D二聚體的檢測及臨床意義

1、D - 二 聚 體 的 檢 測 及 臨 床 意 義近年由于血栓性疾病的增多，檢驗醫(yī)學(xué)即時檢驗（POCT）在免疫測定技術(shù)方面，特別是在出凝血和血栓性疾病的研究上取得了重大的進(jìn)展。 D- 二聚體的檢測方法， 從傳統(tǒng)的定性試驗， 變?yōu)楹唵慰焖贉?zhǔn)確定量的即時檢驗。 金標(biāo)全定量快速檢測對于血栓性疾病的及時準(zhǔn)確診斷、以及對溶栓治療的療效監(jiān)測，是必不可少的重要指標(biāo)。1、 D- 二聚體的形成正常人纖溶酶和抑制酶之間保持了動態(tài)平衡，使血液循環(huán)能正常進(jìn)行。人體內(nèi)的纖溶系統(tǒng)，對保持血管壁的正常通透性；維持血液的流動狀態(tài)和組織修復(fù)，起著重要作用。為維護(hù)正常生理狀態(tài)，在外傷或血管受損的情況下，血栓的形成可防止血液從損傷

2、的血管中流失。病理狀態(tài)下，機(jī)體發(fā)生凝血時，凝血酶作用于纖維蛋白，轉(zhuǎn)變?yōu)榻宦?lián)纖維蛋白，同時纖溶系統(tǒng)被激活，降解纖維蛋白形成各種碎片。丫鏈能把二個含D片斷的碎片連接起來，形成D-二聚體。 D-二聚體水平的上升，代表血塊在血管循環(huán)系統(tǒng)中形成， 急性血栓形成的一個敏感的標(biāo)記物。 但不具特異性 ;下列因素如外科手術(shù)、創(chuàng)傷、感染、 發(fā)炎、懷孕、 產(chǎn)后等，也會導(dǎo)致凝血酶的產(chǎn)生使D-D 水平的上升。D-二聚體的升高反映了體內(nèi)存在著凝血及纖溶活性增強(qiáng)的重要分子標(biāo)志物。因此它既可反映體內(nèi)存在著血栓或繼續(xù)形成的狀況，又可反映體內(nèi)纖溶活性增強(qiáng)的指標(biāo)，因為纖維蛋白降解產(chǎn)物中，唯有D-二聚體可反映血栓形成后的溶栓活性，對

3、于臨床血栓性疾病的診斷和溶栓治療有著極其重要的價值。2、 D- 二聚體檢測的方法學(xué)的進(jìn)展1 、三 P 試驗： FDP 碎片 X 和可溶性纖維蛋白單體FM 復(fù)合物的定性試驗。缺點(diǎn)：敏感性差， DIC 陽性率 30-60% ，試驗時間長，干擾因素多，采血不順，溶血均可影響結(jié)果，只能定性不能定量。2 、膠乳凝集法： 簡單快速缺點(diǎn)：敏感性低，定性或定量倍比稀釋，費(fèi)試劑，重復(fù)性差。3 、 ELISA 法： 敏感性高，能定量缺點(diǎn)：操作煩，時間長，無法滿足急診需求。4、免疫滲濾膠體金顯色反應(yīng)法：采用同種單克隆抗體夾心，即以包被的抗體捕獲血漿中抗原（ D- 二聚體）加入偶聯(lián)有膠體金的同種抗體顯色?？贵w特異性高

4、，可與含D- 二聚體的多種片斷結(jié)合可提高試驗的敏感度。特點(diǎn)：定量報告，快速簡便，敏感性高。測試范圍： 0.1 5mg/L正常參考值： <0.3mg/L ，接近或 >0.3mg/L 應(yīng)考慮疾病狀態(tài)。使用說明：（1） 血漿未經(jīng)徹底離心，血漿中含有白細(xì)胞、血小板、高血脂或高粘度血漿，這些物質(zhì)停留在檢測板的膜表面，導(dǎo)致滲濾減慢時間過長，可能出現(xiàn)假性高值，應(yīng)徹底離心（4000 轉(zhuǎn) 20 分鐘為宜），并小心吸取血漿。(2)各個不同廠家的D-二聚體試劑盒的正常參考范圍值也不一樣，有的以0.3mg/L 為正常，而有的試劑盒以 0.6mg/L 為正常。此外有的以 PEU 單位模式報告，有的以 mg/

