第七章 微生物的檢驗(yàn)技術(shù)

1、第七章第七章微生物檢驗(yàn)技術(shù)微生物檢驗(yàn)技術(shù) 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 食品中大腸菌群測(cè)定食品中大腸菌群測(cè)定實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-4 7-4 食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解食品中細(xì)菌的檢測(cè)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理 菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后(如培基成分、培養(yǎng)溫度和時(shí)間、pH、需氧性質(zhì)等)，所得1mL(g)檢樣中所含菌落的總數(shù)。本方法規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得結(jié)果，只包括一群在營養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)

2、發(fā)育的嗜中溫性需氧的菌落總數(shù)。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定三、實(shí)驗(yàn)材料1.器材 恒溫培養(yǎng)箱，冰箱，天平，電爐，恒溫水浴鍋，培養(yǎng)皿，lmL和l0mL吸管，500mL三角瓶，玻璃珠，培養(yǎng)皿，試管，酒精燈，試管架，滅菌刀或剪刀，滅菌鑷子，酒精棉球。2.用品 市售飲料，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，75乙醇，生理鹽水或其它稀釋液定量分裝于三角瓶和試管內(nèi)滅菌。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定四、實(shí)驗(yàn)方法 菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序見圖7-1所示。(一)檢樣稀釋及培養(yǎng)1.以無菌操作，將飲料檢樣25mL放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶?jī)?nèi)(瓶

3、內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)內(nèi)，經(jīng)充分振搖制成110的均勻稀釋液（如為固體檢樣最好用均質(zhì)器，以800010000r/min的速度處理1分鐘，作成110的均勻稀釋液）。2.用lmL滅菌吸管吸取110稀釋液lmL，沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)，振搖試管混合均勻，作成1100的稀釋液。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定圖7-1 菌落總數(shù)檢驗(yàn)程序 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定3.另取lmL滅菌吸管，按上項(xiàng)操作順序，作10倍遞增稀釋，如此每遞增稀釋一次，即換用1支lmL滅菌吸管，直至稀釋到所需濃度。4.根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要

4、求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì)，選擇23個(gè)適宜稀釋度分別用吸取該稀釋度的吸管移lmL稀釋液于滅菌皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度作兩個(gè)平皿。5.稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至46營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(可放置46水浴保溫)注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿混合均勻，同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有l(wèi)mL滅菌水(不含樣品)的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。6.待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置361溫箱內(nèi)培養(yǎng)242小時(shí)。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定(二)菌落計(jì)數(shù)方法 作平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏，在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù)。(三)菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告1.平板菌落數(shù)

5、的選擇 選取菌落數(shù)在30300之間的平板作為菌落總數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2代表全皿菌落數(shù)。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定 2.稀釋度的選擇(1)應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表7-1中例1)。(2)若有兩個(gè)稀釋度，其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30300之間，則視二者之比如何來決定，若比值小于2，應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)；若大于2，則報(bào)告其中較

6、小的數(shù)字(見表7-1中例2及例3)。(3)若所有稀釋度的平均菌落均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表7-1中例4)。(4)若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表7-1中例5)。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定(5)若所有稀釋度均無菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表7-1中例6)。(6)若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表7-1中例7)。 3.菌落數(shù)的報(bào)告 菌落數(shù)在100以

7、內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告；大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，以四舍五入方法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用10的指數(shù)來表示(見表7-1中“報(bào)告方式”欄)。 五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 用器皿圖解的形式列出食品中菌落總數(shù)檢驗(yàn)程序圖。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-1 7-1 食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定表7-1 稀釋度選擇及菌落式報(bào)告方式 例次稀釋液與菌落數(shù)兩稀釋液之比菌落總數(shù)(個(gè)/g個(gè)/mL)報(bào)告方式(個(gè)/g或個(gè)/mL)10-110-210-31多不可計(jì)164201640016000或1.61042多不可計(jì)295461.63775038000或3.81043多不可計(jì)271602.2271002

8、7000或2.71044多不可計(jì)多不可計(jì)31331300310000或3.1105527115270270或2.71026000110107多不可計(jì)305123050031000或3.1104返回 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解食品中大腸菌群的檢測(cè)方法二、實(shí)驗(yàn)原理 大腸菌群系指一群在37、24小時(shí)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。大腸菌群主要來自人或溫血?jiǎng)游锛S便，食品中檢出大腸菌群則說明食品受到了人或動(dòng)物糞便的污染，大腸菌群數(shù)量越多則表明糞便污染越嚴(yán)重，由此推測(cè)該食品存在著腸道致病菌污染的可能性，潛伏著食物中毒

