不同檢測系統(tǒng)LDH測定結(jié)果的可比性研究(1)

1、不同檢測系統(tǒng)LDH測定結(jié)果的可比性研究(1)】 目的 探討同一臨床實(shí)驗(yàn)室不同檢測系統(tǒng)間乳酸脫氫酶(LDH)測定結(jié)果是否具有可比性，為血清酶測定的標(biāo)準(zhǔn)化提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法 參考NCCLS的EP9-A文件，以日立7170生化分析儀、羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品組成的檢測系統(tǒng)(已通過ISO/IEC 17025實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可）為比較方法，檢測系統(tǒng)14為實(shí)驗(yàn)方法，用患者新鮮血清對LDH進(jìn)行檢測，計(jì)算試驗(yàn)方法(Y)和比較方法(X)之間的相對偏差(SE%)，以CLIA88規(guī)定的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)允許誤差范圍的1/2為標(biāo)準(zhǔn)，判斷不同檢測系統(tǒng)的可比性。結(jié)果 LDH測定結(jié)果各系統(tǒng)的誤差臨床均可以接受。結(jié)論 各

2、檢測系統(tǒng)測定LDH結(jié)果具有可比性。當(dāng)同一實(shí)驗(yàn)室同一檢驗(yàn)項(xiàng)目存在2個(gè)以上的檢測系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法比對和偏差評(píng)估，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的可比性?！娟P(guān)鍵詞】 乳酸脫氫酶 比對試驗(yàn)【Abstract】 Objective To explore the comparability of lactate dehydrogenase(LDH) results of different biochemical detecting systems.Methods According to EP9-A file of NCCLS，different biochemical detecting systems，detec

3、ting system 14(laboratory method) and detecting system 5 (target system， comparison method， which includes Hitachi 7170 biochemical analyzer，reagent of Roche，c.f.a.s calibrator and controller of Roche，and has accredited by ISO/IEC 17025)were used to detect serum LDH to obtain the correlation coeffic

4、ient and the linear equation， respectively.Then the coefficient and equation were used to evaluate the system bias between laboratory method and comparison method.The comparability of different investigative systems was judged according to the half of CLIA88 standard.Results The system bias of LDH c

5、ould be accepted between several investigative systems and target system.Conclusion The comparability of LDH results in 5 kinds of detecting system accorded to evaluation of clinical acceptability.If there are more than two systems for the same test，it is necessary to do method comparison and bias e

6、stimation in order to insure the comparability.【Key words】 lactate dehydrogenase method comparisonLDH(lactate dehydrogenase)是一個(gè)NAD 的氧化還原酶，用NAD 作為氫受體催化乳酸氧化成丙酮酸。檢測血清酶的方法多樣，如量氣法、比色法、熒光法等，而目前各生化分析儀檢測LDH主使用的方法是速率法。全自動(dòng)生化分析儀測定準(zhǔn)確、快速，有利于對臨床的快速診斷和治療。雖然方法一樣，但由于檢測系統(tǒng)1(完成一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、檢驗(yàn)程序、保養(yǎng)計(jì)劃等的組合)不同，測量的結(jié)果

7、會(huì)有偏差。為實(shí)現(xiàn)LDH測定的溯源性和可比性，對本院(總院和2個(gè)分院)5個(gè)生化檢測系統(tǒng)LDH測定進(jìn)行方法比對和偏差評(píng)估，現(xiàn)報(bào)告如下。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 檢測系統(tǒng)的組成 每一檢測項(xiàng)目根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)室所使用的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的不同分為5個(gè)檢測系統(tǒng)，各檢測系統(tǒng)的組成如下：檢測系統(tǒng)1：島津CL-7200生化分析儀，四川邁克試劑，Randox校準(zhǔn)品和質(zhì)控品；檢測系統(tǒng)2：羅氏Cobas 400生化分析儀，原裝配套試劑，c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品；檢測系統(tǒng)3：強(qiáng)生250干生化分析儀，原裝配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品；檢測系統(tǒng)4：日立7170生化分析儀，北京中生試劑，c.f.a.s校準(zhǔn)品

8、，Randox質(zhì)控品；檢測系統(tǒng)5：日立7170生化分析儀，羅氏原裝試劑，c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。1.1.2 盲樣制備 每日常規(guī)工作后收集新鮮血清若干份，制備成13份不同濃度的混合血清，分裝于帶蓋的清潔試管內(nèi)。同時(shí)選用同一批號(hào)的Randox水平2和水平3質(zhì)控血清，按說明書求復(fù)溶，分裝于帶蓋的清潔試管內(nèi)。質(zhì)控樣本和血清樣本隨機(jī)編號(hào)，由專人分發(fā)給不同檢測系統(tǒng)，置于當(dāng)天常規(guī)工作中進(jìn)行測定，連續(xù)20天。1.2 方法 因檢測系統(tǒng)5使用的是羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，參加室間質(zhì)評(píng)成績優(yōu)秀，定期校準(zhǔn)，且已通過ISO/IEC 17025標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，故以檢測系統(tǒng)5作為比較方法(X)，其余

