實(shí)驗(yàn)四 家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)

1、實(shí)驗(yàn)四 家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)【目的要求】1、學(xué)習(xí)直接測(cè)定和記錄家兔動(dòng)脈血壓的急性實(shí)驗(yàn)方法2、觀察神經(jīng)，體液因素對(duì)心血管活動(dòng)的影響【基本原理】在生理情況下，人和其它哺乳動(dòng)物的血壓處于相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)，這種相對(duì)穩(wěn)定是通過(guò)神經(jīng)和體液因素的調(diào)節(jié)而實(shí)現(xiàn)的，其中以頸動(dòng)脈竇主動(dòng)脈弓壓力感受性反射尤為重要。此反射既可在血壓升高時(shí)降壓，又可在血壓降低時(shí)升壓，反射的傳入神經(jīng)為主動(dòng)脈神經(jīng)與竇神經(jīng)。家兔的主動(dòng)脈神經(jīng)為獨(dú)立的一條神經(jīng)，也稱減壓神經(jīng)，易于分離和觀察其作用。在人、犬等動(dòng)物，主動(dòng)脈神經(jīng)與迷走神經(jīng)混為一條，不能分離。反射的傳出神經(jīng)為心交感神經(jīng)、心迷走神經(jīng)和交感縮血管纖維，心交感神經(jīng)興奮，其末梢釋放去甲腎上腺

2、素，去甲腎上腺素與心肌細(xì)胞膜上的b受體結(jié)合，引起心臟正性的變時(shí)變力變傳導(dǎo)作用，心迷走神經(jīng)興奮，其末梢釋放乙酰膽堿，乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上的M受體結(jié)合，引起心臟負(fù)性的變時(shí)變力變傳導(dǎo)作用，交感縮血管纖維興奮時(shí)釋放去甲腎上腺素，后者與血管平滑肌細(xì)胞的a-受體結(jié)合引起阻力血管的收縮。 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用液壓傳遞系統(tǒng)直接測(cè)定動(dòng)脈血壓。即由動(dòng)脈插管、測(cè)壓管道及壓力換能器相互連通，其內(nèi)充滿抗凝液體，構(gòu)成液壓傳遞系統(tǒng)。將動(dòng)脈套管插入動(dòng)脈內(nèi)，動(dòng)脈內(nèi)的壓力及其變化，可通過(guò)密閉的液壓傳遞系統(tǒng)傳遞壓力，通過(guò)壓力換能器將壓力變化轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，用微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)記錄動(dòng)脈血壓變化曲線。 【預(yù)習(xí)要求】 1儀器設(shè)備知識(shí)：RM6

3、240微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)的使用方法。 2實(shí)驗(yàn)理論 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物知識(shí)參見第三章第一節(jié) 生理科學(xué)實(shí)驗(yàn)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類；第四章第一節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作、第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)；統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)參見第5章第四節(jié) 常用統(tǒng)計(jì)指標(biāo)和方法；生理學(xué)教材有關(guān)動(dòng)脈血壓的調(diào)節(jié)。檢索全文數(shù)據(jù)庫(kù)中的相關(guān)研究論文，檢索方法參見第五章第五節(jié)。 3預(yù)繪制實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄表格和統(tǒng)計(jì)表格。 【材料】 家兔，動(dòng)脈插管，血壓換能器，生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，200g/L氨基甲酸乙酯，1000U/ml的肝素，0.1g/L去甲腎上腺素，10-2g/L乙酰膽堿。 【動(dòng)物與器械】 家兔、麻醉箱，兔手術(shù)臺(tái)，常用手術(shù)器械，止血鉗（4把）、眼科鑷、支架、

4、雙凹夾、壓力傳感器，保護(hù)電極，氣管插管，動(dòng)脈插管、動(dòng)脈夾、三通管、注射器（1ml、5ml、20ml），乳膠管，20%25%氨基甲酸乙酯、肝素（200U/ml），腎上腺素（1：5000），乙酰膽堿（1：10000），紗布、棉球、生理鹽水，生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)【方法與步驟】 1實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接及參數(shù)設(shè)置 （1）頸動(dòng)脈血壓測(cè)量記錄裝置。將血壓換能器固定于鐵支柱上，其位置應(yīng)與心臟在同一平面。 （2）壓力換能器輸出線接微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng)第4通道（亦可選擇其它通道）。（3）微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng)參數(shù)設(shè)置： RM6240系統(tǒng)：點(diǎn)擊“實(shí)驗(yàn)”菜單，選擇“循環(huán)”或“自定義實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”菜單中的“兔動(dòng)脈血壓調(diào)節(jié)”。系統(tǒng)進(jìn)入該實(shí)