5、L 的模式報告，其值正好相差一半。所以在評價D- 二聚體結(jié)果時應(yīng)注意上述問題。三、D-二聚體檢測的臨床應(yīng)用D-二聚體增高提示了與體內(nèi)各種原因引起的血栓性疾病相關(guān)。同時也說明了纖溶活性的增強(qiáng)；臨床上常見于彌慢性血管內(nèi)凝血（DIC ）、深靜脈血栓（ DVT ） 、肺栓塞（ PE ） 、急性心肌梗塞、腦梗塞、惡性腫瘤、卵巢癌、肺癌、敗血癥、肝病、妊高征孕婦、先兆子癇、燒傷、外科手術(shù)、創(chuàng)傷和膿毒血癥等均可使D-二聚體升高，但是D-二聚體檢測的升高并不能說明血栓形成的原因及位置，必須結(jié)合臨床和其他檢測分析結(jié)果。1 、 DIC （休克、系統(tǒng)感染、外傷、先兆子癇、惡性疾病和燒傷等）的并發(fā)癥： 血液在全身微小

6、血管內(nèi)廣泛性凝固，形成以血小板和纖維蛋白為主要成分的微血栓。此過程消耗了大量的血小板和凝血因子，并通過激活途徑激活了纖溶系統(tǒng)。微血栓中交聯(lián)纖維蛋白被纖溶酶降解而產(chǎn)生大量高于正常百倍的D-二聚體。與其他診斷DIC的指標(biāo)相比較，D-二聚體是唯一直接反映凝血酶和纖溶酶生成的理想指標(biāo)；診斷 DIC 的特異性也早于其他指標(biāo)。2、深靜脈血栓（DVT）的篩查：血漿D-二聚體陰性可排除DVT的可能性。造影證實DVT者D-二聚體100%陽性，可做溶栓治療和肝素抗凝的用藥指導(dǎo)及療效觀察。靜脈栓塞是臨床上最常見的靜脈疾病，臨床醫(yī)生無法僅僅根據(jù)其臨床癥狀作出診斷。靜脈造影是診斷靜脈栓塞的黃金標(biāo)準(zhǔn)，它是創(chuàng)傷性檢查，費(fèi)用

7、高，而靜脈造影本身具有引發(fā)深靜脈栓塞或其它并發(fā)癥的危險性。靜脈血栓栓塞癥（VTE）的危險因素較低的危險因素中度危險因素高危險因素臥床3日膝關(guān)節(jié)手術(shù)骨折（雕或腿）長時間的處于靜止?fàn)顟B(tài)（如乘車或乘長途飛機(jī)）中央靜脈狹窄雕或膝復(fù)位年齡增大惡性腫瘤、化療大手術(shù)腹腔鏡外科充血性心衰、呼衰大創(chuàng)傷減肥荷爾蒙代替物口服避孕藥脊髓損傷懷孕/產(chǎn)后偏癱性中風(fēng)靜脈曲張懷孕/產(chǎn)后曾患VTE血栓形成傾向D-二聚體測試，配合臨床評估，可以快速、安全的排除30-50% 懷疑DVT/PE的病例，可節(jié)省醫(yī)院的成本，減少不必要的影象診斷及抗凝血治療，減少病人留院的時間，改善病人的情況，減少入侵性診斷的危險，減少因不必要抗凝血治療而

8、引起的出血。D-二聚體可反映血栓大小的變化。含量再升高，預(yù)示血栓再發(fā)生。治療期間持續(xù)較高，提示血栓大小無變化，說明治療無效。陳舊性血栓D-D不增高。3、肺栓塞病人（PE）: PE是一種較常見的潛在致命的疾病，尤其多見于血液病、心臟病和外科手術(shù)病人。PE臨床表現(xiàn)差異極大且PE缺乏特異性（從無任何表現(xiàn)到猝死）、常規(guī)檢查無法獲得直接證據(jù)，加上對該病的認(rèn)識不足，常造成漏診或誤診。及時治療依賴早期診斷。對于呼吸困難、胸悶、咳嗽、咯血，昏厥的患者，尤其是近期有外傷，手術(shù)及長途旅行史；既往患有深靜脈血栓，應(yīng)考慮是否存在D-二聚體測定是PE必備的篩查方法；0.5mg/L 可除外PE。D-二聚體測定在急性肺栓塞

