BOD5檢測(cè)方法

1、B0D5 檢測(cè)方法一、測(cè)定方法碘量法二、方法依據(jù)生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范（2001）三、測(cè)定范圍適用于測(cè)定飲用水源水中的生化需氧量（BOD5）。水樣呈酸性或含苛性堿，余氯、亞硝酸鹽、亞鐵鹽、硫化物及某些有毒物質(zhì)對(duì)測(cè)定有干擾，應(yīng)分別處理后測(cè)定。四、測(cè)定原理生化需氧量（BOD5）是指在有氧條件下，微生物分解水中有機(jī)物的生物化學(xué)過程所需溶解氧的量。取原水或經(jīng)過稀釋的水樣,使其中含足夠的溶解氧，將該樣品同時(shí)分為兩份，一份測(cè)定當(dāng)日溶解氧的質(zhì)量濃度，而將另一份放入20C培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)五天后再測(cè)其溶解氧的質(zhì)量濃度，兩者之差即為五日生化需氧量。五、試劑1、氯化鈣溶液（27.5g/L）:稱取27.5g無水氯化鈣（CaC

2、I2）溶于純水中，稀釋至1000mL。2、氯化鐵溶液（0.25g/L）:稱取0.25g氯化鐵（FeCb6H2O），溶于純水中，稀釋至1000mL。3、硫酸鎂溶液（22.5g/L）:稱取22.5g硫酸鎂（MgSO4.7H2O）,溶于純水中，稀釋至1000mL。4、 磷酸鹽緩沖溶液（pH7.2）:稱取8.5g磷酸二氫鉀（KH2PO4），21.75g磷酸氫二鉀（K2HPO4），33.4g磷酸氫二鈉（Na2HPO4）和1.7g氯化銨（NH4Cl）溶于純水中，稀釋至1000mL。5、 稀釋水：在20L玻璃瓶?jī)?nèi)裝入一定量的蒸餾水（含銅量小于0.01mg/L），在20C條件下用水 泵或無油空氣壓縮機(jī)連續(xù)通入

3、經(jīng)活性炭過濾的空氣8h,予以曝氣，靜置57天，使溶解氧穩(wěn)定， 其溶解氧質(zhì)量濃度應(yīng)為89mg/L。6、接種稀釋水6.1接種液：將生活污水在20C條件下放置2436h，取上清液，備用。6.2接種稀釋水：于每升稀釋水中加入接種液10100mL。7、葡萄糖一谷氨酸溶液：稱取于103C烘烤1h的葡萄糖和谷氨酸各150mg于純水中，稀釋至1000mL，臨用時(shí)配制8、 硫酸溶液c(H2SO4)=0.5mol/L。9、 氫氧化鈉溶液c(NaOH)=1mol/L。10、氟化鉀溶液(40g/L)。11、疊氮化鈉溶液(2g/L)。12、硫酸(p20=1.84g/mL)。13、 硫酸錳溶液(480g/L):稱取480

4、g硫酸錳(MnSO44H2O或400gMnSO42H2O或380gMnCl22H2O)溶于純水中，過濾后，稀釋至1000mL。14、 堿性碘化鉀溶液(500gNaOH+150gKI/L)稱?。?00g氫氧化鈉，溶于300400mL純水中，取稱150g碘化鉀(或碘化鈉)溶于250mL純水中。將以上兩液合并，加純水至1000mL，靜置24h使碳酸鈉沉岀，傾岀上清液備用。15、 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c(Na2S2O3)=0.025mol/L:吸取0.05mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，用新 煮沸放冷的純水準(zhǔn)確稀釋為0.025mol/L。16、 淀粉溶液(5g/L)。六、儀器設(shè)備1、 恒溫培養(yǎng)箱(20士1

5、C)。2、 細(xì)口玻璃瓶：2000mL。3、 量筒：1000mL。4、 玻璃攪拌：玻璃棒底端套上一塊比量筒口徑略小于1mm厚的硬橡膠圓塊， 棒的長(zhǎng)度以可伸 至量筒底部為宜。5、 培養(yǎng)瓶：250mL。七、分析步驟1、樣品預(yù)處理1.1水樣pH應(yīng)為6.57.5之間，飲用水源水受到廢水污染時(shí)，可用硫酸溶液或氫氧化鈉溶液予以 調(diào)整。1.2含有少量余氯水樣，放置12h后即可消失。余氯大于0.1mg/L，可加入硫代硫酸鈉除去，其加入量可用碘量法測(cè)定。1.3受工業(yè)廢水污染的水樣，由于其中可能含有其它有害物質(zhì)，如金屬離子等，應(yīng)根據(jù)具體情況予以處理。1.4當(dāng)水樣中含有0.1mg/L以上的亞硝酸鹽時(shí)，可于每升稀釋水中