5、驗(yàn)信號(hào)記錄狀態(tài)。儀器參數(shù)：4通道時(shí)間常數(shù)為直流，濾波頻率100Hz，靈敏度12Kpa，采樣頻率800Hz，掃描速度 500ms/div。連續(xù)單刺激方式，刺激強(qiáng)度510V，刺激波寬2ms，刺激頻率30 Hz。 2、實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備 打開計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)，接通壓力傳感器。從顯示器的“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”中找出“家兔血壓的調(diào)節(jié)”實(shí)驗(yàn)。 3、連通液導(dǎo)系統(tǒng)并制壓 4、動(dòng)物準(zhǔn)備（1）麻醉：家兔稱重，由耳緣緩慢注射20氨基甲酸乙脂5mlkg。（2）固定：將家兔背位固定在手術(shù)臺(tái)上，用剪毛剪將頸部和劍突部的被毛剪去即可手術(shù)。（3）手術(shù)：沿頸部正中線作一長(zhǎng)57厘米的皮膚切口，用止血鉗分離皮下結(jié)締組織，再向下分離氣管和血管神經(jīng)束

6、頸部神經(jīng)與頸總動(dòng)脈位于氣管外側(cè)，用止血鉗先將血管神經(jīng)束腹面的肌肉和結(jié)締組織分離，再用左手拇指和食指輕輕捏住分離的肌肉和皮膚，稍向外翻，即可將血管神經(jīng)束翻于食指之上，然后用彎頭止血鉗分離頸動(dòng)脈約厘米，穿線備用（注意：再分離頸總動(dòng)脈及穿線時(shí)，切勿損傷與其伴行的神經(jīng)；在頸總動(dòng)脈近甲狀腺處有甲狀腺前動(dòng)脈，分離時(shí)應(yīng)稍靠其下，以免損傷）用同樣方法分離另一側(cè)頸總動(dòng)脈，穿線備用輕輕提起右側(cè)頸總動(dòng)脈下的備用線，即可清楚看到3條粗細(xì)不同的神經(jīng)，迷走神經(jīng)最粗，白色，一般位于外側(cè)，易識(shí)別；交感神經(jīng)較細(xì)，略顯灰色，一般位于內(nèi)側(cè)；減壓神經(jīng)最細(xì)，常與交感神經(jīng)貼在一起識(shí)別準(zhǔn)確后，用玻璃分針縱向小分離順序由細(xì)到粗，神經(jīng)分離2厘

7、米，即可穿線備用。（4）氣管插管法：用止血鉗由頸部正中線將肌肉結(jié)締組織分離，暴露出氣管在氣管下方用鑷子穿一線，打一活結(jié)，在喉頭下23厘米處的氣管上作一“”形切口，將氣管插管向心方向插入氣管中并用線結(jié)扎，并將多余的線系在氣管插管的分叉處固定，以免滑脫。（5）動(dòng)脈插管法：在分離出來(lái)后右側(cè)頸動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端（盡量靠近頭端）用棉線將動(dòng)脈結(jié)扎，在頸總動(dòng)脈近心端用動(dòng)脈夾將動(dòng)脈夾住與兩者之間另穿一線，打一活結(jié)備用在遠(yuǎn)心端結(jié)扎線下方用剪膜剪在動(dòng)脈上作一斜形切口，向心臟方向插入動(dòng)脈插管，用備用線將插管尖端固定于動(dòng)脈管內(nèi)，并將余線結(jié)扎于插管的側(cè)枝上以防滑脫注意插管與血管方向一致，防止扭轉(zhuǎn)或插管尖端刺破動(dòng)脈管壁。5、實(shí)

8、驗(yàn)觀察與記錄：實(shí)驗(yàn)裝置準(zhǔn)備妥當(dāng)，手術(shù)完畢后，慢慢放開動(dòng)脈夾，即可看到少量血自頸總動(dòng)脈沖向動(dòng)脈插管，隨后可按照以下實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行觀察與描記。（1）記錄正常血壓曲線。調(diào)節(jié)掃描速度與增益，可以明顯地觀察的心室射血與主動(dòng)脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數(shù)。有時(shí)可以觀察到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級(jí)波，呼吸波為二級(jí)波。然后將掃描速度調(diào)慢。（2）輕輕提起對(duì)側(cè)完好頸總動(dòng)脈的備用線，阻斷動(dòng)脈內(nèi)血流，觀察并記錄血壓的變化。（3）用手指壓迫頸內(nèi)動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈的分叉處，觀察血壓的變化。（4）刺激減壓神經(jīng)用中等強(qiáng)度的電刺激通過(guò)保護(hù)電極刺激減壓神經(jīng)，記錄血壓變化，然后進(jìn)行雙結(jié)扎剪斷，再分別刺激中樞端和外周端。記

