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文檔簡介
1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)中藥教學(xué)部重慶郵電學(xué)院生物學(xué)院二 O O 四 年六月藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的目的,不僅是驗(yàn)證藥理學(xué)理論,還可培養(yǎng)學(xué)生基本操作技能,觀察和分析解決問題的能力,以及體驗(yàn)科學(xué)研究的基本原則和基本程序,從而提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)研究能力和嚴(yán)密的科學(xué)思維方法。為了使各專業(yè)的學(xué)生能深入理解藥理學(xué)的基本理論和基本知識(shí),特編寫了這本藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)選擇的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容經(jīng)典、實(shí)用, 做到既與理論課有密切聯(lián)系,又有實(shí)驗(yàn)課的獨(dú)特體系;既有整體動(dòng)物(包括清醒動(dòng)物和麻醉動(dòng)物)實(shí)驗(yàn),又有器官水平實(shí)驗(yàn);既有驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),又有設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),還有綜合性實(shí)驗(yàn)。從而使學(xué)生初步具備對(duì)客觀事物進(jìn)行觀察、比較、分析、 綜合和解決問題的能
2、力,并驗(yàn)證、鞏固和加深理解基本理論,從而初步掌握藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本方法。為了達(dá)到上述目的,要求同學(xué)們做到下列事項(xiàng):一、 遵守紀(jì)律,提前5 分鐘到達(dá)實(shí)驗(yàn)室,因故外出或早退應(yīng)向老師請假。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須身穿白大衣,不許穿拖鞋,衣著整潔干凈。實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)嚴(yán)肅認(rèn)真,不高聲談笑,不進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室無關(guān)的活動(dòng)。違者將給予一定的處罰。二、實(shí)驗(yàn)前:1. 仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒁?、方法和操作步驟,領(lǐng)會(huì)其設(shè)計(jì)原理; 2. 結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,復(fù)習(xí)有關(guān)藥理學(xué)和生理學(xué)、生化學(xué)等方面理論知識(shí)做到充分理解;3.預(yù)測實(shí)驗(yàn)中各個(gè)步驟可能出現(xiàn)的情況;4. 注意實(shí)驗(yàn)中可能發(fā)生的問題。三、實(shí)驗(yàn)時(shí):1. 實(shí)驗(yàn)者必須先熟悉儀器的使用要點(diǎn),而后
