2012專(zhuān)科植物組織培養(yǎng)試驗(yàn)

1、植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)室器具洗滌的工藝流程是什么洗凈的判定標(biāo)準(zhǔn)是什么工藝流程：浸泡f刷f沖洗f涮洗f枯燥f存放判定標(biāo)準(zhǔn)：凈水反復(fù)沖洗至管壁、瓶壁形成均勻水膜而無(wú)水珠成股流下 2簡(jiǎn)述組培實(shí)驗(yàn)室的組成局部.準(zhǔn)備間：用于配置培養(yǎng)基,貯存原材料、容器滅菌間：用于培養(yǎng)基的滅菌、冷卻接種間：分為緩沖間和接種室 ；用于接種培養(yǎng)室：用于植物組培物的培養(yǎng)3.簡(jiǎn)述無(wú)菌操作的技術(shù)要點(diǎn).要點(diǎn)：1、組培室消毒處理 2、超凈工作臺(tái)開(kāi)紫外燈照射1020min送風(fēng)3、嚴(yán)格消毒外植體4、已消毒的外植體接觸的所以工具,器血,包括空氣均須是無(wú)菌的.如何理解 y=m- an理解:Y-擴(kuò)繁數(shù)m-初始無(wú)菌系材料數(shù)量a-每次芽增值數(shù)n-繼

2、代次數(shù)5.簡(jiǎn)述污染率、枯死率和誘導(dǎo)率的計(jì)算方法.污染率=100%污染數(shù)/總接種數(shù)枯死率=100 %未叢生芽的/未污染的誘導(dǎo)率=100%有叢生芽的/未污染的6簡(jiǎn)述菊花快繁的技術(shù)路線(xiàn).技術(shù)路線(xiàn)：菊花嫩芽一J1-誘導(dǎo)叢生芽一J2-叢生芽增值一J3-生根一一再生根7菊花快繁實(shí)驗(yàn)中,在進(jìn)行生根培養(yǎng)時(shí),為什么要選擇1/2MS作為根本培養(yǎng)基原因：選擇1/2MS作為根本培養(yǎng)基,即降低了無(wú)機(jī)鹽的含量,降低了滲透壓,有利于牙系充培養(yǎng)基中吸水,促進(jìn)根的生長(zhǎng).8簡(jiǎn)述馬鈴薯脫毒的方法及原理 .方法：選擇品種和母株 一一獲取莖段-芽段消毒一一剝離莖尖接種 一一分化成苗-一保存 無(wú)毒試管苗-擴(kuò)繁或試管薯誘導(dǎo) 一一原種-生產(chǎn)

3、種原理：由于病毒在植株體內(nèi)分布不均勻,存在于根尖、莖尖局部病毒含量低,或無(wú)病毒,以 莖尖組織作為外植體,能獲得脫毒植株,供繁種,生產(chǎn)使用.9繼代培養(yǎng)的目的是什么植物組織培養(yǎng)物長(zhǎng)期生長(zhǎng)在原培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)會(huì)日漸停滯,以至死亡.將它切割、轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)基上,可以保持旺盛生長(zhǎng)勢(shì)頭,也能使其數(shù)量擴(kuò)增.10外植體消毒的一般程序菊花、馬鈴薯、油菜花藥三選一.消毒程序：菊花：幼苗一摘掉葉片-一流水沖洗10-30min 一 75%酒精泡30s 倒入廢液桶-0.1%升汞Hgcl2泡10min 倒入升汞回收瓶-無(wú)菌水洗三至五遍即可銀杏：種子一一剝?nèi)べ|(zhì)中種皮 一-75%酒精泡30s倒入廢液桶-0.1%升汞Hgcl2

4、泡10min 倒入升汞回收瓶-無(wú)菌水洗三至五遍即可馬鈴薯：芽一流水沖洗1030min-75%酒精泡30s倒入廢液桶一一0.1%升汞Hgcl2泡10min 倒入升汞回收瓶-無(wú)菌水洗三至五遍即可11簡(jiǎn)述配方1/2MS+NAA0.1+蔗糖3%+瓊脂0.7%, pH5.8的含義及配1L的制備方法.含義：1/2MS:降低了無(wú)機(jī)鹽的含量,降低了滲透壓,有利于牙系充培養(yǎng)基中吸水促進(jìn)根 的生長(zhǎng)NAA0.1 :即BA/NAA=Ni=0 , 根據(jù)植物生長(zhǎng)激素 CTK/AUK 生長(zhǎng)調(diào)控理論,Ni值越 小,越有利于根的生長(zhǎng).配置方法：潔凈的色搪瓷杯,取蒸儲(chǔ)水 700ml,待冒白氣參加 7g瓊脂攪拌至融化后,加30g蔗

