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文檔簡介

1、第3節(jié) DNA的復(fù)制一、教學(xué)目標(biāo)1. 知識方面概述DNA分子的復(fù)制。2. 情感態(tài)度與價值觀方面探討DNA復(fù)制的生物學(xué)意義。二、教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn)1.教學(xué)重點(diǎn)DNA分子復(fù)制的條件、過程和特點(diǎn)。2.教學(xué)難點(diǎn)DNA分子復(fù)制的過程。三、教學(xué)方法討論法、 演示法、講授法四、教學(xué)課時1五、教學(xué)過程教學(xué)內(nèi)容教師組織和引導(dǎo)學(xué)生活動教學(xué)意圖問題探討提示兩個會徽所用的原料應(yīng)該選自一塊石材;應(yīng)先制造模型,并按模型制作會徽;應(yīng)使用電子控制的刻床;刻床應(yīng)由一名技術(shù)熟練的師傅操作,或完全數(shù)控等。(以上可由學(xué)生根據(jù)自己的經(jīng)驗(yàn)推測回答,事實(shí)是原料確實(shí)選自一塊石材,但由于時間緊迫,兩個會徽是由兩名技術(shù)最好的師傅手工雕刻的)。驗(yàn)證的

2、最簡單的方法是:將兩個印章的圖形蓋在白紙上進(jìn)行比較(學(xué)生也可能提出更科學(xué)、更現(xiàn)代化的方法)。閱讀思考討論回答引入新課講述DNA既能作為遺傳物質(zhì),就必須具有精確的自我復(fù)制能力,那它是怎樣進(jìn)行復(fù)制的呢?思考討論引起思考引入新課一、對DNA分子復(fù)制的推測引導(dǎo)引導(dǎo)學(xué)生閱讀課文P52,沃森和克里克提出的著名的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型后,又發(fā)表了遺傳物質(zhì)自我復(fù)制的假說。進(jìn)而總結(jié)出“半保留復(fù)制”的概念。講述在復(fù)制過程中,原來雙螺旋的兩條鏈并沒有被破壞,它們分成單獨(dú)的鏈,每一條舊鏈作為模板再合成一條新鏈,這樣在新合成的兩個雙螺旋分子中,一條鏈?zhǔn)桥f的而另外一條鏈?zhǔn)切碌?,因此這種復(fù)制方式被稱為半保留復(fù)制。閱讀思考學(xué)新

3、知識二、DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù)講述我們知道,當(dāng)假說通過實(shí)踐檢驗(yàn)并被證明是正確的后,才能上升為科學(xué)理論。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,放射性同位素示蹤技術(shù)被應(yīng)用到DNA分子復(fù)制的研究中。下面我們來探討一下DNA分子半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。講述大家閱讀課文P53,結(jié)合圖3-12,利用物理、化學(xué)知識體會科學(xué)家實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法、原理、步驟、結(jié)果、結(jié)論及它的巧妙之處。強(qiáng)調(diào):該實(shí)驗(yàn)證明了DNA的復(fù)制是以半保留的方式進(jìn)行的??磮D思考培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)重視實(shí)的態(tài)度旁蘭思考題1提示本實(shí)驗(yàn)是根據(jù)半保留復(fù)制原理和DNA密度的變化來設(shè)計(jì)的。在本實(shí)驗(yàn)中根據(jù)試管中DNA帶所在的位置就可以區(qū)分親代與子代的DNA了。思考回答拓展思維知識遷移三、

4、DNA復(fù)制的過程1.概念:指以親代DNA為模板合成子代DNA的過程。DNA的復(fù)制實(shí)質(zhì)上是遺傳信息的復(fù)制。2.時間:細(xì)胞有絲分裂和減數(shù)第一次分裂的間期3.場所:細(xì)胞核(主要)、線粒體、葉綠體4.條件:模板:兩條母鏈原料:四種脫氧核苷酸、能量(ATP)酶:DNA解旋酶、DNA聚合酶等5.過程:解旋提供準(zhǔn)確模板:在ATP供能、解旋酶的作用下,DNA分子兩條多脫氧核苷酸鏈配對的堿基從氫鍵處斷裂,兩條螺旋的雙鏈解開,這個過程叫做解旋。解開的兩條單鏈叫母鏈(模板鏈)。合成互補(bǔ)子鏈:以上述解開的每一段母鏈為模板,以周圍環(huán)境中游離的4種脫氧核苷酸為原料,按照堿基互補(bǔ)配對原則,在有關(guān)酶的作用下,各自合成與母鏈互