3、運(yùn)用。儀器損壞或失靈,應(yīng)請老師修理或調(diào)換。違章操作使儀器損壞者,要進(jìn)行賠償。各小組實(shí)驗(yàn)器材不得調(diào)換。公用物品用完后放回原處。2. 實(shí)驗(yàn)時(shí)將實(shí)驗(yàn)器材妥善安排好,正確裝置;嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的步驟進(jìn)行操作,準(zhǔn)確計(jì)算給藥量,防止出現(xiàn)差錯(cuò)意外;3. 認(rèn)真仔細(xì)地觀察實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象,隨時(shí)記錄藥物反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間、表現(xiàn)以及最后轉(zhuǎn)歸,聯(lián)系課堂講授內(nèi)容進(jìn)行思考。4. 注意節(jié)約實(shí)驗(yàn)材料。四、實(shí)驗(yàn)后:1. 整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果,經(jīng)過分析思考,寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告( . 名、班級(jí)、組別、日期、操作者 .題目、目的、簡要方法(包括儀器,藥品等) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果是實(shí)驗(yàn)中最重要的部分,應(yīng)該忠實(shí),正確地記述實(shí)驗(yàn)過程中所觀察到的現(xiàn)象。一定隨時(shí)記
4、錄,不可單憑記憶,否則容易發(fā)生錯(cuò)誤或遺漏)。時(shí)交給指導(dǎo)教師;2.整理實(shí)驗(yàn)器材,洗凈擦干,妥為安好,放回原處。將用過的動(dòng)物進(jìn)行處死動(dòng)物及其他廢物丟入指定處所。有班長安排各組進(jìn)行輪流打掃清潔,做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作(桌、凳、地板、收拾干凈,擺放整齊),離開時(shí)關(guān)閉所有的水、電、氣關(guān)好門窗。生物信息學(xué)院中藥學(xué)教學(xué)部劉圣蓉 劉毅 編著二 0 0 四年六月目錄實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持法和給藥法3 .8實(shí)驗(yàn)二不同給藥途徑對(duì)藥物作用的影響8實(shí)驗(yàn)三 傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對(duì)麻醉兔血壓的作用9 10實(shí)驗(yàn)四氯丙嗪的安定和抗激怒反應(yīng)作用11實(shí)驗(yàn)五嗎啡的鎮(zhèn)痛作用1213實(shí)驗(yàn)六有機(jī)磷藥物的中毒及其解救1415實(shí)驗(yàn)七強(qiáng)心苷對(duì)在體蛙
5、心的作用16附錄常用生理溶液的成分和配制17 18實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持法和給藥法一、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持法1 .小鼠(1)雙手法:右手提鼠尾,放在鼠籠蓋或其他粗糙面上,向后方輕拉鼠尾,使小鼠前肢固定在粗糙面上。迅速用左手拇指和食指捏其雙耳間頸背部皮膚,無名指、小指和掌心夾其背部皮膚和尾部,便可將小鼠牢固捉持(圖 1)。圖1小鼠雙手捉持法(2)單手法:小鼠置于籠蓋上,先用左手食指和拇指抓住鼠尾,后手掌尺側(cè)和小指夾住鼠尾,然后左手拇指與食指捏住頸部皮膚(圖 2)。圖2小鼠單手捉持法2.大鼠大鼠容易激怒咬人,捉持時(shí)應(yīng)戴防護(hù)手套。先用右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住頭部,其余手指與掌部握住背部和腹部