9、錄血壓變化。 （5）用同樣強(qiáng)度刺激迷走神經(jīng)，雙結(jié)扎剪斷一側(cè)迷走神經(jīng)分別刺中樞端和外周端，記血壓變化再結(jié)扎并剪斷另一側(cè)迷左神經(jīng)，并觀察對(duì)比剪斷迷走神經(jīng)，前后呼吸頻率與深度的變化（6）耳緣注射腎上腺素0.20.3ml，記錄BP變化（7）耳緣注射乙酰膽堿0.20.3ml，記錄BP變化6、整理實(shí)驗(yàn)記錄，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果打印?！咀⒁馐马?xiàng)】1、每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)后，需將血壓基本恢復(fù)后，再進(jìn)行下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)2、隨時(shí)注意插管位置，特別在掙扎時(shí)，避免扭轉(zhuǎn)而阻塞血流或刺破血管3、隨時(shí)注意動(dòng)物麻醉情況，若掙扎厲害時(shí)可補(bǔ)少量麻醉劑兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：     實(shí)驗(yàn)器械

10、和藥品：、血壓換能器、塑料動(dòng)脈插管、試管夾、雙凹夾、鐵支柱、動(dòng)脈夾、三通管、保護(hù)電極、兔手術(shù)臺(tái)、哺乳動(dòng)物手術(shù)器械、照明燈、注射器（1毫升、2毫升、10毫升）、有色絲線、紗布、棉花、20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素(或5%檸檬酸鈉)0.01%腎上腺素、0.01%去甲腎上腺素。注意：動(dòng)脈插管稍長(zhǎng)。MedLab系統(tǒng)二、理論復(fù)習(xí)：     血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)。三、參數(shù)設(shè)置：（一）RM6240系統(tǒng)：點(diǎn)擊“實(shí)驗(yàn)”菜單，選擇“循環(huán)”或“自定義實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”菜單中的“兔動(dòng)脈血壓調(diào)節(jié)”。系統(tǒng)進(jìn)入該實(shí)驗(yàn)信號(hào)記錄狀態(tài)。儀器參數(shù)：4通道時(shí)間常數(shù)為直流，濾波頻率100Hz，

11、靈敏度12Kpa，采樣頻率800Hz，掃描速度 500ms/div。連續(xù)單刺激方式，刺激強(qiáng)度510V，刺激波寬2ms，刺激頻率30 Hz。（二）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.正常血壓曲線。2.夾閉右側(cè)頸總動(dòng)脈。3.刺激減壓神經(jīng)：（1）刺激完整減壓神經(jīng) （2）刺激減壓神經(jīng)中樞端  （3）刺激減壓神經(jīng)外周端。4.刺激迷走神經(jīng)外周端。（三）注意事項(xiàng)：1.分離減壓神經(jīng)注意：減壓神經(jīng)要從向心端開始往頭端分離，避免損傷神經(jīng)，分離時(shí)不使神經(jīng)上帶有結(jié)締組織膜，分離后滴加生理鹽水以防干燥，穿2根線備用。2.連接儀器：注意避免動(dòng)脈插管滑出。3.夾閉頸總動(dòng)脈時(shí)勿牽拉動(dòng)脈（夾閉，血壓增高；牽拉，血壓下降）。4.刺激

12、減壓神經(jīng)，如神經(jīng)損傷，向頭端移動(dòng)（與減壓神經(jīng)放電移動(dòng)方向相反）。5.刺激右側(cè)迷走神經(jīng)末梢端，血壓.心率變化更為明顯。三、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求：（10分）1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果：    各種影響因素引起動(dòng)脈血壓變化曲線圖。（不要求觀察定量變化）2.實(shí)驗(yàn)討論：（各1分）1）夾閉頸總動(dòng)脈，血壓升高：夾閉頸總動(dòng)脈頸動(dòng)脈竇血壓下降頸動(dòng)脈竇壓力感受器受到刺激減弱竇神經(jīng)傳入沖動(dòng)   心迷走中樞（抑制）迷走神經(jīng)傳出沖動(dòng)減少心跳加快.加強(qiáng)心輸出量增多         &#

13、160;                                                 &#

14、160;             減少心交感中樞（興奮）                        小靜脈收縮回心血量增多 血壓升高交感神經(jīng)傳出沖動(dòng)增多                    交感縮血管中樞（興奮）                    小動(dòng)脈收縮外周阻力增大 2）刺激完整減壓神經(jīng)及其中樞端均可引起血壓下降，而刺激該神經(jīng)外周端基本不變：兔減壓神