5、補(bǔ)的一段子鏈。子、母鏈結(jié)合盤繞形成新DNA分子:在DNA聚合酶的作用下,隨著解旋過程的進(jìn)行,新合成的子鏈不斷地延伸,同時每條子鏈與其對應(yīng)的母鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu),從而各自形成一個新的DNA分子,這樣,1DNA分子2個完全相同的DNA分子。6.特點(diǎn):DNA分子是邊解旋邊復(fù)制的;是一種半保留式復(fù)制。(即在子代雙鏈中,有一條是親代原有的鏈,另一條(子鏈)則是新合成的。)7.“準(zhǔn)確”復(fù)制的原因:DNA具有獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu),能為復(fù)制提供模板;堿基具有互補(bǔ)配對的能力,能夠使復(fù)制準(zhǔn)確無誤。8.結(jié)果:一個DNA分子形成兩個完全相同的DNA分子9. 意義:DNA通過復(fù)制,使遺傳信息從親代傳給了子代,從而保證了物種

6、的相對穩(wěn)定性,保持了遺傳信息的連續(xù)性,使種族得以延續(xù)。學(xué)生思考下列問題:什么叫解旋?解旋的目的是什么?什么叫“子鏈”?復(fù)制一次能形成幾條子鏈?簡述“子鏈”形成的過程。DNA復(fù)制后兩個子代DNA分子和親代DNA分子是否完全相同?為什么?通過設(shè)問,學(xué)生回答,進(jìn)一步讓學(xué)生理解和鞏固DNA復(fù)制的全過程。DNA分子連續(xù)復(fù)制演繹的計(jì)算規(guī)律已知某一DNA分子用15N標(biāo)記(0代)將含有該標(biāo)記DNA分子的細(xì)胞(或細(xì)菌)轉(zhuǎn)移到只含14N的培養(yǎng)基中培養(yǎng)(進(jìn)行DNA復(fù)制)若干代后,其DNA分子數(shù)、脫氧核苷酸鏈數(shù)及相關(guān)比例如下表:世代DNA分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)脫氧核苷酸鏈的數(shù)量變換規(guī)律分子總數(shù)不同DNA分子占全部DNA分子之

7、比單鏈總數(shù)不同脫氧核苷酸鏈占全部鏈之比只含15N分子含14N15N雜種分子只含14N分子含15N的鏈含14N的鏈0112112141/21/2241/21/281/43/4381/43/4161/87/8n2n2/2n12/2n2n11/2n11/2n學(xué)生填表培養(yǎng)學(xué)生的總結(jié)能力小結(jié)1通過學(xué)習(xí)必須掌握DNA的復(fù)制過程、復(fù)制的必需條件及DNA復(fù)制在生物學(xué)上的重要意義。為學(xué)習(xí)生物的遺傳和生物的變異奠定基礎(chǔ)。2目前DNA分子廣泛用于刑事案件偵破等方面(l)DNA分子是親子鑒定的主要證據(jù)之一。(2)把案犯在現(xiàn)場留下的毛發(fā)、血等進(jìn)行分析作為破案的證據(jù),與DNA有關(guān)。作業(yè)練習(xí)一二【典型例題】例1.如果將大腸

8、桿菌的 DNA分子用 標(biāo)記,然后將大腸桿菌移入 培養(yǎng)基上連續(xù)培養(yǎng)。從分析得知,第一代大腸桿菌DNA儲存的遺傳信息與親代大腸桿菌DNA儲存的遺傳信息完全相同,其原因是_。若連續(xù)培養(yǎng)三代,此時,含 標(biāo)記的DNA分子約占大腸桿菌DNA分子總量的多少?其原因是多少?【解析】  解題時,可用下圖表示雙鏈DNA分子復(fù)制過程:從圖解可知,第二代大腸桿菌的DNA分子是以親代的DNA分子中兩條母鏈分別為模板,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制而成的。第二代大腸桿菌的DNA分子總量中,含 標(biāo)記的為 (即 );第三代應(yīng)為 (即 )?!敬鸢浮?#160; 以親代DNA為模板,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制而成;25;因 D