6、。注意不要捏其頸部, 以防用力過大、過久,窒息死亡。3 .家兔一只手抓住兔頸背部皮膚,將兔輕輕提起,另一只手托住臀部,使兔呈蹲坐姿勢(圖3)。切不可用手握持雙耳提起兔子。圖3家兔捉持法4 .豚鼠豚鼠性情溫和,不咬人,用手輕輕握住身體即可抓起。5 .貓應(yīng)戴好防護(hù)手套。輕聲呼喚,慢慢將手伸入貓籠,輕撫貓頭、頸和背部,一只手抓住頸背部皮膚,另一只手抓住腰背部。性情兇暴的貓可用布袋或網(wǎng)套捉持,操作中應(yīng)防其利爪和牙齒傷人。6 .狗馴服的狗可戴上特制嘴套,用繩帶固定于耳后頸部;兇暴的狗可用長柄捕狗夾鉗住狗的頸部,然后套上嘴套。狗嘴也可用繩帶固定, 操作時(shí)先將繩帶繞過狗嘴的下頜打結(jié),再繞到頸后部打結(jié),以防繩
7、帶滑落。狗麻醉后四肢固定于手術(shù)臺(tái)上,取下嘴套或繩帶,將一金屬棒經(jīng)兩側(cè)嘴角,穿過口腔壓于舌上,再用繩帶繞過金屬棒綁縛狗嘴,并固定于手術(shù)臺(tái)上。應(yīng)將狗舌拉出口腔,以防窒息。二、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥法1 .經(jīng)口給藥法此法有口服與灌胃兩種方法。適用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等動(dòng)物??诜蓪⑺幬锓湃腼暳匣蛉苡陲嬎辛顒?dòng)物自由攝取。若為保證劑量準(zhǔn)確,可應(yīng)用灌胃法。(1)灌胃法小鼠:左手捉持小鼠,腹部朝上,右手持灌胃管經(jīng)口角插入口腔,使灌胃管與食管成一直線,再沿上顆壁緩慢插入食管,稍感有阻力時(shí)(大約灌胃管插入1/2),如動(dòng)物安靜,呼吸無異常,即可注入藥液。如遇阻力應(yīng)抽出灌胃管重新插入,若藥液誤注氣管,小鼠可立即
8、死亡。一次灌注藥量0.1 0.3ml/10g體重。操作宜輕柔,防止損傷食管(圖 4)。灌胃管可用粗大的注射針頭制作,磨鈍針尖制成,管長 4-5cm ,直徑1mm ,連接于1-2ml注射器上即成。圖4小鼠灌胃法大鼠:左手捉持大鼠,右手持灌胃器,灌胃方法與小鼠相同。若兩人合作時(shí),可由助手協(xié)助固定后肢與尾巴。但灌胃管必須長68cm,直徑1.2mm ,尖端呈球狀,并安裝在 510ml的注射器上。注藥前應(yīng)回抽注射器,證明未插入氣管(無空氣逆流)方可注入藥液。一次投藥量12ml/100g體重。家兔:需兩人合作,一人坐好將兔軀體夾于兩腿之間,左手緊握雙耳固定頭部,右手抓住兩前肢固定前身,使兔頭稍向后仰;另一
9、人將木或竹制開口器橫放于兔口中,將兔舌壓住,以8號(hào)導(dǎo)尿管經(jīng)開口器中央小孔,1&上顆壁慢慢插入食管1518cm。為避免誤入氣管,可將導(dǎo)尿管外口端放入清水杯中,無氣泡逸出方可注入藥液, 并應(yīng)再注入少量清水以保證管內(nèi)藥液全部進(jìn)入胃內(nèi)。灌畢,慢慢拔出導(dǎo)尿管取出開口器(圖 5)。圖5家兔灌胃法豚鼠:如用灌胃器,灌胃法與大鼠相同。如用開口器和導(dǎo)尿管,操作方法與兔灌胃法相同。貓和狗:灌胃方法與兔相似, 將導(dǎo)尿管從鼻腔或口腔經(jīng)食管插入胃內(nèi)給藥。操作時(shí)應(yīng)防止動(dòng)物咬傷與抓傷。2 2) 口服法片劑藥物可在扒開動(dòng)物上下齒列后,用鐐子夾住藥物放在舌根部, 迅速合起上下頜即可咽下藥物。給藥前若先以水濕潤口腔內(nèi)部,
10、更易咽下。液體藥物可在輕輕固定動(dòng)物頭部后,從口角齒列間注入藥液, 動(dòng)物多能自動(dòng)咽下。 溶于水的藥物也可加入飲水中口服,不溶于水的藥物可加入飼料中給藥。但這兩種給藥法必須是 無味的藥物,且難以保證劑量準(zhǔn)確。2.注射給藥法(1)皮下注射法:小鼠:一般需兩人合作,一人把小鼠頭與鼠尾牽向兩端并固定,另一人左手提起背部皮膚,右手持注射器刺入皮下,若針頭容易向左右擺動(dòng)即可注入藥液。拔針時(shí)左手捏住針刺部位,防止藥液外漏(圖6)。一人操作可把小鼠放在金屬網(wǎng)上,左手拉鼠尾,小鼠以其習(xí)性向前移動(dòng),此時(shí)右手持注射器從頭端向尾部刺入背部皮下。注藥量 0.10.3 ml/10g體重。圖6小鼠皮下注射法大鼠:以捉持法握住