9、的篩選中具有重要作用，且操作方法簡便、設(shè)備要求不高， 縣市級醫(yī)院均可開展此項檢測。 我國目前應(yīng)用 D- 二聚體篩選急性肺栓塞尚處于起步階段， 對其在急性肺栓塞的診斷價值中積累的經(jīng)驗仍然較少，特別是急診D- 二聚體的檢測更是剛剛起步，有待于進(jìn)一步積累臨床資料，更好地發(fā)揮其在急性肺栓塞中的診斷作用。4、婦科病人及先兆子癇：Trafatter報告204例先兆子癇婦女中79例D-二聚體增高，而88例正常孕婦全正常。該指標(biāo)對妊高征患者高凝狀態(tài)的診斷、療效觀察及預(yù)后判斷有重要意義。 D-D 檢測排除妊娠VTE: 隨著妊娠期的發(fā)展，孕婦的 D-D 值隨之逐漸升高，可高至基礎(chǔ)值的 3-4 倍。若妊娠期發(fā)生VT

10、E ，干擾 D-D 排除 VTE 的有效性。若D-D 結(jié)果陰性，仍有排除VTE 的價值。5、肝臟疾?。篋-二聚體含量明顯增高并與肝病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。惡性腫瘤伴有D-二聚體增高，提示血栓形成及栓塞，對于病情判斷及治療有重要意義。6、血管疾?。翰环€(wěn)定型心絞痛病人比急性心絞痛高、急性心肌梗死（ AMI）、腦梗塞溶栓治療時，D-二聚體增高對指導(dǎo)溶栓治療很有意義。7、溶血栓治療的監(jiān)測：D-二聚體是溶栓藥物治療監(jiān)控和療效觀察的指標(biāo)。應(yīng)用溶栓藥物后D-二聚體明顯升高。若達(dá)到療效，該指標(biāo)在升高后很快下降； 如果二聚體升高后持續(xù)維持在一定程度高水平則提示溶栓藥物劑量不足。 纖維蛋白降解產(chǎn)物中， 唯有 D-

11、二聚體可反映血栓形成后的溶栓活性。因此定量檢測D-二聚體可以反映藥物溶栓的效果。應(yīng)用溶血栓藥物（SK、UK、rt-PA等）溶解新鮮血栓，其出血的發(fā)生率高達(dá) 5%30 %,建議Fg維持在1.21.5g/L、TT維持在正常對照的1.52.5倍，F(xiàn)DPs維持在300400ug/L8、交聯(lián)衍生物D-二聚體水平的影響 血栓的原始大?。ㄐ柙黾硬糠纸忉專陀绊憼顩r進(jìn)行闡述） 纖溶速率（需增加部分解釋，就影響狀況進(jìn)行闡述） 血栓形成時間，腎功正常時，循環(huán)中的D-二聚體半衰期約6h增加部分解釋，就影響狀況進(jìn)行闡述）;有活躍的纖維蛋白降解和纖溶酶活化； 血栓的位置是否被包裹。（需D-二聚體臨床應(yīng)用時應(yīng)注意的問題1

12、、D-二聚體是一項陰性排除試驗。作為一種無創(chuàng)性檢查手段，在急性肺栓塞（PE）、深靜脈栓塞（DVT）、血管內(nèi)彌漫性凝血（DIC）排 除診斷中有十分重要的價值，它是一項陰性排除試驗。在任何情況下D-二聚體測定值大于試劑盒推薦的 Cut Off值，都不能簡單的作為急性肺栓塞、深靜脈栓塞、血管內(nèi)彌漫性凝血的唯一確診依據(jù)，必須結(jié)合臨床情況綜合分析。在腦梗死、肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)凝血、急性靜脈血栓形成時升高，從D-二聚體的檢測目標(biāo)而言，這些歸屬陽性升高。但是只要機(jī)體血管內(nèi)有活化的血栓形成及纖維溶解活動，D-二聚體就會升高，比如手術(shù)、月中瘤、感染及組織壞死等均可導(dǎo)致D-二聚體升高。特別對8 0歲以上人群及住

