Ⅱ微生物發(fā)酵產(chǎn)酶ppt課件

1、擴(kuò)大培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)收集篩選菌種收集篩選菌種發(fā)酵管理：條件與控制發(fā)酵管理：條件與控制菌種保藏菌種保藏細(xì)胞活化細(xì)胞活化1.用錢購(gòu)買菌種用錢購(gòu)買菌種2.收集土樣篩選菌種收集土樣篩選菌種 收集土樣收集土樣 初篩：?jiǎn)尉渑囵B(yǎng)，用透明圈法選出產(chǎn)初篩：?jiǎn)尉渑囵B(yǎng)，用透明圈法選出產(chǎn) 目的酶的微生物使用鑒定培養(yǎng)基）目的酶的微生物使用鑒定培養(yǎng)基） 復(fù)篩：?jiǎn)尉渑囵B(yǎng)，選出符合優(yōu)良菌種復(fù)篩：?jiǎn)尉渑囵B(yǎng)，選出符合優(yōu)良菌種 要求的菌落使用選擇培養(yǎng)基）要求的菌落使用選擇培養(yǎng)基）單菌落培養(yǎng)單菌落培養(yǎng)優(yōu)良菌種要求與常用菌種優(yōu)良菌種要求與常用菌種透明圈法透明圈法菌種保藏方法：菌種保藏方法：(1)斜面培養(yǎng)法斜面培養(yǎng)法(2)(3)(4

2、)(5)(6)保藏的菌種通常以芽孢形式存在保藏時(shí)保藏的菌種通常以芽孢形式存在保藏時(shí)營(yíng)養(yǎng)缺乏），需放入營(yíng)養(yǎng)充足的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中營(yíng)養(yǎng)缺乏），需放入營(yíng)養(yǎng)充足的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中活化：芽孢活化：芽孢營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞1.1.定義：根據(jù)菌種特點(diǎn)配制培養(yǎng)基，使菌種定義：根據(jù)菌種特點(diǎn)配制培養(yǎng)基，使菌種 大量繁殖用于發(fā)酵大量繁殖用于發(fā)酵2.2.方法：種子罐培養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)方法：種子罐培養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) （工業(yè)生產(chǎn)）（工業(yè)生產(chǎn)） （實(shí)驗(yàn)室）（實(shí)驗(yàn)室）3.3.目的：使菌種大量繁殖，用于發(fā)酵目的：使菌種大量繁殖，用于發(fā)酵培養(yǎng)基配制：碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無培養(yǎng)基配制：碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無 機(jī)鹽、水機(jī)鹽、水CCN N：碳源：糖：

3、碳源：糖加碳源加加碳源加C/NC/N酸性酸性利于菌種利于菌種 保管作保存培養(yǎng)基）保管作保存培養(yǎng)基） 氮源：有機(jī)、無機(jī)氮源：有機(jī)、無機(jī)加氮源減加氮源減C/NC/N堿性堿性 利于酶制劑生產(chǎn)產(chǎn)酶需利于酶制劑生產(chǎn)產(chǎn)酶需N N元素）元素）1.1.菌種要求：繁殖力強(qiáng)菌種要求：繁殖力強(qiáng)( (繁殖周期短繁殖周期短) ) 產(chǎn)酶穩(wěn)定，產(chǎn)酶能力強(qiáng)產(chǎn)酶穩(wěn)定，產(chǎn)酶能力強(qiáng) 平安平安( (不用病菌不用病菌) ) 利于發(fā)酵管理利于發(fā)酵管理( (易于發(fā)酵易于發(fā)酵) )2.2.常用產(chǎn)酶微生物：略常用產(chǎn)酶微生物：略單菌落培養(yǎng)法：稀釋涂平板，長(zhǎng)單菌落，易單菌落培養(yǎng)法：稀釋涂平板，長(zhǎng)單菌落，易 于分離于分離透明圈法：例如透明圈法：例如