6、加入2mg亞甲藍(lán)或3mL疊氮化鈉溶液處理。1.5當(dāng)水樣中含1mg/L以下的亞鐵鹽時(shí)，可于每升水中加入2mL氟化鉀溶液。2、直接培養(yǎng)法：適用于較清潔的水樣。用虹吸法吸岀兩份水樣于溶解氧瓶中，一瓶立即測(cè)定溶解氧，另一瓶，立即放入20士1C的恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)五晝夜后取岀，再測(cè)定溶解氧。二者之差即為水樣的生化需氧量。3、稀釋培養(yǎng)法3.1確定水樣稀釋倍數(shù)：根據(jù)酸性高錳酸鉀法測(cè)得耗氧量(mg/L)，以13除之商即為水樣所需稀釋的倍數(shù)。3.2稀釋方法A連續(xù)稀釋法，先從稀釋倍數(shù)小的配起，繼用第一個(gè)稀釋倍數(shù)的剩余水，再注入適量稀釋用水配成第二個(gè)稀釋倍數(shù)，以此類推。B稀釋操作方法a將水樣小心混勻(注意勿產(chǎn)生氣泡

7、)，根據(jù)3.1確定的稀釋比例，取岀所需體積的水樣，沿筒壁移入量筒中，然后細(xì)心地用虹吸管將配好的稀釋水或接種稀釋水加至刻度，用特制的攪拌在水面以下緩緩上下攪動(dòng)45次，立即將筒中稀釋水樣用虹吸法注入兩個(gè)預(yù)先編號(hào)的培養(yǎng)瓶，注入時(shí) 使水沿瓶口緩緩流下，以防產(chǎn)生氣泡。水樣滿后，塞緊瓶塞，并于瓶口凹處注滿稀釋水，此為第 一稀釋度。b在B.a分析步驟中，量筒內(nèi)尚剩有水樣，根據(jù)第二個(gè)稀釋度需要再用虹吸法向筒中注入稀釋水 或接種稀釋水以下分析步驟重復(fù)3.2.B.a操作，即為第二稀釋度，按同法可做第三個(gè)稀釋度。c另取兩個(gè)編號(hào)的溶解氧瓶，用虹吸法注入稀釋水或接種稀釋水，塞緊后用稀釋水封口作為空白。d檢查各瓶編號(hào)，從

8、空白及每一個(gè)稀釋度水樣瓶中各取1瓶放入20士1C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)中培養(yǎng)5日，剩余各一瓶測(cè)定培養(yǎng)前溶解氧。(a)溶解氧固定立即將分度吸管插入培養(yǎng)瓶液面以下，加1mL硫酸錳溶液，再按同方法加入1mL堿性碘化鉀溶液。蓋緊瓶塞(瓶?jī)?nèi)勿留氣泡)，將水樣顛倒混勻一次，靜置數(shù)分鐘，使沉淀重新下降至瓶中部。(b)釋岀碘用分度吸管沿瓶口加入1mL硫酸溶液蓋緊瓶塞，顛倒混勻，靜置5min。(c)滴定將上述溶液倒入250mL碘量瓶中，并用純水洗滌溶解氧瓶23次，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(110.1.3.15)滴定至溶液呈淡黃色，加入1mL淀粉溶液，繼續(xù)至藍(lán)色剛好褪去為止。記錄用量(d)計(jì)算ViXCX8X1000P(O2)

9、=-V-3式中：p(O2)水中溶解氧的質(zhì)量濃度(以02計(jì))，mg/L;c硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L;V1硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液用量，mL；8與I.OOmL硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c(Na2S203)=1.000mol/L相當(dāng)以mg表示的溶解氧的質(zhì)量；V水樣體積，mL。e每天檢查瓶口是否保持水封，經(jīng)常添加封口水及控制培養(yǎng)箱溫度。f培養(yǎng)五天后取岀培養(yǎng)瓶，倒盡封口水，立即測(cè)定培養(yǎng)后的溶解氧。g溶解氧測(cè)定方法同上。4、標(biāo)準(zhǔn)溶液校核將葡萄糖一谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，以2%稀釋比測(cè)其BOD5，其結(jié)果應(yīng)為200士37mg/L。如不在此范圍內(nèi)，說明實(shí)驗(yàn)有誤，應(yīng)找其原因。八、計(jì)算1、 直接培養(yǎng)法p1(BOD5)=p1-

10、p22、稀釋培養(yǎng)法p1(BOD5)=(p1-p2)-(p3-p4)ff2式中：P1(BOD5)水樣的五日生化需氧量(BOD5)的質(zhì)量濃度，mg/L;p1水樣培養(yǎng)液在培養(yǎng)前的溶解氧的質(zhì)量濃度，mg/Lp2水樣培養(yǎng)液在培養(yǎng)五日后的溶液氧的質(zhì)量濃度，mg/Lp3稀釋水(或接種稀釋水)在培養(yǎng)前的溶解氧的質(zhì)量濃度，mg/Lp4稀釋水(或接種稀釋水)在培養(yǎng)五日后溶解氧的質(zhì)量濃度，mg/Lf1稀釋水(或接種水)在培養(yǎng)液中所占比例f2水樣在稀釋培養(yǎng)液中所占的比例稀釋水(mL)f1=-水樣（mL）+稀釋水（mL）水樣（mL）f2=-水樣（mL）+稀釋水（mL）3、結(jié)果確定測(cè)定2個(gè)或2個(gè)以上稀釋度的溶解氧降低量應(yīng)為40%70%之間，即可取平均值計(jì)算。（P1-p2）X100p5=-P1式中：P5水樣稀釋后溶液氧降低率，%；p1,p2-同上4、精密度有資料說明，在一系列實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的考察中，每系列包括86