13、院患者，因患感染性等疾病易引起凝血異常而導(dǎo)致D-二聚體升高的病人應(yīng)注意結(jié)合臨床情況綜合分析，國際上D-二聚體檢測的特異性一般為50%左右。2、國內(nèi)外無D-二聚體統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)品。D-二聚體是血液中纖維蛋白降解產(chǎn)物，具大小和抗原決定簇不可能完全相同，因此D-二聚體既沒有國際標(biāo)準(zhǔn)、國內(nèi)外均無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)品，也無行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品。不同公司的企業(yè) D-二聚體標(biāo)準(zhǔn)品也不能相互通用。因此該試驗不同廠家試劑所 測的D-D具體數(shù)據(jù)，不可能互相獲得一致的結(jié)果也就可以理解了。但是基本的要求是陰性的排除值和陽性的確定值應(yīng)總體符合。有關(guān)的權(quán) 威論述如下：FACT （ Fibrin Assay Comparison Trial有關(guān)纖維

14、蛋白化驗的國際專職評估和研究機(jī)構(gòu)）以下由權(quán)威的 （FACT）研究組發(fā)表的原文摘錄："Although D-dimer has gained widespread clinical use as a parameter for detection of in vivo fibrin formation,the standardization issue has not been resolved andreference preparations and/or guidelines have not been distributed.”中文翻譯：雖然D-二聚體作為纖維蛋白形成的一項指標(biāo)

15、，在臨床巳廣泛使用，但其標(biāo)準(zhǔn)化問題至今未解決，也無標(biāo)準(zhǔn)品，甚至有關(guān)參 照品制備的指導(dǎo)性文件也沒有公布過。J自 Thromb Haemost 2001;85:671-83、目前D-二聚體試劑溯源標(biāo)準(zhǔn)是如何建立的？D-D DOT試劑標(biāo)準(zhǔn)的建立，D-二聚體試劑盒只能向同類公認(rèn)可靠的D-二聚體測定方法或試劑盒靠攏。D-D DOT研發(fā)時用挪威 NycoCard二聚體試劑盒測定患者樣品，從中選取高值D-Dimer陽性樣品混合，用此NycoCard 二聚體試劑盒將這高值 Dimer混合血漿系列稀釋后定標(biāo)，作溯源標(biāo)準(zhǔn)，建立 D-D DOT試劑盒的二聚體標(biāo)準(zhǔn)曲線、企業(yè) D- 二聚體標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品。本項目方法轉(zhuǎn)移

16、靠混合高值血漿的做法符合國際的通常規(guī)定。有關(guān)的權(quán)威論述如下：FACT文獻(xiàn)摘錄：原文：“The best conformity is achieved by the use of pooled plasma samples from patients with high levels of D-dimer antigen in plasma.”“As an alternative to pooled plasma samples,D-dimer antigen assays may be calibrated with in vitro preparations containing predo

17、minantly H.MW -fibrin oligomers.”中文翻譯：使用病人高值D-dimer混合血漿可取得最好的一致性，作為混合血漿樣品的代用品，D-二聚體檢測可以使用體外制備的標(biāo)準(zhǔn)品校正，體外制備的標(biāo)準(zhǔn)品主要含高分子量纖維蛋白的低聚物。摘自：Thromb Haemost 2001;85 671-84、常見品牌D-二聚體試劑盒的檢測量程：一些品牌D-二聚體試劑盒，為了保證陰性排除判斷的敏感性和陽性確定結(jié)果的準(zhǔn)確性，往 往把檢測量程定在0.1 5mg/L,這一設(shè)計除了滿足和保證區(qū)分陰陽性區(qū)域的敏感性外，更重要的是這種檢測量程設(shè)計已能滿足大部分血栓病人的輔助診斷和溶栓指導(dǎo)的參考。羅氏金標(biāo)

18、層析數(shù)碼定量系統(tǒng)，CARDIAC D-Dimer ,測量范圍：0.1-4.0 聞/mL(0.1-4.0mg/L)法國 Stago 0.22 4 聞/ml(FEU) , 0.22mg 4.0mg/L生物梅里埃D-二聚體測量范圍：45-10,000ng/ml(FEU)(注：FEU -mg/L =mg/L +2, = 0.025-5.0mg/L。)5、幾個常見品牌D-二聚體試劑主要檢測數(shù)據(jù)見下表幾個品牌D-D二聚體試劑比較試劑名稱方法學(xué)報告單位正常值檢測范圍檢測時間奧普D-D DOT金標(biāo)免疫法mg/L<0.3mg/L0.1-5mg/L3minRoche(羅氏)液體試劑717生化儀FEU<

