時(shí)間分辨熒光、磷光法在手性分子識(shí)別中的應(yīng)用研究

1、yiT論女第表&贏時(shí)間分辨熒光、磷光法在手性分子識(shí)別中的應(yīng)用研究【摘要】：第一章：本章簡(jiǎn)述了磷光分析法尤其是室溫磷光法的歷史 和進(jìn)展情況，包括它在我國(guó)的發(fā)展，同時(shí)詳細(xì)介紹了各種室溫磷光法 及其機(jī)理，并展望了室溫磷光的未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)。第二章：本章簡(jiǎn)要介 紹了兩種抗瘧藥一一奎寧和奎尼丁性狀、 藥理及在人體內(nèi)的代謝情 況， 以及研究現(xiàn)狀。第三章：本章建立了奎寧和奎尼丁的濾紙基質(zhì)室 溫磷光法(PS-RTP),詳細(xì)討論了它們的磷光光譜特性。研究表明：奎 寧和奎尼丁的濾紙基質(zhì)室溫磷光光譜基本相近，它們的兩個(gè)激發(fā)波長(zhǎng) 均為 298nm/322nm ,而發(fā)射波長(zhǎng)則分別為 513nm/540nm 和 51

2、1 nm/539nm。pb(2-)、Tl+對(duì)它們有重原子微擾作用，當(dāng) Pb(Ac)_2 1.5mo時(shí)即可誘導(dǎo)出強(qiáng)切穩(wěn)定的PS-RTP信號(hào)。酸度實(shí)驗(yàn)表明：酸度對(duì)奎寧和奎尼丁有一定的影響， 在 pH=7-10 范圍內(nèi)都有PS-RTP,而且在酸性條件下 RTP 則發(fā)生猝滅。此外，本章也對(duì)影響PS-RTP 的溫度、干燥時(shí)間等條件進(jìn)行了考察?？鼘幒涂岫〉木€性 范圍分別為 5.44-709.08ng/spot 和 4.10-786.54ng/spo,檢出限分別為0.53ng/spot 和 0.14ng/spoto 將 PS-RTP 法用于藥品中奎寧和奎尼丁的 測(cè)定，測(cè)得的含量與標(biāo)示量基本吻合，村準(zhǔn)回收實(shí)

3、驗(yàn)表明奎寧和奎尼 丁的回收率在 95%-107%之間。第四章：本章在以Whatma nN 0.40濾紙為基質(zhì)，用 Pb(Ac)_2 為重原子微擾劑建立的測(cè)定痕量奎寧和奎 尼丁的 PS-RTP 分析法的基礎(chǔ)上，以時(shí)間分辨室溫磷光技術(shù)對(duì)奎寧和 奎尼丁進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)表明：奎寧和奎尼丁的PS-RTP 壽命分別為yiT論女第表站家2066.41 g 和 2155.86。重原子濃度，酸度，干燥條件等都對(duì)它們的 RTP壽命有一定的影響，但對(duì)它們的壽命差異(影)響不大。而各種 手性識(shí)別劑，如(+)-酒石酸，膽酸鈉，環(huán)糊精等的加入則可有效地改 變它們之間的PS-RTP 壽命差異，從而對(duì)它們進(jìn)行有效的辨別。其中

4、， (+)-酒石酸對(duì)它們的手性辨別能力最強(qiáng)。這可能是由于(+)-酒石酸中的 羥基能和濾紙之間形成氫鍵，使其能更好地剛性化，并為它們提供一 個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的手性微環(huán)境。第五章：本章建立了基于 Na_2SO_2 化學(xué) 除氧膠束增穩(wěn)室溫磷光法測(cè)定奎寧和奎尼丁的新方法。在陰離子表面 活性劑 SDS 介質(zhì)中，以TINO_3 為重原子微擾劑，研究了奎寧和奎 尼丁的室溫磷光特性。詳細(xì)探討了重原子濃度、酸度、除氧劑用量等 環(huán)境因素對(duì) RTP 發(fā)射的影響?？鼘幒涂岫〉木€性范圍分別為 3Xl0(-6)-8 1E(-5)mol/L 和 1/0(-6)-81%(-5)mol/L，檢出限分別 為 3.99X0(-7)mo

5、l/L 和 1.68 10(-7)mol/L。將 PS-RTP 法用于藥品中 奎寧和奎尼丁的測(cè)定，測(cè)得的含量與標(biāo)示量基本吻合，標(biāo)準(zhǔn)回收實(shí)驗(yàn) 表明奎寧和奎尼丁的回收率在 90%-106%之間。山西大字 2003 屆碩 士研究生學(xué)位論文第六章：木章中， 作者對(duì)， 診響 MS RTP 壽命 的多襯田素傲了詳細(xì)研究，如重原子濃度，膠束濃度，酸度，除氧劑 濃度等，并對(duì)微環(huán)境注質(zhì)進(jìn)行一 j 對(duì)比研究。雖然實(shí)驗(yàn)條件的改變 對(duì)QN和 QD的RTP壽命有一定的影響， 但不能對(duì)它們起到手性識(shí)別 的作用。因此，在時(shí)間分辨磷光的基礎(chǔ)上，通過(guò)加入不同的手性選擇 劑，如(+) 10 一樟腦磺酸，干草酸胺鹽，毛地黃皂營(yíng)，(

