苯酚硫酸法測定多糖

1、苯酚一硫酸法測定黨參總糖1材料與方法1. 1材料與試劑，儀器1.1.1材料、試劑黨參(肉黨、普通紋黨、產于中寨的紋黨)；95%乙醇；苯酚；濃硫酸均為分析純。1.1.2儀器與設備2400分析天平，101A型電熱鼓風干燥箱，型可調式電熱板，電熱 恒溫水浴鍋，5200H超聲清洗器，9100紫外-可見分光光度計1.2方法1.2.2供試品溶液的制備取黨參粉末2g,置圓底燒瓶中，加95%乙醇3次(20.20.20 )每 次2h,過濾，蒸干乙醇，殘渣用水溶解，在電熱板上加熱，提取3次(50.50.50 ),每次2h,過濾，濾液置于50容量瓶中，加蒸餾水至刻 度搖勻。1.2.3標準溶液的配制精密稱取105 C

2、干燥至恒重的無水葡萄糖10置于100容量瓶中， 加水溶解并稀釋至刻度搖勻，得0.1 /的儲備溶液，備用。1.2.3 5 %苯酚溶液的制備精確量取6.3 80%的苯酚溶液轉移至100容量瓶中，加蒸餾水 至刻度，搖勻后置于棕色試劑瓶中，備用。 (實驗室苯酚為師姐配好 的80%的溶液，避光密封保存于冰箱中，用時水浴加熱使其成為透亮 的溶液)1.2.4標準曲線的制備精確吸取葡萄糖標準液0、1、2、3、4、5、6 ,分別置于10容 量瓶中，以蒸餾水補至10搖勻，依次吸取2加入試管中，加入苯酚 液1.0和濃硫酸5.0，混勻，在室溫放置30后，于波長490處測定 吸光度值。以吸光度值為縱坐標，葡萄糖濃度為橫

3、坐標繪制標準曲線。-2-31(10*10 *1/10=10*1010=20.30.40.50.60 )1.2.5樣品的測定準確吸取供試品溶液0.1加水定容至10,精確吸取此稀釋液2 于試管中，按標準曲線制備的方法測定吸光度值，并根據(jù)回歸方程， 求得其濃度，計算樣品中總糖的含量。(黨參溶液的濃度 =2/50*0.1/10=1/2500 1=1/2.5 1=40011)2結果與分析2.1標準曲線標準曲線回歸方程建立用紫外分光光度計，在 4 9 0 nm 的波長處測定吸光度，以試劑空白參比實驗。結果見表 1標液體積()02468標液多糖含0481216量(Jg)吸光度00.1710.3790.666

4、0.9920.0620.0542 ,=0.9826，以吸光度為縱坐標葡萄糖濃度為橫坐標繪制標準曲線見圖系列1線性(系列1)2.2樣品中多糖含量測定結果按上述多糖含量測定方法測的樣品的吸光度， 并按標準曲線測得 的多糖含量占藥材總量如下表。肉黨1肉黨2紋黨1紋黨2中寨紋黨1中寨紋黨2吸光度0.3620.4870.6220.5790.8740.624占藥材含量百分比0.841.091.361.251.371.35(%)上圖所得的標準曲線，線性不好，按此曲線藥材中所得糖含量也 不高，并且當標準溶液液為10時，測不出吸光度，所以改變標液濃 度濃度，取葡萄糖標準液 0、1、2、3、4、5、6按上述方法重做， 所得的吸光如標液體積()0123456標液多糖024681012含量(Jg)吸光度00.1980.5670.8021.0021.3911.5790.1350.0185 , r2=0.9937，以吸光度為縱坐標葡萄糖濃度為橫坐標繪制標準曲線見圖-0.2.864.21.864.2O .1111 0000度光吸糖含量（Jg）線性*系列1系列樣品中多糖含量測定結果按上述多糖含量測定方法測的樣品的吸光度， 并按標準曲線測得 的多糖含量占藥材總量如下表。肉黨1肉黨2紋黨1紋黨2