19、0.5ug/ml(<0.5mg/L)0.15 -9ug/ml(FEU)4.5mg/L10minStago法國專用測定儀FEU<0.4ug/ml(0.4mg/L)0.22 -4ug/ml0.22-4mg/L(FEU)7minOrganon Teknika液體試劑FEU<0.6ug/ml(<0.4mg/L)0.2 -4ug/ml0.2-4mg/L (FEU)12minBiomerieux法國梅里埃酶免法FEU<500ng/ml(0.5mg/L)45-10000ng/ml(FEU)0.045-10mg/L35min6、FEU單位和mg/L單位的報告模式及換算方法：纖維蛋

20、白等值單位(Fibrinogen Equivalent Units FEU)這是目前一些測定D-二聚體儀器和試劑盒所用的報告模式。FEU 和 mg/L 之間的換算，F(xiàn)EU1ng/ml D-dimer=2ng/FEU/ml ,即 FEU;1ng/mlD-dimer=2ng/ ml 的非FEU單位。例如如果以 D-二聚體正常值 0.3mg/L ,換算成FEU結(jié)果需乘2即為0.6mg/L FEU 。7、奧普D- 二聚體試劑的特點(diǎn)： 保存期長，穩(wěn)定性好。 12 個月的失效期，較常見同類試劑的 6 個月失效期長了一半。更方便客戶應(yīng)用。 陰性結(jié)果排除試驗的準(zhǔn)確性和鑒別排除假陽性結(jié)果的臨床符合性滿意。 本試

21、劑盒在臨床評估時發(fā)現(xiàn)6 例 D-D 結(jié)果全正常范圍 （5 例0.1 ， 1 例 0.2mg/L）, 而用進(jìn)口試劑測數(shù)在值在0.3-1.1mg/L 之間 （0.3 、 0.3 、 0.4 、 0.4 、 0.9 、 1.1mg/L） ，臨床追蹤證實該6 例陽性結(jié)果的病人為非血栓病人。 U2 愛國者 POCT 即時檢驗儀器，可快速測定CRP 、 HCG 、 ALB 、 D-dimer 四個項目，一機(jī)多用,有很好的配套效應(yīng)。D-D DOT國產(chǎn)試劑的價格優(yōu)勢，與進(jìn)口試劑等效的產(chǎn)品質(zhì)量。8 、 對 D-D 檢測中可能出現(xiàn)的假陰性和假陽性的評價： D-D 檢測的陰性患者中 （假陰性 ）， 仍有極少數(shù)患者

22、（2%） 伴靜脈血栓， 其原因：（ 1 ）血栓體積很小 / 遠(yuǎn)端小血栓；（ 2 ）放射線 / 超聲檢查出現(xiàn)假陽性；（ 3 ）臨床表現(xiàn)與標(biāo)本采集時間相隔太長；（ 4 ）纖溶活性降低因為 D-D 增高所謂的假陽性，常見于老年人、孕婦、癌癥、 DIC 、肝病、炎癥、創(chuàng)傷、手術(shù)、冠心病等均會導(dǎo)致假陽性。9 、不同型號D- 二聚體試劑比對檢測評估應(yīng)掌握的基本原則： D- 二聚體試劑不同于其它試劑 , 既沒有國際標(biāo)準(zhǔn)、國內(nèi)外均無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)品，也無行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、不同公司的企業(yè)D- 二聚體標(biāo)準(zhǔn)品也不能相互通用。生物梅里埃在宣傳資料中是這樣表達(dá)的： “ D-dimer 由于沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，不同試劑的測試可有不同的結(jié)果

23、。不同商品 D-二聚體試劑盒定量值各不相同，這是因為試劑單克隆抗體的來源/免疫反應(yīng)性，基質(zhì)效應(yīng)，干憂因素、定標(biāo)物的種類不同等多因素，測試X試劑的結(jié)果不一定能與 Y測試的試劑比較”，每種D-D試劑通過充份的臨床驗證，通過觀察 陰性結(jié)果排除試驗的準(zhǔn)確性和真陽性，以及鑒別排除假陽性結(jié)果的臨床符合性來評估試劑優(yōu)劣。這對于傳統(tǒng)用二種數(shù)據(jù)的比對試 驗來評價試劑的方法不同，我們必須接受國際上通行的做法，來更新我們的觀念。D-二聚體檢測倍受關(guān)注的原因分析中華醫(yī)學(xué)會檢驗學(xué)會主任、解放軍 301醫(yī)院主任、叢玉隆教授認(rèn)為：隨著生化、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)飛速發(fā)展；止血、凝血和血栓疾 病的研究取得了巨大進(jìn)步，積極開展血栓