9、NA分子的復(fù)制方式為半保留復(fù)制。例2.將大腸桿菌置于含 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間,然后把 DNA被 完全標(biāo)記的大腸桿菌作為親代,轉(zhuǎn)移到只含 的普通培養(yǎng)基培養(yǎng),使其繁殖兩代形成 4個新個體,則它們的 DNA中含 的鏈與 的鏈的比是(     )A3:1    B2:1    C1:1    D7:l【解析】本題考查“大腸桿菌只有一個DNA分子”以及對“DNA分子具有雙鏈結(jié)構(gòu)”和“DNA半保留復(fù)制”的理解。 標(biāo)記的DNA有兩條含 的鏈,當(dāng)利用含 的氮源來繁殖合成新DNA時

10、,根據(jù)半保留復(fù)制的特點(diǎn),新形成的 2個 DNA分子上應(yīng)各有一條含 的鏈和一條含 的鏈,沒有了 的來源,不論以后復(fù)制多少次,含 的鏈永遠(yuǎn)只是兩條,而增加的新鏈都是含 的鏈。而題中形成了4個新個體,則只有4個DNA分子8條單鏈,只有兩條含 ,其余六條含 , 鏈: 鏈=6:2=3:1?!敬鸢浮緼?!驹u點(diǎn)】DNA復(fù)制,是將兩條鏈之間的氫鏈打開,形成兩條單鏈,然后以單鏈為模板,按照堿基互補(bǔ)配對原則,再各形成一條新鏈。在什么培養(yǎng)基上復(fù)制,新鏈即含什么培養(yǎng)基上的物質(zhì),再次復(fù)制仍如此,但是原DNA(親代DNA)中的兩條鏈上的物質(zhì)永遠(yuǎn)不變。【知識擴(kuò)展】DNA芯片近年來,世界上一些發(fā)達(dá)國家的研究機(jī)構(gòu)和工業(yè)界開始構(gòu)

11、建一種縮微芯片實(shí)驗(yàn)室DNA芯片。目的是將生命科學(xué)研究中的許多不連續(xù)的分析過程,如樣品制備、化學(xué)反應(yīng)和分離檢測等,通過采用類似集成電路制作過程中的半導(dǎo)體光刻加工的縮微技術(shù),將其移植到一塊1cm2見方的玻璃片上,并使其連續(xù)化和微型化。這與當(dāng)年將數(shù)間房屋大小的分離元件計(jì)算機(jī)縮微成現(xiàn)在只有書本大小的筆記本式電腦有異曲同工之效。DNA芯片是一種縮小了的生物化學(xué)分析器,通過芯片上微加工獲得的微米結(jié)構(gòu)和生物化學(xué)處理結(jié)合,便可將成千上萬的與生命相關(guān)的信息集成在一小塊玻璃芯片上。采用芯片可進(jìn)行生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)中所涉及的各種生物化學(xué)反應(yīng),以達(dá)到對基因、抗原和活體細(xì)胞等進(jìn)行測試分析的目的。通過分析可得到大量具有生物學(xué)

12、、醫(yī)學(xué)意義的信息。關(guān)于DNA芯片的設(shè)想可追溯到1989年,當(dāng)時美國Affymetrix公司的科學(xué)家打算用許多分子研制一種硬幣般大小的裝置。他們想出一種巧妙的辦法,利用光刻法與光化學(xué)合成法相結(jié)合,在一塊平滑的玻璃片上,用不同的分子構(gòu)建一個高密度網(wǎng)絡(luò)。開始,他們把某些蛋白質(zhì)堆放在玻璃片上,一名叫斯蒂芬·福多的年輕科學(xué)家立即看出了采用DNA的可能性,他意識到,芯片上的DNA分子就好像一條條細(xì)細(xì)的分子“維可牢(velcro)”(“維可牢”是一種尼龍刺粘搭鏈,兩面相合即粘住,一扯即分開,用以替代服裝上的紐扣等)可選擇性地與某些基因,即DNA的短片段結(jié)合,從而檢查出變異型基因。福多在理論上推定,

13、讓未知的DNA樣品與分布在DNA芯片上已知的DNA序列接觸,就能對其作出鑒定。因?yàn)镈NA雙螺旋的兩條單核苷酸鏈總是遵循“堿基互補(bǔ)”的原則配對,即一條鏈上的A總是與另一條鏈上的T相結(jié)合,C也總是與G相結(jié)合。因此,當(dāng)一條鏈上的堿基序列確定之后,即可推知另一條鏈上的堿基序列。這類帶有已知DNA序列的芯片就能檢測突變基因或堿基的各種改變。目前,DNA芯片主要有四種加工方法。(1)美國Affymetrix公司的光引導(dǎo)原位合成法。(2)美國Incytephaxmaceutical公司的化學(xué)噴射法,即將事先合成好的寡核苷酸探針噴射到芯片上的特定位置。(3)斯坦福大學(xué)的接觸式點(diǎn)涂法,即利用高度精密機(jī)械手所帶的