5、糖溶解移取參加母液1/2MS:用移液管分別量取MS I25ml、MS n 5ml、MSm5ml、MSIV 5ml、MSV 5ml除MS I量減半外其他不減半不影響實(shí)驗(yàn),取 1mlNAA參加其中.將上述溶液定容至 1000ml調(diào)節(jié)pH至5.8趁熱分裝,包扎封口高壓滅菌鍋滅菌15-20min,降溫冷卻,備用.12 簡(jiǎn)述配 500mlMS+BA0.5+NAA0.2+蔗糖 3%+瓊月旨 0.7%+PH5.6 的過(guò)程.配置過(guò)程：潔凈的色搪瓷杯,取蒸儲(chǔ)水300ml,待冒白氣參加3.5g 7g >0.5瓊脂攪拌至融化后,加15g蔗糖溶解移取參加母液：用移液管分別量取MS I25ml、MS nMSV各5

6、ml 除MS I量減半外其他不減半不影響實(shí)驗(yàn),分別取2.5mlBA、lmlNAA參加其中.將上述溶液定容至 500ml調(diào)節(jié)pH至5.8趁熱分裝,包扎封口高壓滅菌鍋滅菌15-20min,降溫冷卻,備用.13簡(jiǎn)述馬鈴薯脫毒的效果的檢測(cè)方法.1 .指示植物法2.血清學(xué)檢測(cè) 3.電鏡檢14組培中外植體污染原因及預(yù)防舉措.污染途徑：1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作不標(biāo)準(zhǔn) 4.環(huán)境不清潔預(yù)防舉措：1,預(yù)防外植體帶菌：選擇好外植體采摘時(shí)期和采摘部位.：室外或無(wú)菌條件下進(jìn)行預(yù)培養(yǎng).：外植體嚴(yán)格滅菌.2,保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌.3,操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程.4,保證接種與培養(yǎng)環(huán)

7、境清潔.15蔗糖在培養(yǎng)基中的作用是什么為細(xì)胞提供合成新化合物的碳骨架,為細(xì)胞的呼吸代謝提供底物與能源,還可以維持一定的滲透壓.16.馬鈴薯結(jié)薯培養(yǎng)基中參加活性炭的目的是什么蔗糖含量高達(dá)80g/L又是為何目的：吸附培養(yǎng)物分泌出有害物質(zhì)原因：1、提升滲透壓降低培養(yǎng)基的滲透勢(shì),減少馬鈴薯水分獲取,以防產(chǎn)生玻璃化苗 2、馬鈴薯的主要成分為淀粉故其生長(zhǎng)需要大量的糖類(lèi)物質(zhì)17.某組培公司方案擴(kuò)繁非洲菊,擬用配方為：MS+BA2.0+NAA0 . 1 ,年方案生產(chǎn)試管苗 12萬(wàn)支,請(qǐng)計(jì)算出擬購(gòu) BA的用量單位：g.注：每升培養(yǎng)基可以分裝60支試管解：BA2.0即每L要使用2mg ;而每L可以分裝60支試管故需要120000/60=2000L ;因此至少需擬購(gòu) 2000 >2.0/1000g=4g的BA.某公司經(jīng)初步實(shí)驗(yàn)說(shuō)明：玫瑰每四周擴(kuò)繁一次,增殖倍數(shù)為4,現(xiàn)有玫瑰試管苗200支,請(qǐng)計(jì)算該公司年產(chǎn)玫瑰苗的數(shù)量.;擴(kuò)繁數(shù)；一一-；初始無(wú)菌系材料數(shù)量=200;-;每次芽增值數(shù)=4; n-繼代次數(shù)=52/4=13-;413134. 22 億在對(duì)油菜花藥進(jìn)行單倍體誘導(dǎo)中,應(yīng)選什么時(shí)期的材料作為外植體處在該時(shí)期的油菜花蕾有何特