9、和流行病的威脅。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 三、實(shí)驗(yàn)材料1.器材 溫箱，天平，顯微鏡，平皿，試管，吸管，載玻片，接種環(huán)。2.培養(yǎng)基和試劑 乳糖膽鹽發(fā)酵管，伊紅美蘭瓊脂，乳糖發(fā)酵管，草酸銨結(jié)晶紫染液，盧戈氏碘液，95%酒精，番紅染液。四、實(shí)驗(yàn)方法 大腸菌群檢驗(yàn)程序見圖7-2所示。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 圖7-2 大腸菌群檢驗(yàn)程序 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 1.檢樣稀釋(1)以無菌操作將飲料檢樣25mL放于含有225mL無菌生理鹽水或其它稀釋液的三角瓶?jī)?nèi)(瓶?jī)?nèi)預(yù)置

10、適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)內(nèi)，經(jīng)充分振搖制成110的均勻稀釋液。(2)用lmL滅菌吸管吸取110稀釋液lmL注入含有9m L滅菌生理鹽水或其它稀釋液的試管內(nèi)，振搖試管混勻，作成1100的稀釋液。(3)另取lmL滅菌吸管，按上項(xiàng)操作，依次作10倍遞增稀釋，每遞增一次，換1支lmL滅菌吸管。(4)根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選擇三個(gè)稀釋度每個(gè)稀釋度接種3管。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 2.乳糖發(fā)酵試驗(yàn) 將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，接種量在1mL以上者，用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管；lmL及l(fā)mL以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一稀釋度接種3管，置3

11、61溫箱內(nèi)培養(yǎng)242小時(shí)，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則報(bào)告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者則按下列程序進(jìn)行。3.分離培養(yǎng) 將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)接在伊紅美蘭瓊脂平板上，置361溫箱內(nèi)培養(yǎng)1824小時(shí)，然后取出，觀察菌落形態(tài)，并作革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 4.證實(shí)試驗(yàn) 在上述平板上挑取可疑大腸菌群菌落12個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置361溫箱內(nèi)培養(yǎng)242小時(shí)，觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣，革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽性。五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN檢索表，報(bào)告每100mL大腸菌

12、群的最可能數(shù)。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 表7-2 大腸菌群MPN檢索表接種水樣總量11.11mL(10、1、0.1、0.01mL各1份)接 種 水 樣 量/mL每升水樣中大腸菌群數(shù)1010.10.0123800 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-2 7-2 飲料食品中大腸菌群測(cè)定飲料食品中大腸菌群測(cè)定 其中:“”發(fā)酵陽性；“”發(fā)酵陰性。本表采用3個(gè)稀釋度1mL(g)、0.1mL(g)和0.01mL(g)，每稀釋度3管。表內(nèi)所列檢樣量如改用10mL(g)、1mL(g)和0.1mL(g)時(shí)，表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低10倍1如改用0.1mL(g)、0.01mL(g)和0.001mL

13、(g)時(shí)，則表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)增加10倍。其余可類推。返回 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解霍華德(H。ward)霉菌計(jì)測(cè)裝置。2.初步掌握番茄醬的霉菌計(jì)測(cè)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理 各種加工的水果和蔬菜制品在適宜條件下霉菌不僅能生長(zhǎng)，還能繁殖。以番茄制品為例，在加工中若原料處理不當(dāng)，產(chǎn)品中就會(huì)有霉菌殘留。因此，利用霍華德霉菌計(jì)數(shù)法，可通過在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)玻片上計(jì)數(shù)含有霉菌菌絲的顯微視野，知道番茄醬中霉菌殘留的多少，對(duì)番茄制品質(zhì)量的評(píng)定，具有一定參考價(jià)值。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 三、實(shí)驗(yàn)材料1. 樣品 番茄醬。2.器材 計(jì)測(cè)裝

14、置，顯微鏡，折光儀或糖度計(jì)，燒杯，量筒，托盤天平等；計(jì)測(cè)裝置(包括載玻片、蓋玻片、測(cè)微計(jì))結(jié)構(gòu)如圖7-3至圖7-5所示。 四、實(shí)驗(yàn)方法 檢驗(yàn)程序:取樣稱樣稀釋調(diào)節(jié)視野涂片觀察記錄計(jì)算。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 圖7-3 載玻片正視圖 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 圖7-4 載玻片側(cè)視圖 圖7-5 測(cè)微器（配片） 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 1.取樣 抽樣數(shù)量按每班成品5t以下取樣1罐，產(chǎn)量每增加5t，取樣量增加1罐。2.檢樣制備 番茄汁和調(diào)味番茄醬可直接取樣；番茄醬或番茄糊需加水稀釋為固形物含量相當(dāng)于2