11、大鼠,于背部或大腿拉起皮膚,將注射針刺入皮下。一次注射藥量小于1.0ml/100g 體重。家兔:左手將兔背部皮膚提起,右手持注射器,針尖刺人皮下松開左手,進(jìn)行注射。豚鼠:注射部位可選用大腿內(nèi)側(cè)面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。通常為大腿內(nèi)側(cè)面注射。一般需兩人合作,一人固定豚鼠,一人進(jìn)行注射。貓:將臀部皮膚拉起,將注射針刺入皮膚與肌肉之間,注入藥液。犬:將犬的頸部或背部皮膚拉起,注射針刺入皮下進(jìn)行注射。(2)皮內(nèi)注射法:先將注射部位剪去毛。左手繃緊皮膚,右手持注射器,小于15。角刺入皮內(nèi),注射藥液,注射處出現(xiàn)一白色小皮丘。(3)腹腔注射法:小鼠:左手捉持小鼠,腹部向上,右手將注射器針頭刺入皮膚,
12、其部位是距離下腹部腹白線稍向左或右的位置。向前推進(jìn)3 5mm ,接著使注射器針頭與皮膚呈 45。角刺入腹肌,繼續(xù)向前刺人,通過腹肌進(jìn)入腹腔后抵抗消失,這時(shí)即可輕輕注入藥液。小鼠的一次注射量為0.1 0.2m1/10g 體重(圖 7)。圖7小鼠腹腔注射法大鼠:腹腔注射與小鼠相同。注射量為12ml/100g體重。豚鼠、貓、免等:豚鼠、貓腹腔注射部位同小鼠。兔在下腹部近腹白線左右兩側(cè)約lcm處,犬在臍后腹白線側(cè)邊 12cm處注射為宜。(4)靜脈注射法:大鼠和小鼠:一般采用尾靜脈注射, 事先將小鼠和大鼠置于固定的筒內(nèi)或鐵絲罩內(nèi),或扣于燒杯內(nèi),使尾巴露出,于 45 50 C溫水中浸泡、或用 60-100
13、瓦電燈泡烘烤、或用 75 %酒 精棉球擦之,使血管擴(kuò)張,選擇尾巴左右兩側(cè)靜脈注射,注射時(shí)若出現(xiàn)隆起的白色皮丘,說明未注入血管,應(yīng)重新向尾根部移動(dòng)注射。一次注射量小鼠為 0.05 0.1ml/10g體重(圖8)。注射完畢后用棉球按壓止血。圖8小鼠尾靜脈注射法家兔:一般采用耳緣靜脈注射。 可用酒精棉球涂擦耳部邊緣靜脈,或用電燈泡烘烤兔耳使血管擴(kuò)張。以左手指在兔耳下作墊,右手持注射器,針頭經(jīng)皮下進(jìn)入血管。注射時(shí)若無阻力或無發(fā)生隆起現(xiàn)象,說明針頭在血管內(nèi),注射完畢,壓住針眼,拔去針頭,繼續(xù)壓迫數(shù)分鐘止血(圖9)。圖9家兔耳緣靜脈注射法豚鼠:一般用前肢皮下頭靜脈注射,后肢小隱靜脈注射也可以。接近下部比較
14、容易刺入靜脈。注射量一般不超過 2ml。貓:一般采用前肢皮下頭靜脈注射。注射前先將貓裝入固定袋或籠內(nèi),左手抓住前肢,酒精棉球涂擦后,從前肢的末稍端將注射器針頭刺入靜脈。證實(shí)針在靜脈內(nèi)后,即可注射。犬:可選用前肢皮下頭靜脈或后肢小隱靜脈注射。以手或橡皮帶把靜脈向心端扎緊,使血管充血。酒精棉球涂榛后,針頭向近心端刺入靜脈,回抽針?biāo)?,倘有回血即可推注藥液(圖10)。圖10犬后肢外側(cè)小隱靜脈(左)和前肢背側(cè)皮下頭靜脈 (右)注射法實(shí)驗(yàn)二不同給藥途徑對(duì)藥物作用的影響目的觀察不同給藥途徑對(duì)尼可剎米作用的影響。器材注射器(1ml M)、小鼠灌胃器、玻璃鐘罩。藥品5 %尼可剎米溶液。動(dòng)物小鼠方法小鼠 3 只,
15、稱重,編號(hào)甲、乙和丙。先觀察正?;顒?dòng),如呼吸、活動(dòng)度和運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)程度等。然后將甲、乙、丙鼠以5尼可剎米溶液0.2m1/10g 體重,分別灌胃、皮下和腹腔注射,觀察給藥后各鼠是否出現(xiàn)興奮、驚厥等癥狀,并記錄出現(xiàn)癥狀的時(shí)間和小鼠的最終結(jié)局。結(jié)果 將觀察結(jié)果列表比較。思考題不同給藥途徑為什么會(huì)影響藥物效應(yīng)?實(shí)驗(yàn)三 傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對(duì)麻醉兔血壓的作用目的 觀察傳出神經(jīng)藥物對(duì)心血管系統(tǒng)的作用,并根據(jù)受體學(xué)說初步分析其作用機(jī)制。器材 RM6240 信號(hào)采集系統(tǒng)、壓力換能器、手術(shù)臺(tái)、動(dòng)脈套管、動(dòng)脈夾、手術(shù)刀,小剪刀、普通剪刀、止血鉗、頭皮針、紗布、彈簧夾、螺旋夾、三通管、lml 注射器 (2 支 )、 20m