24、與止血試驗檢測，推廣臨床應(yīng)用，無疑具有重要意義。血栓性疾病的增多，診斷、治療、監(jiān)測的 臨床需要。檢測方法學(xué)的進(jìn)步、從定性到定量，正確快速。D- 二聚體檢測試劑盒臨床研究總結(jié)報告（摘要）臨床研究評估單位：上海中醫(yī)藥大學(xué)岳陽醫(yī)院上海閔行區(qū)中心醫(yī)院一、材料和方法儀器和試劑：比對評估系統(tǒng)所用的儀器試劑，均為挪威原裝進(jìn)口的NycoCardD-二聚體測定儀和試劑，與上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的 U2 金標(biāo)斑點(diǎn)法定量讀數(shù)儀及試劑按各自操作說明作比對測定。標(biāo)本采集：疑似病例組均為臨床送檢D- 二聚體血漿，共135 份（閔行醫(yī)院 85 例，岳陽醫(yī)院50 例） 。對照組均為健康體檢人群共100 例（閔行醫(yī)院 4

25、0 例，岳陽醫(yī)院 60 例） 。該組為隨機(jī)體檢人群，未進(jìn)行挑選，年齡分布在 16-85 歲，平均年齡為 45.4 歲。二、結(jié)果1 、疑似病例組以比對法結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，共有88 例陽性， 46 例陰性， 1 例乳糜血有干擾不作統(tǒng)計。在陽性組（ 88 例）中， D-D DOT 檢測出 82 例陽性， 6 例陰性，陽性符合率為 93.2 （ 82/88 ） ，病例追蹤不符合的 6 例，結(jié)果支持D-D DOT 的陰性結(jié)果。疑似病例組比對法陰性的 46 例中， D-D DOT 檢測均陰性，陰性符合率100 。陰陽不符的 6 例均為比對試劑（ +） ，而 D-D DOT（-） ，見表 1 。對該陰陽不符的 6

26、 例進(jìn)行臨床病例追蹤，結(jié)果顯示該6 例病例均無深靜脈血栓、肺栓塞和血管內(nèi)彌漫性凝血的相關(guān)癥狀和診斷，病例追蹤結(jié)果支持 D-D DOT 的可靠性，在兩家醫(yī)院臨床研究中 D-D DOT 特異性應(yīng)優(yōu)于進(jìn)口同類比對試劑。對照組以比對法結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，共有 1例陽性(閔行119號，0.3 mg/L ), 99例陰性。該陽性樣本D-D DOT檢測亦為0.3 mg/L , 其它99例D-D DOT檢測均為陰性，符合率100 %。在列入統(tǒng)計的全部234例樣本中，以比對法(NycoCard)為標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果：陽性符合率=93.3%陰性符合率=100%總符合率=97.4%配對卡方檢測結(jié)果顯示兩者結(jié)果在統(tǒng)計學(xué)上無顯著差別；K

27、appa值0.945 (>0.8),具有非常好的一致性。以比對法陽性為標(biāo)準(zhǔn)，D-D DOT的陽性符合率雖為93.3% ,但2個醫(yī)院對陽性不符病例(共 6例)追蹤結(jié)果均支持D-D DOT的可 靠性。D-D DOT 與比對法(NycoCard) 6 例陽性不符結(jié)果在舁 廳PD-DDOT(mg/L)比對法(mg/L)追蹤診斷同行0.10.9肺炎,高血壓，非血栓病閔行0.10.3糖尿病，肺炎，非血栓病閔行0.20.3胰頭癌，非血栓病閔行0.10.4上消化道出血，肝硬化，非血栓病岳陽<0.10.4氣管炎急性發(fā)作，非血栓病岳陽0.11.1高血壓，心臟病，非血栓病2、對照組均為健康體檢人群共10

28、0例(閔行醫(yī)院40例，岳陽醫(yī)院60例)。該組為隨機(jī)體檢人群，未進(jìn)行挑選，年齡分布在 16-85歲， 平均年齡為45.4歲。以比對法結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，共有1例陽性(閔行119號，0.3 mg/L ), 99例陰性。該陽性樣本D-D DOT檢測亦為0.3 mg/L ,其它99例D-D DOT檢測均為陰性，符合率100 %。100例健康人D-二聚體讀數(shù)分布如下：在兩家醫(yī)院進(jìn)行的共100例健康體檢人群的臨床研究中，二法 99 %的健康人D-二聚體讀數(shù)均 0.3 mg/ml ,表明D-D DOT與比 對法一樣，所選的正常參考范圍 0.3 mg/L設(shè)置恰當(dāng)，滿足臨床需要。D-D DOT 陽性符合率=a/(a+c