15、0下折光指數(shù)為1.344 71.3460的標(biāo)準(zhǔn)樣液。（1）稱樣 用小燒杯在托盤天平上稱取10g(約28.5)番茄醬。（2）稀釋 向小燒杯中加入26 mL蒸餾水，用玻棒攪拌均勻，即為折光指數(shù)1.344 71.3460的標(biāo)準(zhǔn)樣液。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 3.標(biāo)準(zhǔn)視野的調(diào)節(jié) 霍德華霉菌計(jì)測(cè)用的顯微鏡，要求物鏡放大倍數(shù)為90125倍，其視野直徑的實(shí)際長(zhǎng)度為1.382mm，則該視野為標(biāo)準(zhǔn)視野。 檢查標(biāo)準(zhǔn)視野：將載玻片放在載物臺(tái)上，配片置于目鏡的光欄孔上，然后觀察。標(biāo)準(zhǔn)視野要具備兩個(gè)條件：載玻片上相距1.382 mm的兩條平行線與視野相切；配片(測(cè)微器)的大方格四邊也與

16、視野相切。如果發(fā)現(xiàn)上述兩個(gè)條件，其中有一條不符合，需經(jīng)校正后再使用。如圖7-6所示。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 圖7-6 標(biāo)準(zhǔn)視野狀態(tài)下兩條標(biāo)準(zhǔn)平行線、配片大方格與視野外切的相互位置 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 4.涂片（1）檢查玻片 首先用擦鏡紙或綢布沾酒精將載玻片和蓋玻片擦凈。（2）加樣 用滴管或玻棒取一大滴混合均勻的樣液，均勻地涂布于載玻片中央的平坦面上，蓋上蓋玻片(蓋玻片可直接蓋上去，也可以從突肩邊沿處吻合切入)。如果發(fā)現(xiàn)樣液涂布不均勻，有氣泡，或樣液流人溝內(nèi)、從蓋玻片與突肩處流出等，應(yīng)棄去不用，重新制作。 涂好的制片，在計(jì)

17、測(cè)室內(nèi)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)視野的樣液體積為：2220.13.1416 (1.382/2)0.10.15()rmm 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 5. 觀察記錄（1）觀察視野數(shù)及分布 對(duì)一般樣品，每個(gè)涂片均檢查50個(gè)視野(每1個(gè)樣品至少應(yīng)測(cè)25個(gè)視野，才能代表樣品的各個(gè)部分。如果檢查結(jié)果陽性視野低于30，則檢查25個(gè)視野即可；如果在3040之間，須檢查50個(gè)視野；如果在4050之間，須檢查100個(gè)視野；如果在50以上或超過更多，則要繼續(xù)檢查，直至檢查25個(gè)視野的結(jié)果與一系列計(jì)算結(jié)果無差異為止)。所檢查的50個(gè)視野要均勻地分布在計(jì)測(cè)室上(圖7-7)，可用顯微鏡載物臺(tái)上帶有標(biāo)尺的推

18、進(jìn)器來控制，從上到下，或從左到右一行行有規(guī)律地進(jìn)行觀察。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 圖7-7 計(jì)測(cè)室上50個(gè)視野的分布 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 （2）霉菌菌絲的鑒別 霉菌菌絲往往與番茄組織難以區(qū)別，但能夠很有把握地加以區(qū)別。在同一視野內(nèi)霉菌菌絲的特征是： 霉菌菌絲一般粗細(xì)均勻。 霉菌菌絲體內(nèi)含有顆粒，具有一定的透明度。 有的霉菌菌絲有橫隔。 有的霉菌菌絲有分支。而番茄組織的細(xì)胞壁大多呈環(huán)狀，粗細(xì)不均勻，細(xì)胞壁較厚，且透明度不一致。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 （3）記錄結(jié)果 陽性視野與陰性視野的判斷

19、：在標(biāo)準(zhǔn)視野下，上下調(diào)節(jié)焦距發(fā)現(xiàn)有霉菌菌絲，其長(zhǎng)度超過標(biāo)準(zhǔn)視野直徑(1.382mm)的1/6(即一個(gè)小方格的邊長(zhǎng))或3根菌絲總長(zhǎng)度超過標(biāo)準(zhǔn)視野直徑的1/6，這個(gè)視野稱為陽性視野，否則稱為陰性視野。有時(shí)在標(biāo)準(zhǔn)視野中出現(xiàn)極細(xì)的菌絲叢或小菌落，則以其直徑來計(jì)算，超過視野直徑1/6為陽性視野，否則為陰性視野。陽性視野用“+”表示；陰性視野用“”表示。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 對(duì)初次學(xué)習(xí)霍德華霉菌計(jì)測(cè)法者，做記錄前，先在記錄紙上劃出計(jì)測(cè)室上50個(gè)視野均勻分布的小格，觀察一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)視野，立即在相應(yīng)的方格內(nèi)作“+”或“”的記錄，或“”以空格表示(如圖7-8)。這種記錄方法，在