16、l 注射器 (1 支)。藥品 肝素、生理鹽水、3戊巴比妥鈉、腎上腺素、去甲腎上腺素、異丙腎上腺素、麻黃堿、酚妥拉明、普萘洛爾、氯化乙酰膽堿、阿托品。動(dòng)物 家兔方法與步驟1 儀器調(diào)試( 1 )將壓力換能器上連接的三通管用肝素充滿,并排除里面的空氣,關(guān)閉三通管與壓力換能器的連同。( 2 )壓力換能器輸出插頭接到RM6240 生物信號(hào)采集系統(tǒng)的一通道上,如:三通道。2 . 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)步驟1. 取兔一只,稱重,以1m/kg 的劑量靜脈注射3戊巴比妥鈉麻醉兔,并將兔仰縛于兔板上。2. 將壓力換能器上連接的三通管用肝素溶液充滿,并排除里面的空氣,關(guān)閉三通管與壓力換能器的連通。3. 分離一側(cè)頸總動(dòng)脈,在動(dòng)脈下
17、穿兩根線,遠(yuǎn)心端結(jié)扎,近心端用動(dòng)脈夾夾住,用眼科剪在動(dòng)脈上剪一 “V”形口,將連有壓力換能器的動(dòng)脈套管插入“ V”形口中,用線結(jié)扎。檢查后, 打開三通管與壓力換能器的連通,以備描記血壓。4. 兔耳緣靜脈置入頭皮針,固定以備給藥,每次給藥后用生理鹽水0.5ml 將藥液沖入靜脈內(nèi)。描記一段正常血壓后,開始給藥。經(jīng)頭皮針到耳緣靜脈依次注射下列藥物,藥物反應(yīng)指),心率改變(心率增快或減慢及標(biāo):血壓變化(升至最高點(diǎn)或降至最低點(diǎn)的高度及其時(shí)間其時(shí)間)。待前面一個(gè)藥物作用基本消失后,再注射下一個(gè)藥物。(一)作用于a與3受體的藥物(1)腎上腺素 10 閔/kg (1:10,000 溶液,0.1ml/kg)(2
18、)去甲腎上腺素10聞/kg (1:10,000 溶液,0.1ml/kg)(3) 麻黃堿 0.5mg/kg (1:200 溶液, 0.1ml/kg)(4) 酚妥拉明0.5mg/kg (10mg/ml , 0.05ml/kg)(5)腎上腺素 10 閔/kg (1:10,000 溶液,0.1ml/kg)(二)作用于3受體藥物(著重觀察心率變化)(6)異丙腎上腺素1聞/kg (1:100,000 溶液,0.1ml/kg)(7) 普萘洛爾0.2mg/kg (1mg/ml , 0.2ml/kg)(8)異丙腎上腺素1聞/kg (1:100,000 溶液,0.1ml/kg)(三 ) 作用于 M 受體藥物(9)
19、氯化乙酰膽堿1聞/kg (1:100,000 溶液,0.1ml/kg)(10) 阿托品 0.5mg/kg (1:200 溶液, 0.1ml/kg)(11)氯化乙酰膽堿 1 聞/kg (1:100,000 溶液,0.1ml/kg)結(jié)果 多媒體描記血壓變化的曲線,注明所用藥物。思考題從受體理論分析并解釋各藥對(duì)兔血壓的影響。15實(shí)驗(yàn)四 氯丙嗪的安定和抗激怒反應(yīng)作用目的 觀察氯丙嗪的中樞安定作用。器材藥理生理多用儀、電刺激盒、小鐘罩、瓷盤、lml注射器、粗天平、膠布少許。藥品0.06鹽酸氯丙嗪注射液、生理鹽水。動(dòng)物雄性小鼠方法1. 儀器準(zhǔn)備:將藥理生理多用儀前面板“刺激方式”置“連續(xù)B”,A頻率”置2