14、移液頭與玻璃芯片表面接觸而將探針定位點(diǎn)滴到芯片上。(4)使用4支分別裝有A、T、G、C核苷的壓電噴頭在芯片上的原位DNA探針合成法。DNA芯片的主要優(yōu)點(diǎn)是使生化分析全過程自動化,生產(chǎn)成本低、防污染(芯片系一次性使用),分析速度快,而且體積小,重量輕,便于攜帶。這類儀器雖剛剛出現(xiàn),但已開始給生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、化學(xué)、新藥開發(fā)、生物武器戰(zhàn)爭、司法鑒定、食品和環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)督等領(lǐng)域帶來沖擊,甚至革命。因此,它已廣為各國學(xué)術(shù)界和工業(yè)界所重視。DNA雜交及其在實(shí)踐中的應(yīng)用如何比較兩DNA分子堿基順序差異的大小呢?我們很容易想到的是如同人類基因組計(jì)劃那樣進(jìn)行堿基測序,然后再進(jìn)行比較。但這樣做工作量太大,耗資多,費(fèi)

15、時長。如人類基因組計(jì)劃動用大量人力物力,歷時數(shù)年,才把人類對對染色體上DNA的堿基排列順序全部檢測完畢!事實(shí)上,如果我們僅僅是比較兩DNA分子差異大小,則不必檢測具體堿基順序,最簡單的方法是進(jìn)行DNA雜交。那么什么叫DNA雜交,DNA雜交在實(shí)踐中具體又有哪些應(yīng)用呢?下面結(jié)合中學(xué)生物教學(xué)特點(diǎn)簡述這個問題。一、何為DNA分子雜交所謂DNA分子雜交,是指把不同來源的DNA分別加熱到100或調(diào)節(jié)pH到大于13時,DNA會變性解離成單鏈,再把兩種來源的DNA單鏈放到一起,在60保持相當(dāng)長時間,互補(bǔ)的DNA單鏈就會重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu),我們把它叫雜合雙鏈,這即是兩個DNA具有相同堿基對排列順序的部分;而不互

16、補(bǔ)的則仍為游離的單鏈,即具有不同的堿基對排列順序的部分。最后通過一定的方法可以檢測出其中單、雙鏈的多少,從而比較兩生物DNA堿基對排列順序差異的大小。一般地說,雜合雙鏈區(qū)越多,DNA堿基對順序相同的越多,反之則越少。可見,通過DNA雜交,我們只需檢測雜合雙鏈區(qū)的多少,而無需檢測具體的DNA堿基序列,所以工作量就大大減少了。二、DNA分子雜交的應(yīng)用1將不同種生物的DNA分子進(jìn)行雜交,可以說明生物之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近高中生物實(shí)驗(yàn)修訂本中敘述了利用DNA雜交方法,把不同生物的DNA分子進(jìn)行比較,從而說明兩種生物之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近。例如,把人、黑猩猩和長臂猿的某些DNA進(jìn)行雜交,發(fā)現(xiàn)人的DNA和黑猩猩的

17、DNA雜交后形成的雜交DNA雜合雙鏈區(qū)多于人的DNA與長臂猿雜交形成的雜合雙鏈區(qū),即人與黑猩猩的DNA更相似,這就說明人與黑猩猩的親緣關(guān)系要近于人與長臂猿的親緣關(guān)系。DNA雜交技術(shù)是人們從分子生物學(xué)角度為生物進(jìn)化提供的一個非常可靠的證據(jù)。2將同種生物的DNA雜交,可用于親子鑒定和痕跡檢驗(yàn)等不同種生物的DNA有差異,同種生物的DNA有沒有差異呢?根據(jù)DNA遺傳規(guī)律,只有自我復(fù)制的DNA才是完全相同的,不同個體的DNA多多少少總存在一定的差異。例如,人類不同種族、不同民族的DNA堿基順序中大約有萬分之一是不一樣的。所以DNA雜交不僅可以用于不同種生物個體之間,也可應(yīng)用于同種生物不同個體之間。如在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中,能準(zhǔn)確進(jìn)行親子鑒定的是DNA檢測,檢測方法并非檢測出全部堿基順序,而是進(jìn)行DNA雜交,即把所要檢測的兩人的

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