動(dòng)物微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)三 培養(yǎng)基的制備 一目的要求 1.掌握一般培養(yǎng)基制備的原則和要求。 2.熟悉一般培養(yǎng)基制備的過(guò)程。二.原理 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是培養(yǎng)腐生性細(xì)菌的常規(guī)培養(yǎng)基，也是微生物實(shí)驗(yàn)室中常備培養(yǎng)基，為天然培養(yǎng)基。它含有牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽，蛋白胨主要提供氮源、NaCl提供無(wú)機(jī)鹽。 牛肉膏 5.0g 食鹽 5.0g pH 7.2-7.4 蛋白胨10.0g 自來(lái)水1000mL (加入1.5%-1.8%瓊脂即成固體培養(yǎng)基) 三 儀器材料 微波爐、高壓滅菌器、玻璃器皿、PH試紙、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、氯化鈉、氫氧化鈉。 四 操作步驟 一)、培養(yǎng)基的制備原則和要求 1

2、.藥品純凈 , 稱量準(zhǔn)確。 2.所用器皿須潔凈 3.準(zhǔn)確測(cè)定調(diào)節(jié)pH值. 4.過(guò)濾培養(yǎng)基 5.嚴(yán)格控制滅菌時(shí)間和溫度. 二)、培養(yǎng)基制備過(guò)程及方法 稱量-加熱溶化-過(guò)濾-PH滴定-分裝-滅菌 1)肉浸液肉湯（普通肉湯）的制法 蛋白胨 10g，氯化鈉 5g，磷酸氫二鉀 2g。 牛肉粉或牛肉膏3g,水1000ml .PH7.47.6 121.3度15磅高壓15鐘. 2)營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（普通瓊脂）的制法 普通肉湯 1000ml 瓊脂粉15g PH7.47.6 121.3度15磅高壓15鐘. 3)半固體培養(yǎng)基的制法 4）鮮血瓊脂的制法 PH的滴定: 1.酸度計(jì)法 2.PH比色計(jì)法:五 注意事項(xiàng)1.稱量準(zhǔn)確 2.加熱攪拌3.補(bǔ)足水分 4.容器適合5.高壓徹底 6.空白培養(yǎng) 六 作業(yè)與思考題 （1）為什么微生物實(shí)驗(yàn)室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞上一小段棉茬再用報(bào)紙包起來(lái)，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能使用? （2）配制培養(yǎng)基時(shí)為什么要調(diào)節(jié)pH? （3）制作平板培養(yǎng)基的注意事項(xiàng)是什么? （4）培養(yǎng)基配好后，為什么必須馬上進(jìn)行高壓蒸汽滅菌?如不能及時(shí)滅菌時(shí)，應(yīng)將培養(yǎng)基暫時(shí)放置何處? 四 操作步驟 一)、培養(yǎng)基的制備原則和要求 1.藥品純凈 , 稱量準(zhǔn)確。 2.所用器皿須潔凈 3.準(zhǔn)確測(cè)定調(diào)節(jié)pH值. 4.過(guò)濾培養(yǎng)基 5.嚴(yán)格控