20、或4HZ (即每次刺激持續(xù)時(shí)間為1/2 或 1/4 秒),“ B 時(shí)間”置 0.5 或 1 秒(即每兩次刺激間的間隔時(shí)間為 1/2 或 1 秒 ) 。將后面板開關(guān)撥向“電驚、激怒”側(cè) (切勿撥向“恒溫、光電”側(cè))。將后面板電壓調(diào)至適當(dāng)強(qiáng)度(140-160V) 后,固定之。將與電刺激盒相連的導(dǎo)線插入“交流輸出”的兩孔插座內(nèi)。2. 動(dòng)物準(zhǔn)備:將準(zhǔn)備好的4 只雄性小鼠分別進(jìn)行稱重、編號(hào)。以體重相近兩只配對(duì),分成對(duì)照組和用藥組。3. 測定兩組小鼠產(chǎn)生斗咬對(duì)恃反應(yīng)所需的刺激次數(shù)。4.對(duì)照組給生理鹽水 0.1ml/10g體重ip;用藥組給0.075 %鹽酸氯丙嗪0.1ml/10g體重ip(7.50mg/k
21、g體重)。15分鐘后重復(fù)3步驟,獲用藥后產(chǎn)生斗咬對(duì)恃所需刺激次數(shù)。5.對(duì)照組及用藥組小鼠的尾部貼上膠布并頭向下作懸垂?fàn)?,觀察各鼠反應(yīng)。結(jié)果將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表。表氯丙嗪對(duì)電刺激小鼠激怒反應(yīng)的影響鼠號(hào)組別產(chǎn)生斗咬反應(yīng)所需刺激次數(shù)給藥前給藥后1鹽酸氯內(nèi)嗪組23生理鹽水組4思考題氯丙嗪對(duì)小鼠產(chǎn)生安定作用的機(jī)理?有何臨床意義?實(shí)驗(yàn)五嗎啡的鎮(zhèn)痛作用目的觀察嗎啡的鎮(zhèn)痛效應(yīng),掌握鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)方法(熱板法)。器材熱板鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)儀、粗天平、平口鐐、1ml注射器、棉花少許。藥品0.15 %鹽酸嗎啡、生理鹽水。動(dòng)物雌性小鼠方法1 .每組取雌性小鼠(18-22g ) 4只(全班分為十組)依次測定其痛閾值。2 .調(diào)節(jié)熱板鎮(zhèn)痛實(shí)
22、驗(yàn)儀的溫度,使之保持在55 ± 1 C。3 .測定時(shí),將小鼠分別放入盒內(nèi), 觀察并記錄小鼠自放入盒內(nèi)至出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間(秒),以此作為該鼠的痛閾值,將小鼠取出。如在 30秒內(nèi)不出現(xiàn)添后足,或逃避跳躍者應(yīng)棄之不用。4 .將篩選合格的小鼠4只,稱重編號(hào),隨機(jī)分成兩組,每隔3分鐘測定各鼠正常痛閾值共2次,取平均值作為給藥前的痛閾值。5.給藥組2只小鼠腹腔注射 0.15 %鹽酸嗎啡0.1ml/10g體重,又照組2只小鼠腹腔注射等容量生理鹽水。于給藥后 5、10、20、40、80分鐘各測痛閾值 2次,取平均值。如果 60秒無反應(yīng),應(yīng)立即將小鼠取出,以免時(shí)間太長把足燙傷,痛閾值計(jì)為60秒。結(jié)果
23、1 .統(tǒng)計(jì)全班結(jié)果,填入下表,并計(jì)算痛閾提高百分率。痛威提高百分率=X1ULI%用藥后平均痛閾值-用藥前平均痛閾值用藥前平均痛麗值表 嗎啡的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)記錄藥物編R劑里痛閾值痛閾值提局白分率給藥前給藥后給藥前給藥后5 10 20 40605 10 20 4060嗎啡生理鹽水2 .以時(shí)間為橫坐標(biāo),痛閾提高百分率為縱坐標(biāo)畫出兩組時(shí)-效曲線,以分析藥物的作用強(qiáng)度,作用開始時(shí)間和維持時(shí)間。注意事項(xiàng)1 .選用雌性小鼠較好,因雄性小鼠受熱后陰囊松馳,與熱板接觸易致反應(yīng)過敏。2 .室溫對(duì)此實(shí)驗(yàn)有一定影響,以 15-20 C為宜,過低時(shí)小鼠反應(yīng)遲鈍,過高時(shí)則過于敏感, 易引起跳躍,均影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性