20、計(jì)測(cè)過程中，可減少重復(fù)或遺漏計(jì)數(shù)的現(xiàn)象，也可以從記錄表格上“+”、“”視野的分布，了解涂片是否均勻。如果一個(gè)樣品做2個(gè)片子，觀察結(jié)果誤差較大(超過6)，則應(yīng)另取樣涂片，觀察測(cè)定至誤差6時(shí)為止。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 圖7-8 觀察結(jié)果記錄示意圖 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1. 計(jì)算 霍德華霉菌計(jì)測(cè)數(shù)值，又稱霉菌數(shù)，用百分比表示。其含義如下： 將0.15mm3標(biāo)準(zhǔn)樣液，均勻地?cái)偛汲珊?.1mm，直徑為1.382 mm，其面積為1.5mm3的標(biāo)準(zhǔn)視野，在顯微鏡下檢查。按100個(gè)視野數(shù)計(jì)算，其中發(fā)現(xiàn)有霉菌菌絲存在的視野數(shù)

21、(即陽性視野數(shù))。 根據(jù)霉菌數(shù)含義，其計(jì)算公式如下： 舉例如圖7-8：記錄的陽性視野數(shù)，片1為15，片2為16，則樣品的霉菌數(shù)為：1 0 0 %5 0陽性視野數(shù)霉菌數(shù) 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-3 7-3 食品中霉菌計(jì)數(shù)法食品中霉菌計(jì)數(shù)法 部頒(衛(wèi)生部)標(biāo)準(zhǔn)為陽性視野不超過40，在國際貿(mào)易中，合同上無要求時(shí)按部頒標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，合同上有要求時(shí)按合同執(zhí)行；每抽取1罐樣品制2個(gè)片子，每片觀察50個(gè)視野，如果超過標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)，應(yīng)該繼續(xù)制片，但片子數(shù)量不得少于3片即150個(gè)視野，如果計(jì)測(cè)結(jié)果相近時(shí)，可取其平均值；如對(duì)抽樣結(jié)果有異議，應(yīng)加倍抽樣；全部合格，作為合格處理，其中有1罐不合格，該批作為不合格處理。2. 報(bào)告 做好計(jì)測(cè)

22、記錄，按記錄計(jì)算計(jì)測(cè)結(jié)果并寫出報(bào)告。返回 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-4 7-4 食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn) 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)原理；2.掌握金黃色葡萄球菌鑒定要點(diǎn)和檢驗(yàn)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理 金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生凝固酶，使血漿凝固。多數(shù)金黃色葡萄球菌致病菌株能產(chǎn)生溶血毒素，使血瓊脂平板菌落周圍出現(xiàn)溶血環(huán)，在試管中出現(xiàn)溶血反應(yīng)。這些是鑒定致病性金黃色葡萄球菌的重要指標(biāo)。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-4 7-4 食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn) 三、實(shí)驗(yàn)材料1.樣品 奶、肉、蛋、魚制品和飲料等。2.菌種 金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、藤黃八疊

23、球菌（Sarcina lutea）。3. 培養(yǎng)基與試劑 7.5%氯化鈉肉湯，血瓊脂平板，Balrd-Parker氏培養(yǎng)基，無菌鹽水，兔血漿，草酸銨結(jié)晶紫染液，盧戈氏碘液，95%酒精，番紅染液。4.器材 顯微鏡，溫箱，離心機(jī)，無菌吸管，無菌試管，無菌平皿，均質(zhì)器，載玻片，L型涂布棒，酒精燈，接種環(huán)等。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-4 7-4 食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn) 四、實(shí)驗(yàn)方法 檢驗(yàn)程序見圖7-9。 1.一般培養(yǎng) 稱取25g 固體樣品，加入225 mL無菌生理鹽水，制成混懸液（液體樣品可不稀釋）。吸取5mL 上述混懸液，接種于7.5%氯化鈉肉湯50mL培養(yǎng)基內(nèi)，同時(shí)挑取混懸液或液體樣品直接在血平板和Baird-Parker平板劃線分離。同時(shí)將對(duì)照菌種在上述兩種平板上做劃線分離接種。置（361） 溫箱培養(yǎng)24h。 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)7-4 7-4 食