9、各檢測系統(tǒng)為試驗(yàn)方法(Y)，進(jìn)行方法間的對比試驗(yàn)。試驗(yàn)前對儀器進(jìn)行常規(guī)維護(hù)與保養(yǎng)，各實(shí)驗(yàn)室按常規(guī)方法進(jìn)行校準(zhǔn)和質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控在控時(shí)進(jìn)行盲樣測定。每個(gè)項(xiàng)目的檢測嚴(yán)格按廠商試劑盒的說明書進(jìn)行。各檢測系統(tǒng)收到盲樣后2h內(nèi)測定完畢，每份樣本只測定1次2，3。1.3 數(shù)據(jù)收集與處理 (1)不采用已明確有人為誤差的結(jié)果；(2)按EP9-A文件進(jìn)行方法間離群值檢查；(3)比較方法(X)測定范圍的檢驗(yàn)：X的分布范圍是否合適，可用相關(guān)系數(shù)(r)做粗略估計(jì)，如r0.975或r20.95，則認(rèn)為X范圍合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠，如r0.975，則使用部分個(gè)別差異法計(jì)算平均偏差；(4)計(jì)算線性回歸方程：試驗(yàn)方

10、法Y=bX a；(5)計(jì)算方法間的系統(tǒng)誤差：根據(jù)臨床使用求，將各個(gè)項(xiàng)目給定的醫(yī)學(xué)決定水平濃度Xc代入回歸方程，計(jì)算試驗(yàn)方法(Y)與比較方法(X)之間的系統(tǒng)誤差(SE)，SE=Yc-Xc，SE%=SE/Xc100%。1.4 臨床可接受性能判斷 CLIA88能力驗(yàn)證計(jì)劃的分析質(zhì)量求規(guī)定LDH的可接受范圍為T20，以精密度CV不大于允許誤差的1/3作為日間CV的允許范圍，由方法學(xué)比較評(píng)估的SE%不大于允許誤差的1/2屬臨床可接受水平3。1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 不同檢測系統(tǒng)質(zhì)控物結(jié)果的統(tǒng)計(jì)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)資料的方差分析；不同檢測系統(tǒng)新鮮血清測定結(jié)果的統(tǒng)計(jì)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)資料的方差分析、可靠性分析、相關(guān)分析

11、和回歸分析。所有數(shù)據(jù)均在Excel 2000和SPSS11.0軟件包上進(jìn)行。2 結(jié)果2.1 不同檢測系統(tǒng)LDH的精密度評(píng)價(jià) 根據(jù)Randox水平2和水平3質(zhì)控品連續(xù)20次的盲測結(jié)果，計(jì)算LDH均值(x)、標(biāo)準(zhǔn)差(s)和變異系數(shù)(CV)來評(píng)價(jià)不同檢測系統(tǒng)LDH的精密度，結(jié)果見表1。LDH水平2和水平3測定結(jié)果經(jīng)隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)資料的方差分析或K個(gè)相關(guān)樣本的Friedman雙向評(píng)秩方差分析差異均有非常顯著性(作者：潘婉儀 羅福東 黃憲章 徐寧 莊俊華張秀明梁偉雄【摘】目的探討同一臨床實(shí)驗(yàn)室不同檢測系統(tǒng)間乳酸脫氫 本篇論文是由3COME文檔頻道的網(wǎng)友為您在網(wǎng)絡(luò)上收集整理餅投稿至本站的，論文版權(quán)屬原作者，

12、請不用于商業(yè)用途或者抄襲，僅供參考學(xué)習(xí)之用，否者后果自負(fù)，如果此文侵犯您的合法權(quán)益，請聯(lián)系我們。P0.001)。由表1可以看出，5個(gè)不同檢測系統(tǒng)Randox 水平2和水平3血清LDH測定的日間CV和總CV均符合臨床求。 表1 不同檢測系統(tǒng)Randox質(zhì)控品測定結(jié)果的變異系數(shù) （CV，）2.2 不同檢測系統(tǒng)新鮮血清LDH測定結(jié)果的比較 5個(gè)檢測系統(tǒng)新鮮血清LDH測定結(jié)果的方差均齊(P0.05)，經(jīng)隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)資料的方差分析，各檢測系統(tǒng)間的差異均有非常顯著性(P0.001)。結(jié)果見表2。5個(gè)檢測系統(tǒng)間新鮮血清LDH測定結(jié)果采用二因素混合模型進(jìn)行可靠性分析可靠性系數(shù)為0.9966。各檢測系統(tǒng)間的相關(guān)