24、。3 .正常小鼠一般放在熱板上10-15秒鐘內(nèi)出現(xiàn)不安、舉前肢、舔前足、踢后肢、跳躍等現(xiàn)象,但這些動(dòng)作均不作為疼痛指標(biāo),只有舔后足才作為疼痛的指標(biāo)。4 .動(dòng)物的體重對(duì)結(jié)果有影響,一般用20克左右的體重為宜。思考題闡明嗎啡鎮(zhèn)痛作用原理及鎮(zhèn)痛的時(shí)-效關(guān)系。20實(shí)驗(yàn)六有機(jī)磷藥物的中毒及其解救目的 觀察有機(jī)磷藥物中毒的癥狀及對(duì)血液膽堿脂酶的抑制情況,根據(jù)阿托品和解磷啶對(duì)有機(jī)磷中毒的解救效果,分析和比較兩藥解毒作用的特點(diǎn)和原理。器材 1ml、 2ml 、 5ml、 10ml 注射器、剪刀、試管架、恒溫水浴儀、15ml 試管、1ml、2ml 、 5ml 吸管、小燒杯、漏斗、濾紙等。藥品 5敵百蟲、0.1
25、硫酸阿托品、2.5解磷啶、磷酸緩沖液(PH7.2) , 0.007M 乙酰膽堿、14鹽酸羥胺、14氫氧化鈉、4N 鹽酸、 10三氯化鐵溶液、肝素(300u/ml) 。動(dòng)物 家兔方法1. 家兔兩只,以甲、乙編號(hào),稱體重后分別觀察下列各項(xiàng)指標(biāo);活動(dòng)情況、呼吸、瞳孔、唾液、大小便、以及有無肌震顫等,分別記錄于表1 內(nèi)。2. 將兔頭固定,用酒精棉球反復(fù)擦耳殼,使血管擴(kuò)張,當(dāng)充血明顯時(shí),甲、乙兩兔耳靜脈注射5敵百蟲溶液2ml/Kg ( 100mg/Kg ),密切觀察表1 中的各項(xiàng)指標(biāo),并作記錄,待中毒癥狀明顯時(shí),然后甲兔靜脈注0.1 硫酸阿托品1ml/Kg ,乙兔靜脈注射解磷啶100mg/Kg ,密切注
26、意甲、乙兔中毒癥狀的改變,直至中毒癥狀明顯消失時(shí),加以記錄。注意事項(xiàng)1 .靜脈給敵百蟲后,應(yīng)將阿托品溶液吸好,并作好隨時(shí)注射準(zhǔn)備。2 .個(gè)別家兔靜脈給解磷咤后癥狀加重(藥效慢),嚴(yán)重者可給阿托品控制癥狀。表1有機(jī)磷農(nóng)藥中毒癥狀及解救觀察指標(biāo)兔號(hào)體重觀察階段活動(dòng)情況瞳孔唾液大小便肌張力肌震顫血膽堿酯酶活力甲用藥前敵百蟲后阿托品后乙用藥前敵百蟲后解磷咤后思考題簡述有機(jī)磷農(nóng)藥的中毒原理、中毒癥狀、解毒原理。23實(shí)驗(yàn)六強(qiáng)心苷對(duì)在體蛙心的作用目的 學(xué)習(xí)在體蛙心的制備,觀察強(qiáng)心苷對(duì)在體蛙心的作用。器材 計(jì)算機(jī)多媒體記錄儀、蛙板、張力換能器、探針、普通剪刀、眼科剪、眼科鑷、鐵支架、雙凹夾、燒杯、滴管、蛙心夾
27、、蛙釘、棉線。藥品 任氏液、無鈣任氏液,1 : 8000 毒毛旋花子甙K, 1 氯化鈣溶液。動(dòng)物 蛙或蟾蜍方法1. 取蟾蜍搗毀腦和脊髓后,仰位固定于蛙板上,剪開胸腹部皮膚,打開腹腔和胸腔,充分暴露出腹壁靜脈和心臟,將蛙心夾夾在心尖上,有線端小心垂直系在張力換能器上。蛙心表面每隔10 分鐘用滴管滴加任氏液以保護(hù)蛙心。2. 描記一段正常心肌收縮曲線,記錄正常心收縮幅度和頻率(次 /分 ),然后依次從腹壁靜脈加入下列藥物,觀察收縮曲線有何變化。( 1 )生理鹽水0.4ml( 2 )洋地黃1: 1000 , 0.4ml3 )洋地黃1: 5000 , 0.4ml4) 1%氯化鈣,0.4ml5) 2%氯化鈣,0.4ml結(jié)果 描繪曲線,記錄每次給藥后心肌收縮強(qiáng)度、心率、節(jié)律的變化。思考題1. 試述強(qiáng)心苷對(duì)心臟的作用特點(diǎn)及原理。2. 為什么應(yīng)用強(qiáng)心苷時(shí)要禁用鈣劑(iv) ?常用生理溶液的成分和配制附錄、配
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