6、+) 酒石酸， 脫氧膽酸鈉，BSA, (R) 一 (一 )一 N 一(3, 5 一二硝基節(jié)基)一 Q 一苯y(tǒng)iT論女第表站家基昔氨酸等對(duì) QN 和 QD 進(jìn)行手性識(shí)別。實(shí)驗(yàn)表明，手性識(shí)別劑的加 入能在一定程度上碎滅 QN 和 QD 的 RTP 信號(hào)，同時(shí)也使得其盯 P 壽命減小，其衰減過(guò)程遵循 5tern-Volmer 動(dòng)力學(xué)關(guān)系， 因此我們求得 了一系列常數(shù)，成功地實(shí)現(xiàn)了對(duì) QN 和 QD 的手性識(shí)別。其中，（+） 一 1） 一樟腦磺酸，毛地黃皂首，脫氧膽酸鈉，甘草酸胺鹽等對(duì)它們 有較好的識(shí)別能力。它們對(duì) QN 和 QD 的識(shí)別能力大小依次為：毛地 黃皂普，甘草酸胺鹽脫氧膽酸鈉）（+） 一

7、10-樟腦磺酸減十）一酒石酸， BSA，限）一一少戒一（3，乃一二硝基節(jié)基）一。一苯基首氨酸。第 七章:本章基于時(shí)間分辨熒光法對(duì) O 和卜色氮酸的手性識(shí)別進(jìn)行了 研究。該法是基于不同介質(zhì)如 BSA，CDS 和膽酸鹽中，D 一和 L 一 色氨酸對(duì)花的碎滅速率不同根據(jù) Stem 一 VOlmer 動(dòng)力學(xué)碎滅方程， 求得了一系列碎滅速率常數(shù)輻，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在BSA 和膽酸鹽中可以對(duì)。一和 L 一色氨酸進(jìn)行較好的手性識(shí)別（用味舊一 T 甲）氣（L 一T 甲）表示），同時(shí)進(jìn)一步提出了 D 一和 L 一色氨酸在不同介質(zhì)中對(duì)花 的碎滅機(jī)理。熒光壽命的差異實(shí)驗(yàn)表明：在 BSA 和 Y CD 的混合介 質(zhì)中，

8、D 一和 L 一色氨酸的壽命差異最大為 558ns,壽命差異的百分 率為28.50%?！娟P(guān)鍵詞】：【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)【學(xué)位級(jí)別】：碩士【學(xué)位授予年份】：2003【分類(lèi)號(hào)】：0656【目錄】 ： 中文摘要9-11英文摘要11-13第一章室溫磷光發(fā)展簡(jiǎn)述 13-261前言 132 室溫磷光的歷史和發(fā)13-212.1 低溫磷光分析法13-142.2 室溫磷光分析法 14-202.2.1 固體基質(zhì)室溫磷光法 152.2.2 流 體室溫磷光 15-192.2.2.1 膠束增穩(wěn)室溫磷光法 15-162.2.2.2 環(huán)糊精誘 導(dǎo)室溫磷光法 16-172.2.2.3敏化/猝滅室溫磷光法 172.2.2

9、.4膠態(tài)微晶室 溫磷光法 172.2.2.5 微乳狀液增穩(wěn)室溫磷光法 17-182.2.2.6 微囊增穩(wěn)室 溫磷光法182.2.2.7混合有序介質(zhì)中室溫磷光法 182.2.2.8無(wú)保護(hù)介質(zhì) 流體室溫磷光18-192.2.3 室溫磷光的研究參數(shù)及手段 19-202.2.3.1 磷 光光譜 192.2.3.2磷光壽命 19-202.2.3.3 磷光偏振 202.2.3.4 磷光探針技 術(shù) 202.3 室溫磷光分析法在我國(guó)的發(fā)展和應(yīng)用研究20-213 室溫磷光的研究現(xiàn)狀 21-22 參考文獻(xiàn) 22-26 第二章硫酸奎寧和奎尼丁簡(jiǎn)介 26-301 歷史背景 262 性狀、藥理及應(yīng)用 26-273 藥代

10、動(dòng)力學(xué) 27-284 研究現(xiàn)狀 28-29參考文獻(xiàn)29-30第三章硫酸奎寧和奎尼丁的濾紙基質(zhì)室溫磷光 光譜研究譜30-371 前言 302 實(shí)驗(yàn)部分 30-312.1 儀器和試劑 30-312.2 實(shí)驗(yàn)步驟312.2.1PS-RTP 光譜的測(cè)量 312.2.2 藥片中硫酸奎寧和奎尼 丁的測(cè)定 313結(jié)果與討論 31-353.1 條件確定 31-343.1.1 硫酸奎寧和奎 尼丁的 PS-RTP光譜 31-323.1.2 濾紙基質(zhì)的選擇 323.1.3 酸度效應(yīng)32- 333.1.4 重原子的選擇 333.1.5 預(yù)烘烤時(shí)間、烘烤時(shí)間測(cè)定33- 343.1.6PS-RTP 穩(wěn)定性考察343.1.