4、: :明膠作培養(yǎng)基可鑒別出產(chǎn)蛋白酶明膠作培養(yǎng)基可鑒別出產(chǎn)蛋白酶 的菌落的菌落( (明膠是蛋白質(zhì)明膠是蛋白質(zhì), ,蛋白酶可分解明蛋白酶可分解明膠膠) ) CaCO3 CaCO3作培養(yǎng)基可鑒別出產(chǎn)酸菌落作培養(yǎng)基可鑒別出產(chǎn)酸菌落( (產(chǎn)生產(chǎn)生 的酸可分解的酸可分解CaCO3,CaCO3,形成透明圈形成透明圈) )1.1.溫度、溫度、PHPH：最適生長(zhǎng)溫度、：最適生長(zhǎng)溫度、PHPH與最適產(chǎn)酶溫度、與最適產(chǎn)酶溫度、PHPH不同不同, ,要實(shí)時(shí)監(jiān)控、要實(shí)時(shí)監(jiān)控、 調(diào)節(jié)溫度、調(diào)節(jié)溫度、PH PH 溫度：溫度：0-10oC;PH:0-10oC;PH:酶活力范圍內(nèi)，酶活力范圍內(nèi)， 防酶變性防酶變性調(diào)調(diào)PHPH方

5、法：方法：CaCO3CaCO3備用堿）備用堿） 磷酸緩沖液：維持磷酸緩沖液：維持PHPH穩(wěn)定穩(wěn)定 調(diào)調(diào)C/NC/N：只工業(yè)上適用，：只工業(yè)上適用，C/NC/N酸，酸， C/N C/N堿堿2.2.增大溶氧量：增大溶氧量：(1)(1)攪拌，使大氣泡變?yōu)楹芏嘈鈹嚢?，使大氣泡變?yōu)楹芏嘈?泡泡 (2) (2)加大通入氧氣量加大通入氧氣量 3.3.氣泡：產(chǎn)生：攪拌發(fā)酵液增大溶氧量氣泡：產(chǎn)生：攪拌發(fā)酵液增大溶氧量 危害：阻礙危害：阻礙CO2CO2排出，使排出，使PHPH減減 小，使發(fā)酵液變酸，影小，使發(fā)酵液變酸，影 響微生物生長(zhǎng)、產(chǎn)酶響微生物生長(zhǎng)、產(chǎn)酶 氣泡過多會(huì)使菌液漫氣泡過多會(huì)使菌液漫 出，造成菌種

6、污染出，造成菌種污染 消除方法：機(jī)械消泡、化學(xué)試劑消除方法：機(jī)械消泡、化學(xué)試劑 消泡、表面活性劑消消泡、表面活性劑消 泡泡4.4.濕度濕度開場(chǎng)：低開場(chǎng)：低后來：高后來：高5.5.提高酶產(chǎn)量的方法提高酶產(chǎn)量的方法加誘導(dǎo)物加誘導(dǎo)物減阻遏物減阻遏物轉(zhuǎn)基因獲得產(chǎn)酶能力強(qiáng)的微生物去產(chǎn)酶）轉(zhuǎn)基因獲得產(chǎn)酶能力強(qiáng)的微生物去產(chǎn)酶）加表面活性劑加表面活性劑加產(chǎn)酶促進(jìn)劑加產(chǎn)酶促進(jìn)劑微生物生長(zhǎng)與產(chǎn)酶模式微生物生長(zhǎng)與產(chǎn)酶模式 微生物生長(zhǎng)模式：調(diào)整期、對(duì)數(shù)期、平衡微生物生長(zhǎng)模式：調(diào)整期、對(duì)數(shù)期、平衡期、衰亡期期、衰亡期 產(chǎn)酶模式：產(chǎn)酶模式：1.同步合成型：調(diào)整期始產(chǎn)酶，同步合成型：調(diào)整期始產(chǎn)酶，平衡期始停產(chǎn)平衡期始停產(chǎn) 2.中期合成型：對(duì)數(shù)期始產(chǎn)酶，中期合成型：對(duì)數(shù)期始產(chǎn)酶，平衡期始停產(chǎn)平衡期始停產(chǎn) 3.滯后合成型：平衡期始產(chǎn)酶，滯后合成型：平衡期始產(chǎn)酶，衰退期始停產(chǎn)衰退期始停產(chǎn) 4.延續(xù)合成型：調(diào)整期始產(chǎn)酶，延續(xù)合成型：調(diào)整期始產(chǎn)酶，衰退期始停產(chǎn)衰退期始停產(chǎn) 提高產(chǎn)酶能力的方法變?yōu)檠永m(xù)合成型）提高產(chǎn)酶能力的方法變?yōu)檠永m(xù)合成型） 1.非調(diào)整期始產(chǎn)酶中期、滯后）：有營(yíng)