 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。運算結(jié)果表示到小數(shù)點后1位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于 0.2%，取其算術(shù)平均值作為測定結(jié) 果。干燥減量、氯化物（以NaCI計

15、）及硫酸鹽（以Na2SO4計）總量的結(jié)果運算(A.6)干燥減量和氯化物（以NaCl計）及硫酸鹽（以 Na2SO4計）的總量以w5 計，數(shù)值用表示，按公式（A.6）運算：w5w2w3w4式中:w2干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù);w氯化物（以NaCI計）的質(zhì)量分?jǐn)?shù);w4硫酸鹽（以Na2SO4計）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)運算結(jié)果表示到小數(shù)點后1位非色素有機物的測定方法提要采納反相液相色譜法，用面積歸一化法進(jìn)行定量，運算非色素有機物 的含量。試劑和材料同 A2.2.2。儀器和設(shè)備同 A2.2.3色譜分析條件同 A2.2.4。試樣溶液的配制稱取約1g喹啉黃（精確到O.OOOIg）,加流淌相A溶解并定容100mL 容量瓶中，搖勻備

16、用。分析步驟在A.4.1.3規(guī)定的色譜分析條件下，用微量注射器吸取試樣溶液注入并 充滿定量環(huán)進(jìn)行色譜檢測，待最后一個組分流出完畢，進(jìn)行結(jié)果處理。結(jié)果運算2-甲基喹啉、2-甲基喹啉基磺酸、鄰苯二甲酸、2,6-二甲基喹啉、2,6-二甲基喹啉磺酸的含量以 wi計，數(shù)值以表示，按式（A.7）運算:100%(A.7)AiAi式中：Ai 試樣中各組分i的峰面積；藝Ai 試樣中各組分i的峰面積之和運算結(jié)果表示到小數(shù)點后1位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于1.0%,取其算術(shù)平均值作為測定結(jié)果 水不溶物的測定儀器和設(shè)備玻璃砂芯坩堝：G4,孔徑為5 1 m 15 1 m。恒溫干燥箱。分析步驟稱取約4.55.5g試樣

17、（精確至O.OOIg），置于250mL燒杯中，加入80C 90C熱水200mL，使之溶解，用已在135C 士 2C烘至恒量的G4玻璃砂芯 坩堝過濾，并用冷水充分洗滌到洗滌液無色，在 135C 士 2C恒溫干燥箱中 烘至恒量。結(jié)果運算水不溶物以W6計，數(shù)值用表示，按公式（A.8）運算：w6 6 100% （A.8）ms式中：m6 干燥后水不溶物質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）;m5 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。運算結(jié)果表示到小數(shù)點后2位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于 0.05%，取其算術(shù)平均值作為測定結(jié) 果。未磺化芳族伯胺（以苯胺計）的測定方法提要以乙酸乙酯萃取出試樣中未磺化芳族伯胺成分，將萃取液

18、和苯胺標(biāo)準(zhǔn) 溶液分不經(jīng)重氮化和偶合后再測定各自生成染料的吸光度予以比較與判 不、。試劑和材料乙酸乙酯；鹽酸溶液：1 + 10。鹽酸溶液：1+3。溴化鉀溶液：500g/ L。碳酸鈉溶液：200g/L。氫氧化鈉溶液：40g/ L氫氧化鈉溶液： 4g/LR 鹽溶液： 20g/L 。亞硝酸鈉溶液： 3.52g/L。苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液： 0.1000g/L。儀器和設(shè)備 可見分光光度計。40mm 比色皿。試樣萃取溶液的配制稱取約2.0g試樣（精確至O.OOIg）于150mL燒杯中，力口 100mL水和5 mL氫氧化鈉溶液（40g/L）,在溫水浴中攪拌至完全溶解。將此溶液移入分 液漏斗中，少量水洗凈燒杯。 每次以

19、 50mL 乙酸乙酯萃取兩次， 合并萃取液。 以10mL氫氧化鈉溶液（4g/L）洗滌乙酸乙酯萃取液，除去痕量色素。再每 次以 10mL 鹽酸溶液（ 1+3）對乙酸乙酯溶液反萃取三次。合并該鹽酸萃取 液，然后用水稀釋至100mL，搖勻。此溶液為試樣萃取溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備分不吸取 5mL、10mL、15mL、20mL、25mL 苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液至 100mL 容量瓶中，用鹽酸溶液（ 1+10）稀釋至刻度，混合平均，此為標(biāo)準(zhǔn)溶液。重氮化偶合溶液的制備吸取 10mL 試樣萃取溶液， 移入透亮潔凈的試管中， 浸入盛有冰水混合 物的燒杯內(nèi)冷卻10min。在試管中加入1mL溴化鉀溶液及0.5mL亞硝酸鈉 溶液

20、，稍用力搖勻后仍置于冰水浴中冷卻10min，進(jìn)行重氮化反應(yīng)。另取一 個25mL容量瓶移入1mL R鹽溶液和10mL碳酸鈉溶液。將上述試管中的 苯胺重氮鹽溶液加至盛有 R 鹽溶液的容量瓶中，邊加邊略振搖容量瓶，用 少許水洗凈試管一并加入容量瓶中， 再以水定容。 充分混勻后在暗處放置 1 5min。該溶液為試樣重氮化偶合溶液。標(biāo)準(zhǔn)重氮化偶合溶液的制備， 分不吸取 10mL 上述系列標(biāo)準(zhǔn)溶液， 其余 步驟同上。參比溶液的制備吸取10mL鹽酸溶液（1+10）、10mL碳酸鈉溶液及1mL R鹽溶液于2 5mL容量瓶中，用水定容。該溶液為參比溶液。分析步驟將上述一系列標(biāo)準(zhǔn)重氮化偶合溶液置于比色皿中，在51