29、)=93.3%D-D DOT 陰性符合率=d/(b+d)=100%P均大于0.05 。D-D DOT 總符合率=(a+d)/(a+b+c+d)=97.4%閔行醫(yī)院和岳陽醫(yī)院的統(tǒng)計四格表分別進(jìn)行配對卡方檢驗，兩者三、結(jié)論上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院和上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院的臨床研究結(jié)果表明上海奧普生物醫(yī)藥有限公司申請臨床研究的D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）和比對法NycoCard D-二聚體單一試劑盒在 D-二聚體測定上有良好等效性，引用的正常人參考范圍（ 0.3 mg/L ）恰當(dāng)， D-D DOT 可以與比對法一樣，在臨床用于排除深靜脈血栓、肺栓塞和血管內(nèi)彌漫性凝血，滿足臨床應(yīng)用需要。

30、以比對法陽性為標(biāo)準(zhǔn)， D-D DOT 的陽性符合率雖為 93.3% ，但 2 個醫(yī)院對陽性不符病例（共6 例）追蹤結(jié)果均支持D-D DOT 的可靠性 ， 提 示 在 本 研 究 D-D DOT 特 異 性 應(yīng) 優(yōu) 于 同 類 比 對 試 劑 。檢測血漿 D- 二聚體新金標(biāo)斑點(diǎn)滲濾法試劑盒的臨床適用性（摘要）上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院檢驗科 張莉本研究對國產(chǎn)新研制的膠體金法D-二聚體試劑盒作了性能評價，并將其與挪威進(jìn)口試劑盒的臨床測試結(jié)果進(jìn)行了比較。一、材料與方法儀器與試劑D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）及配套 Uppergold U2金標(biāo)斑點(diǎn)法定量讀數(shù)儀和D-D DOT試劑，質(zhì)控品

31、均由上海奧普生物醫(yī)藥 有限公司生產(chǎn)。比對用挪威 NycoCard公司生產(chǎn)D-二聚體試劑盒及配套測讀儀 NycoCard Reader H。234 份臨床收集的新鮮血漿標(biāo)本， 作了線性、精密度（CV ） 、回收率并用統(tǒng)計軟件作了分析。結(jié)果一、試劑盒性能評價線性評價：回歸方程為：Y=0.9791X + 0.0684,產(chǎn)0.998 。此結(jié)果顯示，該試劑 D-D在0.3-3.0mg/范圍內(nèi)線性良好。精密度總批內(nèi)及批間精密度分別為 10.77% 和 12.81% ?？偦厥章蕿?101.3% 。二、臨床標(biāo)本比對結(jié)果：234 例樣本中，二者陽性符合率為 95.5 ，陰性符合率為 100 ，總符合率為 98.

32、3 。 D-D DOT 和 Nycocard 試劑盒結(jié)果具有非常好的一致性。討論目前,D-二聚體的臨床檢測主要應(yīng)用街排除靜脈血栓栓塞（VTE）,其中包括了 DVT和PE。目前快速D-二聚體測定已作為DVT診斷的首選項目。D-二聚體還是早期診斷彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）較敏感的指標(biāo)。這對血栓性疾病的診斷，尤其是對于低臨床概率的排除性診斷具 有重要的意義。目前 D- 二聚體的檢測沒有國際標(biāo)準(zhǔn)品和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品， 各公司的標(biāo)準(zhǔn)品不統(tǒng)一、 不通用， 通常只適合于與其配套的檢測系統(tǒng)的自身校正。另外，由于各個檢測系統(tǒng)所使用的免疫抗體差異較大，抗原決定簇各有不同，從而造成不同的檢測方法之間數(shù)據(jù)差異很大，其陽性率