11、7 分析特性 343.2 方法應(yīng)用34- 353.2.1 硫酸奎寧片和硫酸奎尼丁片中的奎寧和奎尼丁的測(cè)定C 易發(fā)表用yiT論女第表匸涼34-353 22 標(biāo)準(zhǔn)回收率 35 結(jié)論 35 參考文獻(xiàn) 35-37 第四章時(shí)間分辨 PS-RTP法對(duì)硫酸奎寧與奎尼丁的手性識(shí)別研究37-481 前言 372 實(shí)驗(yàn)部分 37-382.1 儀器和試劑 37-382.2PS-RTP 壽命的測(cè)量 383 結(jié)果與討 論38-433.1QN 和 QD 壽命測(cè)量 383.2 影響壽命的因素 38-39321 重原 子濃度的影響 38-393.2.2pH 的影響 393.2.3 干燥條件的影響 393.3 手 性識(shí)別劑對(duì)

12、QN和 QD 的手性辨別 39-43331(+)-10-樟腦磺酸，(-)-10- 樟腦磺酸，(+)-酒石酸的影響 40-423.3.2 手性表面活性劑的影響 423.2.3 環(huán)糊精及 D-(+)-葡萄糖的影響42-434結(jié)論43參考文獻(xiàn)43-48 第五章硫酸奎寧和奎尼丁的膠束增穩(wěn)室溫磷光法研究48-551 前言482 實(shí)驗(yàn)部分 48-502.1 儀器和試劑 48-492.2 實(shí)驗(yàn)步驟49- 502.2.1MS-RTP 測(cè)量 492.2.2 藥片中硫酸奎寧和奎尼丁的測(cè)定49- 503 結(jié)果與討論 50-533.1 硫酸奎寧和奎尼丁的發(fā)光光譜 503.2 環(huán)境 因素對(duì)硫酸奎寧和奎尼丁磷光行為的影響

13、 50-523.2.仃 INO_3 的影響50- 513.2.2SDS 的影響 513.2.3pH 的影響 513.2.4Na_2SO_3 用量的影響51- 523.3 分析特性 523.4 方法應(yīng)用 52-533.4.1 硫酸奎寧片和硫酸奎尼 丁片中的奎寧和奎尼丁的測(cè)定 523.4.2 標(biāo)準(zhǔn)回收率 52-53 結(jié)論 53 參考 文獻(xiàn) 53-55第六章時(shí)間分辨 MS-RTP 法在手性對(duì)映體識(shí)別中的應(yīng)用研 究 55-671 前言55-562 實(shí)驗(yàn)部分 56-572.1 儀器和試劑 562.2 實(shí)驗(yàn)步驟56- 573 結(jié)果與討論 57-643.1 硫酸奎寧和奎尼丁的 MS-RTP 壽命測(cè)定 573

14、.2環(huán)境因素對(duì)硫酸奎寧和奎尼丁磷光行為的影響57- 603.2.1TINO_3 的影響 583.2.2SDS 用量的影響 58-593.2.3pH 的影 響593.2.4Na_2SO_3 用量的影響 59-603.3 基于形成離子對(duì)的手性分離C 易發(fā)表用yiT論女第表匸冢60- 613.4 手性表面活性劑對(duì) QN 和 QD 磷光壽命差別的影響61- 633.5BSA 和對(duì)(R)-(-)-N-(3 , 5-dinitrobenzoyl)-aphenylglycineQN 和 QD磷光壽命差別的影響63-644結(jié)論64-65參考文獻(xiàn)65-67第七章 ChiralDiscriminatio no f

15、D-a ndL-Tryptopha nbyTimeResolvedFluoresce nee Technique67-791l nductio n67-682Experime ntalSectio n68-692.1Apparatu sandReage nts682.2Procedures68-693Resultsa ndDissussio n69-773.1Studyon thechiraldiscrimi natio nofL-Trpa ndD-Trpi nBSAmedium69-723.1.1Studyon themicroe nviromc ntalpropertiesofp yren

16、ein theBSAmedium693.1.2Chiraldiscrimi natio no fL-Trpa ndD-Trpi nBSAmedium69-723.2Chiraldiscrimin atio no fL-Trpa ndD-Trpi ncyclodextri nsystem72-743.2.1Study on themicroenviromentalpropertiesofpyrenein -CDmediUm723.2.2Chiraldiscriminati onofL-Trpa ndD-Trpi ncyclodextri nsystem72-743.3Chiraldiscrimi natio nofL-Trpa ndD-Trpi nbilesaltmedia74-753.3.1Study on themicroe nvirome ntalpropertiesofp yrenein bilesaltmediamedium74-753.3.2Chiraldiscrim in ati onofL-Trpa ndD-Trpi nbilesa