21、0 nm波長處用分光光度計測定各自的吸光度，以 A6.7作參比溶液，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。試樣重氮化偶合溶液置于比色皿中，在 510 nm波長處用分光光度計測 定吸光度Aa，以A6.7作參比溶液，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線求出苯胺的量。結(jié)果運算(A.9)苯胺以w?計，數(shù)值用表示，按公式（A.9）運算： w7 匹 100% m? 式中：mA按照標(biāo)準(zhǔn)曲線運算苯胺的質(zhì)量，單位為克（g）;m7 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。 運算結(jié)果表示到小數(shù)點后2位。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于 0.05%，取其算術(shù)平均值作為測定結(jié) 果。副染料的測定方法提要該方法用于2- （2-喹啉基）-1, 3-茚二酮和2-2- （6-甲基喹啉基

22、） -1, 3-茚二酮的限量測定。試劑和材料乙醚。三氯甲烷。儀器和設(shè)備分光光度計。10mm比色皿。索式萃取器。 試樣的制備準(zhǔn)確稱取2g （精確至O.OOOIg）樣品加入索式萃取器中，加入 150mL乙醚萃取5h。每次用25mL水洗滌乙醚萃取液，洗滌兩次。濃縮乙醚萃取 液蒸發(fā)至體積約5mL后，于105C恒溫干燥箱中除去殘留的乙醚。將殘渣 溶于三氯甲烷，并準(zhǔn)確稀釋至 10mL。分析步驟將試樣溶液置于比色皿中，于最大吸取波長 （約420nm）處測定吸光度， 用三氯甲烷作為參比溶液。 限量值為 4mg/kg 的 2-（2-喹啉基）-1， 3-茚二酮的 吸光度為 0.27。任何存在的 2-2-（6-甲基

23、喹啉基 ）-1， 3-茚二酮均作為 2-（2- 喹啉基）-1， 3-茚二酮測定。砷的測定試劑和材料硝酸。硫酸溶液： 1+1。硝酸-高氯酸混合溶液： 3+1。砷（As）標(biāo)準(zhǔn)溶液：按GB/T 602配制和標(biāo)定后，再按照使用的儀器要 求進(jìn)行稀釋配制成含砷相應(yīng)濃度的三個標(biāo)準(zhǔn)溶液。氫氧化鈉溶液： 1g/L。硼氫化鈉溶液：8g/L（溶劑為1g/L的氫氧化鈉溶液）。鹽酸溶液： 1+10。碘化鉀溶液： 200g/L。儀器和設(shè)備原子吸取光譜儀儀器參考條件：砷空心陰極燈分析線波長：193.7nm；狹縫：0.5nm 1.0nm;燈電流：6 mA 10mA。載氣流速：氬氣 250mL/min。原子化器溫度：900C。

24、測定步驟試樣消解稱取約1g試樣（精確至O.OOIg）,置于250mL錐形或圓底燒瓶中，加 10mL15mL硝酸和2mL硫酸溶液，搖勻后用小火加熱趕出二氧化氮氣體， 溶液變成棕色，停止加熱，放冷后加入 5mL 硝酸-高氯酸混合液，強火加熱 至溶液至透亮無色或微黃色， 如仍不透亮， 放冷后再補加 5mL 硝酸-高氯酸 混合溶液，連續(xù)加熱至溶液澄清無色或微黃色并產(chǎn)生白煙（幸免燒干顯現(xiàn) 碳化現(xiàn)象），停止加熱，放冷后加水 5mL 加熱至沸，除去殘余的硝酸 -高氯 酸（必要時可再加水煮沸一次），連續(xù)加熱至發(fā)生白煙，保持10min，放冷后 移入 100mL 容量瓶（若溶液顯現(xiàn)渾濁、 沉淀或機械雜質(zhì)須過濾）

25、，用鹽酸溶 液稀釋定容。同時按相同的方法制備空白溶液。測定量取 25mL 消解后的試樣溶液至 50mL 容量瓶，加入 5mL 碘化鉀溶液， 用鹽酸溶液稀釋定容，搖勻，靜止 15min。同時按相同的方法以空白溶液制備空白測試液。 開啟儀器，待儀器及砷空心陰極燈充分預(yù)熱，基線穩(wěn)固后，用硼氫化 鈉溶液作氫化物還原發(fā)生劑，以標(biāo)準(zhǔn)空白、標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品空白測試液及 樣品溶液的順序，按電腦指令分不進(jìn)樣。測試終止后電腦自動生成工作曲 線及扣除樣品空白后的樣品溶液中砷濃度，輸入樣品信息（名稱、稱樣量、 稀釋體積等），即自動換算出試樣中砷的含量。平行測定結(jié)果的絕對差值不大于 0.1mg/kg，取其算術(shù)平均值作為測定鉛的測定試劑和材料鉛（Pb）標(biāo)準(zhǔn)溶液：按GB/T 602配制和標(biāo)定后，再按照使用的儀器要 求進(jìn)行稀釋配制成含鉛相應(yīng)濃度的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液。氫氧化鈉溶液： 1g/L。硼氫化鈉溶液：8g/L（溶劑為1g/L的氫氧化鈉溶液）。鹽酸溶液： 1+10。儀器和設(shè)備原子吸取光譜儀儀器參考條件：GB 5009.12-2010 第三法 火焰原子吸取光譜法。分析步驟 可直截