33、、敏感性、特異性均不同，甚至對于同一個樣本（枸櫞酸抗凝血漿）的讀數(shù)亦存在較大差異。D-二聚體項目目前公認(rèn)的敏感度在90 %以上，而特異性為40 %60 %左右7,因此診斷疾病時，其意義主要在于陰性結(jié)果，即它是用于排除性的診斷而非確診性的診斷。其陰性符合率達(dá)到100% ， , 陰陽不符的四例病例均為Nycocard 試劑盒陽性而D-D DOT 陰性，對于注重陰性排除試驗的D-二聚體檢測項目，這樣的結(jié)果顯示出D-D DOT更具臨床適用性。已上市的23種D-二聚體檢測試劑盒之間的比對評估，它們的 Spearman 等級相關(guān)系數(shù)在0.794-0.993 之間。而D-D DOT與NycoCard 的 S

34、pearman 系數(shù)為 0.87 ，說明其與國際知名試劑盒等效。以上三項臨床比對數(shù)據(jù)的統(tǒng)計指標(biāo)和對試劑盒基本性能的評價結(jié)果均顯示D-D DOT 完全能夠滿足臨床的需要。本文摘自：核心醫(yī)學(xué)期刊“檢驗醫(yī)學(xué)”2010年1月第1期D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）操作規(guī)程（SOP）一、項目名稱檢驗方法名稱D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）D-D DOT英文名：D-Dimer assay by DIGFA method二、方法學(xué)原理反應(yīng)原理為周相雙抗體夾心法免疫試驗。待測樣品中所含的D-二聚體，能為固相在膜上的 D-二聚體抗體特異性地捕獲，然后由另一個D-二聚體單抗-膠體金綴合物標(biāo)記，呈紅色斑點(diǎn)，斑點(diǎn)紅色強(qiáng)

35、度與樣品中D-二聚體濃度呈正比，可用 U2金標(biāo)斑點(diǎn)法定量讀數(shù)儀測定。、試劑品牌、規(guī)格、內(nèi)含物：包裝規(guī)格：20人份/盒D-二聚體定量檢測試劑盒（膠體金法）同份名稱主要活性成分及濃度數(shù)量1.反應(yīng)板D-二聚體抗體、致敏濃度 0.5-1.5mg/ml20塊2.封閉液1%牛血清白蛋白（BSA） , pH7.4 PBS 緩沖液1 x 3.0ml3.洗滌液pH7.4 PBS 緩沖液1 x 7.0ml4.金標(biāo)液凍干品D-二聚體單抗膠體金綴合物、1% BSA2X 1.1ml5.金標(biāo)液凍干品 復(fù)溶液雙蒸水，0.66% NaCl1 x 3.0ml表中溶液分別以0.5-1.5mg/ml疊氮鈉防腐四、儀器品牌、型號金標(biāo)

36、斑點(diǎn)法定量讀數(shù)儀Uppergold U2五、操作步驟1 .從冷藏處取出試劑盒，室溫至少平衡半小時，在 D-二聚體金標(biāo)液凍干品中，準(zhǔn)確加入 D-二聚體金標(biāo)凍干品復(fù)溶液1.1ml搖勻。2 .將D-二聚體反應(yīng)板平放于實驗臺，在反應(yīng)孔內(nèi)滴加2滴D-二聚體封閉液，待完全滲入。3 .使用潔凈吸頭準(zhǔn)確吸取100叱枸檬酸抗凝血漿，加到反應(yīng)板中，待完全滲入后，加 2滴D-二聚體洗滌液。4 .待洗滌液完全滲入，使用潔凈吸頭準(zhǔn)確加入D-二聚體膠體金溶液100仙l。5 .待完全滲入后，加4滴D-二聚體洗滌液。6 .立刻在U2金標(biāo)定量儀D-二聚體項目下測讀，測讀時間不宜超過 5分鐘。六、正常參考值本試劑盒推薦正常人的預(yù)期讀數(shù)應(yīng) 0.3 mg/L 。七、臨床意義本產(chǎn)品在Uppergold U2金標(biāo)斑點(diǎn)法定量讀數(shù)儀上可快速測定血漿中的纖維蛋白降解產(chǎn)物D-二聚體，是深靜脈血栓、肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)凝血的陰性排除試驗，屬即時檢驗 (POCT)類體外診斷試劑。檢測結(jié)果可在 3分鐘內(nèi)獲得，讀數(shù)范圍為0.1-5.0mg/L ,適用于醫(yī) 院門急診、重癥監(jiān)護(hù)病房等需快速測定 D-二聚體的場所。D-Dimer結(jié)果以D-二聚體濃度mg/L表達(dá)，如要用纖維蛋白原相當(dāng)單位(FEU)表示，則應(yīng)乘以2。D