13、系數(shù)均0.975。 表2 不同檢測系統(tǒng)血清LDH測定結(jié)果的比較 （xs，u/L）注：*與檢測系統(tǒng)5比較2.3 各檢測系統(tǒng)可接受性能的評(píng)價(jià) 以檢測系統(tǒng)5作為目標(biāo)檢測系統(tǒng)，將不同LDH的醫(yī)學(xué)決定水平代入各自相應(yīng)的回歸方程，用以判斷各檢測系統(tǒng)的臨床可接受性能，結(jié)果見表3。LDH回歸方程為：(1)系統(tǒng)1(Y)系統(tǒng)5(X)：y=0.854x 28.85；(2)系統(tǒng)2(Y)系統(tǒng)5(X)：y=0.9739x-14.155；(3)系統(tǒng)3(Y)系統(tǒng)5(X)：y=1.0177x-3.1191；(4)系統(tǒng)4(Y)系統(tǒng)5(X)：y=0.9544x-2.2576。表3 不同檢測系統(tǒng)LDH測定的可接受性能評(píng)價(jià) （u/L）

14、3 討論LDH是一種細(xì)胞質(zhì)酶，存在于所有組織中，甚至在微小的組織損傷后會(huì)滲漏入血漿中，在許多病理情況下引起血漿LDH水平升高?？侺DH升高不能作為特異器官損傷的標(biāo)志，在肝膽疾病的診斷中不如氨基轉(zhuǎn)移酶，其主作用是檢測輕微的組織損傷。隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的飛速發(fā)展，檢驗(yàn)技術(shù)的不斷分支，檢測項(xiàng)目的不斷增多，檢驗(yàn)質(zhì)量的控制變得越來越重，ISO/IEC 17025或ISO 15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可已經(jīng)成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)展的必經(jīng)之路5，6。ISO 15189文件指出：“當(dāng)同樣的檢驗(yàn)應(yīng)用不同程序或設(shè)備，或在不同地點(diǎn)進(jìn)行，或以上各項(xiàng)均不同時(shí)，應(yīng)有確切機(jī)制以驗(yàn)證在整個(gè)臨床適用區(qū)間內(nèi)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性”。應(yīng)按適合于程序和設(shè)備

15、特性的規(guī)定周期驗(yàn)證4。使每一項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果符合質(zhì)量求，除了有標(biāo)準(zhǔn)及嚴(yán)格的質(zhì)量控制外，還必須對使用的檢測系統(tǒng)做嚴(yán)格的選擇和評(píng)價(jià)，確定它的不精密度、不準(zhǔn)確度、患者結(jié)果可報(bào)告范圍、分析靈敏度、分析干擾、參考范圍和其他需說明的性能。根據(jù)NCCLS(EP5-A)求1，由表1可以看出本院檢驗(yàn)科3個(gè)實(shí)驗(yàn)室5個(gè)檢測系統(tǒng)LDH測定的精密度符合臨床求。LDH可靠性系數(shù)(LDH=0.9966)接近1，表明測定結(jié)果穩(wěn)定性及一致性好，受隨機(jī)誤差影響的程度小，穩(wěn)定性臨床可以接受。各檢測系統(tǒng)間檢測LDH的相關(guān)系數(shù)均0.975，說明各系統(tǒng)測定數(shù)據(jù)分布范圍可以用于回歸統(tǒng)計(jì)，可以用它們?nèi)ス烙?jì)方法間的系統(tǒng)誤差，并以醫(yī)學(xué)決定水平處

16、的系統(tǒng)誤差來判斷方法間是否具有可比性。表2表明5個(gè)檢測系統(tǒng)的LDH測定結(jié)果只有系統(tǒng)3和系統(tǒng)5差異最小(P0.769)，因?yàn)橄到y(tǒng)3和系統(tǒng)5均為可溯源的羅氏檢測系統(tǒng)，具有最好的一致性。表1及表2表明我院檢驗(yàn)科不同檢測系統(tǒng)檢測LDH各系統(tǒng)間總體上雖然差異有顯著性，但臨床均可以接受。筆者沒有完全按照NCCLS(EP5-A)規(guī)定精密度評(píng)價(jià)和NCCLS(EP9-A)方法學(xué)比較試驗(yàn)設(shè)計(jì)規(guī)定去完成比對試驗(yàn)24， 嚴(yán)格按照NCCLS文件執(zhí)行是今后努力的方向。 【參考文獻(xiàn)】1 馮仁豐.臨床檢驗(yàn)管理技術(shù)基礎(chǔ).上海：上?？茖W(xué)文獻(xiàn)出版社，2003，5-8，32-34，106-136.2 U.S.Department of Health and Human Services.medicare，medicaid and CLIA program：regulat